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牛布氏杆菌病和分枝杆菌病二联表位疫苗的构建及其免疫效果评价
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作者 卢宝平 扈立伟 +7 位作者 任君 杜荣起 顾天越 包利霞 刘青 朱凡杰 张东超 金天明 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2024年第2期69-75,共7页
为研发一种更安全、有效的防控牛布氏杆菌病和分枝杆菌病的疫苗,运用在线软件ABCPerd和IEBD对牛布氏杆菌外膜蛋白(Omp25)和牛分枝杆菌抗原85A(Ag85A)的B、T细胞表位进行预测分析,设计新的表位基因肽段NewⅠ和NewⅡ,并通过SOPMA和VaxiJe... 为研发一种更安全、有效的防控牛布氏杆菌病和分枝杆菌病的疫苗,运用在线软件ABCPerd和IEBD对牛布氏杆菌外膜蛋白(Omp25)和牛分枝杆菌抗原85A(Ag85A)的B、T细胞表位进行预测分析,设计新的表位基因肽段NewⅠ和NewⅡ,并通过SOPMA和VaxiJen在线软件对NewⅠ和NewⅡ的二级结构与抗原性进行分析。将NewⅠ、Omp25、NewⅡ和Ag85A基因序列依次用自剪切肽T2A、P2A、E2A进行连接,获得串联基因并命名为COE,将COE基因构建至真核表达载体GV658,获得重组质粒GV658-COE;将上述重组质粒转染至HEK293细胞,利用细胞计数(CCK-8)试验评估GV658-COE对细胞的安全性,通过免疫印迹分析目的蛋白的表达情况;将重组质粒以400μg/只的剂量免疫大鼠,检测在第3次免疫后的血清抗体及大鼠脾淋巴细胞中的T细胞亚群占比情况。结果显示:NewⅠ和NewⅡ序列二级结构较稳定,抗原性良好;重组质粒经PCR扩增获得3231 bp大小的目的条带,与预计相符;重组质粒对HEK293细胞无毒性作用;重组质粒在HEK393细胞中可表达出目的蛋白,分别在22.3、17.3、23.9和35.6 kDa处有目的蛋白NewⅠ、Omp25、NewⅡ和Ag85A的表达。三免后,重组质粒免疫大鼠产生的IgG水平均高于空载质粒组和PBS组;与PBS组相比,重组质粒免疫大鼠脾脏中CD4^(+)和CD8^(+)T淋巴细胞百分比均升高。研究表明,重组质粒GV658-COE能有效激发大鼠的体液免疫和细胞免疫反应,可成为预防牛布氏杆菌病和分枝杆菌病的候选疫苗。 展开更多
关键词 牛布氏杆菌病 牛分枝杆菌病 表位疫苗 Omp25 AG85A
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鸡传染性支气管炎和禽衣原体病的多表位DNA疫苗构建及其免疫原性研究
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作者 扈立伟 任君 +9 位作者 卢宝平 刘青 朱凡杰 顾天越 包利霞 刘婷婷 王鑫源 朱晓琛 张东超 金天明 《中国家禽》 北大核心 2024年第5期62-69,共8页
试验旨在设计和构建基于鸡传染性支气管炎病毒(IBV)S1蛋白和鹦鹉热衣原体(Cps)主要外膜蛋白(MOMP)的抗原多表位DNA疫苗,并分析其免疫原性。研究利用免疫信息学方法筛选出IBV S1蛋白和Cps MOMP蛋白的优势抗原表位,设计多表位基因M,并利... 试验旨在设计和构建基于鸡传染性支气管炎病毒(IBV)S1蛋白和鹦鹉热衣原体(Cps)主要外膜蛋白(MOMP)的抗原多表位DNA疫苗,并分析其免疫原性。研究利用免疫信息学方法筛选出IBV S1蛋白和Cps MOMP蛋白的优势抗原表位,设计多表位基因M,并利用多种生物信息学软件对其进行预测分析;将M基因、S1和MOMP串联基因分别连接至真核表达载体pEGFP-N1并转染至DF-1细胞,利用Western blot检测目标蛋白的表达情况。将上述重组质粒肌内注射7日龄雏鸡,四免后检测免疫鸡血清中特异性抗体IgG、细胞因子及T淋巴细胞含量。