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猪圆环病毒3型TB GreenⅡ实时荧光定量PCR检测方法的建立和应用
1
作者 李鹏 孙延举 +6 位作者 王寅彪 金前跃 梁晓晓 银梅 王选年 刘兴友 王利平 《河南农业科学》 北大核心 2023年第3期135-142,共8页
为建立猪圆环病毒3型(Porcine circovirus 3,PCV3)快速、灵敏且特异的检测方法,针对PCV3全基因组的保守区域设计特异性引物,构建标准质粒,通过优化反应体系和反应程序,建立基于TB GreenⅡ的实时荧光定量PCR(qPCR)方法,并对其特异性、敏... 为建立猪圆环病毒3型(Porcine circovirus 3,PCV3)快速、灵敏且特异的检测方法,针对PCV3全基因组的保守区域设计特异性引物,构建标准质粒,通过优化反应体系和反应程序,建立基于TB GreenⅡ的实时荧光定量PCR(qPCR)方法,并对其特异性、敏感性、重复性和可行性进行验证。结果显示,建立的TB GreenⅡqPCR检测方法特异性良好,在4.74×10^(2)~4.74×10^(7)拷贝/μL的标准质粒间具有良好的线性关系(R^(2)=0.999)。建立检测方法的最低检出限为10拷贝/μL,与猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪细小病毒(PPV)和猪圆环病毒2型(PCV2)无交叉反应,组内变异系数为0.33%~0.62%,组间变异系数为0.40%~0.73%。对收集的132份临床样品进行检测,PCV3 TB GreenⅡqPCR方法检出率为9.10%(12/132),高于PCV3常规PCR方法的检出率(4.55%,6/132)。综上,建立的PCV3 TB GreenⅡqPCR检测方法具有良好的敏感性、特异性和重复性,可用于临床样品中PCV3感染的诊断、流行病学监测和实验室研究等。 展开更多
关键词 猪圆环病毒3型 TB GreenⅡ 实时荧光定量PCR 常规PCR 病毒检测
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犬多发性肥大细胞瘤病理学诊断与分析 被引量：1
2
作者 韩瑞芳 韩庆功 +7 位作者 银梅 刘学涵 潘耀谦 秦国富 陈文杰 张一帆 葛亚明 安志兴 《云南畜牧兽医》 2023年第4期37-39,共3页
犬肥大细胞瘤(Canine mast cell tumor,MCT)是起源于真皮组织肥大细胞的恶性肿瘤,最常见于躯干、四肢和头颈部。犬肥大细胞瘤的临床表现多样,其表面可能脱毛、溃疡、红斑、色素过度沉着。一例患犬通过临床症状检查、血常规、血液生化、C... 犬肥大细胞瘤(Canine mast cell tumor,MCT)是起源于真皮组织肥大细胞的恶性肿瘤,最常见于躯干、四肢和头颈部。犬肥大细胞瘤的临床表现多样,其表面可能脱毛、溃疡、红斑、色素过度沉着。一例患犬通过临床症状检查、血常规、血液生化、C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、X射线以及病理组织学观察,最终确诊为犬的多发性肥大细胞瘤。对该犬实施了肿瘤及周围健康组织切除手术,并建议术后进行化疗,为后续提高犬多发性肥大细胞瘤治疗和诊断水平提供参考。 展开更多
关键词 犬 多发性肥大细胞瘤 皮肤肿瘤
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一起鸡马立克氏病的诊断 被引量：5
3
作者 银梅 宁红梅 +3 位作者 陈桂香 逯艳云 王选年 王新华 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第10期211-213,共3页
2009年初,河南省某父母代肉种鸡场15周龄左右鸡出现疑似马立克氏病,患病鸡消瘦,鸡冠苍白,干缩,精神沉郁。剖检病理变化为肝脏、脾脏、肺脏、肾脏和心脏显著肿大,并有大小不等的灰白色结节;腺胃肿大,呈圆球状;胃壁增厚,胃黏膜有出血和溃... 2009年初,河南省某父母代肉种鸡场15周龄左右鸡出现疑似马立克氏病,患病鸡消瘦,鸡冠苍白,干缩,精神沉郁。剖检病理变化为肝脏、脾脏、肺脏、肾脏和心脏显著肿大,并有大小不等的灰白色结节;腺胃肿大,呈圆球状;胃壁增厚,胃黏膜有出血和溃疡灶。组织学病理变化为心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、腺胃、法氏囊、胸腺等组织中大量多形态肿瘤细胞呈弥散性浸润或灶状聚集,正常组织结构遭到破坏。琼脂扩散试验结果表明,马立克氏病呈阳性反应。根据临床症状、病理剖检、组织学病理变化和琼脂扩散试验结果,确诊该场发生的疾病是内脏型马立克氏病。 展开更多
