慢性乙型肝炎肝纤维化患者外周血CD4^+CD25^+CD127^(low/-) T细胞与人肝星状细胞共培养的实验研究 被引量：4

1

作者 金晓芝 陈永平 +4 位作者 程瑗 潘黎静 潘陈为 戴志娟 叶超 《医学研究杂志》 2011年第8期70-73,共4页

目的探讨CD4+CD25+CD127low/-T细胞在慢性乙型病毒性肝炎肝纤维化发病机制中的作用。方法按肝纤维化S分期将慢性乙型肝炎肝纤维化患者分为S1~S2期6例和S3~S4期7例;采用磁激活细胞分选法(MACS)提取13例患者和6例健康对照者外周血CD4+CD25... 目的探讨CD4+CD25+CD127low/-T细胞在慢性乙型病毒性肝炎肝纤维化发病机制中的作用。方法按肝纤维化S分期将慢性乙型肝炎肝纤维化患者分为S1~S2期6例和S3~S4期7例;采用磁激活细胞分选法(MACS)提取13例患者和6例健康对照者外周血CD4+CD25+CD127low/-T细胞;分别将CD4+CD25+CD127low/-T细胞以不同比例与人肝星状细胞株(hepaticstellate cell,HSC)共培养5天,检测各组HSC的增殖及TGF-β1的分泌。结果 CD4+CD25+CD127low/-T细胞与HSC之比,当健康对照组和S1~S2期组为1.5∶1,S3~S4期组为2∶1时,HSC的增殖速度和TGF-β1分泌量均在同组不同比例中达最高值。各组同比例之间,当比例为1.5∶1时,健康对照组HSC的增殖速度显著高于S3~S4期组(P<0.05);在比例为1∶1~2∶1范围内,S1~S2期组和S3~S4期组HSC的TGF-β1分泌量远高于同比例健康对照组(P<0.05)。结论 CD4+CD25+CD127low/-T细胞可能通过自身细胞数量和功能的双重调节,影响肝星状细胞的增殖和分泌,参与了慢乙肝肝纤维化的进展。 展开更多

关键词 慢性乙型病毒性肝炎 肝纤维化 CD4+CD25+CD127low/- Treg MACS

下载PDF 职称材料

调节性T细胞对肝星状细胞增殖及透明质酸分泌的影响 被引量：3

2

作者 陆小蒟 陈永平 +7 位作者 阳韬 程瑗 金晓芝 申春燕 刘俊 王春莹 王晓东 林镯 《临床肝胆病杂志》 CAS 2012年第1期39-43,共5页

目的研究CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)对肝星状细胞(HSC)增殖及透明质酸(HA)分泌的影响。方法 MASC法分离慢性乙型肝炎患者血中CD4+CD25+Treg细胞;传代培养人HSC LX-2(空白组),不同比例CD4+CD25+Treg细胞与HSC直接共培养(共培养组),不同... 目的研究CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)对肝星状细胞(HSC)增殖及透明质酸(HA)分泌的影响。方法 MASC法分离慢性乙型肝炎患者血中CD4+CD25+Treg细胞;传代培养人HSC LX-2(空白组),不同比例CD4+CD25+Treg细胞与HSC直接共培养(共培养组),不同剂量的重组人转化生长因子(TGF)β1和HSC共培养(对照组);使用CCK-8法检测HSC增殖、放射免疫法检测HA分泌情况。组间比较采用单因素方差分析。结果共培养组与空白对照组(0.6623±0.02702)相比,在比例为2.5∶1时HSC增殖最为明显(0.6836±0.00560),比例为1∶1、5∶1及7.5∶1时HSC增殖均明显减少,且随着比例升高其增殖水平逐渐降低,各组与空白对照组相比有统计学差异(F=11.421,5.272,84.514,490.639;均P<0.05)。不同浓度TGFβ1对照组的HSC均比空白对照组(0.3883±0.00189)细胞增殖明显(0.6720±0.00753,0.6773±0.00585,0.5373±0.00387),并于8 ng/μl时增殖达到高峰,各亚组与空白组相比有统计学差异(F=196.175,799.624,236.461;P<0.01)。共培养组与对照组中细胞上清液中HA浓度与HSC增殖呈正相关(r=0.661、0.871,均P<0.01)。结论 CD4+CD25+Treg细胞促HSC增殖并促进其分泌HA,并在体外证实CD4+CD25+Treg细胞在慢性乙型肝炎进展过程中发挥重要作用。 展开更多