结果显示:构建的表位蛋白结构稳定、免疫原性较好且无副作用;重组质粒pEGFP-M和pEGFP-S1-MOMP与预期大小相符;与pEGFP-N1组和PBS组相比,四免后,pEGFP-M免疫组鸡血清中抗IBV IgG和抗Cps IgG抗体水平极显著升高(P<0.01),与pEGFP-S1-MOMP组相当;pEGFP-M组鸡血清中细胞因子γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)水平,T淋巴细胞抗原CD3+、CD4+和CD8+含量均极显著高于pEGFP-N1组和PBS组(P<0.01)。结果表明,构建的多表位DNA疫苗pEGFP-M能够激发鸡的体液免疫和细胞免疫反应,为研制同时预防鸡传染性支气管炎和禽衣原体病的多表位疫苗奠定基础。 展开更多
关键词 鸡传染性支气管炎病毒 鹦鹉热衣原体 S1基因 MOMP基因 表位疫苗
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巴氏杆菌对链霉素和磺胺耐药机制的研究 被引量:7
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作者 金天明 高丰 +1 位作者 佟庆彬 武迎红 《畜牧与兽医》 北大核心 2007年第2期5-7,共3页
根据巴氏杆菌的链霉素耐药基因StrA和磺胺耐药基因SulⅡ序列设计2对引物,以临床分离的4株禽源巴氏杆菌耐药株为模板,扩增出StrA、SulⅡ基因序列。经克隆和核苷酸序列测定,克隆的基因与文献报道的耐药基因序列(NC-001774)有较高的同源性(... 根据巴氏杆菌的链霉素耐药基因StrA和磺胺耐药基因SulⅡ序列设计2对引物,以临床分离的4株禽源巴氏杆菌耐药株为模板,扩增出StrA、SulⅡ基因序列。经克隆和核苷酸序列测定,克隆的基因与文献报道的耐药基因序列(NC-001774)有较高的同源性(≥98.9%);试验结果显示,耐药株巴氏杆菌对链霉素和磺胺耐药性的差异与StrA、SulⅡ基因突变有关(耐药性高的菌株基因突变率高)。试验中所有耐药菌均在StrA基因编码的第204位氨基酸处存在突变;所有耐药菌均在SulⅡ基因编码的第159,246,384,584,590,591,597,582位氨基酸处存在突变,上述突变基因可能是导致巴氏杆菌对链霉素和磺胺产生耐药性的主要因素。 展开更多
关键词 巴氏杆菌 StrA基因 SulⅡ基因 基因突变 耐药机制
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禽霍乱、大肠杆菌病和克雷伯菌病多价蜂胶三联灭活疫苗的研制 被引量:2
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作者 金天明 谷禹 +4 位作者 马文芝 周淑云 李富桂 郭亮 张建斌 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第8期99-100,共2页
利用禽巴氏杆菌C48-1、C48-2强毒株、禽大肠杆菌O78和O1血清型强毒株及克雷伯菌临床分离株制苗,通过疫苗对鸡的免疫效力试验、疫苗最小免疫剂量试验、疫苗产生坚强免疫力时间的测定、疫苗免疫期的测定和疫苗保存期的测定等,研制出禽霍... 利用禽巴氏杆菌C48-1、C48-2强毒株、禽大肠杆菌O78和O1血清型强毒株及克雷伯菌临床分离株制苗,通过疫苗对鸡的免疫效力试验、疫苗最小免疫剂量试验、疫苗产生坚强免疫力时间的测定、疫苗免疫期的测定和疫苗保存期的测定等,研制出禽霍乱、大肠杆菌病和克雷伯菌病多价蜂胶三联灭活疫苗。结果该三联灭活疫苗安全可靠,免疫原性良好,最小免疫剂量为0.5 mL/只,免疫7 d后产生坚强保护力,疫苗对上述疾病的保护率为100%,免疫期为6个月,4℃条件下保存期为9个月。 展开更多
关键词 禽霍乱 大肠杆菌病 克雷伯菌病 蜂胶 三联灭活疫苗
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巴氏杆菌磺胺耐药基因SulⅡ的克隆及其表达 被引量:1
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作者 金天明 高丰 +2 位作者 邓旭明 喻华英 周学章 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期539-541,共3页
