玉米自交系幼胚培养与基因枪转化研究 被引量：1

1

作者 蒋武生 郅玉宝 +5 位作者 耿建峰 原玉香 张晓伟 韩永平 陈占宽 高睦枪 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2001年第10期4-6,共3页

玉米自交系幼胚在添加 1～ 2mg/L 2 ,4-D的N6培养基上能够诱导形成不同类型的胚性愈伤组织。愈伤组织的诱导率与基因型和 2 ,4-D浓度有关 ,6个自交系的诱导率在 5 2 %～ 89%。将淡黄色颗粒状结构致密型愈伤组织在N6诱导培养基上继代培养... 玉米自交系幼胚在添加 1～ 2mg/L 2 ,4-D的N6培养基上能够诱导形成不同类型的胚性愈伤组织。愈伤组织的诱导率与基因型和 2 ,4-D浓度有关 ,6个自交系的诱导率在 5 2 %～ 89%。将淡黄色颗粒状结构致密型愈伤组织在N6诱导培养基上继代培养 2 0个月 ,仍具有较强的分化能力。在附加 2mg/L 6 -BA和0 .2mg/LNAA的N6分化培养基上 ,有 2 7%～ 41%的愈伤组织分化成苗。通过基因枪轰击成功地将 pbarGUS基因转入玉米细胞 ,获得了大量的转化胚性愈伤组织。用 0 .4mol/L的甘露醇高渗处理幼胚 ,能显著提高pbarGUS基因在细胞中的表达 ,高渗处理转化率较对照提高了 展开更多

关键词 玉米 自交系 幼胚培养 愈伤组织 pbarGUS基因 基因枪 基因转化

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苹果脱毒试管苗的繁殖技术研究

2

作者 郅玉宝 易明林 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 1993年第9期35-36,共2页

以苹果脱毒试管苗含腋芽茎切段为材料,在MS+6-BA0.8～1.2 mg/L+NAA0.1～0.5mg/L培养基上培养30～40天均长出健壮的丛生苗。但长期在较高浓度的6-BA条件下继代,幼苗生长速度减慢,转到较低浓度的6-BA培养基上可得到正常的无根苗。无根苗... 以苹果脱毒试管苗含腋芽茎切段为材料,在MS+6-BA0.8～1.2 mg/L+NAA0.1～0.5mg/L培养基上培养30～40天均长出健壮的丛生苗。但长期在较高浓度的6-BA条件下继代,幼苗生长速度减慢,转到较低浓度的6-BA培养基上可得到正常的无根苗。无根苗生长在1/2MS附加IAA、IBA、NAA不同组合的生根培养基上均可诱导生根,生根率在70％～90％。 展开更多

关键词 苹果 脱毒 试管苗 繁殖

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用基因枪法将人工雄性不育基因导入小麦的研究初报 被引量：55

3

作者 傅荣昭 曹光诚 +6 位作者 马江生 李文彬 孙勇加 陈占宽 易明林 郅玉宝 林作辑 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1997年第4期358-361,共4页

利用ＰＤＳ１０００／氦气基因枪将人工构建的雄性不育基因（ＴＡ２９－Ｂａｒｎａｓｅ基因）导入小麦栽培品种豫责１８号的幼胚细胞。然后在含有１０～２０ｍｇ／Ｌ除草剂Ｂａｓｔａ的培养基础上筛选与分化。从１７０个幼胚中获得６株... 利用ＰＤＳ１０００／氦气基因枪将人工构建的雄性不育基因（ＴＡ２９－Ｂａｒｎａｓｅ基因）导入小麦栽培品种豫责１８号的幼胚细胞。然后在含有１０～２０ｍｇ／Ｌ除草剂Ｂａｓｔａ的培养基础上筛选与分化。从１７０个幼胚中获得６株绿苗，对照的７０个幼胚中未得到绿苗。对其中３株已生根且长势好的绿苗进行Ｓｏｕｔｈｅｍ杂交分析，结果表明，这３株绿苗皆为转基因植株，转化效率达１．８％。 展开更多

