人血清甲状腺素的生物素-亲和素竞争酶联免疫分析

1

作者 郭善一 赵学勤 +1 位作者 周新元 张镜宇 《天津医药》 CAS 北大核心 2002年第6期347-349,共3页

目的:建立人血清T4-BA-ELISA分析方法。方法:合成的3种生物素化的T4-衍生物、经过筛选,Biotin-BSA-T4被用于以下实验中:T4在三氯乙酸作用下与甲状腺T4结合球蛋白（TBG）分离,并与Biotin-BSA-T4对有限量的兔抗人T4IgG形成竞争,在链霉亲... 目的:建立人血清T4-BA-ELISA分析方法。方法:合成的3种生物素化的T4-衍生物、经过筛选,Biotin-BSA-T4被用于以下实验中:T4在三氯乙酸作用下与甲状腺T4结合球蛋白（TBG）分离,并与Biotin-BSA-T4对有限量的兔抗人T4IgG形成竞争,在链霉亲和素化辣根过氧化物酶（streptavidin-HRP）存在下,以四甲基联苯胺（TMB）为底物,进行T4的ELISA定量分析。结果:标准曲线的可测量范围是10～20μg/L,批内变异系数为7.1％,批间变异系数为 8.03％。另外,用EIA和RIA同时测定了71份血清标本,对两套数据作了回归分析.r=0.969 5,P<0.001。结论:此方法的灵敏度已达到甚至超过了放射免疫分析的灵敏度,标准曲线范围与放射免疫分析相同。 展开更多

关键词 甲状腺素 生物素-亲和素系统 竞争酶联免疫分析 实验研究 酶联免疫吸附测定

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大鼠脑RC3基因的cDNA克隆及序列分析

2

作者 郭善一 梁东春 +2 位作者 油红捷 刘立明 李蓝戈 《天津医科大学学报》 2002年第1期45-47,共3页

目的 :为研究脑特异性基因 -RC3的功能 ,克隆该基因的cDNA。方法 :以大鼠脑为材料提取总RNA并分离纯化poly(A)+RNA ,用作模板以嵌套式逆转录PCR方法克隆RC3cDNA ,并将其重组入pUC18质粒 ,然后用双脱氧末端终止法进行碱基序列分析。结果 ... 目的 :为研究脑特异性基因 -RC3的功能 ,克隆该基因的cDNA。方法 :以大鼠脑为材料提取总RNA并分离纯化poly(A)+RNA ,用作模板以嵌套式逆转录PCR方法克隆RC3cDNA ,并将其重组入pUC18质粒 ,然后用双脱氧末端终止法进行碱基序列分析。结果 :大鼠脑RC3cDNA序列有一个碱基差别 ,但不涉及氨基酸的改变。结论 :为进一步研究RC3的功能提供了实验基础。 展开更多

关键词 RC3 发育 嵌套式PCR CDNA克隆

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必需微量元素过量(碘过量)对健康影响的研究 被引量：43

3

作者 陈祖培 阎玉芹 +4 位作者 赵金扣 孙秀发 田恩江 李兰英 郭善一 《中国地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期378-379,共2页

关键词 碘过量 健康 毒理学 微量元素过量 高碘

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壳聚糖-明胶网络/羟基磷灰石复合材料支架的研究——制备及形貌 被引量：23

4

作者 赵峰 尹玉姬 +4 位作者 宋雪峰 姚康德 郭善一 郭若霖 张镜宇 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 2001年第5期276-279,共4页

目的　制备壳聚糖 -明胶网络 /羟基磷灰石 (CS- Gel/ HA)复合材料多孔支架 ,并考察组分和制备条件对其微观形貌的影响。方法　采用相分离法制备 CS- Gel/ HA多孔支架 ;利用扫描电镜观察微观形貌 ;液体替代法测孔隙率。结果　采用相分离... 目的　制备壳聚糖 -明胶网络 /羟基磷灰石 (CS- Gel/ HA)复合材料多孔支架 ,并考察组分和制备条件对其微观形貌的影响。方法　采用相分离法制备 CS- Gel/ HA多孔支架 ;利用扫描电镜观察微观形貌 ;液体替代法测孔隙率。结果　采用相分离法 ,通过控制组分配比和预冷冻温度可制备不同密度和孔隙率的 CS- Gel/ HA多孔支架。结论　 CS- Gel/ 展开更多

