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丁酸钠通过下调细胞干扰素调节因子-1抑制鼻咽癌细胞CNE2吲哚胺-吡咯2,3-双加氧酶的表达 被引量：2
1
作者 郭芝刚 曾军 +1 位作者 张锦宏 何玉文 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期850-852,共3页
目的研究丁酸钠(NaB)抑制鼻咽癌细胞CNE2吲哚胺-吡咯2,3-双加氧酶(IDO)表达从而解除肿瘤免疫耐受的分子机制。方法体外培养人鼻咽癌上皮细胞CNE2,采用NaB和(或)IFN-γ处理CNE2细胞;免疫印迹检测CNE2细胞IDO的表达情况;RT-PCR检测JAK/STA... 目的研究丁酸钠(NaB)抑制鼻咽癌细胞CNE2吲哚胺-吡咯2,3-双加氧酶(IDO)表达从而解除肿瘤免疫耐受的分子机制。方法体外培养人鼻咽癌上皮细胞CNE2,采用NaB和(或)IFN-γ处理CNE2细胞;免疫印迹检测CNE2细胞IDO的表达情况;RT-PCR检测JAK/STAT的细胞因子信号抑制因子1(SOCS1)和SOCS3的转录水平;Real time PCR检测CNE2细胞干扰素调节因子-1(IRF-1)的转录情况。结果在NaB作用下,CNE2细胞内IDO的表达减少,并且IFN-γ诱导的IDO表达也被显著抑制;SOCS1和SOCS3的转录水平未见改变;而IFN-γ诱导的IRF1转录受到NaB的显著抑制。结论 NaB抑制IFN-γ诱导的IDO表达,不是通过增加SOCS1和SOCS3的转录,而可能是通过下调IRF-1,抑制IFN-γ诱导的IDO表达。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 羟丁酸盐类 吲哚胺-吡咯2 3-双加氧酶 干扰素调节因子1
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基质细胞衍生因子-1及其受体CXCR4在肿瘤转移中的作用 被引量：7
2
作者 陈宏远 谭毅 +4 位作者 蔡绍晖 马伟峰 郭芝刚 杜军 蔡绍皙 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第5期1180-1183,共4页
基质细胞衍生因子-1(Stromal cell-derived factor-1,SDF-1)及其受体CXCR4与人类多种肿瘤转移密切相关,CXCR4在一些肿瘤细胞系、原发肿瘤组织均呈高表达。SDF-1在肿瘤细胞潜在转移靶器官的表达量比非常规转移靶器官高,肿瘤细胞利用CXCR... 基质细胞衍生因子-1(Stromal cell-derived factor-1,SDF-1)及其受体CXCR4与人类多种肿瘤转移密切相关,CXCR4在一些肿瘤细胞系、原发肿瘤组织均呈高表达。SDF-1在肿瘤细胞潜在转移靶器官的表达量比非常规转移靶器官高,肿瘤细胞利用CXCR4与其天然配体间的趋化效应实现远距离转移。SDF-1/CXCR4驱动癌细胞转移模式的提出及其相互作用机制的深入研究对于肿瘤治疗具有重要的指导意义。 展开更多
关键词 基质细胞衍生因子-1 CXCR4 肿瘤 肿瘤转移
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眼镜蛇毒细胞毒素对S180荷瘤小鼠抗肿瘤作用的研究 被引量：2
3
作者 张锦宏 曾军 +1 位作者 谢天炽 郭芝刚 《中国医学创新》 CAS 2012年第20期1-3,共3页
