人载脂蛋白Eε3等位基因的克隆及表达 被引量：3

1

作者 郐莉 江涌 +1 位作者 孙晓川 郑履平 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2008年第7期784-787,共4页

目的:克隆人载脂蛋白E(Apolipoprotein E,APOE)ε3等位基因,测定序列,并构建带有人源性APOEε3等位基因的真核表达载体。方法:通过逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)从人胎儿脑组织中克隆得到APOEε3等位基因,与PMD19-T载体连接,再酶切PMD19... 目的:克隆人载脂蛋白E(Apolipoprotein E,APOE)ε3等位基因,测定序列,并构建带有人源性APOEε3等位基因的真核表达载体。方法:通过逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)从人胎儿脑组织中克隆得到APOEε3等位基因,与PMD19-T载体连接,再酶切PMD19-T-APOEε3,获得APOEε3基因,然后将其与表达载体pEGFP-N1连接,构建pEGFP-N1-APOEε3真核表达载体。重组质粒转染293T细胞后,在荧光显微镜下观察EGFP的表达,并用Western-Blot的方法检测目的蛋白在293T细胞中的表达。结果:经酶切和DNA测序证明APOEε3基因序列正确,真核表达载体构建成功。将重组质粒转染293T细胞,在转染后的细胞中检测到目的蛋白的表达。结论:成功构建了pEGFP-N1-APOEε3真核表达载体,该表达载体能在真核细胞中正确表达。 展开更多

关键词 载脂蛋白E 等位基因 基因克隆 真核表达

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APOE基因多态性分子生物学检测技术进展及评价 被引量：4

2

作者 郐莉 喻应贵 《泸州医学院学报》 2007年第5期439-440,共2页

载脂蛋白E（Apolipoprotein E,apoE代表载脂蛋白,APOE代表编码载脂蛋白的相应基因）是一种胆固醇转运蛋白,由肝、脾、肾等合成后进入血液循环广泛分布于全身。APOE具有三个等位基因APOEε2、APOEε3及APOEε4,它们主要的区别是其DNA序... 载脂蛋白E（Apolipoprotein E,apoE代表载脂蛋白,APOE代表编码载脂蛋白的相应基因）是一种胆固醇转运蛋白,由肝、脾、肾等合成后进入血液循环广泛分布于全身。APOE具有三个等位基因APOEε2、APOEε3及APOEε4,它们主要的区别是其DNA序列上存在两个位点的碱基替代,造成它们所编码的apoE在第112位和第158位的氨基酸残基发生了相应的变化。APOEε2在两个位点上均为半胱氨酸（Cys）,APOEε3在第112位为半胱氨酸,而第158位为精氨酸（Arg）,APOEε4在两个位点上均为精氨酸。这种多态性导致在人群中产生了六种不同的表型,三种为纯合子（ε2/ε2,ε3/ε3,ε4/ε4）,另三种为杂合子（ε2/ε3,ε2/ε4,ε3/ε4）。ε3是最常见的等位基因,ε3/ε3是最常见的基因型。 展开更多

关键词 APOE基因多态性 分子生物学检测 技术进展 APOEε4 胆固醇转运蛋白 载脂蛋白 等位基因

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APOE基因亚型及其短肽COG1410对神经细胞损伤后早期凋亡的影响 被引量：3

3

作者 江涌 孙晓川 +1 位作者 陈礼刚 郐莉 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期548-552,共5页

