用PCR技术扩增恙虫病立克次体Sta58主要抗原基因的部分片段 被引量：7

1

作者 陈添胜 涂裕英 冯慧敏 《中山医科大学学报》 CSCD 1992年第4期77-78,共2页

参照国外发表的恙虫病立克次体Karp株sta58全基因序列,合成1对DNA引物(27个碱基和23个碱基),以Karp DNA为模板,成功扩增了长约Ikb的DNA片段。将PCR技术应用于立克次体研究,为今后用PCR检测立克次体以及立克次体分子克隆研究起了探索作用。

关键词 恙虫病 立克次体 抗原 基因

下载PDF 职称材料

恙虫病东方体CMY株sta 56基因片段序列分析 被引量：1

2

作者 陈添胜 谭丽霞 +1 位作者 罗会明 许曼波 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1999年第5期3-5,共3页

目的　了解恙虫病东方体 Ｃ Ｍ Ｙ 株与其它株的关系。方法　测定 Ｃ Ｍ Ｙ 株 ｓｔａ５６ 基因片段的核苷酸序列并与其它株相应序列进行比较。结果　在测定的３２４ｂｐ 序列中， Ｇ Ｃ 含量为４３５ ％ ； 与 Ｋａｒｐ 、 Ｇｉｌ... 目的　了解恙虫病东方体 Ｃ Ｍ Ｙ 株与其它株的关系。方法　测定 Ｃ Ｍ Ｙ 株 ｓｔａ５６ 基因片段的核苷酸序列并与其它株相应序列进行比较。结果　在测定的３２４ｂｐ 序列中， Ｇ Ｃ 含量为４３５ ％ ； 与 Ｋａｒｐ 、 Ｇｉｌｌｉａｍ 、 Ｋａｔｏ 、ｋｕｒｏｋｉ、 Ｋａｗａｓａｋｉ 及 Ｓｈｉｍｏｋｏｓｈｉ 株相应序列的同源性分别为９１０ ％ 、８７３ ％ 、８７０ ％ 、８７３ ％ 、８６１ ％ 及７３８ ％ 。结论　 Ｃ Ｍ Ｙ 株与已报道的恙虫病东方体菌株不同， 与 Ｋａｒｐ 株有很高的同源性。 展开更多

关键词 恙虫病 序列分析 sta56基因 恙虫病东方体

下载PDF 职称材料

恙虫病立克次体Sta58主要抗原基因片段的克隆 被引量：2

3

作者 陈添胜 黄满涛 冯慧敏 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1994年第3期26-27,共2页

作者利用其采用ＰＣＲ技术从恙虫病立克次体基因组中扩增出Ｓｔａ５８主要抗原基因的部分片段，约１ｋｂ，克隆入质粒ｐＳＰ７２的ＢａｍＨＩ、ＳｍａＩ位点，建重组质粒ｐＳＰＲＫ９，又将ｐＳＰＲＫ９中的ＡｃｃＩ小片段约５００ｂｐ... 作者利用其采用ＰＣＲ技术从恙虫病立克次体基因组中扩增出Ｓｔａ５８主要抗原基因的部分片段，约１ｋｂ，克隆入质粒ｐＳＰ７２的ＢａｍＨＩ、ＳｍａＩ位点，建重组质粒ｐＳＰＲＫ９，又将ｐＳＰＲＫ９中的ＡｃｃＩ小片段约５００ｂｐ亚克隆至ｐＳＰ７２构建重组质粒ｐＳＰＲＫ７。以上无性繁殖系的建可为我国开展恙虫病立克次体核酸杂交研究提供特异核酸探针。 展开更多

关键词 恙虫病 立克次体 抗原基因

下载PDF 职称材料

广东不同人群HCV感染的血清流行病学调查 被引量：13

4

作者 史小楚 刘家璧 +7 位作者 曹志威 谭丽霞 陈添胜 杨念生 李美霞 刘津成 刘连昌 温社煊 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期8-9,共2页

