阿托伐他汀促进体外培养大鼠乳鼠皮层神经元树突生长及突触相关蛋白表达 被引量：2

1

作者 郁盛雪 屈文慧 +3 位作者 隋海娟 金迎新 金向楠 金英 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期126-131,共6页

目的探讨阿托伐他汀(atorvastatin,Ato)对体外培养大鼠乳鼠大脑皮层神经元树突生长及突触相关蛋白是否有影响。方法选用出生0～24 h Sprague-Dawley(SD)大鼠乳鼠,取大脑皮层,进行皮层神经元体外培养,神经元培养4 d后用于实验。实验分为... 目的探讨阿托伐他汀(atorvastatin,Ato)对体外培养大鼠乳鼠大脑皮层神经元树突生长及突触相关蛋白是否有影响。方法选用出生0～24 h Sprague-Dawley(SD)大鼠乳鼠,取大脑皮层,进行皮层神经元体外培养,神经元培养4 d后用于实验。实验分为对照组、不同浓度Ato处理组、Ato处理不同时间组;对照组:加入等量含0.1%DMSO培养基;Ato处理组:培养4 d神经元,加入不同浓度Ato(0.1、1、5、10μmol.L-1)作用48 h;Ato处理时间组:将Ato 5μmol.L-1加入培养4 d神经元,分别作用12、24、48 h。应用倒置相差显微镜和微管相关蛋白-2(MAP2)免疫荧光染色观察树突的生长,应用Tsview软件测量神经元树突分支总长度(totaldendritic branch length,TDBL)和一级树突数目(primary-or-der dendrite number,PDN);应用免疫荧光染色法和Westernblot检测皮层神经元突触素(synaptophysin,SYP)、突触后致密蛋白95(postsynaptic density protein-95,PSD-95)蛋白表达的改变。结果给予不同浓度Ato(0.1、1、5、10μmol.L-1)作用48 h后,神经元TDBL较对照组明显增加(P<0.01),神经元PDN较对照组呈浓度依赖性增加,Ato(0.1、1μmol.L-1)时可增加神经元PDN(P<0.05),Ato(5、10μmol.L-1)时明显增加神经元PDN(P<0.01);Ato 5μmol.L-1作用24 h后可增加神经元TDBL、PDN(P<0.05),Ato5μmol.L-1作用48 h后可明显增加神经元TDBL、PDN(P<0.01);应用倒置相差显微镜和微管相关蛋白-2(MAP2)免疫荧光染色观察树突TDBL和PDN明显增加;免疫荧光和Western blot结果显示Ato可增加SYP、PSD-95表达水平。结论 Ato促进体外培养大鼠乳鼠皮层神经元树突生长及突触相关蛋白表达。 展开更多

关键词 阿托伐他汀 树突生长 突触蛋白 突触素 突触

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知母皂苷元对高糖引起的体外培养大鼠海马神经元损伤的保护作用 被引量：13

2

作者 肖复茜 李洪秀 +5 位作者 隋海娟 刘卓 屈文慧 郁盛雪 金迎新 金英 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期107-112,共6页

