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塔城病毒Ⅰ型TaqMan探针法荧光定量PCR检测方法的建立
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作者 徐昭艳 姜峰 +3 位作者 陈瑶 金鑫 陈泽良 韩小虎 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2024年第5期83-92,共10页
建立快速特异的蜱传塔城病毒Ⅰ型(TcTV-Ⅰ)荧光定量PCR检测方法,用于TcTV-Ⅰ的初步筛查。选用TcTV-Ⅰ糖蛋白G基因设计特异性引物以及TaqMan探针,建立实时荧光定量PCR检测方法。建立的实时荧光定量PCR检测方法具有良好的特异性,与TcTV-... 建立快速特异的蜱传塔城病毒Ⅰ型(TcTV-Ⅰ)荧光定量PCR检测方法,用于TcTV-Ⅰ的初步筛查。选用TcTV-Ⅰ糖蛋白G基因设计特异性引物以及TaqMan探针,建立实时荧光定量PCR检测方法。建立的实时荧光定量PCR检测方法具有良好的特异性,与TcTV-Ⅱ、新布尼来病毒(Severe fever with thrombocytopenia virus,SFTSV)、森林脑炎病毒(Tick-borne encephalitis virus,TBEV)、大别山病毒(Dabieshan orthohanta virus,DBSV)、阿龙山病毒(Alongshan virus,ALSV)等常见蜱传病毒均无交叉反应;标准曲线的循环阈值(Ct值)与模板拷贝数之间呈良好的线性关系,线性相关系数R^(2)=0.9999;具有良好的敏感性,最低检测限为1.10×10^(1)copies/μL,灵敏度是常规PCR的10^(3)倍;具有较好的稳定性,组内和组间的变异系数均低于2%。采用本方法对辽宁、内蒙古及新疆地区的425份蜱样本就行检测,只有新疆地区的19份蜱样本呈阳性。结果表明本研究建立的实时荧光定量PCR方法具有较高的特异性、敏感性和稳定性,可用于TcTV-Ⅰ的快速检测、流行病学调查和疫情监测等。 展开更多
关键词 实时荧光定量PCR 塔城病毒 TAQMAN探针
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高阻隔软包装用高速无溶剂聚氨酯胶粘剂的制备及应用
2
作者 陈志国 侯高明 +1 位作者 陈泽良 黄燕纯 《山东化工》 CAS 2024年第18期183-185,共3页
为了满足高阻隔软包装用快速复合的要求,通过自主设计预聚体,自主设计扩链制备NCO组分和OH组分,合成了一种适用于高阻隔软包装,并能高速复合的无溶剂聚氨酯胶粘剂。研究了R值和反应温度对胶粘剂胶盘寿命和反应速率的影响,以及不同复合... 为了满足高阻隔软包装用快速复合的要求,通过自主设计预聚体,自主设计扩链制备NCO组分和OH组分,合成了一种适用于高阻隔软包装,并能高速复合的无溶剂聚氨酯胶粘剂。研究了R值和反应温度对胶粘剂胶盘寿命和反应速率的影响,以及不同复合速度下对高阻隔复合结构外观、剥离强度和热封强度的影响。实验结果表明,成功开发出适用于高阻隔多层复合结构,并能高速复合的无溶剂聚氨酯胶粘剂。 展开更多
关键词 聚氨酯胶粘剂 无溶剂 高阻隔 软包装 高速
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复合软包装用耐高温蒸煮聚氨酯胶粘剂的研究
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作者 侯高明 陈志国 +1 位作者 陈泽良 黄燕纯 《山东化工》 CAS 2024年第20期84-86,共3页
主要通过长碳链多元酸和多元醇制备聚酯,引入多官能度原材料,制备高固含酯溶型聚氨酯胶粘剂。研究表明,在无偶联剂条件下,此胶粘剂复合的复合软包装溶残极低,在135℃高温蒸煮后外观表现良好,具有良好的粘接性能,且具有良好的耐老化能力。
关键词 软包装 聚氨酯胶粘剂 耐高温蒸煮 耐老化
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绦虫催乳素基因cDNA克隆及序列分析 被引量:5