关键词 小麦 基因枪 转基因小麦 雄性不育基因 基因工程

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花药培养建立辣椒DH纯系的初步研究 被引量：34

4

作者 陈晓 詹玉丝 +5 位作者 徐小利 齐卫强 常高正 郅玉宝 易明林 吕淑玉 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2003年第9期52-55,共4页

试验结果表明 ,基因型是影响辣椒花药培养胚状体诱导率的主要因素 ,激素是影响辣椒胚状体诱导率的重要因素 ;0 .1mg/L的 2 ,4-D和 0 .1mg/L的KT配比适合大部分辣椒基因型成功出胚 ,且出胚率较高。在不同的时期接种 ,相同基因型胚状体的... 试验结果表明 ,基因型是影响辣椒花药培养胚状体诱导率的主要因素 ,激素是影响辣椒胚状体诱导率的重要因素 ;0 .1mg/L的 2 ,4-D和 0 .1mg/L的KT配比适合大部分辣椒基因型成功出胚 ,且出胚率较高。在不同的时期接种 ,相同基因型胚状体的诱导率存在显著差异。添加活性炭能提高胚状体的诱导率 ,在 0 .2 5 %～ 0 .5 %的浓度区间内得到的诱胚率差异不明显。 展开更多

关键词 辣椒 DH纯系 花药培养 基因型 激素 接种时期 活性炭 胚状体 诱导率

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小白菜游离小孢子培养及其再生植株 被引量：38

5

作者 蒋武生 原玉香 +3 位作者 张晓伟 耿建峰 韩永平 郅玉宝 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期398-401,共4页

在NLN-13添加活性炭的液体培养基中,20个小白菜品种有18个诱导出小孢子胚.各品种间小孢子胚产量差别较大,每花蕾产胚在0.026～26.89个之间.比较NLN培养基中蔗糖、植物生长调节物质浓度效果表明,NLN+蔗糖130 mg·L-1效果较好.接种后... 在NLN-13添加活性炭的液体培养基中,20个小白菜品种有18个诱导出小孢子胚.各品种间小孢子胚产量差别较大,每花蕾产胚在0.026～26.89个之间.比较NLN培养基中蔗糖、植物生长调节物质浓度效果表明,NLN+蔗糖130 mg·L-1效果较好.接种后小孢子在33℃高温预处理24 h产胚量较高.B5+6-BA 0.1 mg·L-1+NAA 0.01 mg·L-1+蔗糖30 mg·L-1+琼脂11mg·L-1培养基有利于小孢子胚长成植株. 展开更多

关键词 小白菜 游离小孢子培养 诱导率 小孢子胚 植株再生

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乙烯生物合成途径及其相关基因工程的研究进展(综述) 被引量：25

6

作者 陈新建 刘国顺 +3 位作者 陈占宽 郅玉宝 易明林 刘鸿先 《热带亚热带植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期83-98,共16页

在对植物激素乙烯生理功能作简要回顾的基础上着重对乙烯的生物合成途径中的关键酶,包括腺苷蛋氨酸合成酶、ACC合成酶及ACC氧化酶的性质和基因的研究进展作了综述,同时展现出了与调控内源乙烯生物合成有关的基因工程的整体轮廓。

关键词 乙烯 生物合成 基因工程 研究进展 植物激素

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用流式细胞仪鉴定中华猕猴桃的多倍体 被引量：33

7

作者 朱道圩 杨宵 +3 位作者 郅玉宝 易明林 理莎莎 符真珠 《植物生理学通讯》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期905-908,共4页

中华猕猴桃叶中酚类物质多而黏性较大,对流式细胞仪检测多有不便。文章参照已有方法,改进细胞核提取液配方和提取方法,建立了快速、准确鉴定秋水仙素诱导中华猕猴桃多倍体的方法,效果较好。

关键词 秋水仙素 中华猕猴桃 流式细胞仪 倍性鉴定

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石斛组织培养与栽培技术的研究 被引量：60

8

作者 赵天榜 陈志秀 +2 位作者 陈占宽 易明林 郅玉宝 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 1994年第2期128-133,共6页