关键词 马立克氏病 诊断 鸡
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关于我国家禽业保险现状的思考 被引量：5
4
作者 银梅 李建勋 陈鹏程 《中国家禽》 北大核心 2007年第7期4-6,共3页
我国家禽业的规模已位居世界第一,但我国家禽业发展仍没有摆脱各种风险的威胁,一旦有特殊事件发生,许多家禽养殖企业和农户将丧失再生产的能力。而家禽业保险却能对我国家禽业发展起到"助推剂"和"稳定器"的作用,为... 我国家禽业的规模已位居世界第一,但我国家禽业发展仍没有摆脱各种风险的威胁,一旦有特殊事件发生,许多家禽养殖企业和农户将丧失再生产的能力。而家禽业保险却能对我国家禽业发展起到"助推剂"和"稳定器"的作用,为实现家禽业稳定、可持续发展,保持农村经济繁荣,维护农民的根本利益提供了保障。因此,家禽业保险正越来越多的受到关注。 展开更多
关键词 家禽业 保险 市场经济条件 养殖企业 家禽产业 禽流感 再生产 水车
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产蛋鸡禽霍乱的诊治 被引量：2
5
作者 银梅 郑素玲 +1 位作者 陈桂香 曹娟 《中国家禽》 北大核心 2006年第18期59-59,共1页
1发病情况 2006年3月，新乡市某养鸡户产蛋高峰鸡突然发病，经诊断为禽霍乱。3月18日，天气突然降温，鸡群开始发病。当天即有12只死亡，第2天死亡43只，第3天死亡56只。第3天诊断为禽霍乱并采取了紧急防制措施，第5天死亡率开始下降... 1发病情况 2006年3月，新乡市某养鸡户产蛋高峰鸡突然发病，经诊断为禽霍乱。3月18日，天气突然降温，鸡群开始发病。当天即有12只死亡，第2天死亡43只，第3天死亡56只。第3天诊断为禽霍乱并采取了紧急防制措施，第5天死亡率开始下降，至发病后第15天鸡群基本恢复正常。本次疫情死亡及淘汰鸡共148只，产蛋率于第3天下降为53％，到治疗后15天产蛋率恢复到82％，但以后再未上升。 展开更多
关键词 禽霍乱 产蛋鸡 发病情况 诊治 死亡率 产蛋高峰 防制措施 产蛋率
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一例非典型猪瘟的诊断与防治 被引量：3
6
作者 银梅 哈斯通拉嘎 +2 位作者 郑素玲 陈桂香 朱彦彩 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2006年第22期5866-5866,共1页
介绍了非典型猪瘟的临床症状、剖检病变、实验室诊断以及防治措施。
关键词 非典型猪瘟 诊断 防治
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非典型猪瘟的免疫酶组织化学方法诊断 被引量：1
7
作者 银梅 郑素玲 +3 位作者 王选年 陈桂香 朱彦彩 吴艳云 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2007年第4期83-83,共1页
关键词 非典型猪瘟 组织化学方法 免疫酶 诊断 病理剖检变化 顽固性腹泻 食欲下降 呼吸困难
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非典型猪瘟的诊断与防治 被引量：1
8
作者 银梅 王选年 +1 位作者 陈桂香 徐之勇 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2007年第6期68-68,共1页
关键词 非典型猪瘟 防治 诊断 发病情况 药物治疗 养猪场 磺胺类 抗生素
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鸡马立克氏病病毒的分离与初步鉴定 被引量：4
9
作者 银梅 高金海 《动物医学进展》 CSCD 2005年第1期102-103,共2页
从鸡马立克氏病病鸡拔取羽毛根 ,经处理后接种于 4日龄鸡胚绒毛尿囊膜。盲传到第六代出现典型的马立克氏痘斑。用第7代鸡胚绒毛尿囊膜研磨液与MD阳性血清进行琼脂扩散试验 ,结果出现了明显的白色沉淀线。此结果表明已分离到马立克氏病毒。
