人Waardenburg综合征点突变SOX10 p.R106W小鼠模型的构建及听力表型初步研究

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作者 王露露 谢飞 +6 位作者 赵清远 徐凯 刘传宏 贺秋月 郭科男 孙宇 王勇 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第24期2512-2520,共9页

目的制备人Waardenburg综合征点突变SOX10 p.R106W小鼠模型,比较分析该突变在小鼠、小型猪及人中诱发的听觉功能表型的异同。方法通过比对人、猪和小鼠的SOX10编码蛋白的氨基酸序列,找到与人SOX10 p.R106W突变所对应的小鼠Sox10基因同... 目的制备人Waardenburg综合征点突变SOX10 p.R106W小鼠模型,比较分析该突变在小鼠、小型猪及人中诱发的听觉功能表型的异同。方法通过比对人、猪和小鼠的SOX10编码蛋白的氨基酸序列,找到与人SOX10 p.R106W突变所对应的小鼠Sox10基因同源位点,通过CRISPR/Cas9介导的基因编辑引入突变,构建Sox10 c.316A>T(Sox10 p.R106W)点突变小鼠。采用听觉脑干反应测试、耳蜗组织切片等方法评估突变小鼠听力表型。对耳蜗组织进行mRNA转录组测序,对差异表达基因进行基因本体(gene ontology,GO)富集分析,借助String数据库分析差异表达基因与Sox10之间的关联性。结果获得了携带有Sox10 c.316A>T突变的基因编辑小鼠,该突变小鼠表现为腹部白斑,杂合稳定遗传。与野生型小鼠比较,Sox10 c.316A>T杂合突变小鼠对声波刺激的敏感性及内耳形态结构均没有明显的差异。转录组分析发现突变小鼠耳蜗中323个基因表达上调,283个基因表达下调,但大部分基因表达差异较小。对差异表达基因GO富集分析发现上调基因与免疫相关,下调基因与神经功能有关。利用String数据库分析显示,表达下调的基因中有5个与Sox10基因有关联,分别是神经丝重多肽(neurofilament heavy polypeptide,Nefh)、脂肪酸2-羟化酶(fatty acid 2-hydroxylase,Fa2h)、缝隙连接蛋白B1(gap junction protein beta 1,Gjb1)、神经生长因子受体(nerve growth factor receptor,Ngfr)、锌指蛋白536(zinc finger protein 536,Zfp536),均与内耳发育或功能无关。结论应用CRISPR/Cas9系统成功构建Sox10 p.R106W基因编辑小鼠,其听力表型无显著改变,与该突变在人和小型猪中诱发的疾病表型差异较大。 展开更多

关键词 WAARDENBURG综合征 SOX10 CRISPR/Cas9 小鼠模型

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川陈皮素在体内外模型中对肠干细胞增殖的影响

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作者 吴静峰 郭科男 +5 位作者 张宁 吴天宇 周子默 陆治宇 王锋超 陈文生 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第21期2195-2205,共11页

目的探讨在体内外模型中常用有效剂量川陈皮素(nobiletin,NOB)对肠道干细胞的调节作用。方法构建小鼠结肠癌细胞系MC38的3D培养模型,加入不同浓度NOB,观察克隆死亡和存活。构建小鼠小肠类器官模型,在类器官培养体系中添加不同浓度的NOB... 目的探讨在体内外模型中常用有效剂量川陈皮素(nobiletin,NOB)对肠道干细胞的调节作用。方法构建小鼠结肠癌细胞系MC38的3D培养模型,加入不同浓度NOB,观察克隆死亡和存活。构建小鼠小肠类器官模型,在类器官培养体系中添加不同浓度的NOB,观察类器官的出芽和生长,利用MTT染色后的类器官成像进行面积和吸光值计算。在50、100μmol/L浓度NOB干预体系中不同时间撤掉NOB,观察类器官生长。在50μmol/L浓度NOB处理类器官的体系中分别加入R-spondin1、CHIR99021加强Wnt通路激活信号,观察类器官的生长。对C57/B6J小鼠灌胃不同浓度NOB,连续给药4 d,观察肠道隐窝和绒毛长度比,观察隐窝细胞凋亡,以及隐窝底部干细胞龛中Olfm4/BrdU染色阳性的细胞数量。结果与对照组相比,50μmol/L NOB即可显著促进肿瘤细胞MC38成球后死亡,显著降低克隆形成率(P<0.001)。与对照组相比,NOB从50μmol/L起可以显著抑制肠类器官的出芽,50~200μmol/L NOB可以显著抑制类器官的生长(P<0.001),并且具有剂量依赖效应;NOB撤药后在50μmol/L时肠类器官生长容易恢复,在100μmol/L时难以恢复到正常水平。增强Wnt通路的激活可以部分挽救NOB对肠类器官的抑制作用。在体给予高于常用浓度的NOB不能诱导肠隐窝细胞凋亡,不影响肠干细胞的数目和增殖,不影响隐窝和绒毛比。结论NOB具有抑制正常肠干细胞的能力,可能通过调控干细胞相关通路如Wnt发挥作用,但其在在体不能发挥抑制干细胞增殖的效应;这提示NOB在常规浓度应用的安全性,同时提醒对NOB在在体肿瘤模型中发挥的抑制作用需要进行更深入的评估。 展开更多

