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蔷薇红景天总黄酮提取物对Aβ_(25-35)诱导PC12细胞损伤的保护作用及其活性部位筛选
1
作者 刘忠毅 王启文 +3 位作者 阿孜古丽·阿里木 王晓梅 胡君萍 王新玲 《中南药学》 CAS 2024年第2期409-415,共7页
目的考察蔷薇红景天总黄酮提取物(TFE)对β淀粉样蛋白25-35(Aβ_(25-35))诱导的PC12细胞损伤的保护作用及其活性部位筛选。方法采用20μmol·L^(-1)Aβ_(25-35)诱导PC12细胞损伤,经AB-8大孔吸附树脂色谱法分离蔷薇红景天TFE,得水及... 目的考察蔷薇红景天总黄酮提取物(TFE)对β淀粉样蛋白25-35(Aβ_(25-35))诱导的PC12细胞损伤的保护作用及其活性部位筛选。方法采用20μmol·L^(-1)Aβ_(25-35)诱导PC12细胞损伤,经AB-8大孔吸附树脂色谱法分离蔷薇红景天TFE,得水及20%、40%、60%、80%、95%乙醇洗脱物(即TFE-0%、TFE-20%、TFE-40%、TFE-60%、TFE-80%和TFE-95%)。计算不同体积分数乙醇洗脱物浸膏得率(赋予0.3权重),紫外分光光度法检测不同体积分数乙醇洗脱物总黄酮含量(赋予0.7权重),综合评价不同体积分数乙醇洗脱物。MTT法检测不同体积分数乙醇洗脱物对损伤后PC12细胞活力的影响;采用倒置显微镜观察细胞形态;采用2,4-二硝基苯肼显色法检测乳酸脱氢酶(LDH)的活性;采用黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶(SOD)的含量;酶联免疫测定(ELISA)法分别检测细胞上清中白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、环氧合酶-2(COX-2)和白细胞介素-1β(IL-1β)的分泌水平。结果TFE-40%总黄酮浓度和浸膏得率的综合得分高于其他不同体积分数乙醇洗脱物。与空白组比较,模型组细胞间隙变大,数目减少,出现细胞碎片,突触明显减少,存活率和SOD水平明显降低(P<0.05),LDH水平明显升高(P<0.05);与模型组比较,TFE-40%、TFE-60%洗脱物和盐酸多奈哌齐组细胞形态均有一定程度改善,数目增多,突触增加,细胞形态较完整;TFE-40%、TFE-60%、TFE-80%及TFE-95%组的细胞上清液中IL-6、TNF-α、COX-2和IL-1β的水平均明显降低(P<0.05)。结论蔷薇红景天TFE-40%洗脱物对Aβ_(25-35)诱导的PC12细胞损伤具有较好保护作用,为最佳活性部位,其机制可能与拮抗Aβ_(25-35)的神经毒性和抑制细胞炎症的发生有关。 展开更多
关键词 蔷薇红景天 总黄酮 PC12细胞 保护作用 活性部位
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蔷薇红景天总黄酮对Aβ_(25-35)诱导HT22细胞损伤的保护作用 被引量：3
2
作者 马俊杰 阿孜古丽·阿里木 +4 位作者 王启文 穆巴热科·吾普尔 王晓梅 胡君萍 王新玲 《食品安全质量检测学报》 CAS 北大核心 2021年第23期9211-9219,共9页
目的探讨蔷薇红景天总黄酮提取物(total flavonoids extract,TFE)、纯化物(total flavonoids purification,TFP)及其活性成分草质素对β-淀粉样蛋白25-35(amyloid β-protein 25-35,Aβ_(25-35))诱导的小鼠海马神经元(hippocampal neuro... 目的探讨蔷薇红景天总黄酮提取物(total flavonoids extract,TFE)、纯化物(total flavonoids purification,TFP)及其活性成分草质素对β-淀粉样蛋白25-35(amyloid β-protein 25-35,Aβ_(25-35))诱导的小鼠海马神经元(hippocampal neuronal cell line,HT22)细胞损伤的保护作用。方法采用Aβ_(25-35)诱导HT22细胞损伤,建立阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)炎症细胞模型,然后将HT22细胞分为空白组、炎症模型组(15μmol/L Aβ_(25-35))、阳性对照盐酸多奈哌齐组(12.5μmol/L)、不同质量浓度TFE(12.5、25、50μg/mL)和TFP(6.25、12.5、25μg/mL)干预组、草质素(5、10、20μmol/L)干预组,采用倒置显微镜观察细胞形态;MTT法测定HT22细胞存活率;采用2,4-二硝基苯肼显色法检测乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)的活性;采用黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的含量;膜联蛋白U-异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)/碘化丙啶(propidium iodide,PI)双染色法检测细胞凋亡;酶联免疫法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测细胞培养液上清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)的水平。结果与空白组比较,模型组神经元细胞变圆,细胞核皱缩,数量减少,细胞间隙增大,存活率显著下降(P<0.05),细胞凋亡率显著提高(P<0.05);与模型组比较,蔷薇红景天TFE、TFP和草质素组的高、中、低剂量组均能改善细胞形态,减少细胞受损,提高细胞存活率,显著降低细胞培养液上清中TNF-α、IL-1β、IL-6和COX-2的水平(P<0.05),且成剂量依赖性。结论蔷薇红景天TFE和TFP及其活性成分草质素对Aβ_(25-35)诱导HT22细胞损伤具有较好保护作用,其机制可能与拮抗Aβ_(25-35)的细胞毒性、保护神经元、抑制HT22细胞炎症的发生有关。 展开更多
关键词 蔷薇红景天 总黄酮 Β-淀粉样蛋白25-35 小鼠海马神经元细胞 抗炎作用
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高效液相色谱结合Box-Behnken响应面法优选新疆鼠尾草根萜类成分提取纯化工艺 被引量：5
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作者 阿孜古丽·阿里木 王启文 +4 位作者 刘阳 马俊杰 王晓梅 胡君萍 王新玲 《中国医院药学杂志》 CAS 北大核心 2023年第8期855-862,共8页
目的:优化新疆鼠尾草根萜类成分的提取纯化工艺。方法:建立能同时测定新疆鼠尾草根中6,7-去氢罗列酮、齐墩果酸和熊果酸3个萜类成分质量分数的HPLC方法,以3个成分的质量分数为指标,在单因素试验基础上,用Box-Behnken响应面法设计分析分... 目的:优化新疆鼠尾草根萜类成分的提取纯化工艺。方法:建立能同时测定新疆鼠尾草根中6,7-去氢罗列酮、齐墩果酸和熊果酸3个萜类成分质量分数的HPLC方法,以3个成分的质量分数为指标,在单因素试验基础上,用Box-Behnken响应面法设计分析分别考察提取温度、提取时间和料液比3个因素对萜类成分提取工艺的影响;考察萃取溶剂比例、萃取次数和振摇时间3个因素对萜类成分纯化工艺的影响。结果:最佳提取工艺为加20倍95%乙醇,85℃回流提取3次,每次2.5 h,在此条件下测得3个成分质量分数之和为4.13%;最佳纯化工艺为向提取物的水混悬液中加等比例的乙酸乙酯萃取5次,每次振摇24 h,在此条件下测得3个成分质量分数之和为21.53%,是提取物的5.19倍。结论:响应面法优选新疆鼠尾草根中萜类成分的提取纯化工艺合理,可为制备新疆鼠尾草根萜类成分提供参考,也为进一步开发利用新疆鼠尾草提供科学依据。 展开更多
关键词 新疆鼠尾草 Box-Behnken响应面法 萜类成分 提取纯化工艺
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