目的探讨知母皂苷元(sarsasapogenin,Sar)对高糖引起的海马神经元损伤是否有保护作用。方法选用出生0～24 h Sprague-Dawley(SD)大鼠乳鼠,取海马,进行海马神经元体外培养,培养7 d用于实验。实验分为正常对照组、高糖组、高糖+Sar(10、30... 目的探讨知母皂苷元(sarsasapogenin,Sar)对高糖引起的海马神经元损伤是否有保护作用。方法选用出生0～24 h Sprague-Dawley(SD)大鼠乳鼠,取海马,进行海马神经元体外培养,培养7 d用于实验。实验分为正常对照组、高糖组、高糖+Sar(10、30、100μmol.L-1)组;对照组:加入等量含0.1%DMSO培养基;高糖处理组:分别加入葡萄糖(30、50、100 mmol.L-1)作用48 h;高糖+Sar(10、30、100μmol.L-1)组:先加入不同浓度Sar(10、30、100μmol.L-1)作用1 h,然后加入葡萄糖(50 mmol.L-1)作用48 h;应用MTT方法观察细胞活力,免疫荧光和Western免疫印迹方法观察神经元突触素表达的改变。应用Hoechst 33258核染色检测神经元凋亡。应用Western免疫印迹方法观察caspase-3和多聚ADP核糖聚合酶(PARP)蛋白表达改变。结果加入葡萄糖(30、50、100 mmol.L-1)作用48 h可使培养神经元细胞活力明显降低,神经元突触素蛋白表达明显降低。另外高糖也可引起神经元凋亡细胞百分比和活性caspase-3、PARP蛋白表达水平也较对照组明显提高。在加入高糖前加入不同浓度Sar(10、30、100μmol.L-1)可明显对抗高糖引起的这些变化。培养海马神经元突触素蛋白表达较高糖组(50 mmol.L-1)明显增加,神经元凋亡细胞百分比和活性caspase-3、PARP蛋白表达水平也较高糖组明显降低。结论 Sar对高糖引起的海马神经元损伤具有明显的保护作用。 展开更多

关键词 知母皂苷元 海马神经元 高糖 突触素 凋亡 caspase-3

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知母皂苷元对谷氨酸引起的皮层神经元损伤的保护作用研究 被引量：11

3

作者 王琦 隋海娟 +4 位作者 屈文慧 郁盛雪 金迎新 刘卓 金英 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期281-285,共5页

目的观察知母皂苷元(Sarsasapogenin,SAR)对谷氨酸引起的皮层神经元损伤的保护作用。方法大鼠乳鼠大脑皮层神经元,培养7 d后用于实验。倒置相差显微镜观察神经元树突生长发育情况;用MTT法测定细胞活力;Ho-echst33258核染色观察细胞凋亡... 目的观察知母皂苷元(Sarsasapogenin,SAR)对谷氨酸引起的皮层神经元损伤的保护作用。方法大鼠乳鼠大脑皮层神经元,培养7 d后用于实验。倒置相差显微镜观察神经元树突生长发育情况;用MTT法测定细胞活力;Ho-echst33258核染色观察细胞凋亡的形态学改变;Western印迹法检测神经元SYP、caspase-3、钙蛋白酶Ⅰ蛋白表达水平。结果形态学观察结果显示谷氨酸可明显抑制神经元树突的生长发育,表现为神经元树突总长度明显降低、一级树突数目明显减少、最大分支级数明显减少及胞体面积缩小。SAR(10、30、100μmol.L-1)可明显抑制谷氨酸对神经元树突生长发育的抑制作用,并呈明显浓度依赖。MTT和Ho-echst33258核染色结果显示谷氨酸可降低神经元细胞活力及增加神经元细胞凋亡百分比。SAR(10、30、100μmol.L-1)能明显对抗谷氨酸引起的神经元细胞活力降低及细胞凋亡百分比增加。Western印迹结果显示谷氨酸可明显降低SYP蛋白表达水平及增加活性caspase-3、钙蛋白酶Ⅰ蛋白表达水平。SAR(10、30、100μmol.L-1)可明显对抗谷氨酸引起SYP蛋白表达降低及活性caspase-3、钙蛋白酶Ⅰ蛋白表达增加。结论知母皂苷元能够明显对抗谷氨酸引起的皮层神经元损伤作用。 展开更多

关键词 知母皂苷元 谷氨酸 皮层神经元 凋亡 突触素 半胱尖冬氨酸酶-3

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腹腔镜下卵巢肿瘤切除术的护理体会 被引量：4

4

作者 郁盛雪 张桂兰 +1 位作者 吕金凤 吉洪梅 《吉林医学》 CAS 2008年第4期290-291,共2页

目的:为腹腔镜下卵巢肿瘤切除手术的患者寻找切实可行的护理措施。方法:对我院自2006年6月以来进行的86例腹腔镜下卵巢肿瘤切除的患者进行回顾性分析。结果:通过良好的护理措施,可减少患者恐惧、紧张等不良的心理,使患者配合手术。从而... 目的:为腹腔镜下卵巢肿瘤切除手术的患者寻找切实可行的护理措施。方法:对我院自2006年6月以来进行的86例腹腔镜下卵巢肿瘤切除的患者进行回顾性分析。结果:通过良好的护理措施,可减少患者恐惧、紧张等不良的心理,使患者配合手术。从而降低手术风险,提高手术的安全系数。同时也可减少繁琐的程序,提高护理工作效率。结论:良好的护理措施可预防并减少各种并发症的发生,术后恢复快,远期并发症少。 展开更多