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作者 陈泽良 刘波 +2 位作者 刘明远 欧阳红生 安铁洙 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期157-159,共3页
根据文献报道的脊椎动物催乳素基因 c DNA序列的保守区 ,设计 1对引物。提取绦虫总 RNA,采用 RT- PCR扩增绦虫催乳素基因 ,琼脂糖凝胶电泳分析 PCR产物 ,将回收产物连接到 p MD- 18T克隆载体 ,对待选克隆进行 PCR和酶切鉴定。阳性克隆... 根据文献报道的脊椎动物催乳素基因 c DNA序列的保守区 ,设计 1对引物。提取绦虫总 RNA,采用 RT- PCR扩增绦虫催乳素基因 ,琼脂糖凝胶电泳分析 PCR产物 ,将回收产物连接到 p MD- 18T克隆载体 ,对待选克隆进行 PCR和酶切鉴定。阳性克隆进行序列测定 ,获得全长 893bp的 c DNA序列 ,共编码 2 2 2个氨基酸 ,其中前 2 2个氨基酸为信号肽 ,成熟蛋白共编码 2 0 0个氨基酸。将测序结果与 Gen Bank中已知序列比较 ,推导氨基酸序列并进行活性位点分析 ,所得序列与脊椎动物催乳素同源性最高 ,含有催乳素的 2个活性区域 ,证明所得到的序列就是催乳素序列。 展开更多
关键词 绦虫 催乳素基因 克隆 序列分析 CDNA
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PCR产物直接测序快速识别病原菌 被引量:2
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作者 陈泽良 王玉飞 +8 位作者 赵瑾 赵红庆 苑锡铜 贾雷立 杜昕颖 刘京梅 宋宏彬 张伶 黄留玉 《现代预防医学》 CAS 北大核心 2008年第2期313-315,共3页
[目的]结合PCR和DNA测序技术,建立一种适用于传染性疾病预防控制的快速准确地识别病原细菌的分子检测方法。[方法]以布鲁氏菌为例,利用PCR分别从纯培养物、模拟标本中扩增布鲁氏菌16S和31kd基因,并对扩增产物测序,与数据库进行比对,根... [目的]结合PCR和DNA测序技术,建立一种适用于传染性疾病预防控制的快速准确地识别病原细菌的分子检测方法。[方法]以布鲁氏菌为例,利用PCR分别从纯培养物、模拟标本中扩增布鲁氏菌16S和31kd基因,并对扩增产物测序,与数据库进行比对,根据比对结果确定扩增产物是否来源于布氏菌。[结果]从纯培养物和模拟标本成功扩增特异产物,测定序列与数据库比对,能很快准确确定病原的种类,优于单纯的PCR扩增。[结论]结合PCR扩增和产物测序的分子检测方法切实可行,为疾病预防控制体系中病原菌的快速识别提供了一个快速、高效和准确的方法。 展开更多
关键词 布鲁氏菌 PCR DNA测序 病原细菌
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应用酵母双杂交技术筛选与埃博拉病毒VP24、VP35、VP40蛋白相互作用的宿主蛋白 被引量:4
6
作者 陈泽良 高婷 +1 位作者 张部昌 曹诚 《生物技术通讯》 CAS 2016年第3期308-313,共6页
目的:用酵母双杂交实验筛选人肝cDNA文库,得到与埃博拉病毒VP24、VP35、VP40蛋白相互作用的蛋白质,用以研究VP24、VP35、VP40蛋白的生物学功能。方法:以埃博拉病毒VP24、VP35、VP40为诱饵蛋白,利用酵母双杂交技术对人肝cDNA文库进行初... 目的:用酵母双杂交实验筛选人肝cDNA文库,得到与埃博拉病毒VP24、VP35、VP40蛋白相互作用的蛋白质,用以研究VP24、VP35、VP40蛋白的生物学功能。方法:以埃博拉病毒VP24、VP35、VP40为诱饵蛋白,利用酵母双杂交技术对人肝cDNA文库进行初步筛选,并采用DNA测序技术及生物信息学技术进行分析。结果:筛选到13个可能与VP24、VP35、VP40相互作用的蛋白,包括视黄酸受体应答蛋白2(RARRES2)、PRKA激酶相互作用蛋白1(AKIP1)、白蛋白(ALB)、补体因子1(CF1)、人肿瘤易感基因(TSG101)等。结论:应用酵母双杂交技术初步筛选出与埃博拉病毒VP24、VP35、VP40相互作用的宿主蛋白,并完成了初步功能分析。 展开更多
