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用Tn5标记带发光酶基因的华癸根瘤菌(Mesorhizobium huakui)7653R质粒 被引量:2
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作者 郭先武 张忠明 +3 位作者 胡福荣 莫才清 李阜棣 陈华癸 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期147-150,共4页
在pRK2073的辅助作用下,通过三亲本接合转移,将Tn5(sacB-luxAB)插入华癸根瘤菌7653R菌株基因组中。将3200个Tn5标记菌株影印到含有8%蔗糖的YMA平板,检测这些菌株的发光酶活性和新霉素抗性。... 在pRK2073的辅助作用下,通过三亲本接合转移,将Tn5(sacB-luxAB)插入华癸根瘤菌7653R菌株基因组中。将3200个Tn5标记菌株影印到含有8%蔗糖的YMA平板,检测这些菌株的发光酶活性和新霉素抗性。共获得8个菌株,其选择标记消失。质粒检测发现其共生质粒有不同程度的缺失甚至消除。结瘤实验证明,所有共生质粒部分缺失(有的缺失达1/3)的菌株依然结瘤。经用luxAB探针的分子杂交证实,8个菌株中有3个对应的标记菌株其Tn5插在共生质粒上。 展开更多
关键词 华癸根瘤菌 共生质粒 分子标记 发光酶基因
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利用果类资源生产果醋的研究 被引量:7
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作者 陈华癸 阎淳泰 梁运详 《中国调味品》 CAS 北大核心 1990年第11期14-18,共5页
本文报告了利用果品加工上的下脚料及果品生产上的残次、落果等原料,并采用了固态发酵法生产食醋的工艺,并对工艺加以适当改造,用于果醋生产。简化了生产王艺、降低了生产投资和生产成本,对于合理利用资源,增加农民收入,繁荣市场,将起... 本文报告了利用果品加工上的下脚料及果品生产上的残次、落果等原料,并采用了固态发酵法生产食醋的工艺,并对工艺加以适当改造,用于果醋生产。简化了生产王艺、降低了生产投资和生产成本,对于合理利用资源,增加农民收入,繁荣市场,将起到一定的促进作用。报告中介绍了工艺流程,选用的菌种、果醋成品的成分含量。 展开更多
关键词 果醋 果类原料 资源利用 固态发酵
全文增补中
豆科植物与根瘤菌共生关系的形成与发展(在河南省绿肥学术讨论会上报告摘要)
3
作者 陈华癸 《河南农业科学》 1981年第8期1-2,共2页
我从豆科绿肥根瘤菌方而,讲讲近年来的进展.一、种植豆类作物不是一个单一的植物,而是种一个共生体.豆科植物在根部部形成根瘤,但只有根毛分泌物或根毛脱落物对某一种根瘤细菌的繁殖有利,某一种根瘤菌才会旺盛繁殖并侵入根毛.就是说豆... 我从豆科绿肥根瘤菌方而,讲讲近年来的进展.一、种植豆类作物不是一个单一的植物,而是种一个共生体.豆科植物在根部部形成根瘤,但只有根毛分泌物或根毛脱落物对某一种根瘤细菌的繁殖有利,某一种根瘤菌才会旺盛繁殖并侵入根毛.就是说豆类根际需要形成一个相应的生态环境,某种根瘤菌才能与某一特定豆类植物形成一个共生体.科学试验证明:利用根瘤菌接种。 展开更多
关键词 根瘤菌 细菌 根毛 分泌物 根瘤细菌 固氮菌 豆科植物 类菌体
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教学、科研、推广是农业院校的三项基本任务
4
作者 陈华癸 《高等农业教育》 1984年第1期38-40,共3页
党的十一届三中全会以来,由于采取了一系列正确的农村政策,极大地调动了农民的积极性、创造性,我国的农业出现了欣欣向荣的景象。近四年中,全国农业生产总值以每年递增5.6%的速度持续增长,连续三年创造了建国以来的最高产量。随着生产... 党的十一届三中全会以来,由于采取了一系列正确的农村政策,极大地调动了农民的积极性、创造性,我国的农业出现了欣欣向荣的景象。近四年中,全国农业生产总值以每年递增5.6%的速度持续增长,连续三年创造了建国以来的最高产量。随着生产的发展,出现了竞相学科学、用科学的科学种田热。 展开更多