关键词 马立克氏病 马立克氏病病毒 分离
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鸡新城疫病毒新乡株ND-XX10的分离与鉴定 被引量：1
10
作者 银梅 赵坤 +3 位作者 陈桂香 宁红梅 贾文科 王选年 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2011年第2期142-145,共4页
2010年初,已免疫过新城疫疫苗的新乡市某鸡场蛋鸡出现以消化道、呼吸道出血为主要症状的疑似新城疫病例。将病料经10日龄SPF鸡胚增殖分离病毒,命名为ND-XX10。提取其病毒基因组RNA,并以此为模板,RT-PCR扩增获得F基因主要功能区(1～631bp... 2010年初,已免疫过新城疫疫苗的新乡市某鸡场蛋鸡出现以消化道、呼吸道出血为主要症状的疑似新城疫病例。将病料经10日龄SPF鸡胚增殖分离病毒,命名为ND-XX10。提取其病毒基因组RNA,并以此为模板,RT-PCR扩增获得F基因主要功能区(1～631bp)片段并进行测序。结果显示,ND-XX10毒株F蛋白的裂解位点为112R-R-Q-K-R-F117,是典型强毒株氨基酸序列结构,第101位和121位氨基酸残基分别是K(赖氨酸)和V(缬氨酸),通过基因进化树分析,确定此分离毒株属于基因Ⅶe型。 展开更多
关键词 新城疫病毒 F基因 RT-PCR
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生猪保险的发展困境及对策解析 被引量：7
11
作者 银梅 李建勋 +1 位作者 方向阳 曲兴罡 《中国牧业通讯》 2008年第6期16-18,29,共4页
畜牧业发达与否是衡量农业现代化程度的重要标志之一。从发达国家的农业发展历程来看，畜牧业在农业总产值中的贡献率呈稳步增长的趋势。一般发达国家畜牧业产值占农业总产值的比重在50％以上，高的可达80％。而我国目前畜牧业产值占农... 畜牧业发达与否是衡量农业现代化程度的重要标志之一。从发达国家的农业发展历程来看，畜牧业在农业总产值中的贡献率呈稳步增长的趋势。一般发达国家畜牧业产值占农业总产值的比重在50％以上，高的可达80％。而我国目前畜牧业产值占农业总产值比重的35％左右。养猪业作为畜牧业的主要组成部分，是农村经济发展的重要产业。它不仅是农民进行产业结构调整、增加经济收入的重要来源，也是满足人们消费需求的保证。 展开更多
关键词 农业总产值 产业结构调整 解析 保险 生猪 农村经济发展 发达国家 农业现代化
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断奶仔猪多系统衰竭综合征 被引量：2
12
作者 银梅 唐海蓉 +2 位作者 陈桂香 王选年 王新华 《现代畜牧兽医》 2006年第12期58-61,共4页
关键词 断奶仔猪多系统衰竭综合征 北爱尔兰 PWMS 猪传染病 呼吸障碍 加拿大 西班牙 意大利
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伪狂犬病研究进展 被引量：2
13
作者 银梅 陈桂香 +2 位作者 王选年 唐海蓉 王新华 《河南科技学院学报》 2005年第3期43-45,共3页
伪狂犬病是多种家畜和野生动物的一种重要病毒性传染病,它一旦感染动物则终生带毒呈潜伏感染状态,给养殖业带来很大经济损失。该病在世界上分布广泛,并有不断蔓延扩大的趋势,各国学者不断对本病进行深入研究。本文就本病的病原学、诊断... 伪狂犬病是多种家畜和野生动物的一种重要病毒性传染病,它一旦感染动物则终生带毒呈潜伏感染状态,给养殖业带来很大经济损失。该病在世界上分布广泛,并有不断蔓延扩大的趋势,各国学者不断对本病进行深入研究。本文就本病的病原学、诊断方法、免疫与防制、免疫研究的前景等方面进行综述。 展开更多
关键词 伪狂犬病 病毒 家畜 野生动物 病原学 诊断方法
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全球化背景下的绿色家禽业发展 被引量：2
14
作者 银梅 王选年 +1 位作者 宁红梅 李建勋 《中国牧业通讯》 2009年第13期16-18,共3页
