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杀虫脒及其代谢物对细菌的诱变作用及细胞的DNA修复合成作用 被引量:1
1
作者 陈星若 金中初 +2 位作者 余应年 丁辰 王鸿秀 《浙江大学学报(医学版)》 CAS 1982年第S1期56-56,共1页
杀虫脒是近年发展的高效新农药,对螨和稻螟均有毒杀效力,对温血动物的毒性中等。气巴-加基公司毒理部曾以杀虫脒及其代谢物喂小鼠终生,可致小鼠结缔组织恶性血管内皮瘤。据说杀虫脒主要代谢产物4-氯邻甲苯胺用Ames试验测试,在S-9活化系... 杀虫脒是近年发展的高效新农药,对螨和稻螟均有毒杀效力,对温血动物的毒性中等。气巴-加基公司毒理部曾以杀虫脒及其代谢物喂小鼠终生,可致小鼠结缔组织恶性血管内皮瘤。据说杀虫脒主要代谢产物4-氯邻甲苯胺用Ames试验测试,在S-9活化系统作用下,对TA100及TA98具有诱变作用,但未查见正式报告。1978年初,我室接受了杀虫脒致突变研究的任务。对上述检品,用两个测试系统进行检测。(1)沙门氏菌/ 展开更多
关键词 诱变作用 细菌 氯邻甲苯胺 DNA 细胞 代谢物 代谢产物
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三年来应用Ames试验系统检测诱变剂(或致癌剂)小结
2
作者 陈星若 金中初 秦文清 《浙江大学学报(医学版)》 CAS 1982年第S1期53-55,共3页
Ames试验是一个灵敏、特异、予测值高的试验系统。是利用组氨酸需要型鼠伤寒菌株,在诱变剂的作用下,使之回变为不需组氨酸型,从而能在最少营养培基上长成菌落。由于鼠伤寒菌缺乏哺乳类的药物代谢酶,故必要时要在试验系统中加入哺乳类(... Ames试验是一个灵敏、特异、予测值高的试验系统。是利用组氨酸需要型鼠伤寒菌株,在诱变剂的作用下,使之回变为不需组氨酸型,从而能在最少营养培基上长成菌落。由于鼠伤寒菌缺乏哺乳类的药物代谢酶,故必要时要在试验系统中加入哺乳类(常用大鼠)的微粒体酶(常用肝)。在实际工作中,应用肝匀浆9,000×g的上清液。其中除含微粒体膜结合酶外,还含其他细胞内可溶性酶,如G-6-P脱氢酶。因此,在辅助因子中除NADP和G-6-P外,不必另加G-6-P脱氢酶。 展开更多
关键词 诱变剂 致癌剂 AMES 菌落数
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MNNG所致哺乳类细胞非定标性突变的时相分析 被引量:6
3
作者 孙雪敏 余应年 +1 位作者 张小山 陈星若 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第1期77-78,共2页
MNNG所致哺乳类细胞非定标性突变的时相分析1孙雪敏1余应年张小山陈星若(浙江医科大学病理生理学教研室及医学分子生物学实验室,杭州310031;1杭州医学高等专科学校,杭州310012)非定标性突变(nontarge... MNNG所致哺乳类细胞非定标性突变的时相分析1孙雪敏1余应年张小山陈星若(浙江医科大学病理生理学教研室及医学分子生物学实验室,杭州310031;1杭州医学高等专科学校,杭州310012)非定标性突变(nontargetedmutation)为原核细胞... 展开更多
关键词 细胞 非定标性突变 甲基硝基亚硝胍 时相分析
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甲基硝基亚硝基胍诱发的遗传不稳定vero细胞DNA体外复制的保真度 被引量:7
4
作者 冯朝晖 余应年 陈星若 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第2期144-148,共5页