关键词 组织工程 壳聚糖-明胶网络 羟基磷灰石多孔支架 制备 形貌

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从矿化的骨组织中提取骨细胞的总RNA 被引量：10

5

作者 郭若霖 郭善一 +2 位作者 左爱军 梁东春 张镜宇 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第4期584-586,共3页

描述了两个从以含大量羟基磷灰石 (钙 )和细胞密度、数量甚低为特点的矿化的成年骨组织 (成年大鼠颅骨 )提取总RNA的改进方法 .紫外分光光度法 (A2 60 、A2 80 和A2 3 0 )和 1%甲醛变性琼脂糖凝胶电泳予以鉴定 .进而以其逆转录的cDNA为... 描述了两个从以含大量羟基磷灰石 (钙 )和细胞密度、数量甚低为特点的矿化的成年骨组织 (成年大鼠颅骨 )提取总RNA的改进方法 .紫外分光光度法 (A2 60 、A2 80 和A2 3 0 )和 1%甲醛变性琼脂糖凝胶电泳予以鉴定 .进而以其逆转录的cDNA为模板扩增出 β actin和BMP 2基因 ,均表明所得总RNA完整和模板活性俱佳 .每克骨组织中总RNA产量为 5 6 0 展开更多

关键词 总RNA 骨组织 RT-PCR 基因表达 提取

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竞争性RT-PCR测定法及BMP-2mRNA的定量检测 被引量：11

6

作者 郭若霖 郭善一 +1 位作者 鲍秋野 张镜宇 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 2000年第5期680-683,共4页

建立竞争性 PCR方法 ,以期用于转录水平基因表达的定量研究 .以检测大鼠颅骨骨细胞总RNA中骨形态发生蛋白 - 2 ( BMP- 2 ,bone morphogenetic protein- 2 ) m RNA含量为例 ,构建大鼠BMP- 2基因的竞争模板 ,以之为内对照进行竞争性 PCR.... 建立竞争性 PCR方法 ,以期用于转录水平基因表达的定量研究 .以检测大鼠颅骨骨细胞总RNA中骨形态发生蛋白 - 2 ( BMP- 2 ,bone morphogenetic protein- 2 ) m RNA含量为例 ,构建大鼠BMP- 2基因的竞争模板 ,以之为内对照进行竞争性 PCR.PCR反应结束后 ,电泳、拍照 ,扫描所扩增条带密度 ,作回归方程 .根据回归方程 ,计算出正常 7d Wistar大鼠颅骨总 RNA中 BMP- 2 m RNA含量为 1 .1 2 5amol/μg RNA.结果显示 ,成功构建了大鼠 BMP- 2基因的竞争模板 ,建立了可以测定大鼠颅骨骨细胞总 RNA中 BMP- 2 m RNA含量的竞争性 PCR方法 . 展开更多

关键词 竞争性PCR 基因表达调控 MRNA 定量检测 BMP-2

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大鼠脑cDNA文库的构建 被引量：4

7

作者 宋学文 赵崇 +2 位作者 周仁 郭善一 张镜宇 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1996年第2期169-172,共4页

采用简单高效的ｃＤＮＡ合成技术制备Ｗｉｓｔａｒ大鼠脑ｃＤＮＡ基因文库，以纯化的ｐｏｌｙ（Ａ）＋－ＲＮＡ为模板，含ＮｏｔＩ切点的ｏｌｉｇｏ－（ｄＴ）１５为引物，在反转录酶的作用下，合成第一股单链ｃＤＮＡ；用Ｅ。ｃｏｌｉ... 采用简单高效的ｃＤＮＡ合成技术制备Ｗｉｓｔａｒ大鼠脑ｃＤＮＡ基因文库，以纯化的ｐｏｌｙ（Ａ）＋－ＲＮＡ为模板，含ＮｏｔＩ切点的ｏｌｉｇｏ－（ｄＴ）１５为引物，在反转录酶的作用下，合成第一股单链ｃＤＮＡ；用Ｅ。ｃｏｌｉＲＮａｓｅＨ除去模板ＲＮＡ，并以Ｅ．ｃｏｌｉＤＮＡ聚合酶Ｉ，Ｅ．ｃｏｌｉＤＮＡ连接酶和Ｔ４ＤＮＡ聚合酶催化合成ｃＤＮＡ第二条链，即成为双链ｃＤＮＡ；此双股ｃＤＮＡ除０．５μｇ用于插入ｐＳＰＯＲＴＩ载体，转入Ｅ．ｃｏｌｉＤＨ５α，建成ｃＤＮＡ文库外，其余保存在－２０℃，以此ｃＤＮＡ为模板，应用ＰＣＲ方法，先后克隆了谷氨酸脱羧酶（ＧＡＤ，１８００ｂＰ）、神经元特异性烯醇化酶（ＮＳＥ，１３４０ｂＰ），甲状腺激素受体（Ｔ３－ｒｅｃｅｐｔｏｒ，１２３０ｂｐ）、胆囊收缩素（ＣＣＫ，３４５ｂｐ）的全编码基因． 展开更多