目的探讨载脂蛋白E(APOE代表基因,apoE代表蛋白)亚型特异性及其短肽与早期凋亡的相关性,以期明确APOE亚型影响脑创伤病情转归及预后的病理机制。方法采用稳定表达人APOE各等位基因的APOE敲除鼠的神经干细胞,优化诱导分化条件,构建神经元... 目的探讨载脂蛋白E(APOE代表基因,apoE代表蛋白)亚型特异性及其短肽与早期凋亡的相关性,以期明确APOE亚型影响脑创伤病情转归及预后的病理机制。方法采用稳定表达人APOE各等位基因的APOE敲除鼠的神经干细胞,优化诱导分化条件,构建神经元/胶质细胞共培养体系及细胞划痕损伤模型。通过Annexin V/PI联合流式细胞技术检测损伤后各组细胞早期凋亡率,分析人APOE各等位基因及其短肽影响继发性神经细胞损伤的差异。结果成功构建携带人源性APOE各亚型的细胞划痕损伤模型;伤后24 h时间点各组细胞早期凋亡率较6、12 h明显增高(P<0.05),且人APOEε4组较其余亚型组早期凋亡率明显增高(P<0.05)。在伤后24 hapoE短肽COG1410可显著降低各亚型组早期凋亡率(P<0.01)。结论 APOEε4携带者可能通过早期凋亡导致脑创伤急性期病情加重。而apoE短肽COG1410可通过降低早期凋亡发挥神经保护作用。 展开更多

关键词 载脂蛋白E 短肽 创伤性脑损伤 体外模型 早期凋亡

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人APOEε2及ε4等位基因修饰的神经干细胞的建立 被引量：1

4

作者 江涌 吴海涛 +5 位作者 孙晓川 陈礼刚 郐莉 郭宗铎 顾应江 刘洛同 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期334-337,共4页

目的构建APOEε2和APOEε4的真核表达载体,转染APOE敲除鼠神经干细胞,分别建立转染APOEε2和ε4的神经干细胞系。方法以前期克隆得到的APOEε3cDNA为基础,通过定点突变技术得到APOEε2和APOEε4cDNA,亚克隆入表达载体pEGFP-N1,构建pEGFP... 目的构建APOEε2和APOEε4的真核表达载体,转染APOE敲除鼠神经干细胞,分别建立转染APOEε2和ε4的神经干细胞系。方法以前期克隆得到的APOEε3cDNA为基础,通过定点突变技术得到APOEε2和APOEε4cDNA,亚克隆入表达载体pEGFP-N1,构建pEGFP-N1-APOEε2及pEGFP-N1-APOEε4的真核表达载体,经双酶切和测序确定序列及阅读框正确。以脂质体转染法转染APOE敲除鼠神经干细胞,通过G418筛选,建立转染APOEε2和ε4的神经干细胞系。采用RT-PCR、Westernblot及免疫荧光法检测APOE的表达。结果APOE敲除鼠NSCs转染6h后发出绿色荧光,48h达到高峰,荧光显微镜下观察转染率约(40.0±2.3)%,转染pEGFP-N1-APOE的NSCs在筛选至第10天可见细胞克隆形成。经鉴定保持了自我更新、多向分化保持性,其中分化为神经元的比例为(32.15±2.61)%,各组之间无明显差异。结论成功构建了稳定表达源性APOEε2及ε4的神经干细胞克隆,相应等位基因修饰的神经干细胞能高效表达目的基因蛋白并保留其干细胞特性。 展开更多

关键词 载脂蛋白E类 等位基因 真核表达载体 神经干细胞 基因表达

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改良静脉留置针治疗外伤性泪小管断裂的临床观察

5

作者 盘如刚 李友谊 郐莉 《泸州医学院学报》 2009年第2期141-143,共3页

目的:探讨使用改良静脉留置针治疗外伤性泪小管断裂的临床疗效,并分析其并发症。方法:利用改良静脉留置针作为支撑物治疗外伤性泪小管断裂42例,术后常规处理,3月拔除静脉留置针,随访观察6～24个月。结果:术后仅有少数患者有轻微的下眼... 目的:探讨使用改良静脉留置针治疗外伤性泪小管断裂的临床疗效,并分析其并发症。方法:利用改良静脉留置针作为支撑物治疗外伤性泪小管断裂42例,术后常规处理,3月拔除静脉留置针,随访观察6～24个月。结果:术后仅有少数患者有轻微的下眼睑外翻,无其它并发症。42例泪小管断裂患者中治愈39例(92.86%),好转2例(4.76%),无效1例(2.38%),总有效率达97.62%。结论:改良静脉留置针治疗外伤性泪小管断裂效果好,安全可靠,改良静脉留置针是一种治疗泪小管断裂的理想材料。 展开更多