关键词 埃博拉病毒 致病机制 酵母双杂交 蛋白质相互作用
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高等学校生物安全实验室化学品安全存储探索
7
作者 吴大伟 何振健 +1 位作者 张定梅 陈泽良 《化工管理》 2023年第15期91-93,共3页
高等学校生物安全实验室的化学品管理是一个系统工程,涉及到申购、运输、存储、使用、报废等全生命的各个环节,其中化学品的存储是一个主要环节,存在较大安全隐患。如何合理规范存放化学品,从而将其危害性降到最低,是一个值得探讨的课... 高等学校生物安全实验室的化学品管理是一个系统工程,涉及到申购、运输、存储、使用、报废等全生命的各个环节,其中化学品的存储是一个主要环节,存在较大安全隐患。如何合理规范存放化学品,从而将其危害性降到最低,是一个值得探讨的课题。化学品的存储涉及到存储场所的选择、存储设施的配套、存储方式的规范、化学品的保护以及信息化的规范标记等内容,化学品规范的存储不仅可以提高化学品的使用效率,而且可以提高化学品的安全管理水平。 展开更多
关键词 高等学校 生物安全实验室 化学品 分类 存储 管理
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我国羊种3型布鲁氏菌的多位点序列分型研究 被引量:47
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作者 周晓艳 陈燕芬 +6 位作者 崔步云 陈泽良 姜海 赵鸿雁 朴东日 李兰玉 王金桃 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期371-375,共5页
目的对2004-2009年从病人标本中分离的羊种3型布鲁氏菌进行遗传多态性分析,了解菌株的遗传特征及遗传进化关系。方法采用多位点序列分型(Multiple locus sequence typing,MLST)技术,对47株布鲁氏菌菌株的7个管家基因、1个外膜蛋白基因及... 目的对2004-2009年从病人标本中分离的羊种3型布鲁氏菌进行遗传多态性分析,了解菌株的遗传特征及遗传进化关系。方法采用多位点序列分型(Multiple locus sequence typing,MLST)技术,对47株布鲁氏菌菌株的7个管家基因、1个外膜蛋白基因及1个基因间区的序列进行测定,将各个基因的序列与标准菌株的等位基因型进行比对,确定其等位基因谱型及菌株序列型(STS),分析与其它ST型间的遗传关系。结果 47株布鲁氏菌中,19株omp25基因与目前已有的等位基因型不同,被定义为1个新的等位基因型,即ST28。其余28株与已知的ST8型的各等位基因型一致。结论我国流行的羊种布鲁氏菌主要是羊3型菌株,国内的菌株与国外菌株遗传背景上有差异。MLST分型可以作为研究布鲁氏菌进化关系的重要手段之一。 展开更多
关键词 布鲁氏菌 羊种3型 MLST
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布鲁氏菌比较基因组学研究进展 被引量:13
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作者 钟志军 于爽 +10 位作者 徐杰 王玉飞 彭广能 陈燕芬 白耀霞 付思美 王同坤 汪舟佳 杜昕颖 黄克和 陈泽良 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期346-350,共5页
依据宿主偏好性的不同,布鲁氏菌分为6个经典种。根据生物学特性又将其分为19个亚型。包括:B.melitensis(羊种,主要感染绵羊和山羊种,
关键词 布鲁氏菌 比较基因组学 生物学特性 羊种
