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利用结合态亚油酸转化生成共轭亚油酸的乳酸菌筛选
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作者 华凌燕 梅永超 +3 位作者 杨波 赵建新 陈卫 陈海琴 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第20期27-34,41,共9页
共轭亚油酸(conjugated linoleic acid, CLA)是亚油酸的几何和位置异构体,具有多种生理功能,前期研究集中于以游离亚油酸为底物转化生成CLA,为了利用自然界中大量以结合态形式存在的亚油酸,该文从22株乳酸菌中筛选出以结合态亚油酸为底... 共轭亚油酸(conjugated linoleic acid, CLA)是亚油酸的几何和位置异构体,具有多种生理功能,前期研究集中于以游离亚油酸为底物转化生成CLA,为了利用自然界中大量以结合态形式存在的亚油酸,该文从22株乳酸菌中筛选出以结合态亚油酸为底物转化生成CLA的菌株,结果显示8株乳酸菌能高效利用结合态亚油酸转化生成CLA,其中转化率最高的为短双歧杆菌CCFM683,转化率高达96%。为进一步探究该菌株高效转化结合态亚油酸生成CLA的原因,利用基因序列比对在短双歧杆菌CCFM683全基因组中筛选出2个编码脂肪酶的候选基因Lipase A/B,在大肠杆菌(Escherichia coli BL21)中异源表达进行功能分析,结果表明Lipase B能特异性水解亚油酸单甘油酯,证实以亚油酸单甘油酯为底物时菌株先将亚油酸单甘油酯水解成游离亚油酸后转化生成CLA,这为进一步研究乳酸菌利用结合态亚油酸提供了参考。 展开更多
关键词 结合态亚油酸 共轭亚油酸 乳酸菌 脂肪酶 生物转化
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Δ12/Δ15脂肪酸脱饱和酶在多不饱和脂肪酸生产中的应用研究进展
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作者 吴琛 史海粟 陈海琴 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期1-11,34,共12页
Δ12/Δ15脂肪酸脱饱和酶(FADS12/15)广泛存在于植物、动物和微生物中,是多不饱和脂肪酸(polyunsaturated fatty acids,PUFAs)合成的关键酶,在其生产中发挥着重要作用。PUFAs具有广泛的益生功能,但是由于人体内缺乏FADS12/15,无法合成... Δ12/Δ15脂肪酸脱饱和酶(FADS12/15)广泛存在于植物、动物和微生物中,是多不饱和脂肪酸(polyunsaturated fatty acids,PUFAs)合成的关键酶,在其生产中发挥着重要作用。PUFAs具有广泛的益生功能,但是由于人体内缺乏FADS12/15,无法合成亚油酸和α-亚麻酸,因此必须通过食物摄入来补充。此外,人体对其他PUFAs的需求也很高,迫切需要开发优质的PUFAs生产者。微生物是脂肪酸生产的潜在资源,通过FADS12/15基因工程改造可有效提高ω-3和ω-6 PUFAs的产量,从而为人类提供优质的生物脂质资源。作者综述了FADS12/15参与的脂肪酸合成途径及其催化机理,以及FADS12/15基因过表达体系和基因工程微生物种类,总结了FADS12/15同源或异源表达生产PUFAs的研究现状,旨在为FADS12/15基因工程研究和PUFAs的高效生产提供参考。 展开更多
关键词 Δ12/Δ15脂肪酸脱饱和酶 多不饱和脂肪酸 基因工程微生物 异源表达 催化机制
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高山被孢霉NADP^(+)依赖型异柠檬酸脱氢酶的异源表达与活性分析 被引量:1
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作者 王旭旭 孙晓琪 +3 位作者 陈海琴 赵建新 陈卫 唐鑫 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期13-19,共7页