关键词 泪小管断裂 静脉留置针 并发症

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载脂蛋白E短肽COG1410对蛛网膜下腔出血后早期脑水肿的影响 被引量：2

6

作者 贺杰 庞金伟 +7 位作者 吴越 彭建华 曹芳 秦兴虎 郐莉 陈礼刚 孙晓川 江涌 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期350-355,共6页

目的探讨载脂蛋白E短肽COG1410对蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)后早期脑损伤(early brain injury,EBI)中脑水肿、小鼠运动功能和水通道蛋白4(aquaproins-4,AQP-4)的影响。方法 108只C57BL/6J小鼠分成假手术对照组(sham)... 目的探讨载脂蛋白E短肽COG1410对蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)后早期脑损伤(early brain injury,EBI)中脑水肿、小鼠运动功能和水通道蛋白4(aquaproins-4,AQP-4)的影响。方法 108只C57BL/6J小鼠分成假手术对照组(sham)、生理盐水组(SAH+生理盐水)、治疗组(SAH+COG1410),采用血管内穿刺法建立SAH模型。观察小鼠运动功能变化,用干湿质量法测定脑含水量的变化,免疫组化法测定表达AQP-4阳性细胞数,酶联免疫吸附法(ELISA)测定AQP-4蛋白含量及实时定量PCR测定AQP-4 m RNA的变化。结果 SAH后生理盐水组和治疗组神经功能评分均明显高于假手术对照组(P<0.05),且生理盐水组和治疗组之间差异有统计学意义(P<0.05)。SAH后各时间点生理盐水组脑含水量、AQP4蛋白含量和AQP4 m RNA表达的变化与假手术对照组对比显著升高(P<0.05)。生理盐水组和治疗组脑含水量、AQP4蛋白含量和AQP4 m RNA表达均在SAH后1 d明显增加,2 d达到高峰,之后逐渐下降,2组间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论载脂蛋白E短肽COG1410可能通过抑制AQP-4的过表达缓解EBI中的脑水肿。 展开更多

关键词 蛛网膜下腔出血 载脂蛋白E短肽 水通道蛋白4 脑水肿 早期脑损伤

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教学相长式业务学习在眼科硕士研究生培养中的作用 被引量：2

7

作者 王杰 康刚劲 +5 位作者 徐曼华 郐莉 王芳 董敏 刘鹃 蒋燕 《国际眼科杂志》 CAS 2015年第7期1237-1239,共3页

目的：了解师生共同参与主讲的教学相长式业务学习对眼科学硕士研究生综合能力培养的作用,为眼科学研究生教育探讨新的模式。方法：对泸州医学院2010-2014级的31名眼科学各专业硕士研究生及47名泸州医学院附属医院眼科全体医护人员进行... 目的：了解师生共同参与主讲的教学相长式业务学习对眼科学硕士研究生综合能力培养的作用,为眼科学研究生教育探讨新的模式。方法：对泸州医学院2010-2014级的31名眼科学各专业硕士研究生及47名泸州医学院附属医院眼科全体医护人员进行回顾性问卷调查,明确新的业务学习模式是否可提高眼科研究生的综合能力。结果：开展教学相长式业务学习可提高眼科学硕士研究生的综合能力。结论：教与学相互促进、共同提高有助于眼科学硕士研究生综合能力的培养。 展开更多

关键词 教学相长 业务学习 研究生 教育 眼科

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高度近视患者SMILE和FS-LASIK术后早期视觉质量的比较 被引量：14