根据巴氏杆菌磺胺耐药基因 Sul 序列设计引物 ,以临床分离的禽源巴氏杆菌磺胺耐药菌株为模板 ,扩增出禽源巴氏杆菌 Sul 的全长基因序列。经 T载体克隆和核苷酸序列测定 ,克隆的 Sul 基因与文献报道的同源性为98.9% ,有 9个碱基的差异 ,... 根据巴氏杆菌磺胺耐药基因 Sul 序列设计引物 ,以临床分离的禽源巴氏杆菌磺胺耐药菌株为模板 ,扩增出禽源巴氏杆菌 Sul 的全长基因序列。经 T载体克隆和核苷酸序列测定 ,克隆的 Sul 基因与文献报道的同源性为98.9% ,有 9个碱基的差异 ,但所编码的氨基酸没有改变。将 Sul 基因按正向的阅读框架与表达载体 p ET- 2 8c(+)连接 ,重组质粒经酶切鉴定正确后 ,经 IPTG诱导 ,SDS- PAGE检测 ,融合蛋白的表达产物占菌体总蛋白的 11% 。 展开更多
关键词 巴氏杆菌 磺胺耐药基因 Sul 克隆 基因表达
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髋关节置换手术与动力髋螺钉内固定治疗移位型股骨颈骨折的疗效比较 被引量:31
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作者 金天明 黄燕 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第23期112-116,共5页
目的比较髋关节置换手术与动力髋螺钉内固定手术治疗移位型股骨颈骨折患者的临床疗效。方法回顾性分析2014年1-2014年12月该院收治的100例移位型股骨颈骨折患者的临床资料,采用全髋关节置换手术治疗的63例患者设为观察组,采用动力髋螺... 目的比较髋关节置换手术与动力髋螺钉内固定手术治疗移位型股骨颈骨折患者的临床疗效。方法回顾性分析2014年1-2014年12月该院收治的100例移位型股骨颈骨折患者的临床资料,采用全髋关节置换手术治疗的63例患者设为观察组,采用动力髋螺钉内固定手术治疗的37例患者设为对照组。对比两组患者围手术期情况、术后1年和2年髋关节功能改良Aubigné-Postel评分、术后1和2年并发症发生情况、各项治疗费用。结果观察组的切口长度、术中出血量、输血量、手术时间和住院时间与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组与对照组术前、术后1年和2年的髋关节功能改良Aubigné-Postel评分比较,采用重复测量设计的方差分析:(1)两组的疼痛,活动范围,行走能力及总分比较,差异有统计学意义(P<0.05);(2)不同时间的疼痛、活动范围、行走能力及总分比较,差异无统计学意义(P>0.05);(3)两组的疼痛、活动范围、行走能力及总分比较,差异有统计学意义(P<0.05)。术后1年观察组和对照组患者的并发症总发生率分别为9.6%和18.9%,术后2年对照组和观察组患者的并发症发生率分别为25.6%和29.7%,差异无统计学意义(P>0.05)。观察组的初次手术费用高于对照组,再次手术费用和求医问药费用低于对照组,总费用稍高于对照组。结论采用髋关节置换手术治疗移位型股骨颈骨折较动力髋螺钉内固定治疗近期并发症发生率较低,远期临床疗效较佳,髋关节功能较好,但其治疗总费用稍高,患者可以根据自身情况选择。 展开更多
关键词 移位型股骨颈骨骨折 髋关节置换 动力髋螺钉内固定 治疗费用
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东北虎巴氏杆菌毒力基因toxA的克隆及同源性分析 被引量:2
7
作者 金天明 高丰 +1 位作者 佟庆彬 武迎红 《中国农学通报》 CSCD 2006年第9期14-16,共3页