对广东不同人群进行丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染的血清流行病学调查。结果发现，抗－ＨＣＶ阳性率正常人群为１．４５％（２２／１５２０）。血液透析病人中有输血史的抗－ＨＣＶ阳性率为８９．１６％（７４／８３），无输血史者为６０... 对广东不同人群进行丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染的血清流行病学调查。结果发现，抗－ＨＣＶ阳性率正常人群为１．４５％（２２／１５２０）。血液透析病人中有输血史的抗－ＨＣＶ阳性率为８９．１６％（７４／８３），无输血史者为６０．７１％（１７／２８），前者显著高于后者（ｐ＜０．０１）。在２２８例吸毒者中，静脉吸毒者的抗－ＨＣＶ阳性率为６５．２９％，显著高于非静脉吸毒者（２１．５０％）。值得注意的是职业献血员抗－ＨＣＶ阳性率为１２．２１％（２１／１７２），显著高于正常人群（ｐ＜０．０１）。卖淫妇女的抗－ＨＣＶ阳性率为２．３８％，略高于正常人群，两者差异无显著性。结果显示血液透析病人、静脉吸毒者、职业献血员感染ＨＣＶ的危险性极高，与国外同类研究结果一致。提示血途径是ＨＣＶ感染的主要传播途径。 展开更多

关键词 丙型肝炎 HCV 血清流行病学 调查 流行病学

下载PDF 职称材料

地里纤恙螨红、白体色体内恙虫病立克次体的聚合酶链反应技术检测及其传病作用 被引量：10

5

作者 黎家灿 郑小英 +1 位作者 倪宏 陈添胜 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1994年第3期2-3,共2页

本文应用聚合酶链反应技术（ＰＣＲ）检测了红、白体色地里纤恙螨亲代成虫及子代幼虫体内恙虫病立克次体ＤＮＡ的动态变化，结果表明：恙虫病立克次体能在红、白体色恙螨体内生长繁殖，且至少持续２７０天，并可以经卵传递给子代。叮咬... 本文应用聚合酶链反应技术（ＰＣＲ）检测了红、白体色地里纤恙螨亲代成虫及子代幼虫体内恙虫病立克次体ＤＮＡ的动态变化，结果表明：恙虫病立克次体能在红、白体色恙螨体内生长繁殖，且至少持续２７０天，并可以经卵传递给子代。叮咬试验证明两体色恙螨幼虫均具有叮咬和传病能力。 展开更多

关键词 恙虫病 立克次体 聚合酶链反应

下载PDF 职称材料

恙螨体内恙虫病立克次体动态变化的实验研究 被引量：7

6

作者 郑小英 黎家灿 +2 位作者 倪宏 陈添胜 陈成福 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1995年第3期6-9,共4页

应用ＰＣＲ技术研究地里纤恙螨（Ｌｅｐｔｏｔｒｏｍｂｉｄｉｕｍｄｅｌｉｅｎｓｅ）实验感染恙虫病立克次体（Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａｔｓｕｔｓｕｇａｍｕｓｈｉ）后恙螨体内立克次体ＤＮＡ的动态变化。结果如下：立克次体在接种组成虫... 应用ＰＣＲ技术研究地里纤恙螨（Ｌｅｐｔｏｔｒｏｍｂｉｄｉｕｍｄｅｌｉｅｎｓｅ）实验感染恙虫病立克次体（Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａｔｓｕｔｓｕｇａｍｕｓｈｉ）后恙螨体内立克次体ＤＮＡ的动态变化。结果如下：立克次体在接种组成虫体内持续３６０天和经卵传递达４代；叮咬组饱食蚴体内立克次体经若蛹、若虫、成蛹达成虫期，成虫体内立克次体持续２７０天和经卵传递达２代，表明叮咬带立克次体鼠和经卵传递是保持恙螨亲代和子代体内立克次体动态循环的基础。 展开更多

关键词 地里纤恙螨 恙虫病立克次体 经卵传递

下载PDF 职称材料

应用PCR技术检测恙螨体内恙虫病立克次体动态和经卵传递的研究 被引量：7

7

作者 倪宏 黎家灿 陈添胜 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 1994年第2期48-53,共6页