产油真菌胞质中NADP^(+)依赖型异柠檬酸脱氢酶(isocitrate dehydrogenase,IDH)能够为脂肪酸合成提供还原力,前期研究表明高山被孢霉的异柠檬酸脱氢酶4(Mortierella alpina isocitrate dehydrogenase4,MaIDH4)对脂质积累有积极的影响。... 产油真菌胞质中NADP^(+)依赖型异柠檬酸脱氢酶(isocitrate dehydrogenase,IDH)能够为脂肪酸合成提供还原力,前期研究表明高山被孢霉的异柠檬酸脱氢酶4(Mortierella alpina isocitrate dehydrogenase4,MaIDH4)对脂质积累有积极的影响。为了深入研究MaIDH4的性质,该文将其在大肠杆菌和毕赤酵母系统中分别进行异源表达并纯化,均成功获得纯酶,并考察了不同表达系统对酶活性和产量的影响。首先克隆MaIDH4至表达载体pET28a(+)和pPink-HC-3CZHEK构建重组质粒,然后分别转化至Escherichia coli BL21(DE3)和PichiaPink TM Strain 2进行诱导表达,最后采用镍柱纯化获得携带10×His标签的MaIDH4重组酶,检测纯酶的比活力分别是34.10 U/mg和43.00 U/mg,酶产量分别为10.28 U/L和159.12 U/L。通过纯酶比活力和酶产量分析表明相比于大肠杆菌表达系统,毕赤酵母宿主更适合MaIDH4的异源表达。 展开更多
关键词 高山被孢霉 异柠檬酸脱氢酶 异源表达 酶活性 酶产量
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提高车辆小偏置碰撞安全性的A柱结构研究
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作者 刘多加 钱梅林 +2 位作者 陈海琴 李灿 赵坤民 《汽车工艺与材料》 2024年第8期1-6,共6页
基于中国保险汽车安全指数25%偏置碰撞工况,对某新能源汽车A柱的结构设计方案进行了研究。对比分析了基础结构、复合车身解决方案(Composite Body Solutions,CBS)胶块增强结构、热气胀形管梁增强结构对碰撞安全性的影响,介绍了CBS胶块... 基于中国保险汽车安全指数25%偏置碰撞工况,对某新能源汽车A柱的结构设计方案进行了研究。对比分析了基础结构、复合车身解决方案(Composite Body Solutions,CBS)胶块增强结构、热气胀形管梁增强结构对碰撞安全性的影响,介绍了CBS胶块和热气胀形的制造工艺,并对热气胀形工艺进行了仿真分析,对比分析2种增强结构的工装投入和单件成本。研究发现,在均能实现小偏置碰撞安全性优秀等级的前提下,1500 MPa热气胀管梁方案在单件成本及轻量化方面比CBS胶块方案更具优势。 展开更多
关键词 碰撞安全性 小偏置碰 车身A柱 热气胀形 CBS胶块
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双歧杆菌源亚油酸异构酶的原核表达及功能分析
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作者 嵇熠彬 梅永超 +1 位作者 杨波 陈海琴 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2023年第23期64-69,共6页
来源于短双歧杆菌CCFM683的亚油酸异构酶(Bifidobacterium breve isomerase,BBI)是目前唯一已知的乳酸菌源单酶转化亚油酸生成共轭亚油酸c9,t11-CLA单体的亚油酸异构酶。该文以pET-28a(+)为表达载体,构建组氨酸标签分别位于C端和N端的... 来源于短双歧杆菌CCFM683的亚油酸异构酶(Bifidobacterium breve isomerase,BBI)是目前唯一已知的乳酸菌源单酶转化亚油酸生成共轭亚油酸c9,t11-CLA单体的亚油酸异构酶。该文以pET-28a(+)为表达载体,构建组氨酸标签分别位于C端和N端的重组载体pET-28a(+)-bbi-His和pET-28a(+)-His-bbi,分别实现其在BL21(DE3)、BL21(DE3)pLysS和Rosetta(DE3)3种类型的大肠杆菌(Escherichia coli)宿主中的异源表达和条件优化。结果表明表达BBI的最优重组菌为E.coli Rosetta/pET-28a(+)-bbi-His,最佳诱导条件为以1.0 mmol/L异丙基硫代半乳糖苷诱导8 h,且当用BBI粗酶转化脂肪酸时,相较于亚油酸和γ-亚麻酸,BBI更偏好转化α-亚麻酸。 展开更多