通过对吉林市江南公园送检东北虎病例的病原分离鉴定,分离出多杀性巴氏杆菌,为进一步加强对该病的流行病学调查,并为准确诊断和治疗该病提供依据,实验对该株巴氏杆菌毒力基因toxA进行了研究。根据巴氏杆菌毒力基因toxA序列设计合成1对引... 通过对吉林市江南公园送检东北虎病例的病原分离鉴定,分离出多杀性巴氏杆菌,为进一步加强对该病的流行病学调查,并为准确诊断和治疗该病提供依据,实验对该株巴氏杆菌毒力基因toxA进行了研究。根据巴氏杆菌毒力基因toxA序列设计合成1对引物,以临床分离的虎源巴氏杆菌为模板,通过PCR技术,扩增出toxA基因片段。将长约526bp的toxA目的基因克隆到pGEM-T载体上,通过核苷酸序列测定,结果表明toxA基因序列与发表序列(X51512)的同源性为100%。流行病学调查显示,东北虎巴氏杆菌病的病原可能来自其食物(牛、羊肉等)。因此,在饲养过程中应加强检疫,切断巴氏杆菌病食源性传播途径。 展开更多
关键词 巴氏杆菌 toxA基因 克隆 同源性分析
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蛋鸡非典型新城疫并发产蛋下降综合症的诊断与防治 被引量:1
8
作者 金天明 成军 +2 位作者 李玉巍 陆慧君 耿百成 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2004年第12期39-40,共2页
通过对临床发病鸡群的流行病学、临床症状、剖检变化及实验室诊断获知新城疫血凝抑制抗体效价水平参差不齐 ,高的在 7~ 8 2以上 ,低的在 3 2以下 ;产蛋下降综合症血凝抑制价在 7~ 12 2之间 ,多数偏高且抗体离散度大 ,由此可以确诊为... 通过对临床发病鸡群的流行病学、临床症状、剖检变化及实验室诊断获知新城疫血凝抑制抗体效价水平参差不齐 ,高的在 7~ 8 2以上 ,低的在 3 2以下 ;产蛋下降综合症血凝抑制价在 7~ 12 2之间 ,多数偏高且抗体离散度大 ,由此可以确诊为该鸡场为蛋鸡非典型新城疫并发产蛋下降综合症混合感染。同时对发病原因进行分析并提出了对症治疗方案。 展开更多
关键词 产蛋下降综合症 非典型新城疫 蛋鸡 并发 诊断 血凝抑制 病鸡 发病 临床 对症治疗
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肉鸡克雷伯氏菌病的病原分离鉴定及其防治 被引量:10
9
作者 金天明 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2005年第11期46-47,共2页
克雷伯氏杆菌(klebsiella)既是一种人兽共患病病原,又是一种可引起多种动物患病的条件性致病菌.
关键词 肉鸡克雷伯氏菌病 病原分离鉴定 人兽共患病 病原 致病菌 肉鸡 发病情况 临床症状 病理变化 实验室检验
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东北虎巴氏杆菌病的病原分离鉴定及耐药性试验 被引量:1
10
作者 金天明 高丰 +1 位作者 佟庆彬 武迎红 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2007年第2期81-82,共2页
关键词 病原分离鉴定 巴氏杆菌病 耐药性试验 东北虎 出血性败血病 烈性传染病 器官发生 野生动物
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不同剂量牛肺表面活性剂治疗新生儿呼吸窘迫综合征的临床疗效观察
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作者 黄燕 金天明 《中国科技期刊数据库 医药》 2023年第12期0085-0087,共3页
探讨不同剂量牛肺表面活性物质治疗新生儿呼吸窘迫综合征的临床效果。方法 选取2018年3月至2021年3月我院收治的40例NRDS患者,随机分为实验组(20例)和对照组(20例)。他们接受了国产PS(Clisu)治疗。实验组首剂为大剂量70mg/kg,对照组首... 探讨不同剂量牛肺表面活性物质治疗新生儿呼吸窘迫综合征的临床效果。方法 选取2018年3月至2021年3月我院收治的40例NRDS患者,随机分为实验组(20例)和对照组(20例)。他们接受了国产PS(Clisu)治疗。实验组首剂为大剂量70mg/kg,对照组首剂为小剂量40mg/kg。比较两组患者服药后6小时的血气指标、氧合指数等相关参数。结果 药物治疗后,实验组患者的动脉氧分压、氧合指数均显着高于对照组患者,但住院时间、无创通气时间无显着差异的两组。结论 在临床上,大剂量牛肺表面活性剂在提高 PARS患者的各项血生化参数方面具有显著的疗效,具有较好的临床价值。 展开更多