本文应用聚合酶链反应技术检测恙虫病立克次体实验感染的恙螨体内立克次体的动态变化，通过人工腹腔接种而感染的恙螨成虫，恙虫病立克次体至少能在其体内生存３６０天和经卵传递４代；通过未食幼虫叮咬病小鼠而感染的恙螨，经饱蚴、若... 本文应用聚合酶链反应技术检测恙虫病立克次体实验感染的恙螨体内立克次体的动态变化，通过人工腹腔接种而感染的恙螨成虫，恙虫病立克次体至少能在其体内生存３６０天和经卵传递４代；通过未食幼虫叮咬病小鼠而感染的恙螨，经饱蚴、若蛹、若虫、成蛹和成虫阶段，恙虫病立克次体检测均呈阳性，至少能在成虫期体内生存２７０天和经卵传递１代。 展开更多

关键词 姜螨 立克次体 PCR

下载PDF 职称材料

HBsAg携带者肌注后的针筒残液及医院注射器的HBV污染状况实验研究

8

作者 沙庆洪 谭丽霞 +6 位作者 陈添胜 刘家璧 刘玉霞 史小楚 林普生 刘邹鲁 陈家伟 《广东卫生防疫》 1995年第1期15-16,共2页

ＨＢｓＡｇ携带者肌注后的针筒残液及医院注射器的ＨＢＶ污染状况实验研究沙庆洪，谭丽霞，陈添胜，刘家璧，刘玉霞，史小楚，林普生，刘邹鲁，陈家伟一般报告认为，医院内各种医疗器械及有关环境受ＨＢＳＡｇ污染严重，是造成乙肝传播... ＨＢｓＡｇ携带者肌注后的针筒残液及医院注射器的ＨＢＶ污染状况实验研究沙庆洪，谭丽霞，陈添胜，刘家璧，刘玉霞，史小楚，林普生，刘邹鲁，陈家伟一般报告认为，医院内各种医疗器械及有关环境受ＨＢＳＡｇ污染严重，是造成乙肝传播的重要危险因素之一。１９９３年，我... 展开更多

关键词 乙肝表面抗原 针筒残液 医院注射器 乙型肝炎病毒

下载PDF 职称材料

恙虫病立克次体sta56基因片段的克隆

9

作者 陈添胜 谭丽霞 +4 位作者 林普生 罗会明 许曼波 黎家灿 冯慧敏 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1998年第5期69-70,共2页

应用半套式PCR技术从Karp株恙虫病立克次体基因组中扩增出872hpDNA片段。该片段经Pstl消化后，与经PStl酶解的pUC18连接，转化大肠杆菌，电泳初筛得pUCRL3等重组质粒。pUCRL3经PCR及酶切证实含约294hp恙虫病立克次体sta56基因片段，可... 应用半套式PCR技术从Karp株恙虫病立克次体基因组中扩增出872hpDNA片段。该片段经Pstl消化后，与经PStl酶解的pUC18连接，转化大肠杆菌，电泳初筛得pUCRL3等重组质粒。pUCRL3经PCR及酶切证实含约294hp恙虫病立克次体sta56基因片段，可作为检测恙虫病立克次休的特异核酸探针。 展开更多

关键词 恙虫病 立克次体 分子克隆 sta56基因

下载PDF 职称材料

恙虫病立克次体核酸的研究进展

10

作者 陈添胜 冯慧敏 《国外医学（微生物学分册）》 北大核心 1993年第3期128-129,136,共3页

恙虫病立克次体的重组DNA研究尽管起步较晚,但目前其基因文库已建立,一些主要蛋白抗原基因已在大肠杆茵中表达成功。

关键词 恙虫病 立克次体 核酸

下载PDF 职称材料

恙虫病立克次体的核酸研究进展

11

作者 陈添胜 林普生 冯慧敏 《华南预防医学》 1993年第2期32-34,共3页

恙虫病立克次体(Rickettsia tsutsugamushi)属于立克次体属中的恙虫病立克次体群(scrub typhus group)。与其它立克次体一样,恙虫病立克次体由于其酶系不完整,只能在真核细胞内生长繁殖。过去,一般用小鼠或兔睾丸细胞进行繁殖传代,现多... 恙虫病立克次体(Rickettsia tsutsugamushi)属于立克次体属中的恙虫病立克次体群(scrub typhus group)。与其它立克次体一样,恙虫病立克次体由于其酶系不完整,只能在真核细胞内生长繁殖。过去,一般用小鼠或兔睾丸细胞进行繁殖传代,现多采用Vero、L929等传代细胞。然而,由于恙虫病立克次体繁殖特别慢,繁殖量少,因而单靠组织培养难以获得大量纯化的立克次体;此外,组织培养液不能加抗菌素,培养基易污染。 展开更多