利用在猴肾vero细胞抽提物中建立的DNA体外复制系统,对穿梭质粒pZ189DNA进行有效的复制后,将复制产物转化至E.coliMBM7070,观察pZ189质粒DNA中突变靶基因supFtRNA基因突变的情况.在烷... 利用在猴肾vero细胞抽提物中建立的DNA体外复制系统,对穿梭质粒pZ189DNA进行有效的复制后,将复制产物转化至E.coliMBM7070,观察pZ189质粒DNA中突变靶基因supFtRNA基因突变的情况.在烷化剂甲基硝基亚硝基胍(N-methyl-N′-nitro-N-nitrosoguanidine)诱发的遗传不稳定(geneticinstability)vero细胞胞浆抽提物中进行pZ189质粒DNA复制,发现经过体外复制的pZ189质粒中supFtRNA基因突变率高出对照组5-8倍(P<0.05)。 展开更多
关键词 MNNG 甲基 硝基亚硝基胍 VERO细胞 DNA复制
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低浓度N-甲基-N′-硝基-N-亚硝基胍对HeLa细胞DNA聚合酶及拓扑异构酶Ⅱ α mRNA表达水平的影响 被引量:6
5
作者 冯朝晖 余应年 陈星若 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期217-221,共5页
利用定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法,研究了低浓度甲基硝基亚硝基胍(MNNG)对HeLa细胞DNA聚合酶(Polα,β,δ,ε)及拓扑异构酶Ⅱα(TopⅡα)mRNA表达水平的影响.发现经0.2μmol·... 利用定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法,研究了低浓度甲基硝基亚硝基胍(MNNG)对HeLa细胞DNA聚合酶(Polα,β,δ,ε)及拓扑异构酶Ⅱα(TopⅡα)mRNA表达水平的影响.发现经0.2μmol·L-1MNNG处理2.5h后,HeLa细胞PolβmRNA水平在6-24h内升高约1倍,而Polα,δ,ε及TopIαmRNA水平则无明显改变.提示PolβmRNA水平改变可能参与MNNG诱发细胞遗传不稳定的发生. 展开更多
关键词 甲基硝基 亚硝基胍 DNA MNNG 聚合酶 基因表达
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茶多酚对人羊膜上皮细胞FL形成B(a)P-DNA加成物的影响 被引量:6
6
作者 冯磊 余应年 +1 位作者 刘志强 陈星若 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 1995年第2期65-68,共4页
应用32P后标记法检测人羊膜上皮细胞(FL)经不同浓度茶多酚(25μg/ml,50μg/ml和100μg/ml,终浓度,下同)和β-萘黄酮(2×l0-5mol/L)所形成的B(a)P-DNA加成物,观察茶多酚化学... 应用32P后标记法检测人羊膜上皮细胞(FL)经不同浓度茶多酚(25μg/ml,50μg/ml和100μg/ml,终浓度,下同)和β-萘黄酮(2×l0-5mol/L)所形成的B(a)P-DNA加成物,观察茶多酚化学预防作用。结果表明,茶多酚不仅可以抑制β-萘黄酮对FL细胞细胞色素P450同功酶的活性的诱导,减少B(a)P-DNA加成物的形成;也可抑制经β-萘黄酮诱导后的FL细胞形成B(a)P-DNA加成物,而且该抑制效应与茶多酚剂量一致。茶多酚的化学预防作用可能与其影响细胞色素P450同功酶的表达调节以及抑制其活性有关。 展开更多
关键词 茶多酚 B(a)P-DNA 加成物 肿瘤 预防
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转录和翻译抑制对哺乳类细胞非定标性突变形成的影响 被引量:10
7
作者 孙雪敏 余应年 +1 位作者 张小山 陈星若 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 1996年第5期286-289,共4页