关键词 川陈皮素 小肠干细胞 小肠类器官 细胞增殖 在体

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不同剂量苦碟子注射液抗大鼠肝纤维化的实验研究 被引量：3

3

作者 郭科男 钱宁 +1 位作者 董小君 吴曙光 《贵阳中医学院学报》 2008年第3期16-19,共4页

目的:探讨不同剂量苦碟子注射液对复合因素致大鼠肝纤维化的治疗作用及各剂量间疗效的比较。方法:采用CCL4和酒精复合诱导大鼠肝纤维化模型,同时采用大、中、小剂量苦碟子注射液治疗,测定谷-丙转氨酶(ALT)、谷-草转氨酶(AST)、羟脯氨酸(... 目的:探讨不同剂量苦碟子注射液对复合因素致大鼠肝纤维化的治疗作用及各剂量间疗效的比较。方法:采用CCL4和酒精复合诱导大鼠肝纤维化模型,同时采用大、中、小剂量苦碟子注射液治疗,测定谷-丙转氨酶(ALT)、谷-草转氨酶(AST)、羟脯氨酸(HYp)含量及脂质过氧化指标超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平,并以光镜观察组织学改变,综合分析不同剂量苦碟子注射液对CCL4和酒精复合诱导大鼠肝纤维化模型的作用。结果:苦碟子注射液有显著降低ALT,AST、Hyp作用,并能使肝组织MDA降低,SOD升高,均有极显著性意义(P<0.01)。经治疗后的肝细胞损伤、肝脏脂肪变性与纤维组织形成较少。其中大、中剂量组的疗效比小剂量组为好,而高、中剂量组两者之间的差异无显著意义。结论:本实验提示苦碟子注射液大、中剂量组抗肝纤维化的作用优于低剂量组,且苦碟子注射液保护肝细胞、减少肝纤维化的刺激因素的作用机制可能就在于抗脂质过氧化反应。 展开更多

关键词 苦碟子注射液:肝纤维化 复合因素 大鼠

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苦碟子注射液治疗贵州小型猪肝纤维化的实验研究 被引量：6

4

作者 赵菊花 吴曙光 +5 位作者 巫全胜 郭科男 董小君 李术钗 魏剑林 钱宁 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期586-588,共3页

目的观察苦碟子注射液对复合因素所致的贵州小型猪肝纤维化治疗作用。方法贵州小型猪15头,随机分为空白组、模型组、治疗组3组,分成造模和治疗两个阶段。除空白组外的其他2组前8周为造模阶段,用40%CCl4橄榄油(0.5 ml/kg)和兔血清(0.5 ml... 目的观察苦碟子注射液对复合因素所致的贵州小型猪肝纤维化治疗作用。方法贵州小型猪15头,随机分为空白组、模型组、治疗组3组,分成造模和治疗两个阶段。除空白组外的其他2组前8周为造模阶段,用40%CCl4橄榄油(0.5 ml/kg)和兔血清(0.5 ml/kg)分别腹腔注射,空白组用橄榄油和生理盐水(NS)各0.5 ml/kg分别腹腔注射,1周两次,共8周;治疗阶段:实验的第9周开始,治疗组给予苦碟子注射液0.8 ml/kg(相当苦碟子生药16g),其余2组给予NS0.8 ml/kg,均为每天腹腔注射1次,共28 d。各组分别于实验末处死动物取血和肝组织块,测定血清谷丙转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、白蛋白/球蛋白比值(A/G);行HE、Masson染色在光镜下及透射电镜观察肝脏组织病理学变化,以评价肝脏损伤程度和药物的治疗作用。结果①苦碟子注射液能显著降低复合因素所致贵州小型猪肝纤维化动物模型的血清ALT、AST含量(P<0.01),减轻肝损伤引起的ALB降低及A/G比例倒置(P<0.05或P<0.01);②光镜切片示苦碟子注射液能减轻贵州小型猪肝纤维化模型的肝细胞变性、坏死,使增生的纤维成分减少,甚至消失。③电镜照片显示:苦碟子注射液能减轻贵州小型猪肝纤维化模型的肝细胞损伤,稳定质膜,使细胞间质中胶原纤维沉积减少。结论苦碟子注射液对贵州小型猪肝纤维化模型具有显著的治疗作用,其可能的机制还有待进一步研究。 展开更多