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我国近10年布鲁氏菌病研究文献分析(英文) 被引量:12
10
作者 高光俊 徐杰 +3 位作者 柯跃华 陈泽良 王玉飞 徐兴然 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1178-1184,共7页
目的分析我国近十年来布鲁氏菌的流行概况和研究水平,为我国布鲁氏菌病防控和研究提供科学依据。方法通过数据库检索近十年(2000~2010)的科技文献和数据资料,对其调研并进行统计分析。结果我国布病疫情防控及研究工作尽管取得了很大的... 目的分析我国近十年来布鲁氏菌的流行概况和研究水平,为我国布鲁氏菌病防控和研究提供科学依据。方法通过数据库检索近十年(2000~2010)的科技文献和数据资料,对其调研并进行统计分析。结果我国布病疫情防控及研究工作尽管取得了很大的进步,但目前布病疫情出现反弹的趋势,研究水平有待继续提高。结论我国布病疫情依然严峻,防控工作和科研水平总体上仍需加强,进而从根本上提高我国布鲁氏菌病的防治水平。 展开更多
关键词 布鲁氏菌 文献计量 疫情分析 研究进展
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基于RNA-Seq的羊种布鲁氏菌新转录本与非编码RNA鉴定 被引量:10
11
作者 郭英飞 王玉飞 +7 位作者 龚春丽 杨明娟 袁久云 庄妤冰 柯跃华 杜昕颖 汪舟佳 陈泽良 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期216-221,共6页
目的对羊种布鲁氏菌的转录本进行测序,鉴定基因组中新的转录本和非编码RNA。方法提取羊布鲁氏菌的总RNA,去除rRNA后连接接头逆转录成cDNA,PCR扩增后进行测序,以羊布鲁氏菌16M的基因组序列为参照对测序得到的reads进行比对作图,通过生物... 目的对羊种布鲁氏菌的转录本进行测序,鉴定基因组中新的转录本和非编码RNA。方法提取羊布鲁氏菌的总RNA,去除rRNA后连接接头逆转录成cDNA,PCR扩增后进行测序,以羊布鲁氏菌16M的基因组序列为参照对测序得到的reads进行比对作图,通过生物信息学方法进行新转录本和非编码RNA的鉴定。结果测序数据分析显示,reads在基因组上覆盖度较好。与现有注释基因相比,有773个基因的5′或3′端在基因组的原有位置基础上发生了延伸,并发现了16个新的转录本。根据测序结果,共鉴定出241条候选的非编码RNA(sRNA),进一步的RT-PCR验证结果显示,预测的sRNA在体外条件下有表达。结论布鲁氏菌基因组中存在除了预测以外的新的转录本,布鲁氏菌中存在非编码RNA且在不同条件下有差异表达。 展开更多
关键词 布鲁氏菌 RNA-SEQ 转录组 SRNA
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以克隆载体为自杀载体快速构建布鲁氏菌的无痕缺失突变株 被引量:11
12
作者 王玉飞 陈泽良 +5 位作者 赵红庆 苑锡铜 黄留玉 张伶 刘京梅 宋宏彬 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期642-645,共4页
构建突变株是病原微生物致病机理研究的重要手段。以往研究中布鲁氏菌的无痕缺失突变株都采用传统的自杀载体来构建,效率低下。首先对布鲁氏菌的电击转化条件进行了优化,然后选择含有反向筛选基因sacB的pEX18Gm质粒作为自杀载体,构建了... 构建突变株是病原微生物致病机理研究的重要手段。以往研究中布鲁氏菌的无痕缺失突变株都采用传统的自杀载体来构建,效率低下。首先对布鲁氏菌的电击转化条件进行了优化,然后选择含有反向筛选基因sacB的pEX18Gm质粒作为自杀载体,构建了缺失Ⅳ型启动子区的布鲁氏菌无痕缺失突变株。这不仅为构建布鲁氏菌的突变株提供了一个快速有效的技术平台,也为深入研究Ⅳ型分泌系统的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 自杀载体 布鲁氏菌 突变株构建
