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成骨细胞外泌体对前列腺癌细胞生物学特性的影响及潜在机制研究
1
作者 李京羿 陈家久 +1 位作者 李耀明 王洛夫 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期544-555,共12页
目的 研究成骨细胞外泌体对前列腺癌细胞生物学特性的影响和潜在的机制。方法 将人骨髓间充质干细胞诱导分化为成骨细胞,超速离心提取细胞培养基上清中的外泌体并鉴定。克隆形成试验分析成骨细胞外泌体对前列腺癌细胞增殖的影响。PCR芯... 目的 研究成骨细胞外泌体对前列腺癌细胞生物学特性的影响和潜在的机制。方法 将人骨髓间充质干细胞诱导分化为成骨细胞,超速离心提取细胞培养基上清中的外泌体并鉴定。克隆形成试验分析成骨细胞外泌体对前列腺癌细胞增殖的影响。PCR芯片分析外泌体处理后前列腺癌细胞中表达变化的miRNA。通过荧光标记实验证明成骨细胞和肿瘤细胞中存在miRNA传递。在细胞和动物水平研究关键miRNA对前列腺癌细胞生物学特性的影响。生信分析并实验验证关键miRNA的靶基因。结果 成功提取并鉴定了成骨细胞外泌体。相比于对照组,加入成骨细胞外泌体的前列腺癌细胞克隆形成能力明显增强(P<0.05)。PCR芯片筛选发现miR-223可能是其中的关键分子。膜交换实验显示成骨细胞与前列腺癌细胞存在膜交换,FAM标记miRNA显示miR-223能够在细胞间传递。功能实验表明,过表达miR-223能够增强前列腺癌细胞的增殖、抗凋亡和迁移侵袭能力(P<0.05)。生信分析提示WNT通路抑制蛋白APC可能是miR-223的靶基因,实验证实过表达miR-223能够降低前列腺癌细胞中APC的表达(P<0.05)。Rescue实验显示过表达APC能够逆转miR-223对前列腺癌细胞增殖、迁移、侵袭的促进作用。结论 成骨细胞外泌体是前列腺癌的促癌因子。外泌体中miR-223可能是其中的关键作用分子,其通过影响细胞中APC的表达发挥促癌作用。 展开更多
关键词 成骨细胞 外泌体 miR-223 APC 前列腺癌
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难治性抑郁症的非药物治疗研究进展 被引量：3
2
作者 康杰 郭晓蕊 +2 位作者 陈家久 陈冬 梁还乾 《武警医学》 CAS 2018年第10期990-994,共5页
抑郁症是一种高患病率、高致残率的严重精神疾患,主要表现为情绪低落、缺乏快感、思维迟缓及其他认知和躯体症状,可导致自杀行为并显著增加心血管疾病风险。其治疗方法主要包括药物治疗与非药物治疗,在过去10年中,抗抑郁药物的研究取得... 抑郁症是一种高患病率、高致残率的严重精神疾患,主要表现为情绪低落、缺乏快感、思维迟缓及其他认知和躯体症状,可导致自杀行为并显著增加心血管疾病风险。其治疗方法主要包括药物治疗与非药物治疗,在过去10年中,抗抑郁药物的研究取得了较为快速的发展。 展开更多
关键词 难治性抑郁症 电休克疗法 重复经颅磁刺激 深部脑刺激
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五苓散对颅脑创伤小鼠脑水肿及线粒体生物合成的影响 被引量：6
3
作者 孙晨岑 刘婷 陈家久 《解放军预防医学杂志》 CAS 2018年第2期194-197,共4页
目的探讨五苓散对颅脑创伤(TBI)小鼠脑水肿及线粒体生物合成的影响。方法将56只C57小鼠随机等分为7组,每组8只,包括对照组,轻、中、重度TBI组,以及轻度TBI加五苓散组、中度TBI加五苓散组、重度TBI加五苓散组。应用脑皮质撞击仪构建轻、... 目的探讨五苓散对颅脑创伤(TBI)小鼠脑水肿及线粒体生物合成的影响。方法将56只C57小鼠随机等分为7组,每组8只,包括对照组,轻、中、重度TBI组,以及轻度TBI加五苓散组、中度TBI加五苓散组、重度TBI加五苓散组。应用脑皮质撞击仪构建轻、中、重度TBI模型,打击深度分别为1 mm、3 mm、4 mm,对照组不进行手术操作。单纯TBI组按体质量每100 g给予1 ml生理盐水灌胃,五苓散组将五苓散药液浓缩成1 g/ml后,按体质量每100 g给予1 ml药液灌胃,均3次/d。48 h后行神经功能损伤评分,之后处死取5 mg损伤周围脑组织并提取DNA和RNA,real-time PCR法检测线粒体拷贝数,以及PGC-1α、NRF1基因的表达水平,其余脑组织测量脑含水量。结果 TBI后小鼠的神经功能损伤评分、脑组织含水量均显著高于对照组,其线粒体拷贝数、PGC-1α及NRF1基因的表达水平显著上调(P<0.05);与相应的单纯TBI组小鼠相比,轻、中度TBI组小鼠在应用五苓散后,神经功能损伤评分显著降低,线粒体拷贝数及PGC-1α、NRF1基因的表达水平显著升高,脑组织含水量显著降低(P<0.05);重度TBI小鼠应用五苓散后,与相应单纯损伤组比较,仅PGC-1α基因表达水平上调(P<0.05)。结论五苓散可能通过激活PGC及下游通路,促进线粒体的生物合成,进而增强TBI后损伤部位脑组织的能量供应,改善脑水肿严重程度,发挥脑保护作用。 展开更多
关键词 颅脑创伤 五苓散 线粒体
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慢病毒表达载体pLVX-PRDX4的构建及稳定转染HepG2细胞系的建立
4
作者 娜日苏 陈家久 徐之丽 《武警后勤学院学报（医学版）》 CAS 2017年第12期1044-1047,共4页
【目的】本研究拟构建人源过氧化还原蛋白家族成员(Peroxiredoxin 4,PRDX4)稳定过表达的人肝癌HepG2细胞系,同时验证PRDX4表达。【方法】利用RT-PCR技术扩增人PRDX4基因全长序列,插入pLVX-IRES-Puro载体,构建p LV-PRDX4载体,转染人胚肾... 【目的】本研究拟构建人源过氧化还原蛋白家族成员(Peroxiredoxin 4,PRDX4)稳定过表达的人肝癌HepG2细胞系,同时验证PRDX4表达。【方法】利用RT-PCR技术扩增人PRDX4基因全长序列,插入pLVX-IRES-Puro载体,构建p LV-PRDX4载体,转染人胚肾细胞293T,包装过表达病毒颗粒,感染HepG2细胞,通过嘌呤霉素筛选,建立稳定过表达PRDX4细胞系,并且采用Western blotting验证PRDX4表达。【结果】Western blotting结果证实过表达HepG2细胞株PRDX4表达量明显高于对照细胞。【结论】成功构建过表达PRDX4的慢病毒载体和HepG2稳定细胞系,为研究PRDX4在肝癌形成和发展中的作用和机制奠定了基础。 展开更多
关键词 过氧化物酶蛋白家族 人源过氧化还原蛋白PRDX4 慢病毒载体 肝癌
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