关键词 T淋巴细胞 肝星状细胞 透明质酸 细胞增殖

下载PDF 职称材料

β连环蛋白在大鼠肝纤维化模型中的动态表达及意义 被引量：2

3

作者 叶超 陈永平 +4 位作者 戴志娟 李文渊 林镯 程瑗 金晓芝 《临床肝胆病杂志》 CAS 2011年第3期261-264,共4页

目的研究wnt信号通路的核心因子β连环蛋白(β-catenin)在肝纤维化大鼠模型中的动态表达及意义。方法腹腔注射二甲基亚硝胺(DMN)诱导大鼠肝纤维化模型。分别在造模后4 d、1、2、4、6、8周等不同时间点测血清ALT、AST、TBil、Alb的变化,... 目的研究wnt信号通路的核心因子β连环蛋白(β-catenin)在肝纤维化大鼠模型中的动态表达及意义。方法腹腔注射二甲基亚硝胺(DMN)诱导大鼠肝纤维化模型。分别在造模后4 d、1、2、4、6、8周等不同时间点测血清ALT、AST、TBil、Alb的变化,采用HE及Masson染色观察肝组织学变化,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测不同时间点肝脏β-catenin mRNA的表达。结果正常肝组织中有少量β-catenin表达,随着肝纤维化的发展,β-catenin的表达量逐渐增加,至第4周达到高峰,第8周略有下降,但仍高于正常。β-catenin的表达量与肝脏纤维化分期(S0～S4)呈正相关(rs=0.926,P<0.001)。结论β-catenin可能参与肝纤维化的发生,并与纤维化的发展过程密切相关。 展开更多

关键词 Β连环素 肝硬化 实验性 信号传导 基因表达

下载PDF 职称材料

慢性乙型肝炎患者外周血CD4^+CD25^+调节性T细胞数量与肝脏疾病慢性化进展关系的研究 被引量：5

4

作者 程瑗 金晓芝 +6 位作者 叶超 陈永平 章圣辉 洪炜龙 谷甸娜 张磊 郑明华 《医学研究杂志》 2011年第7期50-55,共6页

目的探讨慢性乙型肝炎患者(chornic hepatitis B,CHB)外周血中CD4+CD 25+调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)的数量与肝脏慢性疾病进展的关系。方法流式细胞术检测抗病毒治疗后45例CHB患者(根据B超将其分为3组,其中B超提示肝脏无异... 目的探讨慢性乙型肝炎患者(chornic hepatitis B,CHB)外周血中CD4+CD 25+调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)的数量与肝脏慢性疾病进展的关系。方法流式细胞术检测抗病毒治疗后45例CHB患者(根据B超将其分为3组,其中B超提示肝脏无异常改变的单纯CHB组15例,提示慢性肝病改变的CHB慢性肝病组15例,提示肝硬化改变的CHB肝硬化组15例)与B超均提示肝脏无异常改变的15例慢性乙型肝炎病毒携带者(asymptomic HBV carriers,ASCs)以及15例健康成年人(normal control,NC)对照外周血中CD4+CD25+Treg的变化,并分析Treg与患者年龄,HBeAg定量,ALT、AST、TGF-β1水平的相关性。结果外周血中CD4+CD25+Treg占CD4+淋巴细胞的比例在抗病毒治疗后单纯CHB组为(4.03±1.36)%,与NC组(4.02±1.14)%相比差异无显著性(t=0.0223,P>0.05),与ASCs组(5.26±1.25)%相比显著减少(t=-2.2872,P<0.05);CHB慢性肝病组为(5.65±2.01)%,CHB肝硬化组为(5.32±1.47)%,与NC组、单纯CHB组比显著增高(t值分别为3.0351、3.0129、2.4269、2.4046,均P<0.05)与ASCs组相比差异无显著性(t值分别为0.7257、0.1174,均P>0.05);CHB慢性肝病、肝硬化组间相比差异无显著性(t=0.6083,P>0.05)。Treg的数量与年龄、AST、TGF-β1水平呈正相关(r分别为0.327、0.324、0.306,P分别为0.004、0.005、0.008)。结论 Treg在低水平AST时CHB患者外周血中的数量的增高对抗病毒治疗后的CHB患者更能反映其肝脏慢性损伤程度,Treg可能参与了慢性HBV感染后肝脏疾病慢性化进展的过程。 展开更多