关键词 苦碟子注射液 贵州小型猪 肝纤维化 治疗作用

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速眠新Ⅱ与戊巴比妥钠对实验用白香猪麻醉效果的观察 被引量：14

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作者 吴曙光 巫全胜 +3 位作者 赵菊花 董小君 郭科男 钱宁 《实验动物科学》 2007年第2期24-26,共3页

目的观察速眠新Ⅱ对实验用白香猪的麻醉效果。方法将30头成年实验用白香猪随机分为三个组,A组为速眠新Ⅱ组,B组和C组为速眠新Ⅱ和戊巴比妥钠不同比例复合麻醉组。观察诱导期、维持期、苏醒期,监测动物体温、呼吸频率和心率。结果A、B、... 目的观察速眠新Ⅱ对实验用白香猪的麻醉效果。方法将30头成年实验用白香猪随机分为三个组,A组为速眠新Ⅱ组,B组和C组为速眠新Ⅱ和戊巴比妥钠不同比例复合麻醉组。观察诱导期、维持期、苏醒期,监测动物体温、呼吸频率和心率。结果A、B、C三个组的诱导期分别为(11.4±7.85)min(、122.7±42.82)min和(47.8±46.04)min;维持期(5.7±2.51)min(、104.4±27.68)min和(85.9±92.64)min;苏醒期分别为(4.7±2.83)min(、122.8±19.5)min和(102.1±59.62)min。三组动物体温从给药开始至苏醒在总体上均呈下降趋势;三组动物的呼吸频率均表现为给药后10 min至90 min缓慢升高、在苏醒期略下降的规律性变化;三组动物心率从给药开始至苏醒均在持续下降。结论实验用白香猪对速眠新Ⅱ的耐受高,单纯使用速眠新Ⅱ和与戊巴比妥钠复合使用能获得满意的麻醉深度。 展开更多

关键词 速眠新Ⅱ 速眠新Ⅱ与戊巴比妥钠联用 实验用白香猪 麻醉

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大鼠药物依赖性便秘模型的制作 被引量：19

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作者 巫全胜 吴曙光 +3 位作者 赵菊花 郭科男 董小君 钱宁 《实验动物科学》 2007年第4期70-72,共3页

目的建立一种大鼠药物依赖性便秘的动物模型。方法不禁食,限水,致大鼠形成便秘;然后用大黄,酚酞灌胃给予治疗,起始剂量每天20 mg/100 g/d,按每天20 mg/100 g/d递增;大鼠对药物产生依赖后,再逐渐停止限水,大黄最终用量320 mg/100 g/d,酚... 目的建立一种大鼠药物依赖性便秘的动物模型。方法不禁食,限水,致大鼠形成便秘;然后用大黄,酚酞灌胃给予治疗,起始剂量每天20 mg/100 g/d,按每天20 mg/100 g/d递增;大鼠对药物产生依赖后,再逐渐停止限水,大黄最终用量320 mg/100 g/d,酚酞最终用量420 mg/100 g/d,再维持此剂量不变饲养三个月。观察实验动物大鼠肠道的传输功能:粪便排出量,粪便的干重,首粒大便排出时间,大便内酚红含量,大便中红色塑料小球排出情况,小肠推动率。结果与正常对照组比较,各模型组小肠推动率减慢,首粒大便排出时间长,排便量少,大便内酚红含量减少。结论成功地建立了一种大鼠药物依赖性便秘的动物模型,该模型简单经济,可重复性强。 展开更多