目的:探讨眼镜蛇毒细胞毒素(Cytotoxin,CTX)对S180荷瘤小鼠的抗肿瘤作用。方法:采用昆明小鼠S180实体瘤模型,通过腹腔注射CTX,观察CTX对S180小鼠的肿瘤重量、亚显微结构、凋亡率和pro-caspase-3表达量的变化。结果:CTX对S180肿瘤细胞的... 目的:探讨眼镜蛇毒细胞毒素(Cytotoxin,CTX)对S180荷瘤小鼠的抗肿瘤作用。方法:采用昆明小鼠S180实体瘤模型,通过腹腔注射CTX,观察CTX对S180小鼠的肿瘤重量、亚显微结构、凋亡率和pro-caspase-3表达量的变化。结果:CTX对S180肿瘤细胞的生长表现出明显抑制作用。0.2、0.4、0.8mg/kgCTX剂量组的抑瘤率分别为23.8%、54.1%、63.2%;透射电子显微镜和流式细胞仪检测显示S180肿瘤细胞发生凋亡;免疫印迹结果显示pro-caspase-3蛋白表达降低,提示caspase-3被激活。结论:CTX通过诱导细胞凋亡来抑制S180肿瘤细胞的生长。 展开更多
关键词 眼镜蛇毒 细胞毒素 S180 凋亡 CASPASE-3
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医学院校临床专业医学细胞生物学的教学实践与探索 被引量：9
4
作者 张锦宏 曾军 郭芝刚 《西北医学教育》 2012年第4期762-764,共3页
医学细胞生物学是生命科学的四大前沿学科之一,也是医学院校临床专业的必修课程。为了解决医学院校低年级开设该课程所面临的教学内容多和学时少的突出矛盾,我教研室对医学细胞生物学课程的教学内容和教学模式进行了改革和探索,采取了... 医学细胞生物学是生命科学的四大前沿学科之一,也是医学院校临床专业的必修课程。为了解决医学院校低年级开设该课程所面临的教学内容多和学时少的突出矛盾,我教研室对医学细胞生物学课程的教学内容和教学模式进行了改革和探索,采取了一些行之有效的教学方法、手段,为培养高素质的合格人才提供科学保证。 展开更多
关键词 医学细胞生物学 临床专业 教学实践
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突变型hIL-2在Pichia pastoris中直接诱导表达条件研究
5
作者 郭芝刚 欧阳克清 +4 位作者 杨红 高虹 李新平 陈云高 蔡绍皙 《生物技术》 CAS CSCD 2003年第3期11-13,共3页
为了简化突变型白细胞介素 - 2 (mutantvarianthumaninterleukin - 2 ,MvIL - 2 )在毕赤酵母中的表达工艺 ,作者参照传统方法 ,设计了一种新的表达方法 -直接诱导法。在该实验中 ,在摇瓶条件下 ,对OD6 0 0 、诱导时间这两个重要的参数... 为了简化突变型白细胞介素 - 2 (mutantvarianthumaninterleukin - 2 ,MvIL - 2 )在毕赤酵母中的表达工艺 ,作者参照传统方法 ,设计了一种新的表达方法 -直接诱导法。在该实验中 ,在摇瓶条件下 ,对OD6 0 0 、诱导时间这两个重要的参数进行了重点研究 ,并对表达蛋白的抗原性和生物学活性进行鉴定。结果表明 :在pH6 0、温度 30℃、转速 2 80r min的条件下进行培养 ,菌体密度(OD6 0 0 )达到 4 0时直接在发酵液中加入 1%的甲醇进行诱导表达 ,间隔 2 4h补充同上浓度的甲醇 ,96h收集发酵液。以相同体积的培养基最后获得的总目的蛋白来比较 ,直接诱导法的产量是传统诱导法产量的 5倍。Westernblot的抗原性检测和MTT生物学活性实验证明表达的蛋白是特异性蛋白。MTT法测得突变型IL - 2具有 4倍于同样在毕赤酵母中表达的天然IL - 展开更多
关键词 突变型hIL-2 诱导表达 突变型白细胞介素-2 毕赤酵母
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突变型hGM-CSF在毕赤甲醇酵母中的分泌表达