关键词 农村政策 持续增长 十一届三中全会 高等农业院校 三年 技术推广工作 四年 综合度量 条件问题 粉碎“四人帮”
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改革农业教育的两点意见
5
作者 陈华癸 《高等农业教育》 1984年第2期31-35,共2页
为了促进改革,加速高等农业教育的发展,我们特邀请了部分专家、学者,以笔谈方式对高等农业教育提出了改革意见,现选择几篇摘登如下:
关键词 农业教育 促进改革 改革意见 本科教育 研究生教育 学生来源 农业中学 学士学位 教育体系 大学教师
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紫云英根瘤菌分子遗传学研究进展 被引量:10
6
作者 张学贤 李阜棣 +1 位作者 曹燕珍 陈华癸 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期77-83,共7页
总结了紫云英根瘤菌分子遗传学研究进展。这类根瘤菌的寄主范围较窄 ,早先根据互接种族概念将其定名为Rhizobiumastragali,后来定名为Rhizobiumhuakuii,最近并入Mesorhizobium属。对大量菌株进行的 16S和2 3SrDNAPCR RFLP分析和代表菌... 总结了紫云英根瘤菌分子遗传学研究进展。这类根瘤菌的寄主范围较窄 ,早先根据互接种族概念将其定名为Rhizobiumastragali,后来定名为Rhizobiumhuakuii,最近并入Mesorhizobium属。对大量菌株进行的 16S和2 3SrDNAPCR RFLP分析和代表菌株的部分 16SrDNA碱基测序 ,揭示了 7个不同基因型 ,表明这类菌具有遗传多样性 ,可以认为存在不同的种。它们都有质粒 ,数量 1~ 5个 ,因菌株而异 ,可分为不同质粒型 ,共生基因常定位在最大的一个质粒上 ,即共生质粒。它们的结瘤基因具有独特结构。采用包括nodA ,nodB ,nodC ,nodD的苜蓿根瘤菌突变株进行基因互补 ,从紫云英根瘤菌基因文库中获得了相应的转移接合子。这类根瘤菌的nodA与nodBC分隔约 2 2kb距离 ,不同于多数根瘤菌nodABC为一个操纵元的结构。紫云英根瘤菌结瘤基因的这种结构在 7个基因型的菌株中都是一致的 ,说明结瘤基因的保守性。 展开更多
关键词 紫云英 根瘤菌 中慢根瘤菌 分子遗传学
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紫云英根瘤菌基因文库的构建及含完整结瘤基因的重组质粒pRaZ15的分离 被引量:10
7
作者 张忠明 陈华癸 +1 位作者 李阜棣 范云六 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1991年第3期213-219,共7页
以紫云英根瘤菌菌株7653R为材料,制备总DNA,经EcoRI限制酶部分酶解,通过10—50%蔗糖梯度离心,分离到20—30 kb的DNA片段。利用能在革兰氏阴性菌中转移和复制的广谱奇主载体——pLAFR1质粒,构建了紫云英根瘤菌基因文库。通过与苜蓿根瘤菌... 以紫云英根瘤菌菌株7653R为材料,制备总DNA,经EcoRI限制酶部分酶解,通过10—50%蔗糖梯度离心,分离到20—30 kb的DNA片段。利用能在革兰氏阴性菌中转移和复制的广谱奇主载体——pLAFR1质粒,构建了紫云英根瘤菌基因文库。通过与苜蓿根瘤菌1021菌株中8.7kb的共同结瘤基因(作探针DNA)杂交,从基因文库中分离到紫云英根瘤菌共同结瘤基因片段。以紫云英根瘤菌不结瘤突变株7653R+1(7653R消除共生质粒)为受体、构建的7653R基因文库(E.coli C600)为供体,通过协助转移质粒pRK2013(LE392)进行三亲交配,在含四环素的根瘤菌合成培养基(SM)上选择接合转移子。将得到的所有接合转移子混合在一起接种植物,通过植物结瘤试验,分离到含紫云英根瘤菌结癌基因的重组质粒pRaZ15。将该质粒用EcoRI完全酶切,得到25kb左右的外源DNA片段,该片段携带完整的结瘤基因簇。 展开更多
关键词 紫云英根瘤菌 基因文库 结瘤基因
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外源质粒(基因)导入花生根瘤菌的行为分析 被引量:14
8