关键词 恙虫病立克次体 立克次体属 传代细胞 睾丸细胞 组织培养 核糖体结合位点 片段克隆 序列分析结果 繁殖量 决定簇

下载PDF 职称材料

丙型肝炎病毒基因探针的制备

12

作者 陈添胜 谭丽霞 +2 位作者 林普生 罗会明 许曼波 《广东卫生防疫》 1999年第1期6-8,共3页

由于血液中丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）量少，加上ＲＮＡ很容易被核糖核酸酶降解，因此，很多实验室采用逆转录（ＲＴ）套式聚合酶链反应（Ｎ－ＰＣＲ）检测ＨＣＶＲＮＡ。Ｎ－ＰＣＲ虽有敏感性很高的特点，但由于要经过两次扩增，使交叉污... 由于血液中丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）量少，加上ＲＮＡ很容易被核糖核酸酶降解，因此，很多实验室采用逆转录（ＲＴ）套式聚合酶链反应（Ｎ－ＰＣＲ）检测ＨＣＶＲＮＡ。Ｎ－ＰＣＲ虽有敏感性很高的特点，但由于要经过两次扩增，使交叉污染机会增多。在现有的实验条件下，唯... 展开更多

关键词 丙型肝炎病毒 基因探针 聚合酶链反应 核酸杂交技术

下载PDF 职称材料

恙虫病诊断新方法(Ⅱ):核酸分子杂交

13

作者 陈添胜 谭丽霞 林普生 《广东卫生防疫》 1998年第1期86-88,共3页

关键词 诊断 恙虫病立克次体 核酸分子杂交 核酸杂交技术 流行病学调查 标本 基因序列 核酸探针 片段 分子生物学研究

下载PDF 职称材料

恙虫病诊断新方法(Ⅰ):多聚酶链反应

14

作者 陈添胜 谭丽霞 林普生 《广东卫生防疫》 1997年第2期90-91,共2页

关键词 辅助诊断 恙虫病 病原体分离 多聚酶链反应技术 非特异性 防疫站 基层医院 普及 参考 基层单位

下载PDF 职称材料

多聚酶链反应及其在流行病学研究中的应用

15

作者 陈添胜 谭丽霞 《广东卫生防疫》 1995年第3期87-89,共3页

多聚酶链反应及其在流行病学研究中的应用陈添胜综述谭丽霞审阅多聚酶链反应技术（ＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ，简称ＰＣＲ）自１９８５年问世以来迅速作者单位：广东省流行病防治研究所５１０３００在生物医学各... 多聚酶链反应及其在流行病学研究中的应用陈添胜综述谭丽霞审阅多聚酶链反应技术（ＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ，简称ＰＣＲ）自１９８５年问世以来迅速作者单位：广东省流行病防治研究所５１０３００在生物医学各领域得到推广应用。我所从１９９２年... 展开更多

关键词 聚合酶链反应 流行病学研究 恙虫病立克次体检测 乙肝病毒监测 丙肝病毒检测 霍乱弧菌

下载PDF 职称材料

分子生物学基本知识

16

作者 陈添胜 谭丽霞 《广东卫生防疫》 1995年第3期85-87,共3页

分子生物学基本知识陈添胜，谭丽霞自１９５３年Ｗａｔｓｏｎ和Ｃｒｉｃｋ揭示ＤＮＡ双螺旋结构以来分子生物学获得了长足发展，分子生物学向各个不同领域的渗透形成了许多新学科如分子形态学、分子遗传学、分子微生物学、分子病毒学、... 分子生物学基本知识陈添胜，谭丽霞自１９５３年Ｗａｔｓｏｎ和Ｃｒｉｃｋ揭示ＤＮＡ双螺旋结构以来分子生物学获得了长足发展，分子生物学向各个不同领域的渗透形成了许多新学科如分子形态学、分子遗传学、分子微生物学、分子病毒学、分子免疫学和分子流行病学等。使生物... 展开更多