关键词 大鼠 药物依赖性便秘 动物模型

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护肾Ⅰ号对顺铂致贵州小型猪肾损伤的预防作用及机制探讨 被引量：3

7

作者 钱宁 董小君 +2 位作者 郭科男 吴曙光 李术钗 《山东医药》 CAS 北大核心 2008年第24期33-34,共2页

将12只贵州小型猪随机分为Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组,各4只。3组均行膀胱造瘘后,Ⅲ组给予护肾Ⅰ号灌服5d,其余两组给予等量生理盐水。然后Ⅱ和Ⅲ组给以4mg/kg顺铂一次性腹腔注射建立贵州小型猪肾损伤模型,Ⅰ组注射等量生理盐水。测定注射顺铂前1h,... 将12只贵州小型猪随机分为Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组,各4只。3组均行膀胱造瘘后,Ⅲ组给予护肾Ⅰ号灌服5d,其余两组给予等量生理盐水。然后Ⅱ和Ⅲ组给以4mg/kg顺铂一次性腹腔注射建立贵州小型猪肾损伤模型,Ⅰ组注射等量生理盐水。测定注射顺铂前1h,注射后24、48、96h时三组血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及尿β2-微球蛋白(β2-MG)。结果:与Ⅰ组比较,Ⅱ组血清BUN、Cr、MDA含量明显升高,血清SOD活力降低,尿β2-MG浓度升高(P均(0.05)。Ⅲ组的各项指标较Ⅱ组明显改善。认为护肾Ⅰ号可预防顺铂所致的肾损伤,其机制可能与抑制顺铂致血液脂质过氧化反应增强有关。 展开更多

关键词 护肾Ⅰ号 顺铂 贵州小型猪 肾损伤

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幼龄贵州小型猪主要脏器重量及脏器系数的测定 被引量：11

8

作者 钱宁 吴曙光 +3 位作者 郭科男 巫全胜 赵菊花 董小君 《实验动物科学》 2007年第4期24-26,共3页

目的测定幼龄贵州小型猪脏器重量、脏器系数的生物学特性指标。方法选用初生(0 d)和一月龄(30 d)普通级贵州小型猪各20只,雌雄各半,分别测定体重和10个脏器重量,计算脏器系数。结果雌雄贵州小型猪初生组体重、肝重量、肾重量、胃系数差... 目的测定幼龄贵州小型猪脏器重量、脏器系数的生物学特性指标。方法选用初生(0 d)和一月龄(30 d)普通级贵州小型猪各20只,雌雄各半,分别测定体重和10个脏器重量,计算脏器系数。结果雌雄贵州小型猪初生组体重、肝重量、肾重量、胃系数差异均有极显著性(P<0.01),胃、心重量有显著性差异(P<0.05),而一月龄组雌雄体重和脏器重量均无显著性差异(P>0.05),肺系数有极显著性差异(P<0.01)。结论雌雄幼龄贵州小型猪的体重、肝重量、胃重量、心重量、肾重量、胃系数、肺系数具有差异。 展开更多

关键词 贵州小型猪 脏器重量 脏器系数

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大鼠肠道传输功能检测方法改进的实验研究 被引量：3

9

作者 吴曙光 巫全胜 +3 位作者 赵菊花 董小君 郭科男 钱宁 《贵州医药》 CAS 2006年第9期838-838,共1页

关键词 功能检测 肠道传输 大鼠 实验研 小肠炭末推进率 量化指标 对比分析 塑料球

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一种新的小鼠肠道传输功能的检测方法 被引量：8

10

作者 钱宁 巫全胜 +3 位作者 赵菊花 吴曙光 郭科男 董小君 《实验动物科学》 2007年第3期60-62,共3页

目的探讨硫酸钡灌胃法在小鼠肠道传输功能检测中的应用。方法通过硫酸钡和活性炭小鼠灌胃的方法,对正常和便秘小鼠进行小肠推动率、粪便排出量、首粒大便排出时间的观察。结果用硫酸钡灌胃法检测正常和便秘小鼠肠道传输功能,可客观地反... 目的探讨硫酸钡灌胃法在小鼠肠道传输功能检测中的应用。方法通过硫酸钡和活性炭小鼠灌胃的方法,对正常和便秘小鼠进行小肠推动率、粪便排出量、首粒大便排出时间的观察。结果用硫酸钡灌胃法检测正常和便秘小鼠肠道传输功能,可客观地反映小鼠不同生理状态下小肠推动率、首粒大便排出时间和排便量。结论硫酸钡灌胃法可作为小鼠肠动力学实验研究的一种新的检测方法。 展开更多