作者 朱光富 周俊初 陈华癸 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1996年第2期131-141,共11页
利用二亲本或三亲本杂交的方法,将携带有共生固氮基因的外源重组质粒或外源载体质粒导入慢生型花生根瘤菌[Bradyrhzobiumsp.(Arachis)]147-3和快生型花生根瘤菌[Rhizobiumsp.(Arac... 利用二亲本或三亲本杂交的方法,将携带有共生固氮基因的外源重组质粒或外源载体质粒导入慢生型花生根瘤菌[Bradyrhzobiumsp.(Arachis)]147-3和快生型花生根瘤菌[Rhizobiumsp.(Arachis)]85-7中。探讨了转移接合子中外源质粒在人工培养条件下和共生条件下的稳定性,发现外源质粒在花生根瘤菌中的稳定性与质粒的类型、受体菌的特性和环境条件有关。同时还探讨了外源质粒上的共生基因对受体菌147-3共生固氮效率的影响。结果表明,外源共生基因对共生固氮能力的影响是复杂的,既可以产生正效应,也可以产生负效应。 展开更多
关键词 花生 花生根瘤菌 外源质粒 共生固氮效率
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以绿荧光蛋白基因为报告基因的广宿主启动子探针载体的构建和应用 被引量:5
9
作者 马立新 史巧娟 +1 位作者 周俊初 陈华癸 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第5期408-415,共8页
将以绿荧光蛋白基因( gfp) 的cDNA 为模板,用人工合成引物经PCR 扩增获得的0-9kbDNA 片段克隆到表达载体pET11C 上构建成gfp 表达载体pHN115 。从pHN115 上切下的不含启动子,但保留了SD... 将以绿荧光蛋白基因( gfp) 的cDNA 为模板,用人工合成引物经PCR 扩增获得的0-9kbDNA 片段克隆到表达载体pET11C 上构建成gfp 表达载体pHN115 。从pHN115 上切下的不含启动子,但保留了SD 序列的gfp 基因经克隆载体SK( + ) 和pIJ2925 亚克隆后再克隆到广谱稳定性质粒pTR102 上构建成广谱、稳定、可视的启动子探针载体pHN127 。并用它从费氏中华根瘤菌HN01 的总DNA 中成功地钓出组成型和诱导型表达的启动子。 展开更多
关键词 绿荧光蛋白基因 中华根瘤菌 启动子 探针载体
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紫云英根瘤菌与豌豆根瘤菌共生质粒间的相互作用 被引量:3
10
作者 张学贤 周俊初 +2 位作者 张忠明 李阜棣 陈华癸 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1992年第2期175-181,共7页
将豌豆根瘤菌共生质粒pJB5JI导入紫云英根瘤菌含共生质粒的7653R菌株和消除了共生质粒的7653R+1菌株中。7653R+1接合子获得了在碗豆上结瘤的能力,7653R接合子却不能在豌豆上结瘤。从而揭示出紫云英根瘤菌的共生质粒能抑制导入的豌豆根... 将豌豆根瘤菌共生质粒pJB5JI导入紫云英根瘤菌含共生质粒的7653R菌株和消除了共生质粒的7653R+1菌株中。7653R+1接合子获得了在碗豆上结瘤的能力,7653R接合子却不能在豌豆上结瘤。从而揭示出紫云英根瘤菌的共生质粒能抑制导入的豌豆根瘤菌共生质粒pJB5JI功能的表达。同时pJB5JI的导入使7653R接合子在其正常宿主紫云英上的结瘤固氮能力较亲本7653R显著提高。试验同时考察了pJB5JI导入紫云英根瘤菌后的稳定性。 展开更多
关键词 紫云英 根瘤菌 共生质粒 豌豆
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高效固氮大豆根瘤菌中重组质粒pBj32H_2的物理图谱 被引量:2
11
作者 张忠明 莫才清 +2 位作者 沈辉 周俊初 陈华癸 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1992年第1期94-96,共3页