关键词 慢性乙型病毒性肝炎 肝硬化CD4+CD25+调节性T细胞

下载PDF 职称材料

关于优化初中历史作业的思考

5

作者 金晓芝 《好日子》 2019年第23期00050-00050,共1页

历史教学一直都是我国教学的重点,学习历史不仅能够使学生们了解与接受历史文化,而且对学生们今后的成长和发展有所帮助。初中历史教学不仅仅要依靠教师们在课堂上的传授,也需要教师利用作业这一形式来让学生们更好的理解历史。但是在... 历史教学一直都是我国教学的重点,学习历史不仅能够使学生们了解与接受历史文化,而且对学生们今后的成长和发展有所帮助。初中历史教学不仅仅要依靠教师们在课堂上的传授,也需要教师利用作业这一形式来让学生们更好的理解历史。但是在当下还是有许多的教师对于历史作业的布置并不重视,大部分教师布置的历史作业不是预习就是一些背诵,这些作业对于学习历史并没有太大的帮助,甚至还会让学生们对于历史学习产生枯燥、无聊的心理。如何让作业更具创造性与灵活性,从而培养学生的创新与实践能力,成为摆在教学一线的历史教师们的重要课题。 展开更多

关键词 初中历史 历史作业 传统文化

下载PDF 职称材料

五种评分系统对慢性重型肝炎预后的预测价值比较及其临床意义 被引量：7

6

作者 叶超 陈永平 +4 位作者 金晓芝 郑明华 李文渊 肖二辉 程瑗 《中华传染病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期418-421,共4页

目的比较终末期肝病模型（MELD）评分、Child—Turcotte-Pugh（CTP）评分、Mayo评分、MES0指数和MELI）-Na评分系统预测慢性重型肝炎患者预后的价值。方法回顾性分析温州医学院附属第一医院213例慢性重型肝炎患者的临床资料，计算其MELD... 目的比较终末期肝病模型（MELD）评分、Child—Turcotte-Pugh（CTP）评分、Mayo评分、MES0指数和MELI）-Na评分系统预测慢性重型肝炎患者预后的价值。方法回顾性分析温州医学院附属第一医院213例慢性重型肝炎患者的临床资料，计算其MELD、CTP、Mayo、MESO和MELD-Na评分，比较各评分系统在死亡组和生存组中的差异，通过受试者工作特征（R0c）盐线，曲线下面积（Auc）及截断值进行比较分析。计量资料的比较使用成组t检验，各评分系统之间AUC的比较使用MEDCLAC软件。结果死亡组的MELD、CTP、Mayo、MESO、MELD-Na评分分别是（30．6±9．5）、（11．3±1．5）、（10．4±1．3）、（2．3士0．8）和（39．0±11．8）分，均高于生存组的（21．1±6．8）、（10．6±1．6）、（9．0±1．5）、（1.6±0．5）和（22．6±8．2）分，差异有统计学意义（t=7．31，t=3．10，t=6．70，t=7．90，t=10．21，均P〈0．01）；各评分系统的AUC分别为0．810、0．623、0．749、0．829和0．885；Youden指数分别为0．507、0．175、0．389、0．528和0．650。结论CTP评分判断慢性重型肝炎的预后尚不理想；Mayo评分具有一定的预测能力；MELD、MESO、MELD-Na评分在预测慢性重型肝炎预后方面具有肯定的临床应用价值，且MELD-Na评分优于MESO指数和MELD评分。 展开更多