在研究MNNG所致哺乳类细胞非定标性突变时相变化的基础上,以RNA合成抑制剂放线菌素D(AMD)和蛋白质合成抑制剂放线菌素酮(CHM)在MNNG处理后非定标性突变频率最高的6h点分别阻断DNA转录和翻译,发现AMD能... 在研究MNNG所致哺乳类细胞非定标性突变时相变化的基础上,以RNA合成抑制剂放线菌素D(AMD)和蛋白质合成抑制剂放线菌素酮(CHM)在MNNG处理后非定标性突变频率最高的6h点分别阻断DNA转录和翻译,发现AMD能使MNNG诱导的vero细胞非定标性突变率下降至对照水平,而CHM则使其明显上升。提示MNNG引起的DNA损伤能够通过诱导某些基因的表达或干扰某些蛋白质的功能而导致基因组遗传不稳定。 展开更多
关键词 非定标性突变 甲基硝基亚硝胍 翻译抑制剂
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甲基硝基亚硝基胍诱发的遗传不稳定细胞DNA聚合酶βmRNA表达水平研究 被引量:4
8
作者 冯朝晖 余应年 陈星若 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第8期699-702,共4页
目的和方法:本实验室曾报道,低浓度0-2 μmolL 烷化剂甲基硝基亚硝基胍( N- methyl- N′- nitro - N-nitrosoguanidine , MNNG) 可以诱导哺乳类细胞遗传不稳定状态。为明确其发... 目的和方法:本实验室曾报道,低浓度0-2 μmolL 烷化剂甲基硝基亚硝基胍( N- methyl- N′- nitro - N-nitrosoguanidine , MNNG) 可以诱导哺乳类细胞遗传不稳定状态。为明确其发生机制,本文利用定量RT- PCR 方法,研究了该低浓度MNNG 对人HeLa 及猴肾vero 细胞DNA 聚合酶β(pol β) m RNA 表达水平的影响。结果:经0-2 μmolL MNNG2 .5 h 处理后,HeLa 细胞pol βm RNA 水平在6 ~24 h 内升高约1 倍;而vero 细胞pol βm RNA 水平在12 ~30 h 内亦升高1倍左右。结论:提示pol βmRNA 水平改变可能参与MNNG 展开更多
关键词 诱变 DNA聚合酶Β 不稳定性 MNNG 细胞遗传
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带蒂菱壳等16种中药水提取物对大肠杆菌CM891回复突变的抑制作用 被引量:3
9
作者 郭峻 金中初 +1 位作者 梅汝焕 陈星若 《实用肿瘤杂志》 CAS 北大核心 1993年第2期104-107,共4页
大量研究证明,肿瘤的形成要经过始动和促进两个阶段,始动与细胞突变密切相关。为开辟肿瘤化学预防新途径,使突变物失活或抑制突变过程的抗突变研究,近10年来方兴未艾。中药是我国的宝贵医学遗产,近年来的研究正揭示其在拮抗或抑制突变... 大量研究证明,肿瘤的形成要经过始动和促进两个阶段,始动与细胞突变密切相关。为开辟肿瘤化学预防新途径,使突变物失活或抑制突变过程的抗突变研究,近10年来方兴未艾。中药是我国的宝贵医学遗产,近年来的研究正揭示其在拮抗或抑制突变作用上的独特优势。中药成分复杂,可因产地、采摘季节及提取溶剂的不同,抑制突变的效果不尽一致。鉴于不同的抑制因子在突变、癌变的不同阶段发挥作用,因此可用不同检测系统的不同作用模式来证实对各种致突变物或致癌物的抑制效应。本实验以大肠杆菌CM891为测试菌株,通过抑制突变。 展开更多
关键词 中草药 大肠杆菌 突变 药理学
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茶多酚对人羊膜上皮细胞FL系EROD活性的影响 被引量:4
10
作者 冯磊 余应年 陈星若 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第5期467-470,共4页
本实验测定人羊膜上皮细胞FL系乙氧基异吩恶唑O-去乙基酶(EROD)的活性,观察茶多酚对FL细胞细胞色素P4501A1同功酶活性的影响。在茶多酚(GTPP)对猓被鼓芤种柒-NF对EROD的诱导作用。提示,茶多酚可... 本实验测定人羊膜上皮细胞FL系乙氧基异吩恶唑O-去乙基酶(EROD)的活性,观察茶多酚对FL细胞细胞色素P4501A1同功酶活性的影响。在茶多酚(GTPP)对猓被鼓芤种柒-NF对EROD的诱导作用。提示,茶多酚可能通过抑制细胞色素同功酶的活性,降低致癌物在体内代谢活化而发挥其化学预防肿瘤的作用。 展开更多