关键词 大肠杆菌 亚油酸异构酶 共轭脂肪酸 条件优化 底物偏好性
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南海部分区域卫勤药品保障的实践与体会
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作者 陈贵娥 郭珊成 +4 位作者 林文明 郭思潭 谌俊 陈海琴 陈永春 《解放军药学学报》 CAS 2024年第2期142-145,共4页
结合南海区域特殊的地理环境、气候条件与岛礁人员疾病谱,探讨南海区域卫勤药品保障的特点、南海区域卫勤药品保障的多样性、更合理的卫勤药品保障策略,以保障官兵用药需求,充分发挥药品在卫勤保障任务中的作用,为今后更好地保障南海区... 结合南海区域特殊的地理环境、气候条件与岛礁人员疾病谱,探讨南海区域卫勤药品保障的特点、南海区域卫勤药品保障的多样性、更合理的卫勤药品保障策略,以保障官兵用药需求,充分发挥药品在卫勤保障任务中的作用,为今后更好地保障南海区域用药提供一定参考。 展开更多
关键词 南海区域 部队 药品 保障
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揿针埋针治疗糖尿病胃轻瘫临床观察
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作者 黄荣 汪盈 +4 位作者 杨帆 李娜 虞成毕 法文霞 陈海琴 《中国中医药现代远程教育》 2024年第21期113-116,共4页
目的研究揿针埋针治疗糖尿病胃轻瘫(DGP)患者的有效性及安全性。方法选择2021年8月—2022年10月在九江市中医医院糖尿病科门诊及住院部诊断为DGP的患者60例作为研究对象,随机分为两组,其中对照组30例,予糖尿病科常规护理方法及口服枸橼... 目的研究揿针埋针治疗糖尿病胃轻瘫(DGP)患者的有效性及安全性。方法选择2021年8月—2022年10月在九江市中医医院糖尿病科门诊及住院部诊断为DGP的患者60例作为研究对象,随机分为两组,其中对照组30例,予糖尿病科常规护理方法及口服枸橼酸莫沙必利片治疗;治疗组30例,在对照组的基础上予揿针埋针治疗。两组均以5 d为1个疗程,连续2个疗程,比较临床疗效及治疗前后中医证候积分、空腹血糖、餐后2 h血糖变化。结果治疗组总有效率为93.33%(28/30),高于对照组的73.33%(22/30)(P<0.05)。治疗后,治疗组在改善中医证候积分及空腹血糖、餐后2 h血糖变化水平方面明显优于对照组(P<0.05)。结论应用揿针埋针治疗DGP患者,可以改善其临床症状,提高生活质量。 展开更多
关键词 痞满 糖尿病胃轻瘫 揿针埋针疗法
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大肠杆菌无细胞蛋白质合成系统的初步研究 被引量:2
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作者 陈海琴 徐志南 +2 位作者 汪诚 廖玉华 岑沛霖 《浙江大学学报(工学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第5期843-847,共5页
在近几年来被广泛研究和应用的大肠杆菌无细胞蛋白质合成系统中,大肠杆菌抽提物的制备、底物浓度的配比以及能量再生体系的选择是最关键的几个因素.以绿色荧光蛋白(GFP)为报导基因,以缺失核酸酶I基因的大肠杆菌A19为实验菌株,通过对大... 在近几年来被广泛研究和应用的大肠杆菌无细胞蛋白质合成系统中,大肠杆菌抽提物的制备、底物浓度的配比以及能量再生体系的选择是最关键的几个因素.以绿色荧光蛋白(GFP)为报导基因,以缺失核酸酶I基因的大肠杆菌A19为实验菌株,通过对大肠杆菌无细胞抽提物制备过程中菌体收集时间、细胞破碎压力、后处理条件等参数的摸索和确定、无细胞蛋白质合成系统中底物浓度配比的正交实验优化以及系统中能量再生体系的比较和选择,制备得到了GFP表达量为154μg/mL的大肠杆菌无细胞蛋白质合成系统,与优化前相比产量提高了29倍. 展开更多
关键词 蛋白质 生物合成 无细胞系统 绿色荧光蛋白(GFP)
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电还原耦合膜分离技术净化含铬废水研究 被引量:3