8

作者 陈松林 郭露 +3 位作者 郐莉 孔祥梅 黄朝霞 吕红彬 《国际眼科杂志》 CAS 北大核心 2021年第5期890-894,共5页

目的:应用双通道视觉质量分析系统(OQASⅡ)及Pentacam角膜地形图对比研究高度近视患者分别行小切口飞秒激光角膜基质透镜取出术(SMILE)和飞秒激光辅助制瓣的准分子激光原位角膜磨镶术(FS-LASIK)后早期视觉质量的变化。方法:前瞻性非随... 目的:应用双通道视觉质量分析系统(OQASⅡ)及Pentacam角膜地形图对比研究高度近视患者分别行小切口飞秒激光角膜基质透镜取出术(SMILE)和飞秒激光辅助制瓣的准分子激光原位角膜磨镶术(FS-LASIK)后早期视觉质量的变化。方法:前瞻性非随机对照研究。选取2020-03/09于我院行手术矫治的高度近视患者74例148眼,其中SMILE组43例86眼,FS-LASIK组31例62眼。分析患者术前、术后1、7d裸眼视力(UCVA)、调制传递函数截止频率(MTF cut off)、斯特列尔比值(SR)、客观散射指数(OSI)、模拟对比度视力(VA 100%、VA 20%、VA 9%)、高阶像差(HOA)、水平彗差(Z_(3)^(1))、垂直彗差(Z_(3)^(-1))和球差(Z_(4)^(0))情况。结果:两组患者术前年龄、等效球镜、UCVA、MTF cut off、SR、OSI、VA 100%、VA 20%、VA 9%、HOA、Z_(3)^(1)、Z_(3)^(-1)和Z_(4)^(0)均无差异(P>0.05)。SMILE组术后1d OSI值高于FS-LASIK组(2.3±2.1 vs 1.8±1.1),术后7d无差异(1.2±0.7 vs1.3±0.7)。FS-LASIK组术后1、7d HOA和Z_(4)^(0)均高于SMILE组(P<0.001),但术后1、7d两组患者UCVA、Z_(3)^(1)、Z_(3)^(-1)、MTF cut off、SR、VA 100%、VA 20%、VA 9%均无差异(P>0.05)。结论:FS-LASIK术后早期更易引入角膜高阶像差和球差,而2mm切口的SMILE术仅在术后1d引入更高的散射,因此,高度近视患者行角膜屈光手术矫正采用SMILE术较FS-LASIK术后早期能够获得更佳的视觉质量。 展开更多

关键词 高度近视 角膜屈光手术 小切口飞秒激光角膜基质透镜取出术 飞秒激光辅助制瓣的准分子激光原位角膜磨镶术 视觉质量

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Hallermann-Streiff综合征合并双眼脉络膜虹膜缺损及全身多系统畸形1例

9

作者 康海军 康刚劲 +3 位作者 李友谊 郐莉 徐曼华 黄冬梅 《泸州医学院学报》 2016年第3期235-235,共1页

Hallermann-Streiff综合征是一种临床上少见的以口咽畸形、鸟状面和先天性白内障为主要表现的先天性疾病,作者将临床上经治的更为少见的Hallermann-Streiff综合征合并双眼脉络膜、虹膜缺损及全身多系统畸形1例作回顾性报告。1病例资料患... Hallermann-Streiff综合征是一种临床上少见的以口咽畸形、鸟状面和先天性白内障为主要表现的先天性疾病,作者将临床上经治的更为少见的Hallermann-Streiff综合征合并双眼脉络膜、虹膜缺损及全身多系统畸形1例作回顾性报告。1病例资料患儿,女,9岁。患儿被发现双眼畏光、视力下降7＋年、加重半年,以＂双眼先天性白内障＂收入我院。足月顺产,否认遗传及传染病家族史,父母非近亲结婚。 展开更多

关键词 虹膜缺损 眼脉络膜 先天性白内障 非近亲结婚 先天性疾病 足月顺产 脉络膜缺损 上经 鼻下方 内眦赘皮

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载脂蛋白E拟肽对创伤性脑损伤后脑组织血管再生的影响 被引量：4

