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提高水稻基因枪转化效率的研究 被引量：21
1
作者 郑宏红 何锶洁 +2 位作者 戴顺洪 李良材 田文忠 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第S1期116-120,共5页
在转化前将受体材料转移到高渗培养基上，即用含有一定浓度的甘露醇和山梨醇的培养基对受体材料进行处理。基因枪轰击后把受体材料转出，结果表明，这样做明显提高了瞬时表达（ＧＵＳ基因的表达）效果，用可筛选的标记基因（潮霉素磷酸... 在转化前将受体材料转移到高渗培养基上，即用含有一定浓度的甘露醇和山梨醇的培养基对受体材料进行处理。基因枪轰击后把受体材料转出，结果表明，这样做明显提高了瞬时表达（ＧＵＳ基因的表达）效果，用可筛选的标记基因（潮霉素磷酸转移酶基因，ＨＰＴ）试验表明，经高渗处理后，稳定转化的效率也有提高。用基因枪将带有ＨＴＰ基因的粒子轰击其盾片，经过筛选及植株再生，获得了转基因植株。 展开更多
关键词 水稻 基因枪转化 瞬时表达频率 成熟胚
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籼稻基因枪转化的研究 被引量：12
2
作者 郑宏红 戴顺洪 +2 位作者 何锶洁 田文忠 李良材 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1996年第4期286-292,共7页
对国内外１７个籼稻品种进行了基因枪转化，研究了有利于籼稻愈伤组织诱导和生长的培养条件和筛选程序，１５个品种获得了潮霉素抗性愈伤组织，５个品种再生了植株，包括当前国际上推广的ＩＲ系统及国内的优良品种和恢复系，分子生物学... 对国内外１７个籼稻品种进行了基因枪转化，研究了有利于籼稻愈伤组织诱导和生长的培养条件和筛选程序，１５个品种获得了潮霉素抗性愈伤组织，５个品种再生了植株，包括当前国际上推广的ＩＲ系统及国内的优良品种和恢复系，分子生物学证据证明潮霉素基因已经整合入籼稻的基因组。最高植株转化频率接近一般粳稻水平，多数低于粳稻水平。这为建立籼稻的转化系统打下了基础。 展开更多
关键词 水稻 籼稻 基因枪转化
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水稻矮缩病毒基因组分析与部分基因片段的表达及功能研究 被引量：4
3
作者 李毅 徐洪 +10 位作者 程明非 郑宏红 冒志娟 肖锦 张福建 明小天 曲林 刘一飞 李玮 赵晓岚 陈章良 《北京大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 1998年第2期332-341,共10页
根据本实验室对水稻矮缩病毒（ＲｉｃｅＤｗａｒｆＶｉｒｕｓ，ＲＤＶ）中国福建分离株基因组全序列的测定，分析了其编码蛋白的功能，并将ＲＤＶＳ６，Ｓ９，Ｓ１０，Ｓ１１编码区ｃＤＮＡ分别克隆到表达载体ｐＴｒｃＨｉｓＡ，ｐＢＶ... 根据本实验室对水稻矮缩病毒（ＲｉｃｅＤｗａｒｆＶｉｒｕｓ，ＲＤＶ）中国福建分离株基因组全序列的测定，分析了其编码蛋白的功能，并将ＲＤＶＳ６，Ｓ９，Ｓ１０，Ｓ１１编码区ｃＤＮＡ分别克隆到表达载体ｐＴｒｃＨｉｓＡ，ｐＢＶ２２１，ｐＴｒｃＨｉｓＢ和ｐＢＶ２２１中，构建成表达质粒ｐＴＨ－Ｓ６，ｐＢＶＰ９，ｐＴＨ－Ｓ１０，ｐＢ－ＶＰ１１。分别用ＩＰＴＧ或温度诱导大肠杆菌ＤＨ５α，经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及相应抗体的Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｉｎｇ检测证明Ｓ６，Ｓ９，Ｓ１０，Ｓ１１编码蛋白在大肠杆菌中获得成功表达。另外，还将ＲＤＶ外层外壳蛋白基因Ｓ８、微核心蛋白基因Ｓ７及编码非结构蛋白基因Ｓ９通过基因枪导入到水稻植株中，抗病性正在研究之中。 展开更多
关键词 基因组分析 原核表达 转基因水稻 水稻矮缩病毒
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温度对香石竹组织培养及其试管苗玻璃化的影响 被引量：4
4
作者 胡庆阳 于志华 +3 位作者 郑宏红 明小天 朱玉贤 陈章良 《应用基础与工程科学学报》 EI CSCD 1996年第3期303-306,共4页