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作者 陈海琴 梁波 +1 位作者 王雪野 朱学峰 《上海第二工业大学学报》 2018年第1期23-28,共6页
提出了一种电还原与膜分离技术耦合新工艺对含铬废水进行处理。通过导电微滤膜与铁板电极形成的回路,研究了在不同电压和运行时间条件下含铬废水的处理效果,并对铬的去除机理进行探究。实验结果表明,在外加电压为2 V,Cr浓度为20 mg/L,运... 提出了一种电还原与膜分离技术耦合新工艺对含铬废水进行处理。通过导电微滤膜与铁板电极形成的回路,研究了在不同电压和运行时间条件下含铬废水的处理效果,并对铬的去除机理进行探究。实验结果表明,在外加电压为2 V,Cr浓度为20 mg/L,运行90 min,可以取得处理Cr效果的同时不会造成膜损坏。Cr的去除率随电压的增大而增加,2 h后去除效果均趋于稳定,最高去除率在98.5%左右。不同工况条件下,跨膜压差均维持在较低水平。本研究为处理重金属废水提供了新思路。 展开更多
关键词 重金属 膜分离 外加电压 废水处理
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基于金字塔分割和时空注意力的视频行人重识别 被引量:2
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作者 王洪元 徐志晨 +2 位作者 陈海琴 丁宗元 李鹏辉 《常州大学学报(自然科学版)》 CAS 2023年第2期66-76,共11页
针对视频行人重识别任务中存在的行人外观、遮挡等问题,研究并设计了一个基于金字塔分割和注意力机制的视频行人重识别模型。首先,为了增强图模型对行人局部特征的识别能力,提出了多个尺度的水平金字塔分割方法,将各特征分别分割成不同... 针对视频行人重识别任务中存在的行人外观、遮挡等问题,研究并设计了一个基于金字塔分割和注意力机制的视频行人重识别模型。首先,为了增强图模型对行人局部特征的识别能力,提出了多个尺度的水平金字塔分割方法,将各特征分别分割成不同大小的区域,并池化成统一尺寸后输入图模型。另外,鉴于简单的时空注意模块容易因遮挡破坏行人特征,因此使用时空相关注意力方法改进时空注意模块,逐步学习并聚合空间局部信息,同时在时序上相互作用,抑制行人干扰特征并增强判别特征。将模型在Mars和DukeMTMC-VideoReID两个数据集上进行了评估,实验结果证实了文中提出方法的有效性。 展开更多
关键词 视频行人重识别 深度学习 图模型 注意力机制 加权损失策略
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本科生微生物学(食品)创新教学模式摸索 被引量:6
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作者 陈海琴 田丰伟 +3 位作者 王刚 张秋香 陈卫 张灏 《中国科教创新导刊》 2012年第26期23-24,共2页
本文总结了对本科生微生物学(食品)课程创新教学模式的摸索,主要包括双语教学实践、多种教学方式和教学技法研究、网络化、立体化、可编目和可检索的教学资源与素材体系的建设等,希望通过这些摸索,我们能形成一个新的微生物学(食品... 本文总结了对本科生微生物学(食品)课程创新教学模式的摸索,主要包括双语教学实践、多种教学方式和教学技法研究、网络化、立体化、可编目和可检索的教学资源与素材体系的建设等,希望通过这些摸索,我们能形成一个新的微生物学(食品)课程教学模式,在现有教学模式的基础上提高学生进行微生物学和食品微生物学学习的能力,能运用食品微生物学知识和技能融会贯通地学习和解决相关的专业实际问题,使学生成为在国内和国际上都具有竞争能力的高素质创新人才。 展开更多
关键词 微生物学 教学模式 双语教学 网络化
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植物乳杆菌ZS2058生物转化共轭亚油酸反应条件的优化研究
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作者 陈海琴 杨波 +3 位作者 许庆炎 宋元达 陈卫 张灏 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2012年第22期192-197,共6页
