GLI1表达与肿瘤免疫浸润及胃癌临床预后的关系

1

作者 朱文帅 孙菁果 +3 位作者 鲁艺 栾慕华 马晓丽 郏雁飞 《中国现代普通外科进展》 CAS 2024年第1期8-13,共6页

目的:探讨胃癌中胶质瘤相关癌基因1(GLI1)的表达与免疫浸润相关性,及其与临床预后的相关性。研究GLI1的表达对胃癌化疗药物耐药性的影响。方法:运用TCGA数据库分析GLI1在胃癌和正常组织中的表达差异,分析胃癌患者临床特征和GLI1基因表... 目的:探讨胃癌中胶质瘤相关癌基因1(GLI1)的表达与免疫浸润相关性,及其与临床预后的相关性。研究GLI1的表达对胃癌化疗药物耐药性的影响。方法:运用TCGA数据库分析GLI1在胃癌和正常组织中的表达差异,分析胃癌患者临床特征和GLI1基因表达水平对患者预后的影响;分析胃癌组织中GLI1基因表达与肿瘤免疫细胞浸润的相关性,探究其对化疗药物及靶向药物耐药性的影响。收集临床标本,分析GLI1在胃癌和癌旁组织中的表达差异。结果:胃癌组织中GLI1高表达是正常组织的1.7倍,其高表达患者总生存期、无病生存期较低表达患者更短(P<0.05)。胃癌组织中GLI1的高表达组间质评分、免疫评分、免疫浸润细胞丰度更高,GLI1高表达对药物敏感性降低并且和免疫检查点标志物PDCD1表达呈正相关(P<0.05)。GLI1在低分化胃癌患者中表达明显升高(P<0.05)。结论:GLI1表达与胃癌患者预后及免疫浸润相关,并且其可能通过调节化疗耐药而导致患者的不良预后,可能是胃癌潜在的治疗靶点和分子标志物。 展开更多

关键词 胶质瘤相关癌基因1 胃肿瘤 免疫浸润 预后 耐药性

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童心绘丹青,水墨染钟灵——大班幼儿水墨画自然美育的实践研究

2

作者 郏雁飞 《教育界》 2024年第16期122-124,共3页

近些年来,幼儿园越来越注重开展水墨画教学,借助水墨画教学落实自然美育,传承中华优秀传统文化。但当前幼儿园所开展的水墨画自然美育活动仍存在一些不足之处,教师要详细分析其中存在的问题,从水墨画的形与意两个维度探索自然美育的开... 近些年来,幼儿园越来越注重开展水墨画教学,借助水墨画教学落实自然美育,传承中华优秀传统文化。但当前幼儿园所开展的水墨画自然美育活动仍存在一些不足之处,教师要详细分析其中存在的问题,从水墨画的形与意两个维度探索自然美育的开展形式,实施多元化教学策略,让幼儿充分体会水墨画独有的意境美,引导幼儿养成探索自然、体验自然、爱护自然的审美情趣。 展开更多

关键词 水墨画 自然美育 幼儿园 幼儿教育 大班幼儿

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三氧化二砷对人AFP阳性胃癌细胞株FU97的作用及其机制 被引量：4

3

作者 郏雁飞 汪运山 +4 位作者 周芳 胡安拉 马晓丽 肖东杰 苏占涛 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期169-172,共4页

目的研究三氧化二砷(As2O3)抑制AFP阳性胃癌(alpha-fetoprotein-producing gastric carcinoma,APGC)细胞株FU97增殖、诱导凋亡及其机制。方法MTT法检测药物效应;DNA凝胶电泳和流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡;化学发光法、实时荧光定量PCR... 目的研究三氧化二砷(As2O3)抑制AFP阳性胃癌(alpha-fetoprotein-producing gastric carcinoma,APGC)细胞株FU97增殖、诱导凋亡及其机制。方法MTT法检测药物效应;DNA凝胶电泳和流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡;化学发光法、实时荧光定量PCR及ELISA检测AFP、STAT3、VEGF表达变化。结果As2O3可明显抑制FU97细胞增殖,且呈时间和浓度依赖关系;DNA凝胶电泳显示出典型的凋亡特征性梯状条带;FCM检测在细胞周期G1期前出现亚二倍体凋亡峰;细胞周期分析显示G2/M期阻滞;化学发光法、免疫细胞化学法、实时荧光定量PCR以及ELISA结果证实As2O3可下调FU97细胞AFP、VEGF、STAT3基因的表达。结论As2O3可抑制FU97细胞的增殖、阻滞细胞周期进程诱导凋亡。同时通过下调AFP、VEGF、STAT3基因的表达阻止APGC的恶性进程。 展开更多