关键词 腹腔镜 卵巢肿瘤切除术 护理

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阿托伐他汀对体外培养皮层神经元Rho-GTP酶家族的影响 被引量：3

5

作者 金迎新 隋海娟 +3 位作者 屈文慧 郁盛雪 张玲玲 金英 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1474-1475,共2页

阿托伐他汀（atorvastatin，Ato）属于他汀类调血脂类药物。许多研究表明他汀类药物可以降低AD的患病风险，但机制尚不完全清楚。另有很多证据显示他汀类药物有不依赖于其降脂作用的神经细胞保护作用。他汀类药物防治AD的机制除了与降... 阿托伐他汀（atorvastatin，Ato）属于他汀类调血脂类药物。许多研究表明他汀类药物可以降低AD的患病风险，但机制尚不完全清楚。另有很多证据显示他汀类药物有不依赖于其降脂作用的神经细胞保护作用。他汀类药物防治AD的机制除了与降低血清胆固醇有关外， 展开更多

关键词 阿托伐他汀 皮层神经元 树突生长 RHO 异戊二烯 甲羟戊酸

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小牛血清去蛋白注射液对培养皮层神经元树突发育的影响 被引量：3

6

作者 金向楠 隋海娟 +2 位作者 屈文慧 郁盛雪 金英 《辽宁医学院学报》 CAS 2013年第3期6-7,I0002,共3页

目的观察小牛血清去蛋白注射液(Deproteinised calf blood serum injection,DCBSI)对原代培养皮层神经元树突发育是否有促进的作用。方法选用出生0～24 h的Sprague-Dawley(SD)大鼠乳鼠,取皮层神经元进行体外细胞培养,7 d后用于实验。应... 目的观察小牛血清去蛋白注射液(Deproteinised calf blood serum injection,DCBSI)对原代培养皮层神经元树突发育是否有促进的作用。方法选用出生0～24 h的Sprague-Dawley(SD)大鼠乳鼠,取皮层神经元进行体外细胞培养,7 d后用于实验。应用倒置相差显微镜和微管相关蛋白-2(MAP-2)免疫荧光染色观察神经元树突的生长。结果 DCBSI(1,10,100μmol.L-1)可明显促进神经元树突发育,表现为神经元树突总长度明显增加、树突末梢分支数明显增多,并呈明显浓度依赖性。结论 DCBSI对体外培养皮层神经元树突发育有促进作用。 展开更多

关键词 小牛血清去蛋白注射液 皮层神经元 树突发育

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阿托伐他汀通过激活PI3K/Akt/mTOR信号转导而促进神经元突起生长 被引量：1

7

作者 屈文慧 郁盛雪 +3 位作者 隋海娟 金迎新 金向楠 金英 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期150-155,共6页