对本实验室从泡菜中筛选到的植物乳杆菌ZS2058完整细胞生物转化共轭亚油酸的反应条件进行了系统研究。在1mL磷酸钾缓冲液反应体系中,通过单因素实验和响应面分析,确定最合适的反应条件为:亚油酸底物浓度为0.8mg/mL,细胞浓度为4×101... 对本实验室从泡菜中筛选到的植物乳杆菌ZS2058完整细胞生物转化共轭亚油酸的反应条件进行了系统研究。在1mL磷酸钾缓冲液反应体系中,通过单因素实验和响应面分析,确定最合适的反应条件为:亚油酸底物浓度为0.8mg/mL,细胞浓度为4×1010cfu/mL,反应温度为37℃,缓冲液pH为6.7。在此反应条件下,cis9,trans11-CLA的浓度为374.24μg/mL,转化率高达46.78%,这对于实现共轭亚油酸的高效生产和研究其生理功能具有重要的现实意义和理论价值。 展开更多
关键词 共轭亚油酸 生物转化 植物乳杆菌 转化率
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各类小肠疾病行胶囊内镜检查73例护理体会 被引量:1
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作者 陈海琴 陈红 +1 位作者 张海峰 周国雄 《交通医学》 2011年第3期320-321,共2页
目的:总结胶囊内镜检查对各类小肠疾病的检查效果及护理。方法:对73例各类小肠疾病患者采用国产OMOM胶囊内镜检查。结果:除1例外,其余72例均顺利完成检查。诊断小肠血管畸形、静脉瘤13例,小肠炎症10例,克罗恩病、小肠新生物、肠道寄生... 目的:总结胶囊内镜检查对各类小肠疾病的检查效果及护理。方法:对73例各类小肠疾病患者采用国产OMOM胶囊内镜检查。结果:除1例外,其余72例均顺利完成检查。诊断小肠血管畸形、静脉瘤13例,小肠炎症10例,克罗恩病、小肠新生物、肠道寄生虫病各6例,小肠溃疡性病变4例,小肠多发息肉、小肠间质瘤、门脉高压性肠病、活动性出血未能发现病因各3例,异位胰腺、可疑肠易激综合征各2例,升结肠肿瘤、放射性肠炎各1例,未见异常10例。结论:胶囊式内镜检查对小肠疾病的诊断效果好,但需改进和完善胶囊内镜检查的护理措施。 展开更多
关键词 小肠疾病 胶囊内镜 护理
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超声辅助凝胶化对鲢鱼糜凝胶特性的影响 被引量:12
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作者 李斌 陈海琴 +5 位作者 赵建新 范大明 黄建联 高文华 陈卫 张灏 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期65-69,共5页
为了改善鲢鱼糜凝胶的品质,采用超声波辅助强化,定向考察了超声波输出设备内的声场分布,并通过测定鱼糜凝胶强度、持水率、色度、微观结构等指标研究了超声波条件对鲢鱼糜凝胶特性的影响。结果表明:设备内超声波声场分布与换能器的位置... 为了改善鲢鱼糜凝胶的品质,采用超声波辅助强化,定向考察了超声波输出设备内的声场分布,并通过测定鱼糜凝胶强度、持水率、色度、微观结构等指标研究了超声波条件对鲢鱼糜凝胶特性的影响。结果表明:设备内超声波声场分布与换能器的位置存在显著规律,越靠近换能器的区域,声功率强度值越大;当声功率强度达到0.49 W/cm2及以上时,超声波辅助处理可以提高鲢鱼糜的凝胶强度和持水率,且随着声功率强度的增加,鱼糜凝胶强度和持水率呈增加趋势;超声处理对鱼糜凝胶的白度无显著影响。扫描电镜分析显示,0.85 W/cm2超声处理的鱼糜样品,其致密度和均匀度较对照组更好。 展开更多
关键词 超声波 鱼糜 凝胶强度
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植物乳杆菌ZS2058生物转化产物共轭亚油酸的分析方法的研究 被引量:8
15
作者 许庆炎 陈海琴 +3 位作者 田丰伟 赵建新 张灏 陈卫 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期110-115,共6页