关键词 三氧化二砷 FU97 细胞凋亡 AFP阳性胃癌 AFP

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甲胎蛋白特异性小干扰RNA表达载体的构建及鉴定

4

作者 郏雁飞 胡安拉 +3 位作者 汪运山 周芳 马晓丽 苏占涛 《生物技术通讯》 CAS 2007年第6期909-911,共3页

目的:构建特异性抑制甲胎蛋白(AFP)的小干扰RNA(siRNA)表达载体,为进一步研究AFP基因功能及AFP相关肿瘤的基因治疗奠定基础。方法:设计并合成AFP特异性的短链寡核苷酸,退火形成双链DNA片段,通过与RNAi-Ready pSIREN-DNR-DsRed-Express D... 目的:构建特异性抑制甲胎蛋白(AFP)的小干扰RNA(siRNA)表达载体,为进一步研究AFP基因功能及AFP相关肿瘤的基因治疗奠定基础。方法:设计并合成AFP特异性的短链寡核苷酸,退火形成双链DNA片段,通过与RNAi-Ready pSIREN-DNR-DsRed-Express Donor Vector连接、转化大肠杆菌、扩增、纯化得到所需质粒,用琼脂糖凝胶电泳及基因测序鉴定其分子量及插入片段的序列。结果:琼脂糖凝胶电泳证实纯化后的质粒大小约为6 740 bp,测序证实插入序列与合成的寡核苷酸序列完全符合。结论:构建了AFP特异性的siRNA表达质粒pSIREN-DNR-DsRed-Express Donor Vector-AFP。 展开更多

关键词 甲胎蛋白 小干扰RNA 质粒 基因表达

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大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化过程中Hedgehog信号分子的表达 被引量：6

5

作者 张雪萍 马晓丽 +5 位作者 汪运山 申红 郏雁飞 赵云 郑燕 肖东杰 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2011年第14期2487-2490,共4页

背景:Hedgehog 信号通路是一个在胚胎阶段调控多种组织器官发育的重要信号通路,在成骨发育方面具有重要的作用。但Hedgehog 信号分子在大鼠骨髓间充质干细胞体外诱导分化为成骨细胞过程中的作用尚未清楚。目的:体外诱导大鼠骨髓间充质... 背景:Hedgehog 信号通路是一个在胚胎阶段调控多种组织器官发育的重要信号通路,在成骨发育方面具有重要的作用。但Hedgehog 信号分子在大鼠骨髓间充质干细胞体外诱导分化为成骨细胞过程中的作用尚未清楚。目的:体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞向成骨分化,检测 Hedgehog 信号分子在成骨诱导分化过程中的变化。方法:从大鼠骨髓中分离得到骨髓间充质干细胞,进行地塞米松成骨诱导,通过免疫组化方法鉴定成骨的情况,Western Blot方法检测 Hedgehog 信号分子 SHH 和 IHH 在骨髓间充质干细胞成骨分化过程中的表达。结果与结论:成功分离得到骨髓间充质干细胞,地塞米松诱导培养 7,14,21 d 后,Ⅰ型胶原的表达量逐渐增加;在诱导成骨分化过程中,SHH 蛋白表达升高,诱导组的表达明显高于未诱导组的表达(P < 0.05),而 IHH 蛋白的表达降低,诱导组的表达明显低于未诱导组的表达(P < 0.05)。结果提示,Hedgehog 信号分子参与地塞米松诱导骨髓间充质干细胞分化为成骨细胞的过程,且 SHH 和 IHH 在间充质干细胞诱导成骨过程中的作用有差异。 展开更多

关键词 地塞米松 骨髓间充质干细胞 成骨分化 HEDGEHOG 信号分子 干细胞

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三氧化二砷诱导胃癌细胞AGS的凋亡及对STAT3、VEGF表达的影响 被引量：6

6

作者 周芳 汪运山 +3 位作者 郏雁飞 胡安拉 马晓丽 张茂修 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2007年第2期179-183,共5页