以不同品种的香石竹(Dianthus caryophyllus L.)为材料,研究温度对其组织培养及试管苗玻璃化的影响。试验结果表明适当降低培养温度(15℃),可以有效地降低玻璃苗的比例,提高苗的健壮程度及移栽成活率.但温度对香石竹愈伤再分化及生根,... 以不同品种的香石竹(Dianthus caryophyllus L.)为材料,研究温度对其组织培养及试管苗玻璃化的影响。试验结果表明适当降低培养温度(15℃),可以有效地降低玻璃苗的比例,提高苗的健壮程度及移栽成活率.但温度对香石竹愈伤再分化及生根,没有明显的作用. 展开更多
关键词 香石竹 温度 玻璃化 组织培养
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GUS和HPT基因的基因枪法转化水稻 被引量：1
5
作者 陈敏勇 于志华 +2 位作者 明小天 郑宏红 陈章良 《应用基础与工程科学学报》 EI CSCD 1996年第4期385-390,共6页
以水稻（丹粳－５号）愈伤组织为受体材料，采用基因枪法将含有ＧＵＳ和ＨＰＴ基因的ＣＭ２质粒导入水稻细胞．经过５０ｍｇ／Ｌ的潮霉素筛选，获得抗性愈伤组织，并在同样筛选压力下诱导分化成苗，获得抗性苗．共获得１７个抗性克隆．... 以水稻（丹粳－５号）愈伤组织为受体材料，采用基因枪法将含有ＧＵＳ和ＨＰＴ基因的ＣＭ２质粒导入水稻细胞．经过５０ｍｇ／Ｌ的潮霉素筛选，获得抗性愈伤组织，并在同样筛选压力下诱导分化成苗，获得抗性苗．共获得１７个抗性克隆．ＧＵＳ组织化学检测表明，有１２个克隆为ＧＵＳ阳性，ＧＵＳ和ＨＰＴ基因共表达率为７０％左右．Ｓｏｕｔｈｅｒｎ分子检测证明ＨＰＴ基因已整合到水稻基因组中． 展开更多
关键词 转基因水稻 基因枪转化 GUS基因 HPT基因
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花药特异性表达的类查尔酮合酶基因D5与水稻花粉发育相关 被引量：14
6
作者 郑宏红 瞿礼嘉 +6 位作者 刘美华 张毅 申云平 魏军明 潘乃穟 陈章良 顾红雅 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2000年第11期1132-1138,共7页
采用ＲＮＡ原位杂交技术对水稻类查尔酮合酶基因Ｄ５进行细胞定位，结果表明Ｄ５基因特异地在水稻花药的绒毡层及维管束周围细胞中大量表达．为了进一步研究其功能，将水稻肌动蛋白基因（Ａｃｔｉｎｌ）启动子驱动的Ｄ５正义及反义基因... 采用ＲＮＡ原位杂交技术对水稻类查尔酮合酶基因Ｄ５进行细胞定位，结果表明Ｄ５基因特异地在水稻花药的绒毡层及维管束周围细胞中大量表达．为了进一步研究其功能，将水稻肌动蛋白基因（Ａｃｔｉｎｌ）启动子驱动的Ｄ５正义及反义基因分别转入水稻中．对转基因水稻花粉不同发育时期进行观察，发现表达了反义Ｄ５基因的花粉其形态表现明显不正常，由此可以推测出Ｄ５基因对于花粉的发育起重要作用． 展开更多
关键词 花粉发育 水稻 原位杂交 类查尔酮合酶基因D5
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利用土壤农杆菌将天花粉蛋白基因转入水稻植株并检测抗稻瘟病活性 被引量：15
7
作者 明小天 王莉江 +3 位作者 安成才 苑华毅 郑宏红 陈章良 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2000年第10期1080-1084,共5页
通过土壤农杆菌方法将天花粉蛋白基因转化到水稻中，获得了具有单拷贝外源基因插入和表达的水稻再生植株．抗稻瘟病（Ｐｙｒｉｃｕｌａｒｉａ ｏｒｙｚａｅ）检测发现，接病菌后１个月内转天花粉蛋白基因植株在发病时间、发病植株数、... 通过土壤农杆菌方法将天花粉蛋白基因转化到水稻中，获得了具有单拷贝外源基因插入和表达的水稻再生植株．抗稻瘟病（Ｐｙｒｉｃｕｌａｒｉａ ｏｒｙｚａｅ）检测发现，接病菌后１个月内转天花粉蛋白基因植株在发病时间、发病植株数、发病叶片、发病后的植株生长状况等各项指标上与对照的转ＧＵＳ基因植株比较均有较大差异．在去除高湿度的发病环境后，转天花粉蛋白基因植株的生长情况也明显优于对照植株．表明转基因水稻对稻瘟病侵害至少有明显的延迟发病抗性．天花粉蛋白基因在水稻中的表达未发现对宿主植物生长有明显影响。 展开更多
关键词 土壤农杆菌 水稻 天花粉蛋白基因 抗稻温病活性
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