研究了紫外分光光度法、GC、Ag^+-HPLC和GC-MS四种分析方法对植物乳杆菌ZS2058生物转化亚油酸(LA)产生的共轭亚油酸(CLA)检测时的异同点。结果表明,这4种分析方法在对CLA进行检测时各有特色,应用范围也有不同。紫外分光光度法检测成本最... 研究了紫外分光光度法、GC、Ag^+-HPLC和GC-MS四种分析方法对植物乳杆菌ZS2058生物转化亚油酸(LA)产生的共轭亚油酸(CLA)检测时的异同点。结果表明,这4种分析方法在对CLA进行检测时各有特色,应用范围也有不同。紫外分光光度法检测成本最低,操作最快速,但检测结果为转化产物中各种CLA异构体的总和,而GC、Ag^+-HPLC和GC-MS能将产物中的各类CLA异构体分开,可对复杂的生物转化产物进行分析。其中,GC的最大优点在于可以检测到转化底物LA,Ag^+-HPLC可将转化产物中c9,t11-CLA和t8,c10- CLA很好的分离,而GC-MS可以将各种异构体与其它副产物明确区分开来。总之,在检测生物转化法产生的CLA时,根据不同的实验需求来选择不同的检测方法,并需将这几种方法灵活的结合起来应用。 展开更多
关键词 亚油酸 共轭亚油酸 生物转化 分析方法 植物乳杆菌
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肝脓肿临床分析183例 被引量:14
16
作者 张海峰 陈海琴 +1 位作者 丁晓凌 周国雄 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2011年第28期2979-2982,共4页
目的:总结肝脓肿的诊断和治疗经验,提高诊疗水平.方法:回顾性分析本院2001-01/2011-06收治的183例肝脓肿诊断和治疗的临床资料.结果:男112例,女61例,年龄最小18岁,最大83岁.左肝脓肿65例,右肝脓肿110例,混合型脓肿8例.单腔脓肿152例,2... 目的:总结肝脓肿的诊断和治疗经验,提高诊疗水平.方法:回顾性分析本院2001-01/2011-06收治的183例肝脓肿诊断和治疗的临床资料.结果:男112例,女61例,年龄最小18岁,最大83岁.左肝脓肿65例,右肝脓肿110例,混合型脓肿8例.单腔脓肿152例,2个以上脓腔31例.脓腔最大139mm×115mm,最小17mm×16mm;合并糖尿病、空腹血糖受损、糖耐量低减107例,感染性休克5例.好转治愈178例,2例转外科手术治疗,3例自动出院;B超引导下穿刺抽脓107例,穿刺次数1-7次.结论:肝脓肿与糖尿病密切相关;病原菌以肺炎克雷伯菌多见;B超引导下肝脓肿穿刺操作简便,效果好,可作为肝脓肿局部治疗的首选治疗方法. 展开更多
关键词 肝脓肿 诊断 治疗 糖尿病 穿刺
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高山被孢霉生产多不饱和脂肪酸发酵条件的研究进展 被引量:11
17
作者 代鹏 陈海琴 +3 位作者 顾震南 张灏 陈永泉 陈卫 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期354-359,共6页
高山被孢霉能发酵生产多不饱和脂肪酸如花生四烯酸等,具有安全性好、产率高、生产易控制等优点,适宜于工业化生产。本文论述了高山被孢霉产多不饱和脂肪酸发酵条件的研究进展,着重于论述发酵过程中碳源、氮源、溶解氧及培养条件等对产... 高山被孢霉能发酵生产多不饱和脂肪酸如花生四烯酸等,具有安全性好、产率高、生产易控制等优点,适宜于工业化生产。本文论述了高山被孢霉产多不饱和脂肪酸发酵条件的研究进展,着重于论述发酵过程中碳源、氮源、溶解氧及培养条件等对产物产率的影响作用研究。 展开更多
关键词 高山被孢霉 多不饱和脂肪酸 发酵条件
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耐热β-半乳糖苷酶的研究进展 被引量:6
18
作者 董艺凝 陈海琴 +2 位作者 刘小鸣 张灏 陈卫 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期384-387,共4页
耐热-半乳糖苷酶因其具有较高的作用温度和良好的热稳定性,在乳制品生产领域展现出广阔的应用前景,其理论及应用价值正逐渐成为近年来的研究热点。从耐热-半乳糖苷酶的来源、酶学性质、结构特征、催化机制及定向进化研究方面综述了耐热... 耐热-半乳糖苷酶因其具有较高的作用温度和良好的热稳定性,在乳制品生产领域展现出广阔的应用前景,其理论及应用价值正逐渐成为近年来的研究热点。从耐热-半乳糖苷酶的来源、酶学性质、结构特征、催化机制及定向进化研究方面综述了耐热-半乳糖苷酶的研究进展,并对其应用及研究前景进行了展望。 展开更多