关键词 CDNA文库 Wistar大鼠脑 分子克隆

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106例天津老年人载脂蛋白E基因型的测定 被引量：3

8

作者 郭刚 郭善一 +3 位作者 杨洁 陈涛 牛文彦 解用虹 《天津医药》 CAS 1999年第7期390-392,共3页

载脂蛋白Ｅ的遗传多态性不仅可以明显地影响机体的血脂水平，还和一些疾病的发生和发展密切相关。晚近不少学者报告早老性痴呆的发病与 ε_４等位基因密切相关。利用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ方法对１０６例天津市老年人的载脂蛋白Ｅ基因型进行... 载脂蛋白Ｅ的遗传多态性不仅可以明显地影响机体的血脂水平，还和一些疾病的发生和发展密切相关。晚近不少学者报告早老性痴呆的发病与 ε_４等位基因密切相关。利用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ方法对１０６例天津市老年人的载脂蛋白Ｅ基因型进行了测定。该方法用血量少，操作简便，结果可靠，可用于早老性痴呆易患人群的筛选。测定结果显示，老年人群 ε_４ 等位基因频率仅为５．７％，不仅明显低于西方人群，也低于非老年国人，提示中国老年人可能有较低的早老性痴呆遗传易患危险倾向。 展开更多

关键词 载脂蛋白E类 痴呆 等位基因 老年性痴呆 测定

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改进竞争性RT-PCR法测定缺碘大鼠颅骨中BMP-2基因表达变化 被引量：2

9

作者 郭若霖 郑红 +2 位作者 郭善一 郭刚 张镜宇 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期372-376,共5页

为更加精确地测定碘缺乏状态下大鼠颅骨组织中骨形态发生蛋白 2 (BMP 2 )mRNA表达水平 ,改进竞争性RT PCR方法 ,探讨碘缺乏对骨骼发育影响的分子机制 .将构建的DNA竞争模板克隆入pSportⅠ质粒中 ,利用pSportⅠ质粒中所含有的SP6RNA聚... 为更加精确地测定碘缺乏状态下大鼠颅骨组织中骨形态发生蛋白 2 (BMP 2 )mRNA表达水平 ,改进竞争性RT PCR方法 ,探讨碘缺乏对骨骼发育影响的分子机制 .将构建的DNA竞争模板克隆入pSportⅠ质粒中 ,利用pSportⅠ质粒中所含有的SP6RNA聚合酶启动子序列 ,将DNA竞争模板在体外转录成为RNA .以此RNA作为竞争性RT PCR中的竞争模板 ,与所提取的总RNA一同进行RT PCR ,消除逆转录效率对定量结果的影响 .定量检测碘缺乏和正常大鼠颅骨总RNA中BMP 2mRNA的水平 .碘缺乏大鼠 (1d～ 84d)颅骨中BMP 2表达含量明显降低 .1d时降低 6 4 3倍 ,以后差距逐渐缩小 ,至 84d相差 1 5 5倍 .结果提示 ,碘缺乏所致的骨骼发育不良与BMP 2表达不足有关 ,结果首次揭示微量元素碘和甲状腺激素与BMP 展开更多