6
作者 杨红 欧阳克清 +3 位作者 郭芝刚 李新平 陈云高 蔡绍皙 《重庆大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第6期94-97,共4页
临床研究发现 ,与大肠杆菌体系生产的hGM -CSF相比 ,利用酵母表达系统生产的hGM -CSF ,具有毒副作用小等优点。鉴于非糖基化的hGM -CSF生物活性比人体天然产生的糖基化GM -CSF活性更高 ,采用PCR定点突变的方法修改hGM -CSF基因中的糖基... 临床研究发现 ,与大肠杆菌体系生产的hGM -CSF相比 ,利用酵母表达系统生产的hGM -CSF ,具有毒副作用小等优点。鉴于非糖基化的hGM -CSF生物活性比人体天然产生的糖基化GM -CSF活性更高 ,采用PCR定点突变的方法修改hGM -CSF基因中的糖基化位点 ,进而在毕赤酵母 (Pichiapastoris)中实现该突变型基因的高效表达。实验结果表明 ,突变型基因的表达产物具有天然hGM -CSF的活性。 展开更多
关键词 突变型hGM-CSF 毕赤酵母 分泌表达
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CXCR4拮抗剂在肿瘤治疗中的应用 被引量：1
7
作者 罗竞红 郭芝刚 曾军 《成都大学学报（自然科学版）》 2012年第4期309-315,共7页
G蛋白偶联趋化因子受体CXCR4在癌细胞表面广泛表达,癌细胞易转移部位的基质细胞组成型分泌CXCR4的配体——基质细胞衍生因子-1(SDF-1/CXCL12),表达CXCR4的癌细胞在CXCR4/CXCL12轴的调控下沿CXCL12浓度梯度进行转运和归巢,转移的癌细胞在... G蛋白偶联趋化因子受体CXCR4在癌细胞表面广泛表达,癌细胞易转移部位的基质细胞组成型分泌CXCR4的配体——基质细胞衍生因子-1(SDF-1/CXCL12),表达CXCR4的癌细胞在CXCR4/CXCL12轴的调控下沿CXCL12浓度梯度进行转运和归巢,转移的癌细胞在CXCL12作用下与基质细胞紧密联系而获得药物抗性.CXCR4的拮抗剂,比如AMD3100,T140类似物和本课题组开发的SDF-1βP2G,能打断癌细胞与基质细胞的相互作用,动员癌细胞离开对其具保护作用的微环境从而进入血液循环系统,使癌细胞对传统药物的敏感性增加.因此,靶向CXCR4/CXCL12轴的CXCR4拮抗剂联合化疗在探索肿瘤患者治疗方面是一个新颖的,富有吸引力的方法. 展开更多
关键词 CXCR4 拮抗剂 肿瘤治疗
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在EBV阳性鼻咽癌细胞内SAHA联合GCV细胞毒作用的时间点分析
8
作者 何玉文 郭芝刚 肖翔林 《今日药学》 CAS 2014年第1期23-25,共3页
目的探讨伏立诺他(SAHA)联合GCV对EBV阳性鼻咽癌细胞的细胞毒作用有效时间点,为临床化疗提供依据。方法利用Real-time PCR检测SAHA作用下EBV阳性鼻咽癌细胞C666 TK的表达情况;通过MTT检测SAHA联合GCV的细胞毒性。结果 SAHA作用16 h时TK... 目的探讨伏立诺他(SAHA)联合GCV对EBV阳性鼻咽癌细胞的细胞毒作用有效时间点,为临床化疗提供依据。方法利用Real-time PCR检测SAHA作用下EBV阳性鼻咽癌细胞C666 TK的表达情况;通过MTT检测SAHA联合GCV的细胞毒性。结果 SAHA作用16 h时TK的表达最多,并且MTT结果显示SAHA作用16 h后联合GCV两者的细胞毒作用最强。结论 SAHA作用16 h后联合GCV抗鼻咽癌效果较好。 展开更多
关键词 伏立诺他 更昔洛韦 鼻咽癌 EB病毒