关键词 肝炎 病毒性 人 危险性评估 ROC曲线 预后

原文传递

Notch／Jagged信号通路在肝纤维化大鼠模型中的动态表达及意义 被引量：5

7

作者 叶超 陈永平 +3 位作者 金晓芝 程瑗 戴志娟 林镯 《中华传染病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期81-86,共6页

目的探讨Notch／Jagged通路在肝纤维化大鼠模型中的动态表达及意义。方法健康雄性SD大鼠42只分为健康对照组和模型组，模型组再按造模后不同时间分为4d、1周、2周、4周、6周、8周等6个亚组，每组6只。模型组腹腔注射二甲基亚硝胺（DMN... 目的探讨Notch／Jagged通路在肝纤维化大鼠模型中的动态表达及意义。方法健康雄性SD大鼠42只分为健康对照组和模型组，模型组再按造模后不同时间分为4d、1周、2周、4周、6周、8周等6个亚组，每组6只。模型组腹腔注射二甲基亚硝胺（DMN）诱导大鼠肝纤维化模型，测定不同时间点血清ALT、AST、Alb和HA的变化；肝组织经HE、Masson染色，光学显微镜下观察；采用RT-PCR和免疫组织化学法检测不同时间点肝脏Notch-1、Jagged-1mRNA和蛋白表达。各组间均数比较采用单因素方差分析。结果DMN腹腔注射成功诱导大鼠肝纤维化模型，表现为造模4周后肝小叶结构破坏或消失，汇管区或中央静脉有较粗大的纤维条索包绕肝组织形成假小叶。ALT、AST、Alb、HA均于造模后4d开始上升，并于4周达到最高峰，且明显高于健康对照组（F值分别为83．10，104．63，54．24，203．81；均P〈0．05）。Notch-1、Jagged-1mRNA及蛋自在正常肝组织中仅少量表达，模型组表达显著增加（F值分别为282．44，369．14，374．17，256．14；均P〈0．01），且与肝纤维化分级和转化生长因子B1（TGFβ1）的表达量呈正相关（r分别为0．821，0．917，0．767，0．844；P％0．01）。结论Notch／Jagged信号通路可能参与肝纤维化的发生，并与肝纤维化的发展过程和严重程度密切相关。 展开更多

关键词 肝硬化 疾病模型 动物 大鼠 Sprague—Dawley 信号传导 转化生长因子Β1

原文传递

Epac在大鼠肝纤维化模型中的动态变化 被引量：2

8

作者 戴志娟 陈永平 +5 位作者 程瑗 叶超 金晓芝 林镯 张磊 谷甸娜 《中华传染病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期11-17,共7页

