目的：获得抗人视网膜母细胞瘤（RB）单克隆抗体轻链可变区基因序列，为进一步构建抗RB基因工程抗体奠定基础。方法：用扩增小鼠κ轻链可变区基因的一对引物，从分泌抗人视网膜母细胞瘤单克隆抗体的杂交瘤细胞株3C6中提取细胞总RNA，经R...目的：获得抗人视网膜母细胞瘤（RB）单克隆抗体轻链可变区基因序列，为进一步构建抗RB基因工程抗体奠定基础。方法：用扩增小鼠κ轻链可变区基因的一对引物，从分泌抗人视网膜母细胞瘤单克隆抗体的杂交瘤细胞株3C6中提取细胞总RNA，经RT－PCR扩增出3C6VL的cDNA片段，并将其克隆人pGEM -T Easy测序载体，用双脱氧链终止法测定其核苷酸序列，并进行计算机分析。结果：抗人视网膜母细胞瘤单克隆抗体轻链可变区基因由321bp组成，编码了107氨基酸残基，含有4个框架区及3个抗原互补决定区，并含有抗体特性的两个半胱氨酸残基，在基因数据库（Gene Bank 2000,4)中，未发现相同的基因。结论：从分泌抗人视网膜母细胞瘤单克隆抗体杂交瘤细胞中成功克隆了抗人网膜母细胞瘤单克隆抗体轻链可变区基因，为抗RB基因工程抗体研究及新一代抗RB肿瘤导向药物的研究奠定了坚实的基础。展开更多
文摘目的：获得抗人视网膜母细胞瘤（RB）单克隆抗体轻链可变区基因序列，为进一步构建抗RB基因工程抗体奠定基础。方法：用扩增小鼠κ轻链可变区基因的一对引物，从分泌抗人视网膜母细胞瘤单克隆抗体的杂交瘤细胞株3C6中提取细胞总RNA，经RT－PCR扩增出3C6VL的cDNA片段，并将其克隆人pGEM -T Easy测序载体，用双脱氧链终止法测定其核苷酸序列，并进行计算机分析。结果：抗人视网膜母细胞瘤单克隆抗体轻链可变区基因由321bp组成，编码了107氨基酸残基，含有4个框架区及3个抗原互补决定区，并含有抗体特性的两个半胱氨酸残基，在基因数据库（Gene Bank 2000,4)中，未发现相同的基因。结论：从分泌抗人视网膜母细胞瘤单克隆抗体杂交瘤细胞中成功克隆了抗人网膜母细胞瘤单克隆抗体轻链可变区基因，为抗RB基因工程抗体研究及新一代抗RB肿瘤导向药物的研究奠定了坚实的基础。