关键词 硫酸钡 肠道传输功能 实验方法

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护肾Ⅰ号对顺铂致肾损伤预防作用的实验研究 被引量：2

11

作者 董小君 郭科男 +4 位作者 吴曙光 李术钗 张毓芹 邓宏 钱宁 《实验动物科学》 2007年第6期81-83,103,共4页

目的研究护肾Ⅰ号对顺铂所致贵州小型猪急性肾损伤的预防作用。方法将贵州小型猪随机分为正常对照组、顺铂模型组、中药预防组。每天给中药预防组小型猪灌服护肾Ⅰ号煎剂,连续灌胃5 d,以4 mg/kg顺铂一次性腹腔注射,膀胱插管收集尿液,动... 目的研究护肾Ⅰ号对顺铂所致贵州小型猪急性肾损伤的预防作用。方法将贵州小型猪随机分为正常对照组、顺铂模型组、中药预防组。每天给中药预防组小型猪灌服护肾Ⅰ号煎剂,连续灌胃5 d,以4 mg/kg顺铂一次性腹腔注射,膀胱插管收集尿液,动态观察给顺铂前后第0、1、3、6、24、489、6 h时段小型猪的尿量,测尿中肌酐及尿素氮浓度,计算各时段肌酐和尿素氮的排出量。结果与正常对照组比较,顺铂模型组尿量和肌酐、尿素氮的排出量显著减少,中药预防组的各项指标得到明显改善。结论护肾Ⅰ号可预防顺铂所致的肾损伤。 展开更多

关键词 护肾I号 顺铂 贵州小型猪 肾损伤 预防

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贵州小型猪复合因素所致肝纤维化模型的建立 被引量：2

12

作者 赵菊花 吴曙光 +4 位作者 巫全胜 郭科男 董小君 魏剑林 钱宁 《实验动物科学》 2007年第6期74-77,68,共5页

建立贵州小型猪复合因素所致的肝纤维化模型,为肝纤维化机制和治疗研究提供基础。方法贵州小型猪16头,雌雄各半,随机分为对照组和实验组。对照组每周两次给予溶剂橄榄油和生理盐水,实验组每周两次分别腹腔注射给予40%的四氯化碳(CCl4)... 建立贵州小型猪复合因素所致的肝纤维化模型,为肝纤维化机制和治疗研究提供基础。方法贵州小型猪16头,雌雄各半,随机分为对照组和实验组。对照组每周两次给予溶剂橄榄油和生理盐水,实验组每周两次分别腹腔注射给予40%的四氯化碳(CCl4)橄榄油和兔血清各0.5 mL/kg,共9周,建立复合因素所致的肝纤维化模型。实验结束时,取血清查肝功ALT、AST、TP、ALB、A/G,取肝组织邻片做常规HE染色、Masson染色和Van Gieson染色,光镜和电镜下观察病理变化。结果染毒9周后,实验组血清ALT、AST比对照组明显增高(t值分别为0.0001、0.0004,P<0.01),ALB、A/G比对照组明显降低(t值分别为0.001、0.003,P<0.01);实验组肝组织光镜和电镜下观察病理切片均较对照组有明显的改变。结论复合因素CCl4、兔血清腹腔注射可导致贵州小型猪肝纤维化。 展开更多

关键词 贵州小型猪 复合因素 肝纤维化 模型

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速眠新Ⅱ对幼龄贵州小型猪外科手术中的应用研究 被引量：13