关键词 细胞色素 茶多酚 羊膜上皮细胞 肿瘤
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石菖蒲单体α-细辛醚的诱变性及其体外代谢途径研究 被引量:3
11
作者 金中初 秦文清 陈星若 《浙江大学学报(医学版)》 CAS 1982年第S1期57-57,共1页
石菖蒲挥发油及单体a-细辛醚有较强的祛痰、镇咳和平喘等功效。石菖蒲水煎剂还有较好的镇静和抗惊厥作用。文献记载,用含β-细辛醚的石菖蒲挥发油混入饲料,喂大鼠59周后,发生十二指肠恶性肿瘤。α-细辛醚是β-细辛醚的异构体,同存于石... 石菖蒲挥发油及单体a-细辛醚有较强的祛痰、镇咳和平喘等功效。石菖蒲水煎剂还有较好的镇静和抗惊厥作用。文献记载,用含β-细辛醚的石菖蒲挥发油混入饲料,喂大鼠59周后,发生十二指肠恶性肿瘤。α-细辛醚是β-细辛醚的异构体,同存于石菖蒲挥发油中,是否亦有潜在危害性,尚未见报道。我们用沙门氏菌突变检测系统对其进行诱变试验,并初步研究了它的体外代谢途径。 展开更多
关键词 细辛醚 诱变性 挥发油 体外代谢 单体
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人细胞色素P4502B6在哺乳类细胞中的稳定表达 被引量:3
12
作者 吴健敏 余应年 陈星若 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第2期131-135,共5页
〗在诱变试验中广泛应用人羊膜FL细胞,中国仓鼠CHL和V79细胞,但由于它们不能表达内源性细胞色素P450(CYP)活化前致突变物,而严重限制了它们的使用.本工作构建了携有编码CYP2B6单胺氧化酶的cDNA重组表达... 〗在诱变试验中广泛应用人羊膜FL细胞,中国仓鼠CHL和V79细胞,但由于它们不能表达内源性细胞色素P450(CYP)活化前致突变物,而严重限制了它们的使用.本工作构建了携有编码CYP2B6单胺氧化酶的cDNA重组表达体并分别导入上述三种细胞中表达,经G418抗性筛选,建立了FL-2B6,CHL-2B6和V79-2B6三种转基因细胞系,用Northern印迹杂交证明它们都有CYP2B6的表达.在CHL-2B6细胞中还测得较高水平的7-乙氧基-4-三氟甲基香豆素去乙基酶活性,它对前致突变物甲基亚硝胺吡啶酮的致微核形成作用有很高敏感性,并呈剂量效应关系,但其母系细胞皆为阴性. 展开更多
关键词 细胞色素 基因表达 哺乳类 化学致癌
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菜油油烟凝聚物诱发人羊膜FL细胞中的非定标性突变 被引量:3
13
作者 王卫萍 张小山 +1 位作者 余应年 陈星若 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 1996年第3期140-143,共4页
本研究以穿梭质粒pZ189作为探针,用菜油油烟凝聚物RapeSeedOilCondensate,RC)诱发人羊膜FL细胞中的非定标性突变。结果显示:l2.5和50μg/mlRC处理组的突变频率较自发突变频率增加了3.... 本研究以穿梭质粒pZ189作为探针,用菜油油烟凝聚物RapeSeedOilCondensate,RC)诱发人羊膜FL细胞中的非定标性突变。结果显示:l2.5和50μg/mlRC处理组的突变频率较自发突变频率增加了3.5和4.1倍;两个处理组的点突变频率分别为11.9×1O-4(19/15996)和11.6×l0-4(17/14701),比自发点突变频率2.9×10-4(2/6822)分别增加了4.1和3.9倍,其卡方检验的P值均小于0.05。 展开更多
关键词 非定标性突变 菜油油烟凝聚物 穿梭质粒 肿瘤