关键词 RT-PCR 大鼠 颅骨 BMP-2基因 骨形态发生蛋白-2 碘缺乏 骨发育

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发育期缺碘大鼠骨发育障碍的病理学观察 被引量：2

10

作者 郭若霖 左爱军 +2 位作者 郭刚 郭善一 张镜宇 《中国地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期32-35,共4页

目的观察缺碘对大鼠甲状腺功能及骨发育的影响。方法复制两代碘缺乏大鼠动物模型,测定血清中TT3、TT4水平,拍摄X线片,并作股骨远端骨切片观察骨发育情况。结果20日龄缺碘大鼠的体质量明显低于对照组,甲状腺相对质量明显高于对照组;补碘... 目的观察缺碘对大鼠甲状腺功能及骨发育的影响。方法复制两代碘缺乏大鼠动物模型,测定血清中TT3、TT4水平,拍摄X线片,并作股骨远端骨切片观察骨发育情况。结果20日龄缺碘大鼠的体质量明显低于对照组,甲状腺相对质量明显高于对照组;补碘组与正常组无明显差别。碘缺乏大鼠血清TT3水平与对照组相比无明显变化,但TT4水平显著降低。X线片中可见,碘缺乏大鼠的长骨较同日龄正常大鼠短且细,骨间隙增大,钙化不良。股骨远端骨骺病理切片显示,缺碘大鼠次级骨化中心形成迟缓且小,骨骺生长板中几个软骨细胞区域层次混乱,储备细胞数目减少,增殖区宽度较正常大鼠减少,生后补碘可以部分纠正上述改变。结论发育期碘缺乏会导致大鼠发育迟缓,骨骺软骨发育不良,钙化障碍。生后给碘缺乏大鼠补碘可以改善骨骼发育。 展开更多

关键词 碘缺乏 大鼠 骨发育 病理学 动物模型

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甲状腺功能与骨生长因子基因BMP-2、IGF-1表达的关系 被引量：1

11

作者 郭若霖 郭善一 +2 位作者 郑红 梁东春 张镜宇 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期191-191,共1页

目的　探讨甲状腺激素对骨发育调节作用的分子机制。本文从体内和体外实验两方面研究了甲状腺激素对BMP 2、IGF 1基因的调节作用。方法　复制碘缺乏大鼠动物模型 ,检测了甲状腺激素缺乏状态下大鼠颅骨中BMP 2、IGF 1基因表达水平。原代... 目的　探讨甲状腺激素对骨发育调节作用的分子机制。本文从体内和体外实验两方面研究了甲状腺激素对BMP 2、IGF 1基因的调节作用。方法　复制碘缺乏大鼠动物模型 ,检测了甲状腺激素缺乏状态下大鼠颅骨中BMP 2、IGF 1基因表达水平。原代培养正常和碘缺乏大鼠颅骨成骨细胞 ,加入T3 观察成骨细胞中BMP 2、IGF 1因表达水平的变化。结果　BMP 2、IGF 1基因表达水平在碘缺乏大鼠颅骨中明显降低。 1、14、2 8、4 2、5 6、84各日龄正常组大鼠颅骨中BMP 2mRNA表达量分别为 3.2、4 .0、0 .75、0 .6 2、0 .4 6和 0 .31× 10 -16mol·μg-1总RNA ,碘缺乏组分为 0 .9、0 .5 2、0 .2 0、0 .16、0 .13和 0 .2 0× 10 -16mol·μg-1总RNA ,分别为正常组的 1/ 6 .5、1/ 7.6 9、1/ 3.75、1/ 3.88、1/ 3.5 4和 1/ 1.5 5。各日龄正常大鼠IGF 1相对表达量 (IGF 1与 β actin的灰度值比 )为 1.2 8± 0 .17、1.2 7± 0 .18、1.14± 0 .16、0 .84± 0 .0 7、0 .4 8± 0 .10和 0 .89± 0 .0 8;碘缺乏大鼠分别为 1.0 4± 0 .0 4、1.19± 0 .12、1.16± 0 .0 2、0 .4 5± 0 .0 5、0 .4 0± 0 .0 3和 0 .6 5± 0 .0 5 ,分别较正常组降低了 2 3%、6 .7%、7.5 %、87%、2 0 %和 37%。体外实验中 ,T3 浓度从 0 ,10 -10 ～ 10 -6mol·L-1? 展开更多