目的:探讨三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)诱导胃癌细胞AGS的凋亡及对信号转导子与转录激活子基因(signal transducers and activators of transcription 3,STAT3)和血管内皮生长因子基因(vascular endothelial growth factor,VEGF... 目的:探讨三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)诱导胃癌细胞AGS的凋亡及对信号转导子与转录激活子基因(signal transducers and activators of transcription 3,STAT3)和血管内皮生长因子基因(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的影响。方法:分别用1、5、10μmol/LAs2O3处理AGS细胞,在培养24、48、72h后,以MTT法检测细胞的生长增殖,以流式细胞术和TUNEL法检测细胞凋亡,以ELISA、免疫组化和实时荧光定量PCR检测凋亡过程中相关基因STAT3、VEGF表达的变化。结果:(1)AGS细胞经As2O3作用后,细胞增殖受到明显抑制,且呈剂量和作用时间依赖关系;(2)FCM术检测在细胞周期G1期前出现亚二倍体凋亡峰;细胞周期分析显示G2/M期阻滞;(3)TUNEL标记发现DNA链的断裂;(4)在AGS细胞凋亡过程中,STAT3和VEGF表达下调,其中10μmol/L浓度的As2O3作用最强。结论:As2O3抑制胃癌细胞AGS增殖并诱导凋亡,其机制可能与细胞周期阻滞和下调STAT3和VEGF基因表达有关。 展开更多

关键词 三氧化二砷 细胞凋亡 胃癌细胞 信号转导子与转录激活子3 血管内皮生长因子

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成人Still病的辅助检查 被引量：4

7

作者 潘正论 郏雁飞 +1 位作者 吴倩 王梅英 《山东医药》 CAS 北大核心 2008年第20期111-,共1页

Still病本是指系统型起病的幼年型慢性关节炎,但相似疾病也可发生于成年人,称为成人Still病。历史上关于Still病的描述始于1986年,以后报道增多并有不同命名。真正使用成人Still病一名始自1971年Bywater的报道,以后沿用。国内曾长时间使... Still病本是指系统型起病的幼年型慢性关节炎,但相似疾病也可发生于成年人,称为成人Still病。历史上关于Still病的描述始于1986年,以后报道增多并有不同命名。真正使用成人Still病一名始自1971年Bywater的报道,以后沿用。国内曾长时间使用"变异性亚败血症"一名,现早已废弃。为便于国际交流,国家自然科学名词审定委员会公布的医学名词认定Still病一词,成人患者为成人Still病。现将该病的研究进展综述如下,以飨同道。 展开更多

关键词 辅助检查 疾病 成人 STILL 铁蛋白 金属蛋白 中性粒细胞浸润 表皮 皮肤 致炎因子

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IFI44的研究现状 被引量：4

8

作者 李彬彬 郑燕 +2 位作者 郏雁飞 王敏 汪运山 《山东科学》 CAS 2008年第3期32-37,共6页

干扰素诱导蛋白44(Interferon-inducible-protein44,IFI44)是一种α/β-干扰素(Interferon-α/β,IFN-α/β)诱导基因,参与干扰素信号路径的多种生物学作用,如抗病毒。它能够反映干扰素的活性,在系统性红斑狼疮(Systemic Lupus Erythema... 干扰素诱导蛋白44(Interferon-inducible-protein44,IFI44)是一种α/β-干扰素(Interferon-α/β,IFN-α/β)诱导基因,参与干扰素信号路径的多种生物学作用,如抗病毒。它能够反映干扰素的活性,在系统性红斑狼疮(Systemic Lupus Erythematosus,SLE)的发病中担任着新的角色。在肿瘤的发病、治疗、放射抵抗方面也发挥着相应的作用。它还是一个潜在的炎症因子,参与了神经毒素引起的神经变性过程。本文对该基因的研究现状做一简要综述。 展开更多

关键词 干扰素诱导蛋白 Α干扰素 Β干扰素 抗增殖

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siRNA干扰CHRNA5基因的表达抑制尼古丁对人肺癌细胞的促增殖作用 被引量：2

9

作者 赵云 马晓丽 +4 位作者 汪运山 郏雁飞 张雪萍 郑燕 肖东杰 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期604-608,共5页

目的:研究siRNA干扰尼古丁乙酰胆碱受体α5(cholinergic receptor nicotinic alpha5,CHRNA5)基因表达后对尼古丁促人肺癌A549细胞增殖作用的影响。方法:设计并合成CHRNA5-siRNA片段,并经脂质体介导转染A549细胞。荧光定量PCR、Western b... 目的:研究siRNA干扰尼古丁乙酰胆碱受体α5(cholinergic receptor nicotinic alpha5,CHRNA5)基因表达后对尼古丁促人肺癌A549细胞增殖作用的影响。方法:设计并合成CHRNA5-siRNA片段,并经脂质体介导转染A549细胞。荧光定量PCR、Western blotting检测转染后A549细胞中CHRNA5 mRNA和蛋白的表达,MTT法检测CHRNA5-siRNA对尼古丁促A549细胞增殖作用的影响。结果:成功构建了CHRNA5-siRNA并成功转染A549细胞。CHRNA5-siRNA转染组A549细胞的CHRNA5mRNA表达量明显低于si-NC转染对照组(0.196±0.044vs0.944±0.027,P<0.01),CHRNA5-siRNA转染组A549细胞的CHRNA5蛋白表达量明显低于si-NC转染组(0.267±0.031vs0.745±0.035,P<0.01)。在无尼古丁作用时,CHRNA5-siRNA的转染不能抑制A549细胞的增殖。在尼古丁作用下,A549细胞增殖显著增加(P<0.01),CHRNA5-siRNA转染可明显抑制尼古丁的促增殖作用(P<0.01)。结论:siRNA下调肺癌A549细胞中CHRNA5的表达可以抑制尼古丁促细胞增殖作用,CHRNA5可能是肺癌治疗的潜在靶点之一。 展开更多