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pUC19K质粒的构建及其在布鲁氏菌突变株构建中的应用 被引量:12
13
作者 乔凤 陈泽良 +4 位作者 王玉飞 赵瑾 杜昕颖 于雅琴 黄留玉 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1-5,共5页
突变株的构建是细菌基因功能研究的前提。构建了一个可用于布鲁氏菌突变株构建的自杀质粒。在pUC19质粒的多克隆位点插入卡那霉素抗性基因,在该基因两侧添加多个酶切位点,构建成为pUC19K。利用该质粒,构建了布鲁氏菌外膜蛋白Omp25基因... 突变株的构建是细菌基因功能研究的前提。构建了一个可用于布鲁氏菌突变株构建的自杀质粒。在pUC19质粒的多克隆位点插入卡那霉素抗性基因,在该基因两侧添加多个酶切位点,构建成为pUC19K。利用该质粒,构建了布鲁氏菌外膜蛋白Omp25基因的突变株。结果表明,利用该自杀质粒,通过一轮筛选即可得到目标基因被抗性基因替换的突变株。pUC19K质粒的构建及成功应用,为布鲁氏菌突变株的构建提供了一个快速有效的手段,也为布鲁氏菌的基因功能研究奠定了基础。 展开更多
关键词 布鲁氏菌 自杀质粒 突变株构建
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医院获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌Spa和SCCmec分型研究 被引量:7
14
作者 李艳萌 赵瑞珂 +6 位作者 黄宝丽 张险峰 韩清珍 顾国浩 陈泽良 史进方 徐杰 《重庆医学》 CAS 北大核心 2015年第34期4821-4824,共4页
目的对医院获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(HA-MRSA)A蛋白(Spa)和葡萄球菌mec基因盒(SCCmec)分型同源性研究,为预防和控制医院感染提供依据。方法采用药敏纸片法(K-B法)、SCCmec分型及Spa分型技术,收集自2013年8月至2014年4月80株HA-MR... 目的对医院获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(HA-MRSA)A蛋白(Spa)和葡萄球菌mec基因盒(SCCmec)分型同源性研究,为预防和控制医院感染提供依据。方法采用药敏纸片法(K-B法)、SCCmec分型及Spa分型技术,收集自2013年8月至2014年4月80株HA-MRSA,进行药敏试验和同源性分析,并检测毒力基因杀白细胞毒素(pvl)基因和毒性休克综合征(tsst)基因。结果药敏结果显示,80株HA-MRSA对青霉素、氨苄西林/舒巴坦、亚胺培南均耐药,对环丙沙星耐药率为90.0%,对克林霉素耐药率为58.8%,对复方磺胺类耐药率为13.8%,对万古霉素、利奈唑胺、替考拉宁均敏感。SCCmec分型结果显示,80株MRSA中SCCmecⅡ型占73.75%、SCCmecⅢ型(13.75%)、SCCmecⅤ型(12.5%)。Spa分型,28株为t2460型(35%)、9株为t002型(11%)、6株为t030型(8%)、7株为t632型(9%)、5株为t037型(6%),其他Spa型相对分散。pvl基因阳性率为7.5%(6株),tsst基因为阴性。结论 HA-MRSA SCCmec分型以Ⅱ为主,Spa分型以t2460型为主,有较高的同源性;HA-MRSA对多种药物具有较高的耐药性并且存在多重耐药。 展开更多
关键词 交叉感染 葡萄球菌 金黄色 SCCmec分型 Spa分型 耐药性
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DNA测序对Ⅱ型单纯疱疹病毒进行分型鉴定的方法研究 被引量:6
15
作者 汪舟佳 刘意 +4 位作者 贾雷立 任翊 孙岩松 黄留玉 陈泽良 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期99-101,共3页