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多环芳烃结构与致癌活性关系的 Fisher 判别研究 被引量:9
14
作者 朱永平 余应年 陈星若 《卫生毒理学杂志》 CSCD 1997年第2期71-74,136,共5页
应用物理化学参数和结构参数,对多环芳烃的致癌活性进行Fisher判别分析。结果表明现有的物理化学参数在化合物致癌活性QSAR研究中,存在着化学类别上的局限性。就判别效率而言,单独应用结构参数或综合应用两类参数所建立的... 应用物理化学参数和结构参数,对多环芳烃的致癌活性进行Fisher判别分析。结果表明现有的物理化学参数在化合物致癌活性QSAR研究中,存在着化学类别上的局限性。就判别效率而言,单独应用结构参数或综合应用两类参数所建立的判别方程接近CASE系统,但存在着相当大的改进余地。现有的物理化学参数是否适用于其它类别化合物致癌活性的QSAR分析,有待进一步研究。 展开更多
关键词 多环芳烃 致癌活性 构效关系 判别分析
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甲基硝基亚硝胍诱发的遗传不稳定Vero细胞中错配结合蛋白的研究 被引量:2
15
作者 冯朝晖 余应年 +1 位作者 张小山 陈星若 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第6期638-641,共4页
应用凝胶阻滞技术(gelretaldation),在甲基硝基亚硝胍(MNNG)诱发的遗传不稳定的Vero细胞(非洲绿猴肾细胞)抽提物中,发现存在特异性针对G·T的错配结合蛋白(mismatchbindingprotein),能选择性识别DNA中的G·T错配,... 应用凝胶阻滞技术(gelretaldation),在甲基硝基亚硝胍(MNNG)诱发的遗传不稳定的Vero细胞(非洲绿猴肾细胞)抽提物中,发现存在特异性针对G·T的错配结合蛋白(mismatchbindingprotein),能选择性识别DNA中的G·T错配,并与之结合.经与正常Vero细胞相比较,证实其功能并无缺陷。从而排除了MNNG通过对错配结合蛋白功能的损伤而诱发细胞遗传不稳定的可能机制。 展开更多
关键词 MNNG 细胞遗传 错配结合蛋白 错配修复
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pZ189质粒DNA体外复制系统的建立 被引量:2
16
作者 冯朝晖 余应年 陈星若 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1998年第3期271-273,共3页
报道了含SV40复制起点的质粒DNA在真核细胞抽提物中进行复制的DNA体外复制系统的建立.在外源性蛋白质SV40大T抗原(SV40Tag)的参与下,穿梭质粒pZ189能在猴肾vero细胞胞浆抽提物中,利用其中参与体内... 报道了含SV40复制起点的质粒DNA在真核细胞抽提物中进行复制的DNA体外复制系统的建立.在外源性蛋白质SV40大T抗原(SV40Tag)的参与下,穿梭质粒pZ189能在猴肾vero细胞胞浆抽提物中,利用其中参与体内DNA复制所需的蛋白质成分,有效地进行体外DNA复制.从而为研究真核细胞DNA复制系统的结构与功能提供了简单、有效的模型. 展开更多
关键词 穿梭质粒 真核细胞 DNA 复制系统
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c-k-ras反义寡核苷酸抑制HCe8693细胞生长及p21^(ras)表达的序列特异性 被引量:2
17
作者 钱瑛 余应年 +2 位作者 董海涛 陈星若 罗建红 《中国药理学与毒理学杂志》 CSCD 北大核心 1996年第1期45-48,共4页