关键词 甲状腺功能 骨生长因子 BMP-2 IGF-l 基因表达 碘缺乏 骨发育 成骨细胞 甲状腺激素

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尼尔雌醇影响OVX大鼠骨组织IL-6 mRNA表达水平的研究 被引量：1

12

作者 王宝利 李茂欣 +3 位作者 权金星 郭善一 贾红蔚 邱明才 《天津医药》 CAS 北大核心 2001年第2期91-93,共3页

目的:研究尼尔雌醇对OVX大鼠IL-6 mRNA表达水平的影响,探讨绝经后骨质疏松的分子细胞学机制。方法:将30只3月龄雌性Wistar大鼠随机分成3组,每组10只,即OVX组、假手术组和尼尔雌醇组(雌醇组)。对OVX组和雌醇组行双侧卵巢切除制备绝经后... 目的:研究尼尔雌醇对OVX大鼠IL-6 mRNA表达水平的影响,探讨绝经后骨质疏松的分子细胞学机制。方法:将30只3月龄雌性Wistar大鼠随机分成3组,每组10只,即OVX组、假手术组和尼尔雌醇组(雌醇组)。对OVX组和雌醇组行双侧卵巢切除制备绝经后骨质疏松模型,雌醇组于术后1周予尼尔雌醇治疗。3个月后处死全部实验动物,直接从骨组织中提取总RNA,采用相对半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测IL-6 mRNA表达情况。结果:雌醇组IL-6 mRNA水平显著低于OVX组(P<0.01),与假手术组相比无显著性差异(P>0.05)。结论:IL-6参与调节雌激素撤退所致的骨吸收,尼尔雌醇可以抑制IL-6的基因表达,减少骨丢失。 展开更多

关键词 尼尔雌醇 绝经后骨质疏松 治疗 IL-6 mRNA 基因表达

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人骨形态发生蛋白-2基因的真核表达载体构建 被引量：1

13

作者 沈伟 郭善一 +2 位作者 鲍秋野 梁东春 张镜宇 《天津医药》 CAS 北大核心 2001年第2期88-90,共3页

目的:利用杆状病毒载体,构建可直接转染昆虫细胞Sf9的含人骨形态发生蛋白-2(hBMP-2)基因的重组穿梭载体(bacmid DNA),最终获得重组蛋白。方法:将编码包含hBMP-2 N-端信号肽,中间前肽以及C-端成熟肽共1188bp的cDNA片断,插入真核表达载体p... 目的:利用杆状病毒载体,构建可直接转染昆虫细胞Sf9的含人骨形态发生蛋白-2(hBMP-2)基因的重组穿梭载体(bacmid DNA),最终获得重组蛋白。方法:将编码包含hBMP-2 N-端信号肽,中间前肽以及C-端成熟肽共1188bp的cDNA片断,插入真核表达载体pFastBacl的多克隆位点,受控于pPolh启动子,构建成pFastBael/hBMP-2重组转移载体。重组子转化大肠杆菌DH10Bac。转座后,挑选阳性菌落,提取bacmid DNA,经PCR鉴定后,以重组bacmid DNA转染Sf9细胞。收集重组病毒,扩大转染Sf9,表达产物行SDS-PAGE初步鉴定。结果:获得了含hBMP-2全长cDNA片段的重组bacmid DNA和重组病毒,经SDS-PAGE证实在昆虫细胞中表达了分泌型hBMP-2蛋白,经激光密度扫描仪扫描显示分泌性蛋白表达量占细胞蛋白总量的35.6%。结论:利用杆状病毒载体成功构建了可用于直接转染昆虫细胞而无需同源重组的重组bacmid DNA,并在昆虫细胞中表达了分泌型hBMP-2蛋白。 展开更多