关键词 α5-尼古丁乙酰胆碱受体(CHRNA5) SIRNA 肺癌 尼古丁 增殖

原文传递

转录调节因子DEC1的研究进展 被引量：3

10

作者 王敏 郑燕 +2 位作者 郏雁飞 李彬彬 汪运山 《山东科学》 CAS 2008年第4期29-35,共7页

DEC1(Differentiated embryo-chondrocyte expressed gene 1)是一个碱性螺旋-环-螺旋(bHLH)结构的转录因子,在软骨形成、神经发生、免疫应答、分子钟的调控、细胞分化、肿瘤的发生中起着重要的作用。DEC1还是一个缺氧调节基因,与肿瘤细... DEC1(Differentiated embryo-chondrocyte expressed gene 1)是一个碱性螺旋-环-螺旋(bHLH)结构的转录因子,在软骨形成、神经发生、免疫应答、分子钟的调控、细胞分化、肿瘤的发生中起着重要的作用。DEC1还是一个缺氧调节基因,与肿瘤细胞在缺氧环境下存活密切相关,可调控肿瘤细胞生长、凋亡相关因子如缺氧诱导因子1α、转化生长因子-β、信号转导和转录激活因子、P53等的表达。DEC1还可通过调节同一家族的分子如DEC2的表达来调节细胞的功能。本文就其研究进展加以概述。 展开更多

关键词 DEC1 转录因子 肿瘤 缺氧

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DEC1和STAT3在胃癌组织中的表达及意义 被引量：3

11

作者 李彬彬 郑燕 +2 位作者 郏雁飞 王敏 汪运山 《中国现代普通外科进展》 CAS 2009年第7期595-598,共4页

目的:探讨DEC1和STAT3在胃癌组织中的表达及其在胃癌发病机制中的作用。方法:利用免疫组织化学方法检测59例胃癌组织中DEC1、STAT32种蛋白的表达情况,以19例癌旁正常组织作为对照。结果:DEC1蛋白在胃癌组织中的阳性表达率为71.2%,高于... 目的:探讨DEC1和STAT3在胃癌组织中的表达及其在胃癌发病机制中的作用。方法:利用免疫组织化学方法检测59例胃癌组织中DEC1、STAT32种蛋白的表达情况,以19例癌旁正常组织作为对照。结果:DEC1蛋白在胃癌组织中的阳性表达率为71.2%,高于癌旁正常组织的阳性表达率(26.3%,P<0.05)。胃癌组织中的DEC1表达与STAT3表达呈正相关,与肿瘤的分化程度有关,但与患者性别、年龄、肿瘤大小、TNM分期、浸润深度、有无淋巴结转移及远处转移无关;STAT3蛋白的表达与肿瘤的TNM分期、分化程度、浸润深度、淋巴结转移有关,而与患者性别、年龄、肿瘤大小及远处转移无关。结论:DEC1蛋白在胃癌组织中高表达,且与STAT3蛋白的表达相关。DEC1和STAT3均为转录调节因子,二者的相互调节很可能在胃癌的发生发展中具有重要作用。 展开更多

关键词 胃肿瘤 分化型胚胎软骨发育基因1 STAT3转录因子

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济南汉族群体5个Y-SNP位点的多态性分析 被引量：1

12

作者 韩淑毅 高洪梅 +4 位作者 张茂修 郑燕 郏雁飞 丁卜同 汪运山 《法医学杂志》 CAS CSCD 2011年第3期205-207,210,共4页

目的探讨济南汉族群体5个Y-SNP位点的多态性并评价其在法医学中的应用。方法采用片段长度差异等位基因特异性PCR（fragment length difference allele specific PCR,FLDAS-PCR）对济南汉族群体共103名男性无关个体5个Y-SNP标记（M89、M9... 目的探讨济南汉族群体5个Y-SNP位点的多态性并评价其在法医学中的应用。方法采用片段长度差异等位基因特异性PCR（fragment length difference allele specific PCR,FLDAS-PCR）对济南汉族群体共103名男性无关个体5个Y-SNP标记（M89、M9、M122、M134、M95）进行分型研究。结果 5个Y-SNP位点在济南汉族群体中均呈多态性分布,基因多样性（GD）为0.093 3~0.491 2,共检测到20种单倍型（HD为0.8679）,根据国际Y染色体协会命名原则,共有6种单倍群。结论 5个Y-SNP位点及其单倍型在济南汉族具有较好的多态性分布,为该地区人群遗传结构的分析及法医遗传学研究提供了较多的信息量。 展开更多

