广西地区水牛E2型牛肠道病毒的分离和鉴定 被引量：2

1

作者 罗宇航 乔成鹏 +7 位作者 朱鑫玥 刘黄豪 苏亚权 刘海峰 邹延林 黄稳妃 黄伟坚 潘艳 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2023年第1期53-58,共6页

为了解广西地区水牛感染中肠道病毒(BEV)的情况,本研究在广西南宁某水牛规模养殖场腹泻粪便样品中成功分离出2株BEV,分别命名为GXNN2106和GXNN2102。将2株病毒空斑纯化后测定GXNN2106毒株TCID 50为107.99/0.1 mL,GXNN2102毒株TCID 50为1... 为了解广西地区水牛感染中肠道病毒(BEV)的情况,本研究在广西南宁某水牛规模养殖场腹泻粪便样品中成功分离出2株BEV,分别命名为GXNN2106和GXNN2102。将2株病毒空斑纯化后测定GXNN2106毒株TCID 50为107.99/0.1 mL,GXNN2102毒株TCID 50为107.37/0.1 mL。多步生长曲线结果显示,GXNN2106毒株在MDBK细胞中复制增殖良好。经BEV VP 1、5′UTR特异性引物逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)鉴定,2株病毒均属于E2型,与其他E2型BEV 5′UTR核苷酸同源性为75.7%~78.6%,VP 1核苷酸同源性为87.1%~91.1%。本研究首次在广西地区水牛粪便中分离得到E2型BEV毒株,为广西水牛源牛肠道病毒的流行分布情况和疫苗的研发提供数据支持。 展开更多

关键词 牛肠道病毒 水牛 分离鉴定 基因分型

下载PDF 职称材料

非洲猪瘟EP364R蛋白的原核表达及间接ELISA方法的建立 被引量：1

2

作者 卢丽飞 党佳佳 +4 位作者 吴青萍 邹延林 奚媖牡 耿鑫梅 黄伟坚 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2023年第5期79-86,共8页

本研究根据非洲猪瘟病毒(ASFV)Georgia 2007/1毒株的EP364R基因序列(GenBank登录号:FR682468.1)合成EP364R基因序列,通过PCR技术扩增目的基因EP364R,并克隆到pET-32a(+)载体,成功构建了重组质粒pET-32a-EP364R,鉴定正确后将其转化至大... 本研究根据非洲猪瘟病毒(ASFV)Georgia 2007/1毒株的EP364R基因序列(GenBank登录号:FR682468.1)合成EP364R基因序列,通过PCR技术扩增目的基因EP364R,并克隆到pET-32a(+)载体,成功构建了重组质粒pET-32a-EP364R,鉴定正确后将其转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中成功诱导表达,纯化后的重组蛋白利用SDS-PAGE、Western blot进行鉴定。以纯化的pET-32a-EP364R重组蛋白为诊断抗原,成功建立了检测ASFV的间接ELISA抗体检测方法。将建立的间接ELISA检测方法与法国ID-Vet非洲猪瘟抗体试剂盒分别对临床84份血清进行检测,总符合率达89.3%,表明该方法具有良好的特异性、敏感性和重复性。为ASFV的快速诊断、流行病学调查和血清学抗体检测提供了快速实用的检测手段。 展开更多

关键词 非洲猪瘟 间接ELISA EP364R 原核表达

下载PDF 职称材料

星状神经节阻滞配合中西药治疗感染性角膜溃疡

3

作者 王素兰 赵秀玉 +1 位作者 付成建 邹延林 《职业与健康》 CAS 2001年第2期122-123,共2页

角膜溃疡是一种常见的致盲眼疡,特别是一些顽固性角膜溃疡临床上治疗更为棘手.笔者3年来采用星状神经节阻滞配合中西药治疗各类角膜溃疡,缩短了疗程,提高了治愈率,减少并发症的发生,取得了较好的疗效,报告如下.

关键词 星状神经节阻滞 角膜溃疡 中西医结治疗

下载PDF 职称材料

板栗致眼外伤82例分析

4

作者 王素兰 邹延林 孙虹 《现代中西医结合杂志》 CAS 2001年第20期1946-1947,共2页

关键词 板栗致眼外伤 诊断 治疗

下载PDF 职称材料

椎体细胞功能不全综合征1家系报道

5

作者 孙艳 法逸颖 邹延林 《临沂医学专科学校学报》 2001年第3期237-237,共1页

关键词 椎体细胞功能不全综合征 家系 诊断 治疗 病例报告

下载PDF 职称材料

非洲猪瘟病毒p72/p32蛋白的原核表达及重组蛋白间接ELISA方法的建立与比较 被引量：5

6

作者 吴青萍 李丹阳 +6 位作者 卢丽飞 邹延林 耿鑫梅 奚媖牡 黄香梅 韦英明 黄伟坚 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第13期20-26,共7页