关键词 骨形态发生蛋白质 杆状病毒 基因表达 载体构建

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一种改良的组织DNA酚抽提法 被引量：6

14

作者 梁东春 郭刚 +1 位作者 郭善一 张镜宇 《天津医科大学学报》 2002年第1期105-106,共2页

关键词 组织 提取 DNA 酚抽提

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IGF-1信号肽及成熟肽全编码序列的克隆 被引量：4

15

作者 梁东春 郭善一 +1 位作者 郭刚 张镜宇 《天津医科大学学报》 2003年第4期453-455,共3页

目的 :克隆含信号肽编码序列的胰岛素样生长因子1(IGF -1)基因 ,为转IGF -1基因研究奠定基础。方法 :分别扩增IGF -1信号肽及成熟肽的编码序列 ,以PCR的方法对二者进行拼接 ,将拼接后的DNA片段克隆入质粒载体pGEM -Teasy。结果 :以PCR... 目的 :克隆含信号肽编码序列的胰岛素样生长因子1(IGF -1)基因 ,为转IGF -1基因研究奠定基础。方法 :分别扩增IGF -1信号肽及成熟肽的编码序列 ,以PCR的方法对二者进行拼接 ,将拼接后的DNA片段克隆入质粒载体pGEM -Teasy。结果 :以PCR拼接的方式成功地扩增出大小为360bp含信号肽编码序列的IGF -1基因。完成了该DNA片段的克隆 ,经序列测定证实读码框架完全正确。结论 :克隆IGF -1信号肽及成熟肽全编码序列 ,可以为转IGF 展开更多

关键词 胰岛素样生长因子1 信号肽 克隆

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人胰岛细胞瘤cDNA文库的构建 被引量：1

16

作者 宋学文 郭善一 +2 位作者 周仁 赵崇 张镜宇 《中国糖尿病杂志》 CAS CSCD 1995年第3期159-161,共3页

采用一种简单高效的互补脱氧核糖核酸（ｃＤＮＡ）克隆技术制备人胰岛细胞瘤的ｃＤＮＡ文库。方法的主要过程如下：以人胰岛细胞瘤的Ｐｏｌｙ（Ａ）＋－ＲＮＡ为模板，以含ＮｏｔＩ切点的ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）１５为引物，在反转录酶作用... 采用一种简单高效的互补脱氧核糖核酸（ｃＤＮＡ）克隆技术制备人胰岛细胞瘤的ｃＤＮＡ文库。方法的主要过程如下：以人胰岛细胞瘤的Ｐｏｌｙ（Ａ）＋－ＲＮＡ为模板，以含ＮｏｔＩ切点的ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）１５为引物，在反转录酶作用下合成第一股单链ｃＤＮＡ；用Ｅ．ｃｏｌｉＲＮａｓｅＨ除去Ｐｏｌｙ（Ａ）＋－ＲＮＡ，并以Ｅ．Ｃｏｌｉ　ＤＮＡ　Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ　Ｉ　Ｅ．Ｃｏｌｉ　ＤＮＡ　Ｌｉｇａｓｅ和Ｔ_４　ＤＮＡ　Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ催化合成第二股即成为双链ｃＤＮＡ；加接ＳａｌＩ接头并经ＮｏｔＩ酶切后，将ｃＤＮＡ通过ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ－５００ＨＲ柱使大小不同的片段分离，再以质粒ｐＳＰＯＲＴ１为载体与ｃＤＮＡ退火连接并转化至Ｅ．ｃｏｌｉＤＨ５ａ，得到人胰岛细胞瘤的ｃＤＮＡ文库。克隆效率为１×１０６转化子／μｇｃＤＮＡ，有ｃＤＮＡ插入片段的转化子占９２％。 展开更多

关键词 胰岛细胞瘤 胰岛肿瘤 CDNA文库

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人血清载脂蛋白E酶联免疫吸附测定方法的建立 被引量：1

17

作者 郭刚 刘欣 +1 位作者 郭善一 解用虹 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 1996年第3期217-220,共4页

利用由纯化的人血浆载脂蛋白Ｅ制备获得的小鼠抗人载脂蛋白Ｅ单克隆抗体和兔抗人载脂蛋白Ｅ多克隆抗体，建立了测定人血清载脂蛋白Ｅ浓度的抗体双夹心酶联免疫吸附测定方法。该方法具有特异性强、灵敏度高、操作简便和重复性好等优点，... 利用由纯化的人血浆载脂蛋白Ｅ制备获得的小鼠抗人载脂蛋白Ｅ单克隆抗体和兔抗人载脂蛋白Ｅ多克隆抗体，建立了测定人血清载脂蛋白Ｅ浓度的抗体双夹心酶联免疫吸附测定方法。该方法具有特异性强、灵敏度高、操作简便和重复性好等优点，可广泛地应用于基础研究和临床检验。 展开更多