目的探讨阿托伐他汀(Ato)对体外培养大鼠皮质神经元突起生长促进作用的信号转导机制。方法 取培养7 d大脑皮质神经元,分为Ato 10μmo.lL-1作用48 h组和阻断剂+Ato组,先分别加入阻断剂PD98059 50μmo.l L-1、LY294002 30μmol.L-1、曲... 目的探讨阿托伐他汀(Ato)对体外培养大鼠皮质神经元突起生长促进作用的信号转导机制。方法 取培养7 d大脑皮质神经元,分为Ato 10μmo.lL-1作用48 h组和阻断剂+Ato组,先分别加入阻断剂PD98059 50μmo.l L-1、LY294002 30μmol.L-1、曲西立滨(TCBN)2.5μmol.L-1和西罗莫司(雷帕霉素,Rapa)100 nmo.l L-1作用1 h,再加入Ato共同作用48 h。应用倒置相差显微镜观察神经元突起生长状况;Western印迹法检测磷酸化的磷酸肌醇依赖激酶1(PDK1)、磷酸化蛋白激酶B(Akt)、磷酸化西罗莫司靶蛋白(mTOR)、磷酸化的核糖体S6激酶(p70S6K)和磷酸化的真核翻译起始因子4E结合蛋白1(p-4E-BP1)的表达。结果 形态学观察结果显示,Ato 10μmo.lL-1组可明显促进突起生长,表现为突起总长度增加、一级突起数目增多、末端分支数增多及胞体面积增大。PD98059,LY294002,TCBN和Rapa均可阻断Ato对神经元突起生长的促进作用。Western印迹结果显示,Ato 10μmo.lL-1可显著上调p-PDK1,p-Akt(Ser473),p-mTOR,p-p70S6K和p-4E-BP1蛋白表达水平(P<0.01)。LY294002可显著阻断Ato引起的p-PDK1,p-Akt(Ser473)蛋白表达水平增加(P<0.01)。TCBN可显著阻断Ato引起的p-mTOR蛋白表达水平增加(P<0.01)。Rapa可明显阻断Ato引起的p-p70S6K和p-4E-BP1蛋白表达水平增加(P<0.01)。结论 Ato对体外培养皮质神经元突起发育的促进作用可能与激动MEK/ERK信号转导通路有一定的关系,主要可能与通过激活PI3K/Akt/mTOR信号转导通路有关。 展开更多

关键词 阿托伐他汀 皮质神经元 突起生长 信号转导通路 磷酸酰肌醇-3激酶 蛋白激酶B 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白

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知母皂苷元通过上调PI3K/Akt信号通路减轻淀粉样β蛋白诱导的乳大鼠海马神经元突触损伤 被引量：8

8

作者 卢英 金英 +5 位作者 隋海娟 刘卓 屈文慧 郁盛雪 金迎新 李洪秀 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期635-640,共6页

目的探讨知母皂苷元(Sar)减轻淀粉样β蛋白(Aβ)诱导的海马神经元突触损伤的信号转导机制。方法取出生0～24 h SD乳大鼠海马神经元,体外培养7 d。海马神经元分别加入磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)特异性阻断剂LY294002 30μmo.lL-1或蛋白激酶... 目的探讨知母皂苷元(Sar)减轻淀粉样β蛋白(Aβ)诱导的海马神经元突触损伤的信号转导机制。方法取出生0～24 h SD乳大鼠海马神经元,体外培养7 d。海马神经元分别加入磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)特异性阻断剂LY294002 30μmo.lL-1或蛋白激酶B(Akt)特异性阻断剂曲西立滨1μmol.L-11 h后,加Sar 30和100μmo.l L-1作用1 h,再加Aβ1-4250 nmo.l L-1作用24 h。应用突触囊泡蛋白(SYP)免疫荧光染色观察突触的改变。Western蛋白质印迹法检测海马神经元SYP、磷酸化Akt(p-Akt)和磷酸化糖原合成酶3β(p-GSK3β)表达水平的改变。结果与正常对照组相比,Aβ1-42组培养的海马神经元SYP,p-Akt和p-GSK3β表达水平明显减低(P<0.01)。与Aβ1-42组相比,Aβ1-42+Sar 30和100μmo.l L-1组海马神经元SYP,p-Akt和p-GSK3β表达水平明显增加(P<0.01)。给予LY294002作用后,SYP和p-Akt表达水平明显降低(P<0.05)。给予曲西立滨作用后,SYP和p-GSK3β表达水平明显降低(P<0.05)。单独给予LY294002,海马神经元SYP表达无变化,p-Akt表达水平明显降低(P<0.01)。单独给予曲西立滨,海马神经元SYP和p-GSK3β蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。结论 Sar通过上调PI3K/Akt/GSK3β信号通路对抗Aβ1-42诱导的海马神经元突触损伤。 展开更多