10

作者 江涌 秦兴虎 +10 位作者 游红 郐莉 曹芳 刘杰什 贺杰 庞金伟 彭建华 万伟峰 杨晓波 陈礼刚 孙晓川 《中华创伤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期645-650,共6页

目的 探讨载脂蛋白E（apoE）拟肽对创伤性脑损伤（TBI）后脑组织血管内皮生长因子（VEGF）、微血管密度（MVD）、血脑屏障（BBB）通透性和脑水肿的影响.方法 将256只C57BL/6J雄性基因野生型小鼠按随机数字表法分为正常对照组、假手术组... 目的 探讨载脂蛋白E（apoE）拟肽对创伤性脑损伤（TBI）后脑组织血管内皮生长因子（VEGF）、微血管密度（MVD）、血脑屏障（BBB）通透性和脑水肿的影响.方法 将256只C57BL/6J雄性基因野生型小鼠按随机数字表法分为正常对照组、假手术组、等渗盐水组、apoE拟肽干预组,每组又分为创伤后1d和3d两个亚组,每亚组32只.采用控制性气压冲击法构建小鼠TBI模型.apoE拟肽干预组为创伤后每24 h予以尾静脉注射apoE拟肽COG1410,其他组为创伤后每24 h予以尾静脉注射等渗盐水;创伤后1,3d,采用ELISA法、免疫组化、伊文思蓝和干湿重法分别检测脑组织VEGF表达情况、MVD、BBB通透性和脑组织含水量.结果 创伤后第1天,假手术组与正常对照组脑组织VEGF表达量、MVD计数、BBB通透性和脑组织含水量比较差异无统计学意义（P＞0.05）;apoE拟肽干预组与等渗盐水组脑组织VEGF表达量[（18.12±1.51） pg/ml∶（23.66±1.78） pg/ml]、MVD计数[（14.78±1.98）个/HP∶（19.25±2.23）个/HP]、BBB通透性[（0.45 ±0.02）∶（0.53 ±0.05）]和脑组织含水量[（79.05±0.17）％∶（79.77±0.22）％]比较均明显降低（P＜0.05）.创伤后第3天,假手术组与正常对照组脑组织VEGF表达量、MVD计数、BBB通透性和脑组织含水量比较差异无统计学意义（P＞0.05）;apoE拟肽干预组与等渗盐水组脑组织VEGF表达量[（28.77±2.01） pg/ml∶（34.52±1.93） pg/ml]、MVD计数[（20.67 ±2.58）个/HP∶（31.66±3.67）个/HP]、BBB通透性[（0.60 ±0.07）∶（0.79±0.10）]和脑组织含水量[（78.97±0.29）％∶（80.06±0.28）％]比较均明显降低（P＜0.05）.结论 apoE拟肽能有效降低TBI后脑组织血管的过度再生以及由血管过度再生引起的血管源性脑水肿. 展开更多

关键词 载脂蛋白E类 脑损伤 血管内皮生长因子 血脑屏障

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载脂蛋白E拟肽对创伤性脑损伤后脑组织TNF-α表达和脑水肿的影响及意义 被引量：11

11

作者 秦兴虎 游红 +6 位作者 郐莉 曹芳 吴越 董劲虎 陈礼刚 孙晓川 江涌 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期35-40,共6页