为了建立检测非洲猪瘟病毒(ASFV)的间接ELISA方法,试验基于p72/p32基因序列,构建了重组质粒pCold-p72/p32,将其转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,利用IPTG诱导获得相应的重组蛋白,通过SDS-PAGE分析重组蛋白的表达形式,利用Ni柱亲和... 为了建立检测非洲猪瘟病毒(ASFV)的间接ELISA方法,试验基于p72/p32基因序列,构建了重组质粒pCold-p72/p32,将其转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,利用IPTG诱导获得相应的重组蛋白,通过SDS-PAGE分析重组蛋白的表达形式,利用Ni柱亲和层析法纯化p72/p32重组蛋白,并以此为包被抗原建立2种快速检测ASFV的间接ELISA方法,并对方法的临界值、有无交叉反应、重复性及敏感性进行了检测,并对来自不同猪场的临床样本进行验证性检测。结果表明:试验成功构建了重组质粒pCold-p72/p32,2种重组蛋白均能与ASFV阳性血清反应;p32以可溶性蛋白和包涵体蛋白形式表达,p72以包涵体蛋白形式表达。基于p32重组蛋白所建立的间接ELISA方法的临界值为0.543,基于p72重组蛋白所建立的间接ELISA方法的临界值为0.612;批内、批间重复性试验的变异系数均小于10%;与猪瘟病毒(CSFV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)等常见病原的阳性血清无交叉反应;与商品化的非洲猪瘟抗体试剂盒检测结果的符合率分别为95.1%和91.3%。说明试验建立的2种间接ELISA方法均具有良好的特异性、敏感性和重复性。通过比较,可以初步认为以p32重组蛋白为包被抗原建立的间接ELISA方法检测效果更好,可以用于猪血清样本中ASFV抗体的检测。 展开更多

关键词 非洲猪瘟病毒 间接ELISA方法 p72蛋白 p32蛋白 比较

原文传递

水牛匈爱病毒结构蛋白VP1的截短表达及多克隆抗体的制备

7

作者 邹延林 张广欣 +11 位作者 罗宇航 朱鑫玥 刘黄豪 莫筱可 谢江 王小玲 陈樱 欧阳康 韦祖樟 覃一峰 潘艳 黄伟坚 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期700-705,共6页

为了制备水牛匈爱病毒(BufHuV)结构蛋白VP1截短基因的多克隆抗体,将病毒的VP1截短基因克隆至原核表达载体pET-32a(+)获得重组质粒pET-32a-BufHuV-VP1,重组质粒转化至BL21感受态细胞(DE3)后诱导表达,VP1截短蛋白的分子质量约为31.5 ku,... 为了制备水牛匈爱病毒(BufHuV)结构蛋白VP1截短基因的多克隆抗体,将病毒的VP1截短基因克隆至原核表达载体pET-32a(+)获得重组质粒pET-32a-BufHuV-VP1,重组质粒转化至BL21感受态细胞(DE3)后诱导表达,VP1截短蛋白的分子质量约为31.5 ku,主要以包涵体的形式表达。以纯化好的重组蛋白免疫昆明小鼠以制备多克隆抗体,通过Western-blot与IFA鉴定其特异性。结果显示,制备的小鼠多克隆抗体能与纯化的VP1重组截短蛋白和感染BufHuV的细胞表达的VP1特异性结合,表明多克隆抗体具有良好的反应原性和特异性。水牛匈爱病毒VP1截短重组蛋白及其多克隆抗体的成功制备为研究BufHuV致病机制、VP1蛋白功能以及血清学检测方法的建立提供了材料基础。 展开更多

关键词 牛匈爱病毒 结构蛋白 原核表达 多克隆抗体

下载PDF 职称材料

牛匈爱病毒SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法的建立及应用 被引量：2

8

作者 朱鑫玥 董覃婷 +10 位作者 罗宇航 张广欣 乔成鹏 黄稳妃 邹延林 陈樱 欧阳康 韦祖樟 苏亚权 潘艳 黄伟坚 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期1252-1258,共7页

水牛匈爱病毒(BufHuV)是2021年在广西水牛中新发现的一种小核糖核酸病毒,本研究旨在建立一种可用于临床快速且特异检测牛匈爱病毒的方法。基于GenBank上公布的bovine hunnivirus、ovine hunnivirus和BufHuV的5′UTR保守区设计了1对特异... 水牛匈爱病毒(BufHuV)是2021年在广西水牛中新发现的一种小核糖核酸病毒,本研究旨在建立一种可用于临床快速且特异检测牛匈爱病毒的方法。基于GenBank上公布的bovine hunnivirus、ovine hunnivirus和BufHuV的5′UTR保守区设计了1对特异性引物,首次建立了检测牛匈爱病毒的SYBRGreenⅠ实时荧光定量PCR方法。结果表明,标准曲线在1.1×10^(8)copies/μL~1.1×10^(3)copies/μL质粒标准品稀释浓度范围内呈线性关系,斜率为-3.2657,相关系数为0.9998,熔解曲线为单峰,检测下限为1.1×10^(1)copies/μL,比常规PCR敏感性高100倍;特异性高,与多种常见的牛病病毒均无交叉反应;重复性好,批内和批间变异系数均小于1.0%。收集了257份有腹泻迹象的牛粪样品,用于对所建立平台的性能评估,结果,建立的实时荧光定量PCR的阳性检出率为3.89%,高于普通PCR的阳性检出率(1.56%)。上述结果表明,该方法将为牛匈爱病毒的临床样品检测、流行病学监测提供一种快速、可靠、低成本的替代方案,也为后续研究奠定了基础。 展开更多