关键词 知母皂苷元 海马神经元 突触囊泡蛋白 蛋白激酶B 糖原合成酶3β

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知母皂苷元改善淀粉样β蛋白引起的体外培养乳大鼠海马神经元的损伤 被引量：7

9

作者 王立军 金英 +4 位作者 隋海娟 屈文慧 郁盛雪 金迎新 李洪秀 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期629-634,共6页

目的探讨知母皂苷元(Sar)对淀粉样β蛋白片段1-42(Aβ1-42)引起的海马神经元损伤是否有保护作用。方法取出生24 h内SD乳大鼠海马神经元,体外培养7 d,先加入Sar 10,30和100μmo.lL-1作用1 h,然后加入Aβ1-4250 nmo.l L-1作用24 h。应用... 目的探讨知母皂苷元(Sar)对淀粉样β蛋白片段1-42(Aβ1-42)引起的海马神经元损伤是否有保护作用。方法取出生24 h内SD乳大鼠海马神经元,体外培养7 d,先加入Sar 10,30和100μmo.lL-1作用1 h,然后加入Aβ1-4250 nmo.l L-1作用24 h。应用倒置相差显微镜和微管相关蛋白2(MAP2)免疫荧光染色观察神经元树突的生长;应用Hoechst33258核染色检测神经元凋亡;Western蛋白质印迹法检测海马神经元突触囊泡蛋白(SYP)、突触后致密蛋白95(PSD95)和活性胱天蛋白酶3表达。结果加入Aβ1-42作用24 h,可使培养海马神经元树突静脉曲张样改变和突起回缩,树突总长度和末梢分枝数明显减少。与正常对照组相比,SYP和PSD95蛋白表达水平明显降低(P<0.01),神经元凋亡细胞百分率和活性胱天蛋白酶3蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。与Aβ1-42模型组相比,先分别加入Sar 30和100μmo.lL-1可明显对抗Aβ1-42引起的这些改变,培养海马神经元树突总长度(μm)和末梢分枝数从277±76和6±2分别增加到359±144和8±3以及370±158和8±3,神经元SYP和PSD95蛋白表达水平明显增加(P<0.01),神经元凋亡细胞百分率和活性胱天蛋白酶3表达水平明显降低(P<0.01)。结论 Sar能够改善Aβ1-42引起的海马神经元损伤。 展开更多

关键词 知母皂苷元 淀粉样Β蛋白 海马神经元 突触囊泡蛋白 细胞凋亡

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钙敏感受体在人参皂苷Rg1防治心肌细胞损伤中的作用 被引量：5

10

作者 郁盛雪 杨依玲 +3 位作者 左中夫 鲁美丽 吕涛 刘学政 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2018年第7期752-756,共5页

目的探讨钙敏感受体(CaSR)在人参皂苷Rg1防治心肌损伤中的作用。方法选择大鼠新生乳鼠心脏组织H9C2心肌细胞于培养基中培养,实验分为对照组、异丙肾上腺素(ISO)组、低剂量组、中剂量组、高剂量组及普萘洛尔组。对照组未加任何试剂培养,... 目的探讨钙敏感受体(CaSR)在人参皂苷Rg1防治心肌损伤中的作用。方法选择大鼠新生乳鼠心脏组织H9C2心肌细胞于培养基中培养,实验分为对照组、异丙肾上腺素(ISO)组、低剂量组、中剂量组、高剂量组及普萘洛尔组。对照组未加任何试剂培养,ISO组加入ISO 10μmol/L作用48h,低、中、高剂量组及普萘洛尔组,分别加入人参皂苷Rg1 20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L、普萘洛尔2μmol/L预孵育30min,再加入ISO 10μmol/L,作用48h。测定细胞体积及心肌细胞蛋白含量,观察各组心肌细胞线粒体膜电位变化、细胞内Ca2+的瞬间变化、CaSR表达及凋亡因子半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase-3)蛋白表达。结果与对照组比较,ISO组心肌细胞蛋白含量明显增加[(28.8±2.8)μg vs(17.8±2.3)μg,P<0.05];与ISO组比较,中、高剂量组及普萘洛尔组心肌细胞蛋白含量明显降低,差异有统计学意义[(21.7±2.9)μg vs(28.8±2.8)μg,P<0.05;(19.6±1.8)μg vs(28.8±2.8)μg,P<0.01;(19.2±2.3)μg vs(28.8±2.8)μg,P<0.01)]。与对照组比较,ISO组心肌细胞肥大,线粒体膜电位降低,细胞内Ca2+浓度、CaSR表达及caspase-3蛋白表达增加。与ISO组比较,中、高剂量组心肌细胞蛋白含量明显降低,线粒体膜电位绿色荧光明显减弱,细胞内Ca2+浓度、CaSR及caspase-3表达明显降低。结论人参皂苷Rg1通过CaSR可以减轻ISO诱导的肥大心肌细胞凋亡。 展开更多

