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Rab27a促进MC3T3细胞外泌体分泌及成骨分化的机制研究与外泌体递送应用
1
作者 郑蔚晗 利时雨 +1 位作者 戴振宁 黄文华 《解剖学杂志》 CAS 2021年第S01期210-211,共2页
成骨细胞外泌体(exosome,EXO)可经旁分泌机制促进骨缺损修复,高效制备提取外泌体可有效促进外泌体于骨缺损修复的应用潜力,Rab27a基因与外泌体分泌密切相关。本研究构建了MC3T3-Rab27a高产外泌体细胞株,通过蛋白质谱检测和转录组测序,... 成骨细胞外泌体(exosome,EXO)可经旁分泌机制促进骨缺损修复,高效制备提取外泌体可有效促进外泌体于骨缺损修复的应用潜力,Rab27a基因与外泌体分泌密切相关。本研究构建了MC3T3-Rab27a高产外泌体细胞株,通过蛋白质谱检测和转录组测序,探究了外泌体蛋白组分以及Rab27a对MC3T3成骨分化的影响;微流控芯片制备PEGDA/GelMA/Exo(PGExo)外泌体缓释微球;低温相分离结合3D打印制备了纤维状粗糙表面的PLA支架,支架经多巴胺(pDA)涂覆后粘附微球,形成PLA/pDA/PGExo外泌体缓释支架。 展开更多
关键词 外泌体 成骨分化 骨缺损修复 微流控芯片 3D打印 成骨细胞 蛋白组分 多巴胺
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核因子κB受体活化因子配体和肿瘤坏死因子α经炎性牙周膜干细胞外泌体促进破骨细胞分化 被引量：4
2
作者 戴振宁 郑蔚晗 利时雨 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期377-385,共9页
目的慢性牙周炎表现的病理性骨吸收非常常见,牙周膜干细胞(PDLSCs)的外泌体(Exo)对骨吸收的作用和影响尚不明确,本研究分析了该Exo蛋白组分对破骨细胞分化的影响。方法分别从正畸前拔牙患者和慢性牙周炎患者的牙周膜组织中提取PDLSCs,... 目的慢性牙周炎表现的病理性骨吸收非常常见,牙周膜干细胞(PDLSCs)的外泌体(Exo)对骨吸收的作用和影响尚不明确,本研究分析了该Exo蛋白组分对破骨细胞分化的影响。方法分别从正畸前拔牙患者和慢性牙周炎患者的牙周膜组织中提取PDLSCs,通过流式细胞术检测表面标记物;通过差速离心分别提取2种细胞的Exo,即Exo-WT和Exo-CP,并通过Westernblot、透射电子显微镜(TEM)、蛋白浓度检测、纳米粒径追踪检测Exo特征;通过蛋白质谱检测2种Exo的蛋白组分;通过酶联免疫吸附(ELISA)验证了差异表达蛋白肿瘤坏死因子α(TNF-α)、核因子κB受体活化因子配体(RANKL)、白细胞介素(IL)-1α、转化生长因子β(TGF-β)、骨形态发生蛋白2(BMP-2)表达水平;将10、100、1000μg·mL^(−1)的Exo-CP或Exo-WT加入RAW264.7培养基中并于5 d时通过实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)、Westernblot、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色检测破骨分化相关指标表达情况;采用SPSS 24.0软件对实验数据进行统计学分析。结果Exo-CP富集的差异表达蛋白主要与破骨细胞分化的TNF信号通路、核转录因子κB(NF-κB)信号通路相关;ELISA实验证实了Exo-CP中高表达TNF-α、RANKL、IL-1α,低表达TGF-β1、BMP-2(P<0.05);Exo-CP作用于RAW264.7,显著提高了细胞的破骨分化相关基因及蛋白的表达水平,TRAP染色可见分化的破骨细胞,且呈现浓度依赖性,100、1000μg·mL^(−1)浓度Exo-CP对破骨细胞分化的促进作用显著高于10μg·mL^(−1)浓度组(P<0.05)。结论慢性牙周炎的病理性骨吸收可能由炎性PDLSCs所分泌的Exo通过促进破骨细胞分化引起,Exo中主要的作用蛋白可能为RANKL和TNF-α,本研究为慢性牙周炎骨吸收的发病机制提供了新视角。 展开更多