研究结果表明，Ｎ＿６、ＭＳ等１４种培养基对曲茎石斛、铁皮石斛的种胚成苗率、种胚苗生长有显著作用，其中以Ｎ＿６为佳。在１／２Ｎ＿６培养基内添加香蕉汁（１５０ｍｇ／Ｌ），石斛种胚苗生长最好；若添加２ｍｇ／Ｌ或１ｍｇ／ＬＮ... 研究结果表明，Ｎ＿６、ＭＳ等１４种培养基对曲茎石斛、铁皮石斛的种胚成苗率、种胚苗生长有显著作用，其中以Ｎ＿６为佳。在１／２Ｎ＿６培养基内添加香蕉汁（１５０ｍｇ／Ｌ），石斛种胚苗生长最好；若添加２ｍｇ／Ｌ或１ｍｇ／ＬＮＡＡ，可提高石斛种胚苗分蘖率６～７．１４倍。选曲茎石斛或铁皮石斛的茎尖、茎段、充实幼叶及其种胚、鳞叶期原球茎、种胚苗、幼根为外殖体，可培育出大批组培苗。栽培试验结果表明，石斛组培苗在特殊的环境条件下，５月上中旬栽培。用苔藓或腐乳质土覆盖幼根，成活率达９５％以上，且生长发育良好。 展开更多

关键词 石斛 组织培养 放栽

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河南石斛属植物资源的开发利用研究 被引量：18

9

作者 赵天榜 陈志秀 +3 位作者 杨献国 陈占宽 易明林 郅玉宝 《地域研究与开发》 CSSCI 北大核心 1994年第2期59-61,共3页

河南石斛属植物有１３种，其中新记录种７种。“河南金钗”石斛量少质优，药材用途广，价格昂贵。石斛属植物有性繁殖困难，对适生环境要求严格。开发利用石斛属植物资源，既要采用组织培养的新技术，快速繁殖石斛幼苗，扩大栽培范围，... 河南石斛属植物有１３种，其中新记录种７种。“河南金钗”石斛量少质优，药材用途广，价格昂贵。石斛属植物有性繁殖困难，对适生环境要求严格。开发利用石斛属植物资源，既要采用组织培养的新技术，快速繁殖石斛幼苗，扩大栽培范围，又要挖掘、保护资源，加强理论研究，增加新的开发途径。 展开更多

关键词 河南 石斛属植物 开发利用

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软枣猕猴桃原生质体培养与细胞团再生的初步研究 被引量：13

10

作者 朱道圩 秦永华 +3 位作者 郅玉宝 易明林 陈占宽 胡湛 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 2001年第3期221-224,共4页

以软猕猴桃叶片、叶片愈伤组织为材料 ,研究了影响原生质体分离和培养的因素 结果表明 ,原生质体分离 ,酶液配方 2优于配方 1,成龄叶片优于幼龄叶片 ;培养方法以浅层培养法最好 ;改良MS液体培养基培养愈伤组织原生质体 ,5～ 7d出现第 ... 以软猕猴桃叶片、叶片愈伤组织为材料 ,研究了影响原生质体分离和培养的因素 结果表明 ,原生质体分离 ,酶液配方 2优于配方 1,成龄叶片优于幼龄叶片 ;培养方法以浅层培养法最好 ;改良MS液体培养基培养愈伤组织原生质体 ,5～ 7d出现第 1次细胞分裂 ,14d出现第 2次细胞分裂 ,30d形成多细胞团 ,5 展开更多

关键词 软枣猕猴桃 原生质体 再生细胞团 猕猴桃

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芝麻人工构建雄性不育基因的转化研究初报 被引量：12

11

作者 陈占宽 郅玉宝 +7 位作者 易明林 王金兰 梁秀银 屠礼传 傅荣昭 曹光诚 史艳红 孙勇如 《华北农学报》 CSCD 北大核心 1996年第4期33-38,共6页