以在我国黑龙江地区广泛应用的慢生型大豆根瘤菌22—10为出发菌株,通过导入克隆有快生型大豆根瘤菌菌株B52的DNA片段的重组质粒pBj32H_2,构建了高效固氮大豆基因工程根瘤菌32.该菌株在黑龙江地区进行田间中试和大面积(15万亩)推广应用,... 以在我国黑龙江地区广泛应用的慢生型大豆根瘤菌22—10为出发菌株,通过导入克隆有快生型大豆根瘤菌菌株B52的DNA片段的重组质粒pBj32H_2,构建了高效固氮大豆基因工程根瘤菌32.该菌株在黑龙江地区进行田间中试和大面积(15万亩)推广应用,获得比出发菌株22—10增产大豆7.4%和8.5%的效果。为了研究pBj32H_2中所克隆基因的结构和功能,本工作对pBj32H_2进行了限制性内切酶图谱分析,确定了pBj32H_2中外源DNA片段的大小及EcoRⅠ、BglⅡ、XhoⅠ的酶切位点,建立了该片段的物理图谱。 展开更多
关键词 物理图谱 质粒 大豆根瘤菌 大豆
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紫云英根瘤菌共生基因分布及其共生效应的多样性 被引量:2
12
作者 邹向宏 李阜棣 +2 位作者 曹燕珍 陈文新 陈华癸 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 1997年第1期49-54,共6页
从同一植株不同根瘤分离40株紫云英根瘤菌,所有菌株对10种抗生素的抗药性测定表明,该群体分为22个抗药类群,质粒检测显示所有公离株都含有质粒,质粒数1~4条,用快生型大豆根瘤菌USDA205质粒作参考,估测质粒Mr分布范围为83~226MU... 从同一植株不同根瘤分离40株紫云英根瘤菌,所有菌株对10种抗生素的抗药性测定表明,该群体分为22个抗药类群,质粒检测显示所有公离株都含有质粒,质粒数1~4条,用快生型大豆根瘤菌USDA205质粒作参考,估测质粒Mr分布范围为83~226MU.根据图谱分析表明,该菌群可分为6个不同质粒型.各类型质粒通过与Dig-nodABC和Dig-nifHDK杂交,结果显示带有1条质粒的菌株其共生基因定位在染色体上.带有2条或2条以上质粒的菌株各拥有1条共生质粒,共生质粒Mr范围有差异,大约为117~220MU.研究结果也显示,不同质粒型的菌株其共生效应存在明显差异,其中第6质粒型的菌株共生固氮率最强,第1质粒型菌株共生固氮率较低.共生固氮能力最强的第6质粒型菌株,只占总菌数7.5%. 展开更多
关键词 紫云英根瘤菌 共生基因 共生效应
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紫云英根瘤菌寄主专性结瘤基因和固氮基因的鉴定 被引量:2
13
作者 张忠明 周俊初 陈华癸 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1989年第4期285-290,共6页
用植物筛选法从紫云英根瘤菌7653R基因文库中分离到能互补7653R+1(原菌株7653R消除共生质粒的突变株)共生缺陷功能的重组质粒pRaZ15。pRaZ15质粒克隆有紫云英根瘤菌共同结瘤基因簇。采用三亲交配—植物试验法,将pRaZ15质粒转移到豌豆根... 用植物筛选法从紫云英根瘤菌7653R基因文库中分离到能互补7653R+1(原菌株7653R消除共生质粒的突变株)共生缺陷功能的重组质粒pRaZ15。pRaZ15质粒克隆有紫云英根瘤菌共同结瘤基因簇。采用三亲交配—植物试验法,将pRaZ15质粒转移到豌豆根廇菌菌株T83K3和菜豆根瘤菌菌株3622—15中,用以回接紫云英植株,并在紫云英上结瘤,证实了pRaZ15质粒上克隆有紫云英根瘤菌寄主专性结瘤基因。将pRaZ15质粒再次转移到紫云英根瘤菌不结瘤突变株7653R+1中,回接紫云英植株,用乙炔还原法测定出所结根瘤的固氮酶活性。用α—^(32)p-dCTP标记克隆有肺炎克氏杆菌nif HDK基因的pSA30,以此作为探针,与pRaZ15质粒的EcoR1片段杂交,证实了紫云英根瘤菌nif HDK基因也存在于pRaZ15质粒上。 展开更多
关键词 紫云英 根瘤菌 固氮基因 结瘤基因
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导入外源DNA片段的花生根瘤菌高效基因工程菌株的构建 被引量:2
14
作者 李立家 周俊初 陈华癸 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第3期219-225,共7页