目的建立一种能够对标本中的Ⅱ型单纯疱疹病毒进行准确鉴定分型的方法。方法从生殖器疱疹(GH)患者病变部位采集标本,将标本接种Vero细胞,待出现细胞病变后收获病毒感染物;提取病毒感染物的基因组。根据HSV-1和HSV-2的gD基因序列,设计合... 目的建立一种能够对标本中的Ⅱ型单纯疱疹病毒进行准确鉴定分型的方法。方法从生殖器疱疹(GH)患者病变部位采集标本,将标本接种Vero细胞,待出现细胞病变后收获病毒感染物;提取病毒感染物的基因组。根据HSV-1和HSV-2的gD基因序列,设计合成了一对能够同时扩增两个型的病毒引物,PCR扩增感染物中病毒的序列,PCR产物克隆到pMD18-T载体,然后进行序列测定,测定序列与数据库比对,根据比对结果确定HSV的型。结果用PCR成功扩增出200bp大小的片段;测定序列与数据库的比对结果显示,该序列与HSV-2的gD基因同源性最高,表明在标本中有HSV-2病毒。测定的gD序列与国外分离株的序列存在一定的差异。结论通过PCR扩增和产物的克隆测序,能够实现对临床上难以区分的HSV-1和HSV-2的分型鉴定。 展开更多
关键词 疱疹病毒2型 聚合酶链反应 序列分析 DNA
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副溶血弧菌实时荧光定量PCR快速检测方法的建立 被引量:7
16
作者 孙宏迪 杜昕颖 +6 位作者 汪舟佳 王玉飞 宋宏彬 孙岩松 黄留玉 杨振洲 陈泽良 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期969-972,共4页
目的建立一种快速检测副溶血弧菌的实时荧光定量PCR方法。方法根据副溶血弧菌tdh基因设计合成引物及TaqMan探针,利用阳性质粒和模拟标本建立副溶血弧菌实时荧光定量PCR检测方法。结果以副溶血弧菌DNA为模板克隆了tdh基因,得到阳性质粒... 目的建立一种快速检测副溶血弧菌的实时荧光定量PCR方法。方法根据副溶血弧菌tdh基因设计合成引物及TaqMan探针,利用阳性质粒和模拟标本建立副溶血弧菌实时荧光定量PCR检测方法。结果以副溶血弧菌DNA为模板克隆了tdh基因,得到阳性质粒。利用阳性质粒建立了定量PCR方法 ,得到标准曲线y=-4.9197x+58.72,决定系数(R2)为0.9864。此方法具有很好的特异性,在对15种肠道致病菌的检测中,只有副溶血弧菌基因组DNA的扩增结果为阳性。对粪便和食物模拟标本进行检测,敏感性均为102cfu/μl。此方法重复性较好,对4种浓度(105、104、103、102cfu/μl)的菌液各进行3次检测,结果均为阳性,且Ct值的变异系数<2%。结论建立了一种检测副溶血弧菌的荧光定量PCR方法 ,该法的敏感性和特异均较好,适用于快速、准确地检测食品和粪便中的沙门菌。 展开更多
关键词 弧菌 副溶血性 基因 tdh 实时定量聚合酶链反应 DNA探针
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布鲁氏菌胞内生存机制研究进展 被引量:14
17
作者 王玉飞 陈泽良 黄留玉 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期1218-1221,共4页
布鲁氏菌是一种胞内寄生菌,可以在专业和非专业吞噬细胞内生存和复制。当布鲁氏菌与细胞接触时,细菌可以通过受体分子进入细胞。布鲁氏菌在细胞内首先定位于早期吞噬体,然后,在胞内改变其运输方向,最终抵达其胞内复制部位内质网,开始大... 布鲁氏菌是一种胞内寄生菌,可以在专业和非专业吞噬细胞内生存和复制。当布鲁氏菌与细胞接触时,细菌可以通过受体分子进入细胞。布鲁氏菌在细胞内首先定位于早期吞噬体,然后,在胞内改变其运输方向,最终抵达其胞内复制部位内质网,开始大量复制。这种复制既不影响细胞的基本功能,也不诱导细胞的损伤。主要综述了布鲁氏菌对细胞的侵袭、胞内运输和复制的相关研究进展。 展开更多
关键词 布鲁氏菌 细菌侵袭 胞内运输 胞内复制
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尿路感染ESBLs阳性大肠埃希菌的基因分型与耐药性分析 被引量:8
18