关键词 hunnivirus SYBR GreenⅠ 实时荧光定量PCR 5′UTR 检测方法

下载PDF 职称材料

基于非洲猪瘟病毒B119L蛋白的间接ELISA抗体检测方法的建立与应用 被引量：2

9

作者 耿鑫梅 奚媖牡 +5 位作者 黄香梅 邹延林 吴青萍 卢丽飞 覃一峰 黄伟坚 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期1355-1359,共5页

为了建立一种针对非洲猪瘟病毒(ASFV)抗体的血清学检测手段,参考ASFV Pig/HLJ/2018株全基因组序列合成非结构蛋白B119L的基因序列,成功构建重组表达质粒pCold-Ⅰ-B119L,将重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,用IPTG诱导表达获... 为了建立一种针对非洲猪瘟病毒(ASFV)抗体的血清学检测手段,参考ASFV Pig/HLJ/2018株全基因组序列合成非结构蛋白B119L的基因序列,成功构建重组表达质粒pCold-Ⅰ-B119L,将重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,用IPTG诱导表达获得重组蛋白,利用纯化后的B119L重组蛋白作为诊断抗原,建立检测ASFV抗体的间接ELISA检测方法。结果显示:原核表达的B119L蛋白的分子质量为14.4 ku,与预期相符;以其为包被抗原建立的间接ELISA检测方法的批间及批内变异系数均小于10%;标准阳性血清的最低检测稀释度为1︰5120;对ASFV阳性血清具有特异性,与猪瘟病毒、伪狂犬病病毒、口蹄疫病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒阳性血清无交叉反应;该间接ELISA方法与商品化试剂盒的符合率为100%。本研究中建立的间接ELISA检测方法特异性、重复性、灵敏度良好,为ASFV的临床检测和流行病学调查提供了依据,对于预防ASFV的感染具有重要作用。 展开更多

关键词 非洲猪瘟病毒 B119L蛋白 pCold-Ⅰ载体 间接ELISA

下载PDF 职称材料

非洲猪瘟MGF360-11L蛋白的原核表达及间接ELISA方法的建立 被引量：2

10

作者 奚媖牡 耿鑫梅 +5 位作者 黄香梅 邹延林 卢丽飞 吴青萍 覃一峰 黄伟坚 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期1496-1502,共7页

本研究根据非洲猪瘟病毒(ASFV)HLJ/2018株(GenBank登录号:MK333180)MGF360-11L核苷酸序列,合成MGF360-11L基因序列,将其克隆至pET-32a(+)载体。测序正确后转入大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞进行诱导表达与纯化,纯化后的重组蛋白进行SDS-P... 本研究根据非洲猪瘟病毒(ASFV)HLJ/2018株(GenBank登录号:MK333180)MGF360-11L核苷酸序列,合成MGF360-11L基因序列,将其克隆至pET-32a(+)载体。测序正确后转入大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞进行诱导表达与纯化,纯化后的重组蛋白进行SDS-PAGE和Western-blot鉴定。以纯化的MGF360-11L重组蛋白作为包被抗原,建立了检测ASFV MGF360-11L抗体的间接ELISA方法。用建立的间接ELISA方法与法国ID-Vet非洲猪瘟抗体检测试剂盒分别对192份临床血清样品进行检测比较,结果显示,该间接ELISA方法的特异性为91.6%,敏感性为92.1%,符合率约为91.7%。表明,该间接ELISA方法敏感性高、重复性好和特异性强,可初步用于临床血清样品非洲猪瘟抗体的检测,该方法的建立为ASFV的快速诊断提供了更多选择,对非洲猪瘟的防控提供了技术支持。 展开更多

关键词 非洲猪瘟病毒 MGF360-11L蛋白 原核表达 间接ELISA

下载PDF 职称材料

杨子荣是这样擒获座山雕的

11

作者 邹延林 齐长春 杨彦忠 《中国民兵》 2015年第2期44-47,共4页

《智取威虎山》剧情概述 解放战争初期，中国人民解放军在东北战场取得辉煌胜利，为落实毛主席“建立巩固根据地”指示，某部团参谋长率一支追剿队进入深山发动群众、组织民兵。共同消灭逃进威虎山的座山雕土匪武装。在常猎户父女的帮... 《智取威虎山》剧情概述 解放战争初期，中国人民解放军在东北战场取得辉煌胜利，为落实毛主席“建立巩固根据地”指示，某部团参谋长率一支追剿队进入深山发动群众、组织民兵。共同消灭逃进威虎山的座山雕土匪武装。在常猎户父女的帮助下，侦察排长杨子荣找到土匪线索，缴获座山雕垂涎已久的“秘密联络图”。并掌握了“百鸡宴”的情况。 展开更多

关键词 杨子荣 《智取威虎山》 中国人民解放军 战争初期 东北战场 毛主席 参谋长 土匪

原文传递