改革开放以来，我国畜牧业发展成就卓著，畜牧业产值在农业总产值中的比重不断加大。畜牧业的发展对畜产品加工、饲料、兽药等相关产业的带动作用明显。家禽业是畜牧业中发展较快的行业，已成为我国农村重要的经济支柱和农民致富的重要... 改革开放以来，我国畜牧业发展成就卓著，畜牧业产值在农业总产值中的比重不断加大。畜牧业的发展对畜产品加工、饲料、兽药等相关产业的带动作用明显。家禽业是畜牧业中发展较快的行业，已成为我国农村重要的经济支柱和农民致富的重要手段，也是建设现代农业的一个重要突破口。 展开更多
关键词 家禽业 全球化 农业总产值 畜产品加工 畜牧业 改革开放 牧业发展 相关产业
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鸡马立克氏病毒蛋白的分离与鉴定
15
作者 银梅 王选年 +2 位作者 陈桂香 钟华 孙瑞芹 《贵州农业科学》 CAS 2007年第5期85-86,共2页
鸡马立克氏病是一种高度接触性、致死性、恶性肿瘤性传染病,一旦发生,损失严重。为快速诊断此病,建立了一种应用SDS-PAGE电泳和Western-blot染色分离鉴定、纯化马立克氏病毒特异性抗原蛋白的方法,并获得了与MDV抗血清特异反应的抗原蛋... 鸡马立克氏病是一种高度接触性、致死性、恶性肿瘤性传染病,一旦发生,损失严重。为快速诊断此病,建立了一种应用SDS-PAGE电泳和Western-blot染色分离鉴定、纯化马立克氏病毒特异性抗原蛋白的方法,并获得了与MDV抗血清特异反应的抗原蛋白。为进一步制备抗MDV特异性单克隆抗体奠定基础。 展开更多
关键词 马立克氏病毒 SDS-PAGE WESTERN-BLOT 蛋白分离
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鸡肿瘤坏死因子的提取及其免疫活性的研究 被引量：1
16
作者 银梅 日穆德玛 王凤龙 《甘肃畜牧兽医》 2004年第6期13-16,共4页
应用卡介苗 (BCG)和大肠杆菌内毒素 (脂多糖 ,Lipopolysuccharide,LPS)在鸡体内诱导产生肿瘤坏死因子 (TumorNecrosisFactor,TNF) ,然后从血清、脾细胞、外周血白细胞提纯TNF ,并对其免疫活性 (对L92 9细胞的杀伤作用 )进行探讨 ,将其... 应用卡介苗 (BCG)和大肠杆菌内毒素 (脂多糖 ,Lipopolysuccharide,LPS)在鸡体内诱导产生肿瘤坏死因子 (TumorNecrosisFactor,TNF) ,然后从血清、脾细胞、外周血白细胞提纯TNF ,并对其免疫活性 (对L92 9细胞的杀伤作用 )进行探讨 ,将其结果绘出图像 ,并用方差分析法进行了数据处理。研究结果表明 ,从鸡体内可以提取TNF。血清TNF活性最强 ,其次为脾细胞TNF ,外周血白细胞TNF活性最弱。血清TNF经用SephadexG 2 0 0分离组分 ,第一组分活性为最强 ,但低于全组总活性。 展开更多
关键词 鸡 肿瘤坏死因子 提取技术 免疫活性
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鸡新城疫病毒(NDV-XX08)单克隆抗体的制备与鉴定
17
作者 银梅 孔令芸 +4 位作者 张秋雨 丰兰竹 周洁 岳锋 王选年 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2016年第2期3-5,8,共4页
本研究采用鸡胚繁殖NDV-XX08,差速离心法纯化NDV,用纯化的病毒免疫BALB/c小鼠。取免疫小鼠的脾细胞与NSO细胞进行融合,用间接ELISA和血凝抑制试验（HJ）进行筛选,挑选效价高的杂交瘤细胞进行克隆和亚克隆,建立阳性杂交瘤细胞株,最终得... 本研究采用鸡胚繁殖NDV-XX08,差速离心法纯化NDV,用纯化的病毒免疫BALB/c小鼠。取免疫小鼠的脾细胞与NSO细胞进行融合,用间接ELISA和血凝抑制试验（HJ）进行筛选,挑选效价高的杂交瘤细胞进行克隆和亚克隆,建立阳性杂交瘤细胞株,最终得到一株稳定分泌抗体的杂交瘤细胞,命名为4F12。采用体外细胞培养和体内诱生腹水的方法制备了其McAb。对获得的单克隆抗体采用ELISA,HI,Western-Blotting方法进行鉴定。杂交瘤细胞培养上清和腹水的ELISA效价分别为1：160和1：3.2×10~4。获得的单克隆抗体与NDV具有良好的特异性反应,与鸡胚阴性尿囊液、鸡正常组织、鸡[gG、鸡传染性囊病病毒、鸡传染性支气管炎病毒、禽流感检测抗原均无交叉反应性。HI试验表明,制备的单抗没有血凝抑制活性。Western-Blotting证明获得的单抗与新城疫病毒蛋白有特异性反应。经连续传代20次,冻存、复苏3次,4F12杂交瘤细胞株仍能稳定分泌抗体。 展开更多