用基因枪将人工构建的植物雄性不育基因ＴＡ２９－Ｂａｒｎａｓｅ及其标记基因ｂａｒ导入芝麻豫芝４号的离体子叶，在ＭＳ＋５ｍｇ·Ｌ－１６－ＢＡ＋１ｍｇ·Ｌ－１ＩＡＡ＋１ｍｇ·Ｌ－１ＡＢＡ＋５ｍｇ·Ｌ－１Ａｇ... 用基因枪将人工构建的植物雄性不育基因ＴＡ２９－Ｂａｒｎａｓｅ及其标记基因ｂａｒ导入芝麻豫芝４号的离体子叶，在ＭＳ＋５ｍｇ·Ｌ－１６－ＢＡ＋１ｍｇ·Ｌ－１ＩＡＡ＋１ｍｇ·Ｌ－１ＡＢＡ＋５ｍｇ·Ｌ－１ＡｇＮＯ３的培养基上交培养１２天，转入光、暗光替培养，诱导出不定芽。经添加２ｍｇ·Ｌ－１除草剂（ＢＡＳＴＡ）的上述培养基筛选，获得了１１个ＢＡＳＴＡ抗性株系，对其中３个株系进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交鉴定分析，证实其中２个为转基因株系，转化率为１．４６％ 展开更多

关键词 芝麻 基因枪 离体子叶 转基因

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喹乙醇人工抗原的合成与鉴定 被引量：5

12

作者 宋春美 高爱中 +4 位作者 邓瑞广 职爱民 郅玉宝 侯玉泽 张改平 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期1-6,共6页

采用琥珀酸酐法合成喹乙醇半琥珀酸酯(OLA-HS),以质谱法对其进行鉴定;活化酯法合成全抗原OLA-BSA、OLA-OVA,以紫外(UV)和凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定之;用OLA-BSA免疫BALB/c小鼠,间接ELISA测定多抗血清效价,阻断ELISA鉴定其敏感性、特异性... 采用琥珀酸酐法合成喹乙醇半琥珀酸酯(OLA-HS),以质谱法对其进行鉴定;活化酯法合成全抗原OLA-BSA、OLA-OVA,以紫外(UV)和凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定之;用OLA-BSA免疫BALB/c小鼠,间接ELISA测定多抗血清效价,阻断ELISA鉴定其敏感性、特异性。紫外扫描测得OLA-BSA、OLA-OVA中OLA-HS和BSA、OVA的分子结合比分别为17.1∶1和12.4∶1;3号小鼠抗血清的效价最高,对OLA的IC50为58.923 ng/mL,与卡巴氧的交叉反应率为1.841%,与其他药物无交叉反应。通过系列ELISA鉴定,获得高价、敏感、特异的多克隆抗体(pAb),为OLA残留免疫学检测方法的建立奠定基础。 展开更多

关键词 喹乙醇 人工抗原 合成 鉴定

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小麦抗白粉病基因Pm23分子标记的初步鉴定 被引量：5

13

作者 柴春月 刘红彦 +3 位作者 伊艳杰 王振军 王瑞 郅玉宝 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2006年第5期47-50,共4页

根据植物抗病基因的保守结构,合成7对特异引物,用感病品种Chanceller作对照,对12个含不同抗白粉病基因的小麦品系进行PCR分析,结果只有1对引物(3LR+3LF)在Pm23的载体品系中扩增出稳定的多态性片段,对该片段进行回收、克隆、测序,全长为2... 根据植物抗病基因的保守结构,合成7对特异引物,用感病品种Chanceller作对照,对12个含不同抗白粉病基因的小麦品系进行PCR分析,结果只有1对引物(3LR+3LF)在Pm23的载体品系中扩增出稳定的多态性片段,对该片段进行回收、克隆、测序,全长为253bp。经同源性分析发现,该特异性片段与大麦Ty3-gypsy类反转录转座子基因部分序列有87%的同源性,属于反转录转座子类标记。 展开更多