关键词 载脂蛋白E 免疫学检验 ELISA

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大鼠谷氨酸脱羧酶(GAD)毕赤酵母表达重组子的构建 被引量：1

18

作者 张颖 郭善一 +1 位作者 梁东春 王宝利 《天津医科大学学报》 2004年第1期43-46,共4页

目的 :构建大鼠谷氨酸脱羧酶(glutamicaciddecarboxylase,GAD)巴斯德毕赤酵母(Pichiapastoris)表达重组子 ,探索一条真核细胞高效表达rGAD的新途径。方法 :以 pUC18_GAD质粒为模板PCR扩增出大鼠GAD65基因 ,将其克隆入PGEM_Teasy载体 ,... 目的 :构建大鼠谷氨酸脱羧酶(glutamicaciddecarboxylase,GAD)巴斯德毕赤酵母(Pichiapastoris)表达重组子 ,探索一条真核细胞高效表达rGAD的新途径。方法 :以 pUC18_GAD质粒为模板PCR扩增出大鼠GAD65基因 ,将其克隆入PGEM_Teasy载体 ,继而将其克隆到毕赤酵母分泌型质粒表达载体 pPIC9K中 ,重组质粒线性化后PEG法转染入毕赤酵母菌株GS115,PCR筛选转化子。结果 :DNA序列分析和PCR鉴定表明成功构建了大鼠谷氨酸脱羧酶 (GAD)毕赤酵母表达重组子。结论 展开更多

关键词 谷氨酸脱羧酶(GAD65) 毕赤酵母 重组

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人血浆载脂蛋白E的分离提纯

19

作者 解用虹 徐秀双 +2 位作者 郭刚 郭善一 王维兆 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1992年第2期140-143,共4页

利用仅2.5h的不连续密度梯度超速离心,可自人血浆分离获得纯净的极低密度脂蛋白(VLDL)。VLDL脱脂后,其可溶成分经Heparin-Sepharose CL-6B亲和层析柱,可分为低盐洗脱峰Ⅰ和高盐洗脱峰Ⅱ。峰Ⅱ经SDS-PAGE鉴定为单一染色带,测定其分子量为... 利用仅2.5h的不连续密度梯度超速离心,可自人血浆分离获得纯净的极低密度脂蛋白(VLDL)。VLDL脱脂后,其可溶成分经Heparin-Sepharose CL-6B亲和层析柱,可分为低盐洗脱峰Ⅰ和高盐洗脱峰Ⅱ。峰Ⅱ经SDS-PAGE鉴定为单一染色带,测定其分子量为33900。此即为纯净的人血浆载脂蛋白E,载脂蛋白E的分离提纯为制备其羊克隆抗体和进行血浆浓度及表型测定提供了有利条件。 展开更多

关键词 分离 亲和层析 载脂蛋白E

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1型糖尿病患者血清抗BSA抗体水平的初步研究

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作者 刘颖 郭善一 +3 位作者 沈伟 郑红 张镜宇 孙丽荣 《天津医科大学学报》 1999年第3期1-2,共2页

目的：研究成人１ 型糖尿病患者血清中抗ＢＳＡ 抗体的水平。方法：用ＥＬＩＳＡ 法检测了４０名年龄在２０～４５ 岁之间，病程小于２ａ 的１ 型糖尿病患者血清中的ＩｇＧ 型抗ＢＳＡ 抗体。并用４０名正常人血清做对照。结果：１ 型... 目的：研究成人１ 型糖尿病患者血清中抗ＢＳＡ 抗体的水平。方法：用ＥＬＩＳＡ 法检测了４０名年龄在２０～４５ 岁之间，病程小于２ａ 的１ 型糖尿病患者血清中的ＩｇＧ 型抗ＢＳＡ 抗体。并用４０名正常人血清做对照。结果：１ 型糖尿病患者血清抗ＢＳＡ 抗体水平与对照组无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。结论：国人成人新发１ 型糖尿病患者血清ＩｇＧ 型抗ＢＳＡ 展开更多

关键词 BSA 抗体 1型 糖尿病 ELISA

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