关键词 耐热-半乳糖苷酶 结构特征 催化机制 定向进化
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蚕蛹脂肪酸和游离氨基酸组成及分布特征分析 被引量:5
19
作者 杨芹 过立昶 +3 位作者 陈海琴 张灏 陈卫 陈永泉 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2016年第23期351-356,366,共7页
为了考察蚕蛹的主要化学成分组成,为蚕蛹的生物利用及营养研究提供物质基础,采用气相色谱-质谱法系统分析了不同品种和不同孵育时间的蚕蛹的脂肪酸和游离氨基酸组成。结果表明,桑蚕蛹和柞蚕蛹中的脂肪酸在种类上是相同的,共9种。但柞蚕... 为了考察蚕蛹的主要化学成分组成,为蚕蛹的生物利用及营养研究提供物质基础,采用气相色谱-质谱法系统分析了不同品种和不同孵育时间的蚕蛹的脂肪酸和游离氨基酸组成。结果表明,桑蚕蛹和柞蚕蛹中的脂肪酸在种类上是相同的,共9种。但柞蚕蛹中的多不饱和脂肪酸(74.7%)要高于桑蚕蛹(60.9%),而其软脂酸(C16∶0)和硬脂酸(C18∶0)的含量低于桑蚕蛹。游离氨基酸分析发现,除了在柞蚕蛹中检测到天冬酰胺二在桑蚕蛹中没测到外,二者的其它氨基酸组成在种类上相同。在含量上,柞蚕蛹中脯氨酸含量最高(37.5%),丙氨酸次之(20.5%),桑蚕蛹中丙氨酸含量最高(34.9%),都远高于其它氨基酸。孵育过程中柞蚕蛹的脂肪酸和氨基酸分析结果显示,大部分脂肪酸随孵化时间的延长总体呈下降趋势,只有部分脂肪酸在成蛾阶段有小幅上升。其氨基酸的变化要相对复杂些,在蚕由糖宝完全转化为蛹的初期所有氨基酸的含量均显著升高,孵化阶段开始后由于机体开始利用储存的氨基酸其含量开始下降,表明在蚕蛹由蛹变蛾的过程中可能存在大量的蛋白质合成。该结果表明了蚕在由虫体向蛹和蛾的变化过程中的代谢物变化情况,可能反映了孵育过程中蚕蛹体内能量利用的情况,也为确定后加工时蚕蛹的处理时间和方式提供依据,并为蚕蛹的进一步开发与利用提供物质基础和理论依据。 展开更多
关键词 蚕蛹 脂肪酸 游离氨基酸 甲基叔丁基醚 气相色谱-质谱法
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高山被孢霉GDP-L-岩藻糖合成途径中GDP-甘露糖-4,6-脱水酶的克隆、表达和功能鉴定 被引量:4
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作者 王鸿超 张陈 +5 位作者 周昕 陈海琴 顾震南 张灏 陈卫 陈永泉 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期14-19,共6页
GDP-L-岩藻糖是糖复合物生物合成和糖类代谢的重要中间产物,作为岩藻糖转移酶的供体参与岩藻糖基化反应,具有重要的生理功能。高山被孢霉是重要的产油真菌,是唯一在分子水平上证明可合成GDP-L-岩藻糖的真菌。GDP-L-岩藻糖从头合成途径中... GDP-L-岩藻糖是糖复合物生物合成和糖类代谢的重要中间产物,作为岩藻糖转移酶的供体参与岩藻糖基化反应,具有重要的生理功能。高山被孢霉是重要的产油真菌,是唯一在分子水平上证明可合成GDP-L-岩藻糖的真菌。GDP-L-岩藻糖从头合成途径中的GDP-甘露糖-4,6-脱水酶(GMD)能催化GDP-D-甘露糖合成GDP-4-酮基-6-脱氧-D-甘露糖。对高山被孢霉中的GMD基因进行克隆、表达和功能鉴定,可进一步阐明GDP-L-岩藻糖体内代谢的分子生物机制。首先对GMD序列进行分析,并以p ET28a+质粒为骨架构建了GMD的表达载体,然后转化至大肠杆菌BL21中进行诱导表达。进一步利用Ni金属螯合层析纯化目的蛋白,采用液相色谱-质谱法分析酶反应产物,表明纯化蛋白具有GMD活性。最后对高山被孢霉进行发酵培养,发现GDP-L-岩藻糖产量在氮源耗尽后较高,可达0.10 mg/g。同时GMD的转录水平在氮源耗尽后发生了明显的上调,表明GMD在氮源耗尽后对高山被孢霉体内GDP-L-岩藻糖的合成具有重要作用。这为进一步利用高山被孢霉发酵生产GDP-L-岩藻糖和酶法转化生产GDP-L-岩藻糖奠定了理论基础。 展开更多
关键词 功能鉴定 从头合成途径 GDP-甘露糖-4 6-脱水酶 GDP-L-岩藻糖 高山被孢霉
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