目的探讨载脂蛋白Z（apoE）拟肽COGl410对创伤性脑损伤（TBI）急性期脑组织肿瘤坏死因子-α（TNF—α）和脑水肿的影响。方法雄性C57BL／6J基因野生鼠45只按随机数字表法分为假手术组、等渗盐水组、apoE拟肽干预组，每组15只。后2组小... 目的探讨载脂蛋白Z（apoE）拟肽COGl410对创伤性脑损伤（TBI）急性期脑组织肿瘤坏死因子-α（TNF—α）和脑水肿的影响。方法雄性C57BL／6J基因野生鼠45只按随机数字表法分为假手术组、等渗盐水组、apoE拟肽干预组，每组15只。后2组小鼠采用控制性气压冲击法构建TBI模型，模型制作完成30min后分别予以尾静脉注射200μL等渗盐水和apoE拟肽COG1410（0．2mg／mL）。造模后24h,RT—PCR、酶联免疫吸附实验（ELISA）法分别检测小鼠伤侧半脑TNF—α mRNA的表达和TNF-α的含量；MRI T2WI像扫描检测小鼠脑水肿体积及双侧侧脑室体积比。结果RT-PCR、ELISA检测显示：与假手术组比较，等渗盐水组、apoE拟肽干预组小鼠脑组织TNF-α mRNA和含量明显升高,且apoE拟肽干预组小鼠脑组织TNF-α mRNA和含量较等渗盐水组明显降低,差异均有统计学意义（P〈0．05）。MRI T2WI脑扫描显示apoE拟肽干预组小鼠脑水肿体积较等渗盐水组明显降低，差异有统计学意义（P〈0．05）；与假手术组比较，等渗盐水组、apoE拟肽干预组小鼠伤侧／对侧侧脑室体积比降低，且apoE拟肽干预组小鼠伤侧／对侧侧脑室体积比较等渗盐水组明显升高,差异有统计学意义（P〈0．05）。相关性分析显示等渗盐水组与apoE拟肽干预组小鼠TBI急性期脑组织TNF-α含量和脑水肿体积呈正相关性（r=0．969，P=0．001）。结论apoE拟肽可通过抑制TBI急性期脑组织TNF-α的过度表达从而抑制血管源性脑水肿。 展开更多

关键词 载脂蛋白E 颅脑损伤 肿瘤坏死因子-α 脑水肿

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小鼠蛛网膜下腔出血后大脑皮层长链非编码RNA及mRNA的表达谱研究 被引量：2

12

作者 彭建华 陈义天 +8 位作者 吴越 庞金伟 曹芳 田晓翠 秦兴虎 郐莉 陈礼刚 孙晓川 江涌 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1111-1117,共7页

目的探讨小鼠蛛网膜下腔出血（SAH）后早期大脑皮层长链非编码RNA（lncRNAs）及mRNAs的差异表达情况，寻求调控SAH后早期脑损伤（EBI）的新机制。方法6只C57BL／6J雄性基因野生型小鼠按随机数字表法分为假手术组及SAH组（n=3），后者采... 目的探讨小鼠蛛网膜下腔出血（SAH）后早期大脑皮层长链非编码RNA（lncRNAs）及mRNAs的差异表达情况，寻求调控SAH后早期脑损伤（EBI）的新机制。方法6只C57BL／6J雄性基因野生型小鼠按随机数字表法分为假手术组及SAH组（n=3），后者采用颈动脉内穿刺法构建SAH模型。造模后24h断头取脑，提取皮层总RNA。经质量检测合格后，行PCR扩增建立cRNA文库，采用Illumina HiSeq^TM2500测序。运用软件Tophat2将转录本比对至小鼠基因组，运用RPKM法分别计算lncRNAs及mRNAs的表达量。通过数据库KEGG、GO富集对有差异表达的mRNAs进行通路分析，得到mRNAs参与的生物学途径。运用实时定量荧光PCR（qRT-PCR）技术对部分有差异表达的lncRNAs（fantom3_C730003K16、fantom3_I830129C17、fantom3_A430024L20、fantom3_C330006P03）进行验证。结果成功得到假手术组及SAH组小鼠大脑皮层lncRNAs及mRNAs的表达谱。3对样本中均有差异表达的lncRNAs共617种，其中103种上调、514种下调。3对样本中均有差异表达的mRNAs共444种，其中387种上调、54种下调。GO富集及KEGG通路分析提示，有差异表达的mRNAs涉及到包括炎症在内的多种生物学途径。随机选取的4条lncRNAs的变化趋势（fantom3_C730003K16、fantom3_I830129C17表达上调，fantom3_A430024L20、fantom3_C330006P03表达下调）经qRT-PCR技术得到验证。结论小鼠SAH后大脑皮层lncRNAs较正常脑组织存在明显差异，lncRNAs也许可以成为SAH后EBI病情及预后的判断标志以及潜在的治疗靶点。 展开更多