本文采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR),并结合PCR产物直接测序法,证明人大肠癌细胞系HR8348和HCe8693的k-rascDNA片段(第3~83密码子)中存在第12密码子GGT→GAT突变,未发现其它突... 本文采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR),并结合PCR产物直接测序法,证明人大肠癌细胞系HR8348和HCe8693的k-rascDNA片段(第3~83密码子)中存在第12密码子GGT→GAT突变,未发现其它突变或RNA剪接异常.用分别与野生型和上述突变型k-ras第9~15密码子互补的18聚硫代磷酸型寡核苷酸(两者仅存在一个碱基差别)及随机设计的对照寡核苷酸(终浓度为6μmol·L-1),发现与突变型k-ras互补的寡核苷酸能抑制HCe8693细胞生长并有p21ras蛋白表达量的抑制;而与野生型k-ras互补的寡核苷酸及随机合成的对照寡核苷酸对之无明显抑制作用,说明c-k-ras反义寡核苷酸对HCe8693细胞生长和p21ras蛋白合成的抑制作用存在明显的核苷酸序列特异性. 展开更多
关键词 肿瘤细胞 原癌基因 反义 寡核苷酸 基因表达
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N—亚硝基化合物致癌活性和物理化学行为相关性的研究 被引量:3
18
作者 朱永平 余应年 陈星若 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 1996年第5期283-286,共4页
应用Lydersen等方法,估算N—亚硝基化合物的监界常数和热力学参数,与其致癌活性进行Fisher判别分析,正确率达80%以上,但假阳性率偏高。经Ridit检验,判别效率与目前国际上最佳的CASE系统相比无明显差异。
关键词 亚硝基化合物 致癌活性 物理化学 构效关系
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MNNG诱发的遗传不稳定vero细胞中错配修复功能的研究 被引量:3
19
作者 冯朝晖 余应年 陈星若 《实验生物学报》 CSCD 1998年第3期217-221,共5页
在MNNG诱发的延迟发生的,以非定标性突变形成为特征的遗传不稳定vero细胞抽提物中,应用凝胶阻滞和体外错配修复技术,发现仍存在特异性针对G·T的错配结合蛋白,能选择性识别并结合DNA中的G·T错配;同时发现在该细胞核抽提物中G&#... 在MNNG诱发的延迟发生的,以非定标性突变形成为特征的遗传不稳定vero细胞抽提物中,应用凝胶阻滞和体外错配修复技术,发现仍存在特异性针对G·T的错配结合蛋白,能选择性识别并结合DNA中的G·T错配;同时发现在该细胞核抽提物中G·T错配能被有效、特异地修复成G·C。经与正常vero细胞比较,证实二者功能均无缺陷。从而排除了MNNG通过对错配结合蛋白及G·T错配修复功能的损伤而诱发细胞遗传不稳定的可能机制。 展开更多
关键词 MNNG诱发 遗传不稳定 VERO细胞 错配修复功能
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MNNG所致哺乳类细胞非定标性突变的时相分析 被引量:2
20
作者 孙雪敏 余应年 陈星若 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 1995年第4期250-250,共1页
MNNG所致哺乳类细胞非定标性突变的时相分析孙雪敏,余应年,陈星若(浙江医科大学病理生理教研室及医学分子生物学实验室杭州310031)本实验室曾以穿梭质粒为探针,用DNA损伤剂甲基硝基亚硝胍(MNNG)、交链孢酚和菜... MNNG所致哺乳类细胞非定标性突变的时相分析孙雪敏,余应年,陈星若(浙江医科大学病理生理教研室及医学分子生物学实验室杭州310031)本实验室曾以穿梭质粒为探针,用DNA损伤剂甲基硝基亚硝胍(MNNG)、交链孢酚和菜油油烟凝聚物在哺乳类细胞中成功地诱... 展开更多
关键词 DNA损伤 甲基硝基亚硝胍 MNNG 哺乳类细胞 非定标性突变 时相分析
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