关键词 慢性牙周炎 牙周膜干细胞 外泌体 核因子ΚB受体活化因子配体 肿瘤坏死因子Α 破骨细胞分化
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基于参数化建模的3D打印β-TCP仿生支架促进骨再生
3
作者 利时雨 戴振宁 +1 位作者 郑蔚晗 黄文华 《解剖学杂志》 CAS 2021年第S01期210-210,共1页
骨缺损面临庞大的临床修复需求,用于修复骨缺损的组织工程骨提倡模拟天然骨组织的仿生形态结构,但目前尚无公认的仿生支架结构。本研究采用参数化建模和3D打印技术设计、制备基于Voronoi结构算法的松质骨仿生支架,该模型设计可以便捷调... 骨缺损面临庞大的临床修复需求,用于修复骨缺损的组织工程骨提倡模拟天然骨组织的仿生形态结构,但目前尚无公认的仿生支架结构。本研究采用参数化建模和3D打印技术设计、制备基于Voronoi结构算法的松质骨仿生支架,该模型设计可以便捷调节支架微孔数、微孔孔径、孔隙率等支架结构参数,并可用于3D打印,仿生支架经体内外实验研究大鼠骨髓间充质干细胞(rBMSCs)富集及颅骨缺损修复效果。 展开更多
关键词 3D打印 参数化建模 仿生支架 修复骨缺损 仿生形态 支架结构 模型设计 骨组织
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不同分娩孕周对剖宫产术后阴道试产围生期结局的影响 被引量：2
4
作者 张丽清 钟柳英 +5 位作者 林嘉恒 杨媛婷 薛家健 王建华 郑蔚晗 邓雯锋 《中国妇幼保健》 CAS 2021年第15期3429-3432,共4页
目的探讨不同分娩孕周对剖宫产术后阴道试产(TOLAC)的围生期结局的影响。方法对491例TOLAC孕产妇按不同分娩孕周分为3组,A组:39周≤孕周<40周共276例;B组:40周≤孕周<41周共182例;C组:41周≤孕周<42周共33例。比较其产后出血... 目的探讨不同分娩孕周对剖宫产术后阴道试产(TOLAC)的围生期结局的影响。方法对491例TOLAC孕产妇按不同分娩孕周分为3组,A组:39周≤孕周<40周共276例;B组:40周≤孕周<41周共182例;C组:41周≤孕周<42周共33例。比较其产后出血、子宫破裂、剖宫产术后阴道分娩(VBAC)率、中转剖宫产情况及新生儿结局等。结果3组的产程管理在产程时限、阴道助产使用率及会阴侧切率差异无统计学意义(P>0.05);而3组间产程中的人工破膜率和缩宫素使用率差异有统计学意义[37例(13.4%)vs.15例(8.24%)vs.0例(0.00),(P<0.05)]。491例TOLAC孕产妇中,产后出血率和会阴裂伤率与孕周相关[11例(3.99%)vs.11例(6.04%)vs.6例(18.18%);89例(32.25%)vs.57例(31.33%)vs.19例(57.58%),P<0.05]。子宫破裂4例。总VBAC率为68.23%(335/491),随着孕周的增加,VBAC率增高,中转剖宫产率下降,3组间差异无统计学意义(P>0.05)。(P>0.05)。中转剖宫产主要原因有:疑诊先兆子宫破裂、胎儿窘迫及产程异常(P>0.05)。新生儿平均出生体质量、羊水粪染率与孕周相关(P<0.05)。3组新生儿窒息发生率随孕周增加而下降,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论对自然临产并分娩孕周为39~42周的TOLAC者,随着孕周的增加,VBAC率是升高的,同时由于产程干预的降低,围生期的不良结局将有所降低。 展开更多
关键词 分娩孕周 剖宫产术后阴道试产 围生期结局
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