目的观察Epac在实验性大鼠肝纤维化过程中的动态变化。方法42只SD雄性大鼠分为对照组6只，模型组36只，模型组再按4d、1周、2周、4周、6周、8周分为6个亚组。采用腹腔注射二甲基亚硝胺建立大鼠肝纤维化模型。采用HE和Masson染色观察肝... 目的观察Epac在实验性大鼠肝纤维化过程中的动态变化。方法42只SD雄性大鼠分为对照组6只，模型组36只，模型组再按4d、1周、2周、4周、6周、8周分为6个亚组。采用腹腔注射二甲基亚硝胺建立大鼠肝纤维化模型。采用HE和Masson染色观察肝组织病理学变化，RT-PCR、免疫组织化学和Western印迹法分别检测Epacl、Epac2及TGFβI mRNA和蛋白在造模过程中的动态变化及肝组织中的定位。统计学处理采用单因素方差分析、LSD-t检验、Dunnett T3检验和Pearson直线相关分析。结果成功建立大鼠肝纤维化模型。对照组肝组织Epacl（0．03128±0．00896）和Epac2（O．03443±0．00245）蛋白主要表达于肝细胞胞质。Epacl在造模后4d（O．02397±0．00381）、1周（O．01581士0．00248）表达下降，2周后开始升高，6周时达高峰，为0．03954±0．00143，与对照组相比，差异有统计学意义（t-5．47、11．58、-6．18，均P〈0．05）。Epac2表达水平在模型组均下降，4周时达最低水平，为0．01121±0．00132，与对照组相比，差异有统计学意义（T=24．50，P％0．05）。TGFβl在模型组表达增加，4周时最明显，为0．01130±0．00103，与对照组的0．00208±0．00018相比，差异有统计学意义（t=23．36，P〈O．05）。Epacl、Epac2和TG即1mRNA的变化趋势与蛋白水平变化基本一致。相关分析显示，Epacl蛋白水平与肝纤维化病程呈正相关（rs=0．703，P〈0．01），而Epac2蛋白水平与肝纤维化病程呈负相关（rx=0．409，P〈O．05）。结论Epacl在肝纤维化形成过程中呈先下降后升高趋势，Epac2呈持续下降趋势；Epac可能参与了肝纤维化的发生发展过程。 展开更多

关键词 二甲基亚硝胺 肝纤维化 Epact转化生长因子βl 疾病模型 动物

原文传递

过氧化物酶体增殖因子活化受体-γ和脂肪酸结合蛋白在大鼠肝纤维化模型中的表达 被引量：1

9

作者 卢洁 陈永平 +4 位作者 叶超 林镯 戴志娟 金晓芝 陈瑗 《中华传染病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期395-397,共3页

我国是慢性病毒性肝炎高发国家,肝纤维化是各种慢性肝病向肝硬化发展所共有的病理过程.脂质过氧化损伤是肝纤维化形成过程中的重要原因之一.过氧化物酶体增殖因子活化受体-γ（PPAR-γ）属于核激素受体超家族的成员,在肝纤维化中参与脂... 我国是慢性病毒性肝炎高发国家,肝纤维化是各种慢性肝病向肝硬化发展所共有的病理过程.脂质过氧化损伤是肝纤维化形成过程中的重要原因之一.过氧化物酶体增殖因子活化受体-γ（PPAR-γ）属于核激素受体超家族的成员,在肝纤维化中参与脂质过氧化损伤过程,脂肪酸结合蛋白（L-FABP）作为PPAR-γ配体之一,参与脂肪酸氧化过程.本研究通过建立肝纤维化模型,检测PPAR-γ和L-FABP的变化水平,以进一步明确肝纤维化中,脂质过氧化损伤相关因子的作用. 展开更多

关键词 过氧化物酶体增殖因子活化受体 大鼠肝纤维化模型 脂肪酸结合蛋白 脂质过氧化损伤 PPAR-γ 慢性病毒性肝炎 肝纤维化形成 L-FABP

原文传递

CD4^＋CD25^＋CD127^dim/-调节性T淋巴细胞对肝星状细胞增殖及功能的影响

10

作者 陈永平 程瑗 +4 位作者 金晓芝 阳韬 王春莹 刘俊 郑明华 《中华传染病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期529-533,共5页