关键词 法医遗传学 多态性 单核苷酸 Y染色体 汉族

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甲胎蛋白特异性小干扰RNA重组腺病毒载体的构建 被引量：1

13

作者 苏占涛 汪运山 +3 位作者 郏雁飞 张玉玲 肖东杰 孙善会 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2008年第37期7314-7317,共4页

背景:RNA干扰技术的应用,关键在于能够采用1个有效的基因转移系统将小干扰RNA转入至靶细胞,目前广泛应用的是构建小干扰RNA表达载体。目的:利用AdMax腺病毒载体系统构建表达人甲胎蛋白-小干扰RNA的腺病毒载体。设计、时间及地点:开放性... 背景:RNA干扰技术的应用,关键在于能够采用1个有效的基因转移系统将小干扰RNA转入至靶细胞,目前广泛应用的是构建小干扰RNA表达载体。目的:利用AdMax腺病毒载体系统构建表达人甲胎蛋白-小干扰RNA的腺病毒载体。设计、时间及地点:开放性实验,于2007-03/10在山东大学附属济南市中心医院中心实验室完成。材料:穿梭质粒pDC316-EGFP-U6为本元正阳基因技术公司产品;AdMax KitD试剂盒与低代数HEK293细胞为Microbix Biosystem sInc.(Canada)公司产品。方法:选择针对甲胎蛋白mRNA的特异性小干扰RNA靶序列,设计合成为相应的双链DNA,并将其与酶切线性化的pDC316-EGFP-U6载体片段连接,构建好的穿梭质粒pDC316-EGFP-U6-AFP-siRNA和腺病毒骨架质粒pBHGlox_E1,3Cre共转染HEK293细胞,同源重组产生重组腺病毒。主要观察指标:对重组腺病毒进行聚合酶链反应鉴定及扩增、纯化、滴度测定。结果:构建的穿梭质粒载体经聚合酶链反应鉴定和测序分析,证实与设计一致。重组腺病毒Ad-AFP-siRNA经聚合酶链反应和绿色荧光蛋白表达检测证实构建成功,测定滴度为1.4×109nfu/L。结论:实验成功构建了Ad-EGFP-U6-AFP-siRNA重组腺病毒。 展开更多

关键词 甲胎蛋白类 RNA干扰 腺病毒科 重组 遗传

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FUT3-miRNA重组质粒对人胃癌KATO-III细胞增殖的影响 被引量：1

14

作者 辛永红 郏雁飞 +2 位作者 蔡永君 刘强 汪运山 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2012年第25期2341-2346,共6页

目的:研究利用miRNA干扰技术抑制FUT3基因表达对人胃癌KATO-Ⅲ细胞增殖的影响.方法:将前期实验构建成功的2对针对FUT3基因的特异性miRNA表达载体,用脂质体转染入人胃癌KATO-Ⅲ细胞,RT-PCR检测FUT3基因表达水平的变化;免疫细胞化学法、... 目的:研究利用miRNA干扰技术抑制FUT3基因表达对人胃癌KATO-Ⅲ细胞增殖的影响.方法:将前期实验构建成功的2对针对FUT3基因的特异性miRNA表达载体,用脂质体转染入人胃癌KATO-Ⅲ细胞,RT-PCR检测FUT3基因表达水平的变化;免疫细胞化学法、流式细胞术检测其合成抗原sLeA表达变化;MTT法、克隆形成实验检测FUT3基因的表达抑制对KATO-Ⅲ细胞增殖的影响.结果:转染FUT3-miRNA的2个干扰组FUT3基因mRNA相对表达量分别为0.41±0.01,0.36±0.02,明显低于对照组(0.71±0.05)和空载体组(0.65±0.03,P<0.05);细胞表面合成抗原sLeA的表达水平,FUT3-miRNA1组为35.51%±0.36%,FUT3-miRNA2组为26.05%±1.14%,明显低于对照组(52.79%±2.62%)与空载体组(49.75%±1.29%,P<0.05);与对照组(5.60%±0.63%)和空载体组(8.90%±0.91%)相比较,FUT3-miRNA1组(38.10%±1.96%)和FUT3-miRNA2组(49.04%±2.37%)能明显抑制细胞的增殖(P<0.05);细胞的克隆形成能力FUT3-miRNA1组(14.10%±1.70%)和FUT3-miRNA2组(12.50%±1.96%),显著低于对照组(29.79%±3.05%)和空载体组(28.92%±2.10%,P<0.05).结论:FUT3靶向miRNA真核表达载体可有效抑制胃癌细胞的增殖能力. 展开更多