关键词 牛肺表面活性剂 新生儿呼吸窘迫综合征 不同剂量 临床疗效
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巴氏杆菌耐药性检测芯片的研制 被引量:1
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作者 金天明 武迎红 +4 位作者 李向阳 刘海学 王学理 冯海华 高丰 《畜牧与兽医》 北大核心 2008年第9期74-75,共2页
根据磺胺耐药基因sulI、sulII,链霉素耐药基因strA、strBy,氯霉素耐药基因CatB2和四环素耐药基因TetG多态性位点和突变位点的基因序列,设计特异性探针,构建耐药基因检测芯片。利用该芯片对巴氏杆菌耐药菌株进行检测,得到的结果与药敏检... 根据磺胺耐药基因sulI、sulII,链霉素耐药基因strA、strBy,氯霉素耐药基因CatB2和四环素耐药基因TetG多态性位点和突变位点的基因序列,设计特异性探针,构建耐药基因检测芯片。利用该芯片对巴氏杆菌耐药菌株进行检测,得到的结果与药敏检测结果完全一致。该研究为巴氏杆菌耐药基因的高通量、并行化、自动化和快速检测奠定了基础。 展开更多
关键词 巴氏杆菌 耐药性 基因芯片
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河蟹土池生态育苗中敌害生物控制的实验室试验 被引量:1
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作者 金天明 李东芹 《动物医学进展》 CSCD 2003年第6期115-117,共3页
文章对河蟹土池生态育苗中的敌害生物的控制进行实验室试验研究 ,结果表明 :漂白粉可有效控制敌害生物 ,4mg/ L有效氯即可杀灭沙蚕幼体和桡足类 ;划蝽对敌百虫较敏感 ,浓度为 0 .8mg/ L 时 ,1 2 h后全部致死 ;甲醛浓度为 0 .8m L/ L 时 ... 文章对河蟹土池生态育苗中的敌害生物的控制进行实验室试验研究 ,结果表明 :漂白粉可有效控制敌害生物 ,4mg/ L有效氯即可杀灭沙蚕幼体和桡足类 ;划蝽对敌百虫较敏感 ,浓度为 0 .8mg/ L 时 ,1 2 h后全部致死 ;甲醛浓度为 0 .8m L/ L 时 ,1 2 h后全部致死划蝽 ;由小球藻配制的敌百虫液 ,浓度为 2 .0 mg/ L时 ,1 2 h后使划蝽全部致死 ,其杀死划蝽浓度明显高于由消毒海水配制的敌百虫液 ,说明小球藻液削弱敌百虫毒性效果明显。 展开更多
关键词 河蟹 池塘 生态育苗 敌害 生物控制 实验室试验
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腺病毒及腺病毒载体的研究进展 被引量:5
14
作者 金天明 武迎红 《天津农学院学报》 CAS 2007年第2期48-51,共4页
对腺病毒的结构、转录和复制特性进行了较全面的介绍,回顾了腺病毒载体的发展历程,同时对各种动物腺病毒的现状进行了描述。进一步分析了腺病毒载体易于构建和操作、宿主范围广、感染性强等特性的分子机制。因其具有广泛的组织亲和性,... 对腺病毒的结构、转录和复制特性进行了较全面的介绍,回顾了腺病毒载体的发展历程,同时对各种动物腺病毒的现状进行了描述。进一步分析了腺病毒载体易于构建和操作、宿主范围广、感染性强等特性的分子机制。因其具有广泛的组织亲和性,腺病毒成为表达和传递治疗基因的主要候选者。随着动物腺病毒载体的发展,它将在控制人和动物传染性疾病,特别是病毒性传染病以及人类的基因治疗中发挥越来越重要的作用。 展开更多
关键词 腺病毒 载体 结构
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雏鸡克雷伯氏菌病的诊断及其氢氧化铝灭活疫苗的安全性检测 被引量:4
15
作者 金天明 《畜牧与兽医》 北大核心 2005年第2期38-39,共2页