关键词 鸡 新城疫病毒 单克隆抗体 Western-Blotting
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乌鸡转移因子和鸡肿瘤坏死因子对肿瘤细胞的杀伤活性比较
18
作者 银梅 王选年 +1 位作者 陈桂香 钟华 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2006年第12期2754-2755,共2页
从乌鸡脾脏提取转移因子(TF),从鸡血清分离纯化肿瘤坏死因子(TNF),将TF和TNF作用于L929细胞,检测L929细胞死亡率,比较TF和TNF对肿瘤细胞杀伤活性。结果表明:TF对L929细胞有一定杀伤作用,但杀伤活性明显弱于鸡血清TNF。
关键词 乌鸡转移因子 肿瘤坏死因子 肿瘤细胞 杀伤活性
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氯甲酚纳米乳消毒剂对真菌的杀菌作用
19
作者 银梅 张道亮 +6 位作者 孙延举 李香会 李怡颖 徐盼 薛梦晴 金梦云 杨雪峰 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2020年第10期18-23,37,共7页
【目的】研究氯甲酚纳米乳消毒剂(CND)对真菌的杀菌效果及其作用机理。【方法】以白色念珠菌为指示菌,分别利用营养肉汤稀释法、悬液定量杀菌试验法、物体表面消毒模拟现场试验法、扫描和透射电子显微镜观察法,研究CND的体外抗菌活性、... 【目的】研究氯甲酚纳米乳消毒剂(CND)对真菌的杀菌效果及其作用机理。【方法】以白色念珠菌为指示菌,分别利用营养肉汤稀释法、悬液定量杀菌试验法、物体表面消毒模拟现场试验法、扫描和透射电子显微镜观察法,研究CND的体外抗菌活性、杀菌效果、模拟现场消毒效果及对真菌超微结构的影响。【结果】CND对白色念珠菌的MIC和MBC均为3 mg/mL。对白色念珠菌的杀菌效果随着其体积分数的增大和作用时间的延长而增强,体积分数0.5%CND作用15 min、0.6%CND作用10 min和0.8%CND作用5 min时,消毒合格;0.8%和1.0%CND分别作用10和5 min时,杀菌率均为100%。体积分数0.2%和0.5%CND的杀菌率极显著高于相同体积分数的氯甲酚溶液(P<0.01),二者体积分数为1.0%时差异不显著(P>0.05)。经体积分数0.8%CND作用10 min后,扫描电镜下白色念珠菌表面粗糙不平,皱褶明显,部分菌体表面出现裂缝;透射电镜下菌体形状发生改变,细胞壁变薄,且部分细胞壁局部有断裂或破损,部分真菌的细胞膜和细胞核边界不清,结构模糊,多数真菌的细胞质内部构造不清,不同真菌之间的胞浆内电子密度不同。【结论】CND对真菌的杀菌作用强,并能使白色念珠菌的超微结构发生改变。 展开更多
关键词 氯甲酚纳米乳 消毒剂 白色念珠菌 杀菌作用 超微结构
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鸡肿瘤坏死因子的分离纯化样品和未分离纯化样品免疫活性比较 被引量：1
20
作者 银梅 《上海畜牧兽医通讯》 2005年第1期26-27,共2页
在鸡体内诱导产生肿瘤坏死因子 ,取血清、外周白细胞及脾细胞样品 ,然后分别取一定量样品用硫酸铵盐析法和葡聚糖凝胶G - 2 0 0柱层析法进行分离纯化。再将分离纯化的样品和未分离纯化的样品分别作用于L92 9细胞 ,检测细胞死亡率。结果... 在鸡体内诱导产生肿瘤坏死因子 ,取血清、外周白细胞及脾细胞样品 ,然后分别取一定量样品用硫酸铵盐析法和葡聚糖凝胶G - 2 0 0柱层析法进行分离纯化。再将分离纯化的样品和未分离纯化的样品分别作用于L92 9细胞 ,检测细胞死亡率。结果表明分离纯化的样品活性高于未分离纯化的样品活性 ,这种纯化方法能提高鸡TNF的纯度和活性。 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子 免疫活性 分离纯化 外周 法能 TNF 体内 性比 鸡体 样品
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