关键词 FUT3基因 MIRNA RNA干扰 胃肿瘤 增殖

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Cag A阳性幽门螺杆菌对胃癌细胞lncRNA DLEU2表达及上皮间质转化的影响 被引量：1

15

作者 曲雪 刘琦 +6 位作者 赵鑫 邢元欣 郏雁飞 郑燕 杨炜华 汪运山 韩淑毅 《山东医药》 CAS 2023年第1期1-5,共5页

目的探讨细胞毒素相关蛋白A(Cag A)阳性幽门螺杆菌(Hp)对胃癌细胞长链非编码RNA淋巴细胞白血病缺失基因2(DLEU2)表达及上皮间质转化的影响。方法体外培养胃癌细胞系HGC-27、AGS、MGC-803、MKN-28以及正常胃黏膜上皮细胞系GES1,采用RT-q... 目的探讨细胞毒素相关蛋白A(Cag A)阳性幽门螺杆菌(Hp)对胃癌细胞长链非编码RNA淋巴细胞白血病缺失基因2(DLEU2)表达及上皮间质转化的影响。方法体外培养胃癌细胞系HGC-27、AGS、MGC-803、MKN-28以及正常胃黏膜上皮细胞系GES1,采用RT-qPCR法检测DLEU2表达,并选择DLEU2表达最高的胃癌细胞进行后续实验。将Hp NCTC标准菌株26695或11637分别与正常胃黏膜上皮细胞和胃癌细胞共培养0、3、9、12 h,采用RT-qPCR法检测DLEU2表达。采用Western blotting法检测与NCTC 26695或11637共培养3、9、12 h正常胃黏膜上皮细胞和胃癌细胞Cag A表达以及共培养3、9、12 h神经钙黏着蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)表达。同时,分析与NCTC 26695或NCTC 11637共培养的胃癌细胞DLEU2、Cag A表达与N-cadherin、Vimentin表达的关系。结果HGC-27、AGS、MGC-803、MKN-28细胞DLEU2相对表达量均高于GES1细胞(P均<0.05)。在胃癌细胞中,以HGC-27细胞DLEU2相对表达量最高。因此,选择胃癌细胞HGC-27进行后续实验。NCTC 11637感染3、9、12 h时GES1细胞DLEU2相对表达量均高于NCTC 11637感染0 h时(P均<0.05),NCTC 11637感染12 h时HGC-27细胞DLEU2相对表达量高于NCTC 11637感染0 h时(P<0.05)。NCTC 11637感染12 h时HGC-27细胞和GES1细胞Cag A、N-cadherin、Vimentin相对表达量均高于NCTC 26695感染12 h时相应细胞(P均<0.05)。Pearson相关分析显示,NCTC 26695或11637感染的HGC-27细胞DLEU2、Cag A表达与N-cadherin、Vimentin表达均呈正相关关系(P均<0.05)。结论Cag A阳性Hp能够引起胃癌细胞长链非编码RNA DLEU2异常表达,而DLEU2异常表达可促进胃癌细胞上皮间质转化。 展开更多

关键词 胃癌 幽门螺杆菌 细胞毒素相关蛋白A 长链非编码RNA 淋巴细胞白血病缺失基因2 上皮间质转化

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非小细胞肺癌中IGFBP-3、P53、Ki-67的表达及临床意义 被引量：10