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SAHA联合GCV对EBV阳性鼻咽癌细胞的细胞毒作用
9
作者 何玉文 郭芝刚 肖翔林 《今日药学》 CAS 2013年第12期785-787,共3页
目的探讨伏立诺他(SAHA)联合GCV对EBV阳性鼻咽癌细胞的细胞毒作用,为临床化疗提供理论依据。方法在EBV阳性鼻咽癌细胞C666和EBV阴性鼻咽癌细胞NP69中,通过MTT检测SAHA联合GCV的细胞毒性;利用Western-Blot检测SAHA诱导C666细胞裂解期蛋白... 目的探讨伏立诺他(SAHA)联合GCV对EBV阳性鼻咽癌细胞的细胞毒作用,为临床化疗提供理论依据。方法在EBV阳性鼻咽癌细胞C666和EBV阴性鼻咽癌细胞NP69中,通过MTT检测SAHA联合GCV的细胞毒性;利用Western-Blot检测SAHA诱导C666细胞裂解期蛋白EA-D的表达;利用流式细胞仪检测SAHA及其联合GCV诱导细胞凋亡情况。结果 MTT结果显示SAHA联合GCV能增强GCV的细胞毒性,随着时间延长SAHA诱导C666 E-D表达增多;SAHA及其联合GCV诱导细胞凋亡没有统计学差异(P>0.05)。结论 SAHA联合GCV增强了GCV的细胞毒性,此协同作用可能与SAHA诱导EBV阳性鼻咽癌细胞进入裂解期有关。 展开更多
关键词 伏立诺他 更昔洛韦 鼻咽癌 EB病毒
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细胞内趋化因子重组突变体SDF-1α/54/KDEL的构建及其对CXCR4受体在细胞膜表面表达的抑制作用
10
作者 陈宏远 谭毅 +6 位作者 郭芝刚 马伟峰 蔡绍皙 杜军 黄俊 胡厚稳 蔡绍晖 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第3期647-651,677,共6页
构建人基质细胞衍生因子(SDF-1)突变体SDF-1α/54/KDEL重组真核表达质粒,并考察其对T细胞性白血病细胞株Molt-4细胞表面受体CXCR4表达的影响,为尝试表型敲除肿瘤细胞CXCR4以抑制肿瘤的转移提供理论和实验依据。以SDF-WT-Gly×4-Dec/... 构建人基质细胞衍生因子(SDF-1)突变体SDF-1α/54/KDEL重组真核表达质粒,并考察其对T细胞性白血病细胞株Molt-4细胞表面受体CXCR4表达的影响,为尝试表型敲除肿瘤细胞CXCR4以抑制肿瘤的转移提供理论和实验依据。以SDF-WT-Gly×4-Dec/PET30a(+)质粒为模板,用PCR法扩增出SDF-1α/54并将其亚克隆至真核表达质粒pEGFP-C3构建成真核表达载体pEGFP-C3/SDF-1α/54/KDEL。经酶切及测序验证后,脂质体介导转染入COS-7细胞,通过Western blot检测SDF-1α/54/KDEL的表达。电穿孔法将重组载体瞬时转染CXCR4高表达的Molt-4,并用流式细胞仪检测CXCR4含量的变化。DNA测序证明:读码框完全正确,重组真核表达载体含有SDF-1α/54基因和编码4肽KDEL的基因,Western blot证明融合蛋白能在COS-7细胞表达。电穿孔转染Molt-4细胞后发现,SDF-1α/54/KDEL可以显著降低胞膜表面CXCR4表达量。由此提示:KDEL介导的SDF-1α/54对Molt-4细胞CXCR4具有表型敲除作用,且此效应不受SDF-1αC端α螺旋缺失的影响。 展开更多
关键词 人基质细胞衍生因子(SDF-1) SDF-1α/54 CXCR4 表型敲除
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