关键词 受体 钙敏感 人参皂甙类 肌细胞 心脏 异丙肾上腺素 普萘洛尔

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漆黄素对高糖诱导视网膜Müller细胞氧化应激炎症反应的作用 被引量：2

11

作者 胡千慧 曹睿 +1 位作者 凌云 郁盛雪 《锦州医科大学学报》 2022年第6期13-20,共8页

目的探讨漆黄素(fisetin,FIS)对高糖诱导的视网膜Müller细胞的作用及其机制。方法采用100 mmol/L葡萄糖模拟体外高糖环境,实验分为4组:对照组、高糖组、漆黄素+高糖组、漆黄素+高糖+TCBN(Akt/Gsk3β信号通路抑制剂)组。通过CCK8法... 目的探讨漆黄素(fisetin,FIS)对高糖诱导的视网膜Müller细胞的作用及其机制。方法采用100 mmol/L葡萄糖模拟体外高糖环境,实验分为4组:对照组、高糖组、漆黄素+高糖组、漆黄素+高糖+TCBN(Akt/Gsk3β信号通路抑制剂)组。通过CCK8法检测Müller细胞增殖活力;硫代巴比妥酸比色法测定丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性;DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;JC-1法检测线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP);免疫荧光检测线粒体膜通透性转换孔(membrane permeability transition pore,mPTP)及IL-1β、IL-6、TNF-α表达;实时荧光定量PCR检测IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA表达;Western Blot检测炎症因子及信号通路蛋白表达。结果与高糖组相比,漆黄素组降低MDA含量,提高SOD活力,明显抑制ROS产生,抑制mPTP开放,稳定MMP(P<0.05);与漆黄素组相比,TCBN组明显阻断了漆黄素的这种作用。免疫荧光和qPCR结果发现,与高糖组相比,漆黄素组能明显降低IL-1β、IL-6、TNF-α炎症因子表达水平(P<0.05);与漆黄素组相比,TCBN组各炎症因子表达增加(P<0.05)。同时Western Blot结果发现,与高糖组相比,漆黄素组能明显增加p-Akt、p-Gsk3β蛋白表达(P<0.05);而TCBN组p-Akt、p-Gsk3β蛋白表达减少(P<0.05)。结论漆黄素通过降低细胞内MDA含量、增加SOD活性、抑制ROS产生、mTPT开放来维持MMP稳定,减少炎症因子表达从而减轻氧化应激损伤,这种作用与激活Akt/Gsk3β信号通路有关。 展开更多

关键词 糖尿病视网膜病变 MÜLLER细胞 氧化应激 炎症 Akt/Gsk3β信号通路

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姜黄素通过HMGB1因子促进HepG2肝癌细胞凋亡 被引量：1