16

作者 张玉洁 孙怡琳 +3 位作者 朱苹 郏雁飞 张倩 马晓丽 《贵州医药》 CAS 2020年第1期6-9,16,I0001,共6页

目的研究非小细胞肺癌患者胰岛素样生长因子3(IGFBP-3)、P53、Ki-67蛋白的表达及临床意义。方法收集57例非小细胞肺癌(NSCLC)患者的血清和组织样本,酶联免疫吸附法(ELISA)检测健康对照者及肺癌患者血清IGFBP-3的浓度,免疫组化法检测肺... 目的研究非小细胞肺癌患者胰岛素样生长因子3(IGFBP-3)、P53、Ki-67蛋白的表达及临床意义。方法收集57例非小细胞肺癌(NSCLC)患者的血清和组织样本,酶联免疫吸附法(ELISA)检测健康对照者及肺癌患者血清IGFBP-3的浓度,免疫组化法检测肺癌组织和癌旁组织中P53和Ki-67蛋白的表达情况,并分析它们的表达与患者的临床病理参数的关系。结果与健康对照者相比,NSCLC患者血清中IGFBP-3的含量显著降低,当IGFBP-3取临界值1139.10 ng/mL时,ROC曲线下面积最大0.817,灵敏度为81.3%,特异度为57.7%。IGFBP-3的表达与患者的吸烟史有相关性(P<0.05),P53和Ki-67蛋白表达与患者吸烟史、淋巴结转移、分化程度显著相关(P<0.05)。NSCLC中P53与IGFBP-3表达呈负相关,P53和Ki-67的表达有相关性(P<0.05)。结论IGFBP-3、P53和Ki-67表达与NSCLC患者吸烟史密切相关,联合检测血清IGFBP-3有助于监测吸烟相关肺癌的发生、发展,为NSCLC诊疗提供实验依据。 展开更多

关键词 胰岛素样生长因子3 P53 非小细胞肺癌 吸烟史 核增殖抗原Ki-67

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分化型胚胎软骨发育基因1特异性小干扰RNA表达质粒的构建和鉴定 被引量：1

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作者 魏炎 郏雁飞 +2 位作者 郑燕 马晓丽 汪运山 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2011年第24期4489-4492,共4页

背景:分化型胚胎软骨基因1可调控肿瘤生长、凋亡、衰老相关因子,与肿瘤的发生发展有着重要的联系。目的:构建针对人分化型胚胎软骨基因1的小干扰RNA表达载体。方法:从NCBI中查找人分化型胚胎软骨基因1基因全长mRNA序列,利用Katahdin提... 背景:分化型胚胎软骨基因1可调控肿瘤生长、凋亡、衰老相关因子,与肿瘤的发生发展有着重要的联系。目的:构建针对人分化型胚胎软骨基因1的小干扰RNA表达载体。方法:从NCBI中查找人分化型胚胎软骨基因1基因全长mRNA序列,利用Katahdin提供的在线小干扰RNA模板序列设计软件,设计针对分化型胚胎软骨基因1的2条shRNA的DNA模板单链,合成靶向分化型胚胎软骨基因1基因转录可形成茎环结构的寡聚核苷酸,退火后与酶切后的pGreenPuroTM shRNA Cloning and Expression Lentivector质粒连接,在JM-109菌株中扩增,并进行质粒DNA琼脂糖凝胶电泳分析、紫外分光光度计检测、菌落PCR以及测序鉴定。结果与结论:将含有分化型胚胎软骨基因1目标序列25bp的双链DNA插入片段,连接到pGreenPuroTM shRNA Cloning and Expression Lentivector质粒形成重组质粒。质粒DNA琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计分析结果确认所提质粒纯度较高,可用于后续实验。菌落PCR结果表明产物大小约为170bp,与预期相符。测序结果表明pGreenPuroTM shRNA Cloning and Expression Lentivector质粒已经插入人分化型胚胎软骨基因1的干扰合成片段,无碱基突变。成功构建了靶向分化型胚胎软骨基因1-小干扰RNA表达载体。 展开更多

关键词 分化型胚胎软骨基因1 小干扰RNA 构建 质粒 基因表达

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AFP基因特异性miRNA表达质粒的构建及鉴定

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作者 张玉玲 栾英姿 +3 位作者 苏占涛 郑燕 郏雁飞 汪运山 《山东医药》 CAS 北大核心 2008年第11期33-35,共3页

目的构建针对人甲胎蛋白(AFP)基因的miRNA表达质粒,为进一步研究AFP基因功能奠定基础。方法沿mRNA序列寻找连续两个AA及后面的19个核苷酸,通过同源性比较,选择与其他任何基因无同源性的序列即作为潜在的miRNA靶位点,针对AFP基因的编码... 目的构建针对人甲胎蛋白(AFP)基因的miRNA表达质粒,为进一步研究AFP基因功能奠定基础。方法沿mRNA序列寻找连续两个AA及后面的19个核苷酸,通过同源性比较,选择与其他任何基因无同源性的序列即作为潜在的miRNA靶位点,针对AFP基因的编码序列体外合成两段互补的寡核苷酸,与线性化的pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR RNAi EXPRESSION VECTOR载体连接后转化大肠杆菌,扩增、纯化获得所需质粒,以琼脂糖凝胶电泳、PCR及基因测序鉴定其相对分子质量及插入片段的序列。结果纯化质粒的相对分子质量为5.8 kb,PCR鉴定结果符合目的条带(260 bp左右)大小,插入的寡核苷酸序列与设计的序列完全相符。结论成功构建了针对人AFP基因的miRNA表达质粒。 展开更多