以柯斯质粒pLAFR1为载体先构建快生型花生根瘤菌85-7菌株总DNA的基因文库。在协助质粒pRK2013帮助下用此基因文库分别同菌株85-7和另一株慢生型花生根瘤菌菌株C02-5作三亲本杂交。转移接合子接种沙培条件... 以柯斯质粒pLAFR1为载体先构建快生型花生根瘤菌85-7菌株总DNA的基因文库。在协助质粒pRK2013帮助下用此基因文库分别同菌株85-7和另一株慢生型花生根瘤菌菌株C02-5作三亲本杂交。转移接合子接种沙培条件下生长的花生,通过结瘤试验初筛选和复筛选,共筛选出3株工程菌HN11、HN12(以85-7为受体)和HN13(以C02-5为受体)。其每植株根瘤的固氮酶活分别比出发菌株的提高302%(HN11)、356%(HN12)和284%(HN13);每植株干重分别比出发菌株的提高85%(HN11)、83%(HN12)和28%(HN13)。工程菌株的重组质粒酶切分析表明,除载体pLAFR1外还分别含有25kb(pHN11)、14kb(pHN12和18kb(pHN13)的外源片段。 展开更多
关键词 花生 根瘤菌 基因文库 外源DNA
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紫云英根瘤菌结瘤基因调控片段克隆和分析 被引量:1
15
作者 农广 张忠明 +1 位作者 胡福荣 陈华癸 《中山大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期73-77,共5页
通过对紫云英根瘤菌7653R及其Nod-突变株7653R-1侵染根毛试验证实,7653R菌株318×103bp大质粒决定早期结瘤功能,分子杂交结果显示,其nodDABC定位于该质粒上.将7653R菌株的大质粒DN... 通过对紫云英根瘤菌7653R及其Nod-突变株7653R-1侵染根毛试验证实,7653R菌株318×103bp大质粒决定早期结瘤功能,分子杂交结果显示,其nodDABC定位于该质粒上.将7653R菌株的大质粒DNA进行酶切并克隆到表达载体pMP220上,构建lacZ重组子文库,将lacZ重组子文库导入7653R菌株,在加有X-gal和种子浸提物的根瘤菌培养基上选择蓝色菌落.通过Miler试验测定它们的β-半乳糖苷酶活性,获得1株种子浸提物对其有诱导效应的菌株HN18,对该菌株所含的重组质粒pHN18进行nodDABC探针杂交,发现有1条1.7×103bp的阳性杂交带。 展开更多
关键词 紫云英根瘤菌 nod基因 分子杂交 结瘤基因 克隆
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紫云英根瘤菌5个互补结瘤菌株所分离到的重组质粒外源片段的酶切图谱 被引量:1
16
作者 农广 张忠明 +2 位作者 胡福荣 陈华癸 李立家 《武汉大学学报(自然科学版)》 CSCD 1995年第4期469-474,共6页
对来源于紫云英根瘤菌7653R总DNA基因文库的5个互补结瘤菌株所分离到的重组质粒pNR102,pNR103,pNR108,pNR203和pNR213,EcoRⅠ酶切表明它们分别携带有一个4.68,5.01,5.04... 对来源于紫云英根瘤菌7653R总DNA基因文库的5个互补结瘤菌株所分离到的重组质粒pNR102,pNR103,pNR108,pNR203和pNR213,EcoRⅠ酶切表明它们分别携带有一个4.68,5.01,5.04,5.10或9.38kb的外源DNA片段.选用11种内切酶进行单、双酶切分析,建立了重组质粒外源片段的酶切图谱,5个质粒都具有1.7kb的EcoRⅠ-BglⅡ片段和1.9kb的EcoRⅠ-SacⅠ片段. 展开更多
关键词 重组质粒 酶切图谱 根瘤菌 紫云英 结瘤菌
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高等农林院校本科生物系列课程教改设想 被引量:2
17
作者 李合生 陈华癸 《中国大学教学》 1996年第6期16-18,共3页
高等农林院校本科生物系列课程教改设想华中农业大学李合生,陈华癸一、面向21世纪的高等农林院校生物系列课程教学改革的重要意义科学家预言21世纪是生命科学的世纪。这就意味着现代生命科学在理论上将会出现巨大的飞跃,在农业、... 高等农林院校本科生物系列课程教改设想华中农业大学李合生,陈华癸一、面向21世纪的高等农林院校生物系列课程教学改革的重要意义科学家预言21世纪是生命科学的世纪。这就意味着现代生命科学在理论上将会出现巨大的飞跃,在农业、医学、工业和国防上,也将引起巨大的... 展开更多
