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基于微流控芯片评估富血小板血浆促进子宫内膜细胞的增殖
1
作者 闻哲嘉 吕芳 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第10期2091-2096,共6页
背景:富血小板血浆可促进薄型子宫内膜细胞的增殖,但存在剂量难以控制、取样困难等问题。微流控芯片具有高通量、低消耗、操作简便等优点,为模拟子宫内膜细胞在体微环境提供了新途径。目的:利用三通道微流控芯片构建富血小板血浆促进子... 背景:富血小板血浆可促进薄型子宫内膜细胞的增殖,但存在剂量难以控制、取样困难等问题。微流控芯片具有高通量、低消耗、操作简便等优点,为模拟子宫内膜细胞在体微环境提供了新途径。目的:利用三通道微流控芯片构建富血小板血浆促进子宫内膜细胞增殖的研究模型。方法:从1名女性外周静脉血中提取富血小板血浆。采用含不同浓度[0%(对照),0.5%,1%,2%]富血小板血浆的无血清细胞培养基培养人子宫内膜间质细胞,采用划痕实验检测细胞迁移,CCK-8法检测细胞增殖。利用聚二甲基硅氧烷胶制备微流控芯片,该微流控芯片设计有3个通道,中间通道为细胞外基质水凝胶通道,左右两侧分别为人子宫内膜间质细胞及富血小板血浆通道,3个通道之间保存有可以相互沟通以及实现物质交换的面积,实验组两侧通道分别加入人子宫内膜间质细胞(绿色荧光蛋白GFP标记)和含0.5%富血小板血浆的无血清培养基,对照组两侧通道分别加入人子宫内膜间质细胞(绿色荧光蛋白GFP标记)和无血清细胞培养基,共培养48 h后,采用Ki67免疫荧光染色观察细胞增殖与迁移。结果与结论:(1)细胞划痕实验和CCK-8检测结果显示,与对照组相比,0.5%,1%,2%浓度的富血小板血浆可促进人子宫内膜间质细胞的迁移与增殖(P <0.05),并且0.5%浓度富血小板血浆的促进细胞迁移与增殖作用强于其他2个浓度(P <0.05);(2)Ki67免疫荧光染色结果显示,与对照组相比,实验组人子宫内膜间质细胞的增殖和迁移能力更强;(3)实验证实通过三通道微流控芯片可以模拟子宫内膜细胞的微环境,同时利用该系统验证了富血小板血浆可显著促进子宫内膜间质细胞的增殖与迁移。 展开更多
关键词 微流控芯片 富血小板血浆 子宫内膜间质细胞 子宫内膜增殖 迁移 细胞外基质 薄型子宫内膜 子宫内膜相关疾病
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妊娠前应激暴露对小鼠后续妊娠的影响
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作者 王欣 刘琳 +3 位作者 闻哲嘉 刘春玲 张弘 吕芳 《中华临床医师杂志（电子版）》 CAS 北大核心 2023年第4期431-437,共7页
目的探讨给予糖皮质激素作为应激因素对小鼠后续妊娠结局的影响及可能机制。方法将40只BALB/C雌鼠随机分为2组:正常对照组和实验组,实验组小鼠腹腔注射20 mg/kg/d皮质酮(CORT),连续处理24天后,与对照组比较应激相关指标变化。应激小鼠... 目的探讨给予糖皮质激素作为应激因素对小鼠后续妊娠结局的影响及可能机制。方法将40只BALB/C雌鼠随机分为2组:正常对照组和实验组,实验组小鼠腹腔注射20 mg/kg/d皮质酮(CORT),连续处理24天后,与对照组比较应激相关指标变化。应激小鼠造模成功后,小鼠休息2周后合笼。观察比较2组小鼠妊娠结局相关指标并统计分析。收集妊娠E13.5~15.5天的胎盘组织,免疫组化检测皮质酮代谢基因糖皮质激素受体(GR)和血清/糖皮质激素诱导激酶1(SGK1)表达情况。结果CORT实验处理组小鼠与对照组比较,强迫游泳不动时间明显延长(P=0.004),血清CORT和促肾上腺皮质激素(ACTH)水平明显升高(P=0.048,P=0.040);实验组平均产仔量、仔鼠平均出生体重均显著降低(P=0.025,P=0.003),妊娠中期吸收胎比率显著增高(P<0.001)。免疫组化结果显示实验组蜕膜区和迷路区GR表达显著多于对照组(P=0.037,P=0.001);而蜕膜区SGK1阳性染色显著低于对照组(P=0.048)。结论通过腹腔注射CORT成功诱导小鼠应激模型,后续妊娠的应激小鼠吸收胎比率显著升高,产仔数量,仔鼠出生体重显著降低。妊娠前应激暴露引起后续不良妊娠结局,与后续妊娠中皮质酮代谢基因GR表达增多,以及胎盘蜕膜组织SGK1表达减少密切相关。本研究为妊娠前高糖皮质激素暴露对后续妊娠的影响提供了研究基础。 展开更多
关键词 应激 皮质酮 糖皮质激素受体 血清/糖皮质激素诱导激酶1 不良妊娠结局
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