关键词 小麦 白粉病 抗病基因 分子标记

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以合成肽为抗原建立口蹄疫病毒非结构蛋白抗体检测ELISA试剂盒 被引量：4

14

作者 杨继飞 杨苏珍 +7 位作者 杨艳艳 职爱民 赵东 郅玉宝 邢广旭 邓瑞广 柴书军 张改平 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期1242-1247,共6页

【目的】建立合成多肽抗原检测FMD NSP抗体的ELISA方法。【方法】固相法合成特异性FMDV NSP B细胞表位肽,将其偶联在BSA载体蛋白上,作为抗原包被在ELISA板上,制备检测抗FMDV NSP抗体的ELISA试剂盒,并对该试剂盒进行方法考核。【结果】... 【目的】建立合成多肽抗原检测FMD NSP抗体的ELISA方法。【方法】固相法合成特异性FMDV NSP B细胞表位肽,将其偶联在BSA载体蛋白上,作为抗原包被在ELISA板上,制备检测抗FMDV NSP抗体的ELISA试剂盒,并对该试剂盒进行方法考核。【结果】抗原包被浓度选择2.5μg·mL-1;检测199份血清标本,与美国UBI商品试剂盒符合率达到96.48%,与国产3ABC ELISA比较,符合率为97.48%,显示极好的一致性。【结论】该合成肽ELISA试剂盒可以用以检测NSP抗体,从而鉴别FMD的自然感染与疫苗免疫,试剂盒特异性强,重复性好、稳定性高,操作简便。 展开更多

关键词 FMDV ELISA 合成肽

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芝麻丛芽的诱导及再生植株研究 被引量：6

15

作者 陈占宽 王金兰 +1 位作者 郅玉宝 易明林 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 1994年第11期10-12,共3页

芝麻丛芽的诱导及再生植株研究陈占宽，王金兰，郅玉宝，易明林（河南省农科院科学实验中心郑州４５０００２）芝麻（ＳｅｓａｍｕｍｉｎｄｉｃｕｍＬ·）是我国重要的油料作物，亦是不易进行组织培养的几种作物之一，特别是其组织... 芝麻丛芽的诱导及再生植株研究陈占宽，王金兰，郅玉宝，易明林（河南省农科院科学实验中心郑州４５０００２）芝麻（ＳｅｓａｍｕｍｉｎｄｉｃｕｍＬ·）是我国重要的油料作物，亦是不易进行组织培养的几种作物之一，特别是其组织培养中的分化问题更难解决，以致成为芝麻... 展开更多

关键词 芝麻 丛芽 诱导 再生植株

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甘蓝型油菜脂肪酸延长酶FAE1 RNA干扰体的构建 被引量：3

16

作者 田保明 陈占宽 +6 位作者 苗利娟 梁会娟 黄冰艳 翁海波 易明林 曹刚强 郅玉宝 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2006年第3期43-47,共5页

利用来源于油菜fae1基因编码区的长498bp的2个片段,反向连接于1个83bp的内含子两端,构建成RNAi载体,以期在油菜中转录后能有效抑制fae1基因的表达。所构建的RNAi载体最终序列全长2 066bp,经限制性内切酶消化及序列测定验证,其序列结构... 利用来源于油菜fae1基因编码区的长498bp的2个片段,反向连接于1个83bp的内含子两端,构建成RNAi载体,以期在油菜中转录后能有效抑制fae1基因的表达。所构建的RNAi载体最终序列全长2 066bp,经限制性内切酶消化及序列测定验证,其序列结构与设计一致。通过农杆菌介导的油菜转化,获得油菜再生株系29个。 展开更多

关键词 RNA干扰(RNAI) 脂肪酸延长酶 芥酸 油菜

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狂犬病病毒糖蛋白胞外区基因的原核表达、纯化及鉴定 被引量：2

17

作者 杨艳艳 王丽 +5 位作者 杨继飞 郅玉宝 滕蔓 邓瑞广 肖治军 张改平 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2010年第3期28-31,共4页