作者 刘世巍 徐杰 +10 位作者 张正芳 王立平 高光俊 王玉飞 苑锡铜 黄留玉 崔明全 张宁 陈永德 陈泽良 郭洁 《现代检验医学杂志》 CAS 2012年第4期5-8,共4页
目的了解尿路感染ESBLs阳性大肠埃希菌的耐药和基因分型遗传特征,指导尿路感染的临床用药与控制医院感染。方法选取中国中医研究院望京医院2006~2010年医院分离的76株尿路感染大肠埃希菌,通过药敏试验分析这些菌株对17种抗生素的耐... 目的了解尿路感染ESBLs阳性大肠埃希菌的耐药和基因分型遗传特征,指导尿路感染的临床用药与控制医院感染。方法选取中国中医研究院望京医院2006~2010年医院分离的76株尿路感染大肠埃希菌,通过药敏试验分析这些菌株对17种抗生素的耐药性,用rep-PCR对菌株进行分型。结果选取的76株尿路感染大肠埃希菌对哌拉西林、庆大霉素、左氧氟沙星、头孢唑啉、头孢呋辛、氨苄西林/舒巴坦、头孢噻肟与头孢曲松的耐药率高达40%以上,依次是86%,68%,64%,59%,59%,41%,41%和40%。17种抗菌药物中,亚胺培南与美洛培南的耐药率最低,敏感率为100%,与ES—BLs阴性的大肠埃希菌相比,尿路感染ESBLs阳性大肠埃希菌有14种抗菌药物的耐药率高。76株尿路感染大肠埃希菌分为三个大的组,其中A组敏感性最高,B组次之,C组耐药性最强,舍有ESBLs的尿路感染大肠埃希菌主要分布在C组和B组。rep-PCR可以把76株菌分为68个基因型,四个组,分别为I,Ⅱ,Ⅲ和Ⅳ,分别包含25,14,20和17株细菌。不同基因型的菌株在耐药性上没有显著差异。结论尿路感染大肠埃希菌对常见的抗生素产生不同程度的耐药性,含有ESBLs的尿路感染大肠埃希菌的耐药性更高,这些菌株的耐药性可能是通过水平转移获得的。临床上应严格按照科学的用药方案进行抗生素使用,及时掌控ESBLs的尿路致病性大肠埃希菌对抗生素耐药的变化,以减少耐药性菌株的产生,降低耐药菌的危害。 展开更多
关键词 超广谱Β-内酰胺酶 尿路感染大肠埃希菌 基因分型 耐药性
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三重PCR鉴别牛、羊和猪3个布氏杆菌种的方法研究 被引量:7
19
作者 杜昕颖 汪舟佳 +7 位作者 王玉飞 甄清 乔凤 钟志军 赵瑾 孙岩松 陈泽良 黄留玉 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期110-112,共3页
关键词 布氏杆菌 IS711 三重PCR
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多重PCR特异检测布鲁氏菌方法的建立 被引量:16
20
作者 杜昕颖 陈泽良 +4 位作者 王玉飞 乔凤 赵瑾 苑锡铜 黄留玉 《解放军预防医学杂志》 CAS 北大核心 2008年第5期341-343,共3页
目的建立一种快速检测布鲁氏菌的多重PCR方法,为临床快速检测、准确诊断布鲁氏菌提供依据。方法针对布鲁氏菌外膜蛋白31 kD、22 kD和2a基因,各设计一对引物,扩增片断大小分别为427 bp3、17 bp和830 bp。利用纯培养物和模拟标本,分析这3... 目的建立一种快速检测布鲁氏菌的多重PCR方法,为临床快速检测、准确诊断布鲁氏菌提供依据。方法针对布鲁氏菌外膜蛋白31 kD、22 kD和2a基因,各设计一对引物,扩增片断大小分别为427 bp3、17 bp和830 bp。利用纯培养物和模拟标本,分析这3对引物的特异性和敏感性。结果3对引物均能特异扩增布鲁氏菌的DNA,31 kD、22 kD和2a,扩增纯培养物的敏感性分别为2.8×103、4.6×103和2.1×104cfu,将3对引物组合在一起建立了多重PCR方法,能从模拟的细胞和血液标本中扩增出特异的产物,对模拟的细胞感染标本的敏感性为1×105cfu,对模拟的血标本的敏感性为1.2×106cfu。结论针对外膜蛋白基因,建立了能特异地检测标本中布鲁氏菌的多重PCR检测方法。 展开更多
关键词 多重PCR 布鲁氏茵 外膜蛋白
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