13

作者 吴曙光 佘小明 +5 位作者 田锟 赵菊花 巫全胜 郭科男 董小君 钱宁 《实验动物科学与管理》 2006年第4期21-23,共3页

目的研究速眠新Ⅱ在贵州小型猪幼龄猪外科手术中的麻醉效果和应用。方法将30头贵州小型猪幼龄猪分成两组,A组用速眠新Ⅱ0.15 mL/kg肌注麻醉;B组用0.1 mL/kg速眠新Ⅱ与3.5%戊巴比妥钠生理盐水溶液0.5 mL/kg同时肌注麻醉。两组动物均进行... 目的研究速眠新Ⅱ在贵州小型猪幼龄猪外科手术中的麻醉效果和应用。方法将30头贵州小型猪幼龄猪分成两组,A组用速眠新Ⅱ0.15 mL/kg肌注麻醉;B组用0.1 mL/kg速眠新Ⅱ与3.5%戊巴比妥钠生理盐水溶液0.5 mL/kg同时肌注麻醉。两组动物均进行腭裂造模术及腭裂修补术、器官切除术、腹腔探察术、清创术等手术。观察两组动物的麻醉诱导期、维持期、苏醒期及动物的体温、呼吸频率、心率变化。结果A、B两组的诱导期分别为(7.67±5.20)min、(3.58±3.20)min;维持期分别为(40.17±4.96)min(、60.50±17.3)min;苏醒期分别为(7.00±2.45)min(、56.27±33.60)min。体温变化:A组先下降,后上升;B组总体持续下降。两组动物呼吸频率和心率平稳。结论速眠新Ⅱ用于幼龄贵州小型猪外科手术中的麻醉、镇痛和镇静及肌松效果良好、与戊巴比妥钠复合麻醉效果良好。 展开更多

关键词 速眠新Ⅱ 贵州小型猪 幼龄 外科手术 麻醉

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顺铂致贵州小型猪呕吐模型 被引量：8

14

作者 钱宁 吴曙光 +3 位作者 赵菊花 董小君 巫全胜 郭科男 《实验动物科学与管理》 2006年第4期18-20,共3页

目的建立贵州小型猪恶心呕吐的动物模型。方法实验动物随机分为3组,用不同剂量顺铂一次性腹腔注射,观察8h内出现恶心和呕吐情况。结果在观察期,对照组动物未出现恶心呕吐表现,小剂量组(3 mg/kg)仅有1/4的动物在给药后382min出现恶心而... 目的建立贵州小型猪恶心呕吐的动物模型。方法实验动物随机分为3组,用不同剂量顺铂一次性腹腔注射,观察8h内出现恶心和呕吐情况。结果在观察期,对照组动物未出现恶心呕吐表现,小剂量组(3 mg/kg)仅有1/4的动物在给药后382min出现恶心而未有呕吐,大剂量组(4 mg/kg)全部动物均出现恶心和呕吐,恶心出现的平均时间为68.25 min,出现呕吐的平均时间为138 min。结论贵州小型猪对顺铂引起的恶心和呕吐反应呈显著的剂量反应关系,反应均一,提示贵州小型猪可作为一种新的疾病模型实验动物,用于呕吐机制、药物和针灸抗呕吐的研究。 展开更多

关键词 贵州小型猪 顺铂 呕吐

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幼龄贵州小型猪体重与各脏器重量之间关系的回归分析 被引量：5

15

作者 钱宁 郭科男 +3 位作者 吴曙光 董小君 巫全胜 赵菊花 《贵阳中医学院学报》 2007年第5期12-14,共3页

目的:测定幼龄贵州小型猪脏器重量、脏器系数的生物学特性指标,对体重与各脏器重量之间的关系进行了回归分析,并计算出相应的直线回归方程。方法:选用初生和一月龄贵州小型猪各20只,雌雄各半,分别测定体重和10个脏器重量,计算脏器系数,... 目的:测定幼龄贵州小型猪脏器重量、脏器系数的生物学特性指标,对体重与各脏器重量之间的关系进行了回归分析,并计算出相应的直线回归方程。方法:选用初生和一月龄贵州小型猪各20只,雌雄各半,分别测定体重和10个脏器重量,计算脏器系数,对脏体比与体重作相关性分析。结果:雌雄贵州小型猪初生组体重、肝重量、肾重量、胃系数差异均有极显著性(P<0.01),胃重量、心重量有显著性差异(P<0.05),而一月龄组雌雄体重和脏器重量差异均无显著性(P>0.05),肺系数差异有极显著性(P<0.01);雄性贵州小型猪体重与肝、胆囊、胃、心、肺、肾、脾、肾、脾、肾上腺、睾丸(P<0.01),两样本间有线性关系。雌性贵州小型猪体重与肝、胆囊、胃、心、肺、肾、脾、肾、脾、肾上腺(P<0.01),两样本间有线性关系。卵巢(P>0.05),两样本间无线性关系。结论:本研究填补了国内有关贵州小型猪脏器重量、脏器系数测定的空白,为相关研究打下基础。 展开更多