关键词 蛛网膜下腔出血 早期脑损伤 长链非编码RNA 炎症 二代测序

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载脂蛋白E拟肽对创伤性脑损伤后神经元凋亡及自噬的影响 被引量：2

13

作者 庞金伟 陈义天 +7 位作者 杨萍 郐莉 彭建华 吴越 刘亮 陈礼刚 孙晓川 江涌 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期238-245,共8页

目的探讨载脂蛋白E（ApoE）拟肽对创伤性脑损伤（TBI）小鼠神经元凋亡及自噬的影响及其作用机制。方法健康成年雄性C57BL／6J小鼠40只，按随机数字表法分为假手术组、TBI＋生理盐水组、TBI＋低剂量COG1410组和TBI＋高剂量c0G1410组，每... 目的探讨载脂蛋白E（ApoE）拟肽对创伤性脑损伤（TBI）小鼠神经元凋亡及自噬的影响及其作用机制。方法健康成年雄性C57BL／6J小鼠40只，按随机数字表法分为假手术组、TBI＋生理盐水组、TBI＋低剂量COG1410组和TBI＋高剂量c0G1410组，每组10只。采用控制性皮质撞击（CCI）法建立中度TBI模型。假手术组只开骨窗，不进行撞击。造模后30minTBI＋低剂量COG1410组和TBI＋高剂量COG1410组小鼠尾静脉注射COG1410溶液（剂量分别为1mg／kg、2mg／kg），另外2组仅注射等量生理盐水。3d后用转棒实验、改良神经功能缺损评分（mNSS）评价4组小鼠的神经功能：采用TUNEL、免疫荧光染色分别检测小鼠损伤灶周围皮层神经元的凋亡和自噬蛋白微管相关蛋白1轻链3（LC3）的表达；采用Western blotting检测小鼠伤侧大脑半球凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Caspase-3、自噬蛋白Beclin-1、和LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ的表达以及磷酸化蛋白激酶B（Akt）、哺乳动物雷帕霉素受体（mTOR）、磷酸化Akt（p-Akt）、磷酸化的mTOR（p-mTOR）含量的变化。结果与假手术组比较，TBI＋生理盐水组小鼠转棒时间明显缩短，mNSS评分增加，脑Bax、Caspase-3蛋白表达增加，Bcl-2表达降低，TUNEL染色阳性神经元数量、Beclin-1和LC3-Ⅱ蛋白的表达、LC3阳性神经元数量、p-Akt和p-mTOR含量均增加，差异有统计学意义（P〈0．05）。与TBI＋生理盐水组比较，TBI＋低剂量COGl410组和TBI＋高剂量COGl410组小鼠转棒时间增加，mNSS评分降低，脑Bax、Caspase-3蛋白表达降低，Bcl-2表达增高，TUNEL染色阳性神经元数量、Beclin-1和LC3-Ⅱ蛋白表达、LC3阳性神经元数量均明显减少，p-Akt和p-mTOR含量增加，差异均有统计学意义（P〈0．05）；与TBI＋低剂量COG1410组比较，TBI＋高剂量COG1410组转棒时间较高、mNSS评分较低、脑Bax、Caspase-3蛋白表达降低，Bcl-2表达增高，TUNEL染色阳性神经元和LC3阳性神经元数量、Beclin-1和LC3-Ⅱ蛋白表达均降低，p-Akt、p-mTOR含量增加，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论ApoE拟肽可以剂量依赖性地减少小鼠TBI后的自噬水平，从而减轻TBI后的神经元凋亡，其机制可能与调节AKt／mTOR相关通路有关。 展开更多

关键词 创伤性脑损伤 细胞凋亡 细胞自噬 载脂蛋白E

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