12

作者 于洪丹 郁盛雪 左中夫 《锦州医科大学学报》 2022年第2期7-11,共5页

目的探讨姜黄素通过HMGB1介导的炎症反应对人HepG2肝癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响。方法选择终浓度为0、5、10、20μg/mL的姜黄素处理人HepG2肝癌细胞48 h。通过CCK-8试剂盒检测HepG2肝癌细胞的增殖情况,划痕实验观察HepG2肝癌细胞的... 目的探讨姜黄素通过HMGB1介导的炎症反应对人HepG2肝癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响。方法选择终浓度为0、5、10、20μg/mL的姜黄素处理人HepG2肝癌细胞48 h。通过CCK-8试剂盒检测HepG2肝癌细胞的增殖情况,划痕实验观察HepG2肝癌细胞的迁移能力,Annexin V-FITC/PI双染法通过流式细胞仪分析HepG2肝癌细胞的凋亡率,Western blot检测凋亡和炎症相关蛋白的表达水平。结果姜黄素对HepG2肝癌细胞的增殖抑制作用表现为剂量依赖性,48 h姜黄素的半数抑制浓度(IC_(50))为10μg/mL;HepG2肝癌细胞的迁移能力随姜黄素浓度的增加而明显降低;与对照组(0μg/mL)相比,5μg/mL的姜黄素未能明显诱导HepG2肝癌细胞凋亡(P>0.05),10μg/mL和20μg/mL的姜黄素能显著诱导HepG2肝癌细胞发生凋亡(P<0.05);Western blot结果表明姜黄素上调凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2、p53及p-p53(ser315)的表达,下调炎症相关蛋白HMGB1、IL-6、NF-κB、p-NF-κB(ser536)的表达。结论本研究表明,姜黄素能抑制人HepG2肝癌细胞的增殖,促进其凋亡的发生,其机制可能与姜黄素抑制促炎因子HMGB1的表达而降低炎症反应,进而诱导HepG2肝癌细胞的凋亡。 展开更多

关键词 姜黄素 HEPG2 HMGB1 凋亡

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知母皂苷元对谷氨酸诱导的皮层神经元损伤的保护作用及其机制 被引量：3

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作者 岳连虎 隋海娟 +3 位作者 屈文慧 郁盛雪 刘卓 金英 《中药药理与临床》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期31-36,共6页

目的:观察知母皂苷元(Sarsasapogenin,SAR)对谷氨酸引起的皮层神经元损伤的保护作用及其机制研究。方法:大鼠乳鼠大脑皮层神经元,培养7 d后用于实验。倒置相差显微镜观察神经元树突生长情况;用MTT法测定细胞活力;Hoechst33258核染色观... 目的:观察知母皂苷元(Sarsasapogenin,SAR)对谷氨酸引起的皮层神经元损伤的保护作用及其机制研究。方法:大鼠乳鼠大脑皮层神经元,培养7 d后用于实验。倒置相差显微镜观察神经元树突生长情况;用MTT法测定细胞活力;Hoechst33258核染色观察细胞凋亡的形态学改变;Western印迹法检测神经元SYP、p-PDK1、p-Akt473、p-mTOR蛋白表达水平。结果:形态学观察结果显示谷氨酸(150μmol/L)可明显抑制神经元树突的生长发育。谷氨酸150μmol/L+SAR 30μmol/L组可明显对抗谷氨酸的抑制作用。谷氨酸150μmol/L+SAR30μmol/L+各阻断剂组能够阻断SAR的作用。谷氨酸可降低神经元细胞活力及增加神经元细胞凋亡百分比。谷氨酸150μmol/L+SAR 30μmol/L组能明显抑制谷氨酸引起的神经元细胞活力降低及细胞凋亡百分比增加。谷氨酸150μmol/L+SAR 30μmol/L+各阻断剂组能够阻断SAR的保护作用。Western印迹结果显示谷氨酸可明显降低SYP、p-PDK1、p-Akt473、p-mTOR蛋白表达水平。谷氨酸150μmol/L+SAR 30μmol/L组可明显增加SYP、p-PDK1、p-Akt473及p-mTOR蛋白表达水平。谷氨酸150μmol/L+SAR 30μmol/L+各阻断剂组能够明显降低神经元SYP、p-PDK1、p-Akt473及p-mTOR的蛋白表达水平。结论:SAR对谷氨酸引起的体外培养皮层神经元的损伤有保护作用,这种作用可能与PI3K/Akt/mTOR信号转导通路有关。 展开更多

关键词 知母皂苷元 谷氨酸 皮层神经元 树突发育 信号转导通路

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