本文对临床采集的蛋鸡病料进行镜检、细菌分离培养、生化特性和致病性分析后, 确定为克雷伯氏菌感染; 同时制备了自家氢氧化铝灭活苗, 并对疫苗的安全性、保护性及免疫原性进行了检测, 结果表明: 利用当地发病鸡群分离的克雷伯氏杆菌制... 本文对临床采集的蛋鸡病料进行镜检、细菌分离培养、生化特性和致病性分析后, 确定为克雷伯氏菌感染; 同时制备了自家氢氧化铝灭活苗, 并对疫苗的安全性、保护性及免疫原性进行了检测, 结果表明: 利用当地发病鸡群分离的克雷伯氏杆菌制成的灭活苗性能良好, 使用安全可靠。 展开更多
关键词 克雷伯氏杆菌 分离鉴定 疫苗
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仔猪克雷伯氏菌病的病原分离鉴定及其疫苗制备 被引量:2
16
作者 金天明 高丰 +3 位作者 梁焕春 成军 耿百成 周艳红 《动物科学与动物医学》 2004年第7期48-49,共2页
克雷伯氏杆菌既是一种人兽共患病病原又是一种可引起多种动物患病的条件性致病菌。常可引起仔猪败血性克雷伯氏杆菌病,引起仔猪大量死亡,本文对临床采集的病料进行镜检、细菌分离培养、生化特性和致病性分析后分离出克雷伯氏菌;同时制... 克雷伯氏杆菌既是一种人兽共患病病原又是一种可引起多种动物患病的条件性致病菌。常可引起仔猪败血性克雷伯氏杆菌病,引起仔猪大量死亡,本文对临床采集的病料进行镜检、细菌分离培养、生化特性和致病性分析后分离出克雷伯氏菌;同时制备了自家氢氧化铝灭活苗,并对疫苗的安全性、保护性及免疫性进行了检测。结果表明:利用当地发病猪群分离的克雷伯氏杆菌制备的灭活苗性能良好使用安全可靠。 展开更多
关键词 克雷伯氏杆菌 疫苗 制备
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蛋鸡克雷伯氏菌的分离鉴定及其疫苗制备 被引量:1
17
作者 金天明 《中国兽医科技》 CSCD 北大核心 2004年第10期58-61,共4页
通过对临床采集的蛋鸡病料进行镜检、细菌分离培养、生化特性和致病性分析 ,分离出了克雷伯氏菌 ;同时制备了氢氧化铝灭活疫苗 ,并对疫苗的安全性、保护性及免疫性进行了检测。结果表明 ,利用当地发病鸡群分离的克雷伯氏菌制备的灭活疫... 通过对临床采集的蛋鸡病料进行镜检、细菌分离培养、生化特性和致病性分析 ,分离出了克雷伯氏菌 ;同时制备了氢氧化铝灭活疫苗 ,并对疫苗的安全性、保护性及免疫性进行了检测。结果表明 ,利用当地发病鸡群分离的克雷伯氏菌制备的灭活疫苗性能良好、使用安全可靠。 展开更多
关键词 克雷伯氏菌 疫苗 制备
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肉仔鸡非典型新城疫并发克雷伯氏菌病的诊治
18
作者 金天明 成军 +2 位作者 李玉巍 陆慧君 耿百成 《中国家禽》 北大核心 2004年第23期33-34,共2页
关键词 克雷伯氏菌病 非典型新城疫 肉仔鸡 鸡群 日龄 病鸡 诊治 发病 死亡 病情
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敌百虫对鲤鱼的毒性与pH值的关系初探 被引量:6
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作者 金天明 孙晓辉 《内蒙古民族大学学报(自然科学版)》 2002年第5期420-422,共3页
通过对敌百虫的毒性 ,毒理的分析 。
关键词 敌百虫 毒性 毒理
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西湖水库大银鱼的移殖增殖效果初探 被引量:1
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作者 金天明 申玉春 +1 位作者 陈国华 崔海鹏 《内蒙古民族大学学报》 1998年第3期36-38,共3页
本文探讨了西湖水库大银鱼的移值增值效果,并对大银鱼的人工繁殖技术和胚胎发育状况进行了初步研究。
关键词 大银鱼 移殖 增殖
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