关键词 贵州小型猪 体重 脏器重量 脏器系数

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苦碟子对四氯化碳所致大鼠急性肝损伤的防治作用 被引量：1

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作者 钱宁 赵菊花 +4 位作者 吴曙光 巫全胜 董小君 郭科男 魏剑林 《甘肃中医》 2007年第8期69-71,共3页

目的:观察苦碟子注射液对四氯化碳(CCl4)所致大鼠急性肝损伤的防治作用。方法:建立CCl4所致大鼠急性肝损伤模型,设空白对照组、模型对照1组、苦碟子预防组、模型对照2组、苦碟子治疗组,并分别用药。通过测定各组动物血清谷丙转氨酶(ALT... 目的:观察苦碟子注射液对四氯化碳(CCl4)所致大鼠急性肝损伤的防治作用。方法:建立CCl4所致大鼠急性肝损伤模型,设空白对照组、模型对照1组、苦碟子预防组、模型对照2组、苦碟子治疗组,并分别用药。通过测定各组动物血清谷丙转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)和观察肝脏组织病理学变化,以评价肝脏损伤程度和药物的防治作用。结果:该药能显著降低CCl4所致急性肝损伤大鼠血清中ALT、AST含量,病理切片示肝组织变性、坏死明显减轻。结论:苦碟子注射液对此模型大鼠的肝损伤具有显著的防治作用,其可能的机制还有待研究。 展开更多

关键词 苦碟子注射液 四氯化碳 动物实验 大鼠 急性肝损伤

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苦碟子注射液用于肝纤维化大鼠疗效观察及其作用机制探讨

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作者 钱宁 郭科男 +3 位作者 董小君 吴曙光 李术钗 张志勇 《山东医药》 CAS 北大核心 2008年第20期24-25,共2页

对10只肝纤维化大鼠模型(苦蝶子组),采用苦碟子注射液腹腔注射(0.4 m l/100 g,1次/d),连用2周后检测大鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、白蛋白(A lb)含量,肝组织丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平,并观察其肝脏内α-平滑... 对10只肝纤维化大鼠模型(苦蝶子组),采用苦碟子注射液腹腔注射(0.4 m l/100 g,1次/d),连用2周后检测大鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、白蛋白(A lb)含量,肝组织丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平,并观察其肝脏内α-平滑肌蛋白(α-SMA)表达。结果与模型组比较,观察组显著降低肝血清ALT、AST含量及肝组织中MDA水平明显降低,使血清A lb含量及肝组织中SOD活性显著升高(P<0.01);肝脏内α-SMA阳性细胞数明显减少(P<0.01),认为苦碟子注射液具有抗肝纤维化的作用,其机制可能为抗脂质过氧化及降低HSC活化。 展开更多

关键词 苦碟子注射液 肝纤维化 肝星状细胞 脂质过氧化 Α-平滑肌肌动蛋白

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慢病毒介导的CYP3A11基因knock-down小鼠的建立 被引量：1

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作者 庞浩 刘昌峨 +4 位作者 刘勤 王露露 郭科男 王勇 魏泓 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期422-426,共5页