目的了解CD4^＋CD25^＋CD127^dim/-调节性T淋巴细胞在体外对肝星状细胞（HSC）增殖以及功能的影响，初步探讨调节性T淋巴细胞促肝纤维化的机制。方法传代培养HSC LX-2，将免疫磁珠细胞分选（MASC）法分离所得慢性乙型肝炎患者调节性T淋... 目的了解CD4^＋CD25^＋CD127^dim/-调节性T淋巴细胞在体外对肝星状细胞（HSC）增殖以及功能的影响，初步探讨调节性T淋巴细胞促肝纤维化的机制。方法传代培养HSC LX-2，将免疫磁珠细胞分选（MASC）法分离所得慢性乙型肝炎患者调节性T淋巴细胞与HSC LX-2按不同方式共培养5d，以单独培养的HSC作为对照，细胞计数试剂盒-8（CCK-8）法检测共培养HSC增殖情况，ELISA法检测上清液中转化生长因子（TGF）β1含量，放射免疫法检测HSC分泌HA、PCⅢ水平。统计学处理采用LSD-t检验。结果5例调节性T淋巴细胞与HSC比例为1．5：1时HSC增殖最为明显，10例直接接触共培养与使用Transwell系统共培养调节性T淋巴细胞与HSC吸光度值分别为（0．713±0．032）、（0．735±0．028）cpm，均较对照组的（0．677±0．029）cpm增殖明显（t=5．4003，8．7878；均P〈0．01）。10例直接接触共培养与Transwell组细胞上清液中TGFCβ1浓度分别为（781．59±76．45）、（813．53±60．62）pg／mL，显著高于对照组的（722．51±59．66）pg／mL（t=4．0014，6．1653；均P〈0．01）；HA浓度分别为（433．57±27．90）、（445．40±23．73）ng／mL，显著高于对照组的（415．83±19．44）ng／mL（t=3．3124，5．5231；均P〈0．01）；PCⅢ浓度分别为（21．93±1．71）、（23．12±1．87）ng／mL，显著高于对照组的（20．10±1．49）ng／mL（t=4．8082，7．9436；均P〈0．01）。且Transwell组各项结果均显著高于直接接触组（t=3．3875，2．1639，2．2107，3．1354；均P〈0．05）。结论CD4^＋CD25^＋CD127^dim/-调节性T淋巴细胞可促进共培养的HSC增殖及其HA、pCⅢ的分泌。体外实验证明，CD4^＋CD25^＋CD127^dim/-调节性T淋巴细胞具有促进肝纤维化的重要作用。 展开更多

关键词 CD4阳性T淋巴细胞 受体 白细胞介素7 白细胞介素2受体α亚单位 肝硬化 星形细胞 细胞 培养的 转化生长因子β1

原文传递

非酒精性单纯性脂肪肝患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞数量变化及临床意义 被引量：7

11

作者 程瑗 陈永平 +3 位作者 金晓芝 戴志娟 叶超 章圣辉 《中华传染病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期43-47,共5页

目的探索非酒精性单纯性脂肪肝（NAFL）患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞（Treg）数量变化与临床意义。方法流式细胞术检测50例NAFL患者以及50例健康对照者外周血CD4＋CD25＋Treg的变化，采用成组t检验或Mann-WhitneyU检验及Spearman... 目的探索非酒精性单纯性脂肪肝（NAFL）患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞（Treg）数量变化与临床意义。方法流式细胞术检测50例NAFL患者以及50例健康对照者外周血CD4＋CD25＋Treg的变化，采用成组t检验或Mann-WhitneyU检验及Spearman秩相关检验进行统计学分析。结果NAFL患者外周血CD4＋CD25＋Treg占CD4＋T淋巴细胞的比例为（5．39±1．94）％，高于健康对照者的（4．21±1．52）％，差异有统计学意义（t=3．385，P〈O．01）。Treg数量与三酰甘油（TG）、体质指数（BMI）水平呈正相关（r=0．307、0．251，P=0．002、0．012），与高密度脂蛋白胆固醇（HDL—C）呈负相关（r=-0．306，P=0．002）。Treg在高BMI组、高TG组、低HDL，C组、高血压组及代谢综合征（MS）组升高（t=2．294、2．533、3．154、2．010、4．454，均P〈0．05），在高空腹血糖组差异无统计学意义（U=1143．500，P=0．471）。结论NAFL患者外周血Treg数量增加，可能是NAFL作为MS组分之一，与MS时机体处于慢性低度炎性反应状态所表现出的促炎与抗炎平衡紊乱有关。 展开更多

关键词 脂肪肝 代谢综合征 CD4阳性T淋巴细胞

原文传递