关键词 质粒 甲胎蛋白 基因 表达

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基于生物信息学分析泛癌中PDPN的表达与预后及与免疫细胞浸润的关系

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作者 袁明洁 刘端瑞 +2 位作者 郏雁飞 宿振国 刘相东 《医学检验与临床》 2022年第3期5-13,20,共10页

目的:探讨平足蛋白(Podoplanin,PDPN)在泛癌中的表达量与预后及PDPN与免疫浸润之闻的关系。为癌症的免疫治疗提供一个断的方向。方法:通过UACLAN、Oncomine和TIMER2.0数据库分析PDPN在泛癌及对应的正常组织中的表达量;通过PrognoScan和K... 目的:探讨平足蛋白(Podoplanin,PDPN)在泛癌中的表达量与预后及PDPN与免疫浸润之闻的关系。为癌症的免疫治疗提供一个断的方向。方法:通过UACLAN、Oncomine和TIMER2.0数据库分析PDPN在泛癌及对应的正常组织中的表达量;通过PrognoScan和Kxplan-Meier Potter数据库分析并验证PDPN与泛癌预后之间的相关性。通过TIMER2.0分析PDPN与不同类型癌症尤其是消化道肿瘤中免疫细胞浸润的相关性。在LinkedOmics以及DAVID、KOBAS数据库中查找与PDPN共表达的基因,并以此检索相关信号通路。STRING数据库寻找并分析PDPN互作的蛋白质。结果:PDPN在大多数癌組织中表达量增加,起到促癌基因的作用,部分癌组织中,PDPN表达量下降,仍可导致恶性肿瘤透展;PDPN表达量的高低与某些恶性肿瘤预后具有显著相关性;PDPN与多种免疫细胞尤其是肿瘤相关成纤维细胞(CAF)之间表现出显著的相关性,提示PDPN与肿瘤免疫浸润相关,可能参与肿瘤微环境的调控。PDPN参与调控多种信号通路。PDPN与CD44及CLEC1B之间存在较强的相互作用。结论:PDPN可以作为泛癌尤其是胃癌、结直肠癌等消化道肿瘤的预后当物标志物。PDPN在多种免疫细胞中表达,通过调节免疫浸润影响恶性肿瘤的进展。 展开更多

关键词 PDPN 预后 免疫浸润 癌症 生物信息学

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肺腺癌中α5-nAChR和VEGF的表达相关性及其对血管形成的影响 被引量：2

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作者 朱苹 黄月盈 +5 位作者 康桂钰 郏雁飞 张倩 贾颖 焦瑒 马晓丽 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期1450-1455,共6页

目的探讨α5-nAChR与VEGF在肺腺癌中表达的相关性及α5-nAChR对血管形成的影响。方法检索Oncomine、GEPIA、Kaplan-Meier Plotter数据库分析肺腺癌中编码α5-nAChR的CHRNA5基因和VEGF基因表达相关性及预后情况。干扰A549细胞CHRNA5表达... 目的探讨α5-nAChR与VEGF在肺腺癌中表达的相关性及α5-nAChR对血管形成的影响。方法检索Oncomine、GEPIA、Kaplan-Meier Plotter数据库分析肺腺癌中编码α5-nAChR的CHRNA5基因和VEGF基因表达相关性及预后情况。干扰A549细胞CHRNA5表达后,制备肿瘤条件培养基作用于人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC),检测HUVEC在Matrigel表面的血管形成能力。采用免疫组化检测57例肺腺癌组织及癌旁组织中α5-nAChR、VEGF的表达并分析其临床意义。结果Oncomine中分别有3个芯片数据集显示CHRNA5或VEGF基因在肺腺癌组织中表达水平均显著升高(P<0.05)。GEPIA表明CHRNA5与VEGF表达呈正相关(P<0.05)。Kaplan-Meier Plotter显示CHRNA5或VEGF高表达患者的生存率显著降低(P<0.05)。血管形成实验表明,干扰CHRNA5表达后,HUVEC血管形成能力低于对照组(P<0.05)。免疫组化检测α5-nAChR与VEGF的阳性率分别为57.89%(33/57)和78.95%(45/57),两者表达呈正相关(P<0.05)且与生存期呈负相关。结论α5-nAChR和VEGF在肺腺癌中表达升高并呈正相关,两者高表达与肺腺癌患者预后差有关,且α5-nAChR促进体外血管生成。 展开更多

关键词 肺肿瘤 肺腺癌 α5-nAChR VEGF 数据库 血管形成

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