利用RT-PCR技术,将狂犬病病毒株ERA株糖蛋白胞外区基因分两段进行扩增,经克隆与序列分析,两片段大小分别为523,381 bp,各编码174,127个氨基酸,分子量分别为19.7,14.5 kDa。在原核表达载体pET-43a中分别克隆了这两段糖蛋白基因,将重组质... 利用RT-PCR技术,将狂犬病病毒株ERA株糖蛋白胞外区基因分两段进行扩增,经克隆与序列分析,两片段大小分别为523,381 bp,各编码174,127个氨基酸,分子量分别为19.7,14.5 kDa。在原核表达载体pET-43a中分别克隆了这两段糖蛋白基因,将重组质粒转化到表达菌BL21(DE3)中,经SDS-PAGE电泳分析,在分子量约为94,89kDa处分别出现新蛋白带,和预期的目的蛋白的分子量相符。两重组蛋白主要以可溶形式表达,利用Ni2+亲和层析柱纯化了蛋白,纯度大于95%。Western-Blot分析结果显示,两种重组融合蛋白均可与兔抗RBV多抗血清反应,具有良好的反应原性。 展开更多

关键词 狂犬病病毒 糖蛋白 胞外区 纯化

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石斛种胚苗培养试验研究 被引量：3

18

作者 易明林 陈占宽 郅玉宝 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 1993年第9期40-42,共3页

选用铁皮石斛种胚进行胚苗培养试验,结果表明:N_6、MS、SH培养基适于作为石斛胚培养的基本培养基。加入0.5ppm以下NAA对胚苗生长发育有显著促进作用。

关键词 石斛 胚培养 培养基

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石斛体细胞无性系的建立及其快速繁殖 被引量：3

19

作者 易明林 陈占宽 郅玉宝 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 1993年第9期43-44,共2页

以铁皮石斛种子作为试材,在附加0.05～0.3ppm NAA的N_6培养基上诱导出愈伤组织,通过对其继代培养和筛选,建立了铁皮石斛体细胞无性繁殖系。该无性系在黑暗条件下培养能够快速增殖,在光照下培养则进行分化,形成原球茎。原球茎能够无性增... 以铁皮石斛种子作为试材,在附加0.05～0.3ppm NAA的N_6培养基上诱导出愈伤组织,通过对其继代培养和筛选,建立了铁皮石斛体细胞无性繁殖系。该无性系在黑暗条件下培养能够快速增殖,在光照下培养则进行分化,形成原球茎。原球茎能够无性增殖,分化形成植株。 展开更多

关键词 石斛 无性系 繁殖

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Ⅰ型与Ⅱ型IBDV前体多聚蛋白B细胞抗原表位的预测与比较 被引量：1

20

作者 肖治军 张改平 +8 位作者 乔松林 赵东 李学伍 邓瑞广 杨艳艳 邢广旭 郅玉宝 杨继飞 柴书军 《中国家禽》 北大核心 2009年第21期22-24,28,共4页

用生物信息学方法比较了GenBank中9株Ⅰ型IBDV与2株Ⅱ型IBDV基因片段A前体多聚蛋白的推导氨基酸(aa)序列,预测并分析了上述两型IBDV毒株前体多聚蛋白的线性B细胞抗原表位。结果表明,两型IBDV毒株的前体多聚蛋白有75个aa残基的差异,其上... 用生物信息学方法比较了GenBank中9株Ⅰ型IBDV与2株Ⅱ型IBDV基因片段A前体多聚蛋白的推导氨基酸(aa)序列,预测并分析了上述两型IBDV毒株前体多聚蛋白的线性B细胞抗原表位。结果表明,两型IBDV毒株的前体多聚蛋白有75个aa残基的差异,其上大多数预测B细胞抗原表位的位置及其指数值均无明显差异;但两型IBDV在第3～10位中的aa残基差异影响了该序列肽的预测指数和结构,以及与Ⅰ型IBDV多抗的反应性。 展开更多

关键词 IBDV 氨基酸序列 B细胞抗原表位 比较分析

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