关键词 高等农林院校 生物系列 选修课 课程教改 植物生理学 系列课程 动物生理学 实验课 生物化学 遗传学
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绿衣观音土曲的特征和制作工艺 被引量:4
18
作者 廖美德 陈华癸 许耀才 《湖北农学院学报》 1994年第2期61-63,共3页
绿衣观音土曲的特征和制作工艺廖美德,陈华癸,许耀才(湖北农学院农业工程系,湖北江陵431103)(华中农业大学土化系,武汉430072)绿衣观音土曲又名“绿衣小曲”、“绿曲”、“南曲”。是近年来在湖南常德地区、湖北江... 绿衣观音土曲的特征和制作工艺廖美德,陈华癸,许耀才(湖北农学院农业工程系,湖北江陵431103)(华中农业大学土化系,武汉430072)绿衣观音土曲又名“绿衣小曲”、“绿曲”、“南曲”。是近年来在湖南常德地区、湖北江汉平原和鄂东南地区普遍用来酿制小曲... 展开更多
关键词 绿衣观音土曲 工艺 制备 白酒 曲种
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21世纪农林本科生物系列课程改革的研究与实践(上) 被引量:3
19
作者 李合生 陈华癸 《中国农业教育》 2000年第4期19-22,共4页
关键词 生物系列 课程改革 农林本科 研究与实践 21世纪 系列课程 生物学素质 生物化学 普通生物学 课程体系
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紫云英根瘤菌由种子浸提物诱导的基因调控片段的克隆和分析
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作者 农广 张忠明 +1 位作者 胡福荣 陈华癸 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第3期225-228,共4页
The large plasmids of strain 7653R were digested with restriction enzyme EcoRI. Their DNA fragments were cloned into the expression vector pMP220 to construct a lacZ fusion pool, which were transferred into the recipi... The large plasmids of strain 7653R were digested with restriction enzyme EcoRI. Their DNA fragments were cloned into the expression vector pMP220 to construct a lacZ fusion pool, which were transferred into the recipient strain 7653R Tri-transconjugants were selected onto plates containing X-gal and seed extract Five blue colonies were assayed of their β-galactosidase activity after incubation with or without seed extract. A positive induced strain HN18 was obtained. Hybridization of nodDABC probe on the recombinant plasmid pHN18 showed a 1.7kb positive band.The evidence makes a deduction that the pHN18 containes a promoter of nod operon. 展开更多
关键词 紫云英根瘤菌 种子浸提物 DIG杂交 lacZ融合
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