目的构建和筛选小鼠P4503A11基因miR RNAi慢病毒载体,建立CYP3A11基因knock-down小鼠。方法利用Ravi Sachidanandam's Lab的在线软件设计沉默小鼠P4503A11基因的miRNA所对应的shRNA序列,PCR扩增后克隆到PCI-GFP-MiR质粒中,其再与慢... 目的构建和筛选小鼠P4503A11基因miR RNAi慢病毒载体,建立CYP3A11基因knock-down小鼠。方法利用Ravi Sachidanandam's Lab的在线软件设计沉默小鼠P4503A11基因的miRNA所对应的shRNA序列,PCR扩增后克隆到PCI-GFP-MiR质粒中,其再与慢病毒载体FUW进行重组。将psPAX2和pMD2.G两个载体和FUW-GFP-MiR-shRNA重组慢病毒载体共转染293FT细胞,包装成病毒。用包装好的病毒液感染293FT细胞后,并利用GFP蛋白表达水平进行滴度测定。将上述重组慢病毒载体分别转染FVB/N小鼠肝细胞,转染48h后,检测P4503A11基因mRNA表达水平的变化。选取干扰效果最好的FUW-GFP-MiR-shRNA1重组慢病毒载体进行制备基因knock-down小鼠模型。用显微注射法将浓缩的shRNA1病毒液注射至FVB/N小鼠12细胞期胚胎透明带下。将注射后发育至22细胞期的胚胎移植至假孕受体母鼠,得F0代小鼠。在紫外光照射下利用滤光片观察GFP在小鼠活体内的表达水平。结果DNA测序结果显示3个重组慢病毒载体均与所设计的shRNA序列一致。检测的3个浓缩前慢病毒悬液的滴度均≥106TU/ml,经过高速离心对病毒进行浓缩和纯化,其滴度达到109TU/ml以上。转染FUW-GFP-MiR-shRNA1、2的2组肝细胞的P4503A11基因mRNA表达水平相对于空白对照组均显著下降(P<0.05),而转染阴性对照FUW-GFP-MiR-shRNA-NC的肝细胞P4503A11基因mRNA表达水平相对于空白对照组无明显改变。选用FUW-GFP-MiR-shRNA1慢病毒载体制备的F0代3A11基因knock-down小鼠,在紫外光照射下,阳性小鼠可见较强的荧光。结论构建并筛选出小鼠P4503A11基因有效的靶向miR RNAi慢病毒载体,并成功建立CYP3A11基因knock-down小鼠。 展开更多

关键词 细胞色素P-450 CYP3A KNOCK-DOWN 微RNAS 慢病毒 小鼠

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苦碟子注射液对乙醇所致大鼠急性肝损伤的影响 被引量：3

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作者 郭科男 钱宁 +1 位作者 董小君 吴曙光 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期543-544,共2页

目的观察苦碟子注射液对大鼠急性酒精性肝损伤的影响。方法采用50%乙醇给大鼠灌胃5 d造成大鼠急性酒精性肝损伤模型,第3天检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST),第5天给药后检测血清ALT,AST,还原型谷胱甘肽(GSH)及肝匀浆超... 目的观察苦碟子注射液对大鼠急性酒精性肝损伤的影响。方法采用50%乙醇给大鼠灌胃5 d造成大鼠急性酒精性肝损伤模型,第3天检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST),第5天给药后检测血清ALT,AST,还原型谷胱甘肽(GSH)及肝匀浆超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)。结果苦碟子注射液可显著降低大鼠急性酒精性肝损伤模型血清ALT及AST(P<0.01或P<0.05),能明显抑制造模大鼠血清中GSH含量降低(P<0.01),明显提高肝匀浆SOD水平(P<0.01),降低肝匀浆MDA含量(P<0.05)。结论苦碟子注射液对大鼠急性酒精性肝损伤具有较好的治疗作用,为其临床用药提供了药效学基础。 展开更多

关键词 苦碟子 动物模型 急性肝损伤 乙醇

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老龄贵州小型猪血液生理生化指标观察 被引量：4

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作者 吴曙光 董小君 +4 位作者 郭科男 王明镇 詹新义 张树森 钱宁 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第3期46-47,共2页

为了探求小型猪在生物医学、药学等方面的利用价值,试验采用常规方法检测了5～7岁贵州小型猪血液的生理生化指标,统计分析各指标间的性别差异。结果表明:老龄贵州小型猪绝大多数血液生理、生化指标性别间差异不显著;谷草转氨酶、白蛋白... 为了探求小型猪在生物医学、药学等方面的利用价值,试验采用常规方法检测了5～7岁贵州小型猪血液的生理生化指标,统计分析各指标间的性别差异。结果表明:老龄贵州小型猪绝大多数血液生理、生化指标性别间差异不显著;谷草转氨酶、白蛋白、低密度脂蛋白、淋巴细胞比率、中性细胞比率、淋巴细胞计数差异显著;乙型肝炎病毒和丙型肝炎病毒抗体检测结果均为阴性,提示过去和现在均未感染过乙型肝炎病毒和丙型肝炎病毒。 展开更多

关键词 贵州小型猪 老龄 血液 生化 生理

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