关键词 分子生物学 核酸 遗传物质 化学组成 双螺旋结构 脱氧核糖核酸

下载PDF 职称材料

恙虫病立克次体的快速检测

17

作者 文建华 陈戊申 +5 位作者 林普生 杜福 黄满涛 谭丽霞 陈添胜 冯慧敏 《华南预防医学》 1994年第1期41-42,共2页

恙虫病立克次体的快速检测文建华，陈戊申，林普生，杜福，黄满涛，谭丽霞，陈添胜，冯慧敏随着聚合酶链式反应（ＰＣＲ）技术的建立与推广，恙虫病立克次体的检测出现了突破。在国内，陈氏等首次设计合成一对特异于恙虫病立克次体Ｓｔ... 恙虫病立克次体的快速检测文建华，陈戊申，林普生，杜福，黄满涛，谭丽霞，陈添胜，冯慧敏随着聚合酶链式反应（ＰＣＲ）技术的建立与推广，恙虫病立克次体的检测出现了突破。在国内，陈氏等首次设计合成一对特异于恙虫病立克次体Ｓｔａ５８基因的引物［１］，用ＰＣＲ方... 展开更多

关键词 恙虫病立克次体 冯慧 聚合酶链式反应 普生 杜福 恙螨 核酸提取 特异扩增带 酶反应技术 琼脂糖电泳

下载PDF 职称材料

恙虫病立克次体sta58主要抗原基因片段的克隆及表达 被引量：11

18

作者 陈添胜 冯慧敏 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1994年第5期304-307,共4页

作者设计合成一对ＤＮＡ引物，经ＰＣＲ扩增出Ｋａｒｐ及ＣＭＹ株恙虫病立克次体ｓｔａ５８主要抗原基因片段，分别建立其无性繁殖系，构建了表达质粒ｐＢＶＲＫ５和ｐＢＶＲＣ４５，在国内首次应用大肠杆菌成功表达了恙虫病立克次体抗... 作者设计合成一对ＤＮＡ引物，经ＰＣＲ扩增出Ｋａｒｐ及ＣＭＹ株恙虫病立克次体ｓｔａ５８主要抗原基因片段，分别建立其无性繁殖系，构建了表达质粒ｐＢＶＲＫ５和ｐＢＶＲＣ４５，在国内首次应用大肠杆菌成功表达了恙虫病立克次体抗原。其意义在于为我国恙虫病立克次体研究提供特异性核酸探针，为恙虫病基因工程诊断试剂的研制奠定物质基础。 展开更多

关键词 恙虫病 立克次体 分子克隆 基因表达 抗原基因

原文传递

多聚酶链反应检测恙虫病立克次体核酸 被引量：7

19

作者 陈添胜 刘邹鲁 +1 位作者 郭辉玉 冯慧敏 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1994年第2期129-130,共2页

作者设计合成一对恙虫病立克次体ｓｔａ５８基因的ＤＮＡ引物，分别从恙虫病立克次体ｋａｒｐ、Ｇｉｌｌｉａｍ及ＣＭＹ株基因组中扩增出１ｋｂ片段，普氏及莫氏立克次体、西伯利亚立克次体和贝氏柯克斯体则不能，表明该引物为恙虫病立... 作者设计合成一对恙虫病立克次体ｓｔａ５８基因的ＤＮＡ引物，分别从恙虫病立克次体ｋａｒｐ、Ｇｉｌｌｉａｍ及ＣＭＹ株基因组中扩增出１ｋｂ片段，普氏及莫氏立克次体、西伯利亚立克次体和贝氏柯克斯体则不能，表明该引物为恙虫病立克次体种特异。以含ｓｔａ５８基因片段的重组质粒为模板作敏感性鉴定，表明ＰＣＲ可检测到１０ｐｇ的靶ＤＮＡ。用该引物作ＰＣＲ检测实验感染恙虫病立克次体的小鼠血、腹水及脾标本均获满意结果。 展开更多

关键词 多聚酶链反应 恙虫病立克次体

原文传递

多聚酶链反应技术检测实验感染恙虫病立克次体的恙螨 被引量：4

20

作者 陈添胜 黎家灿 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1993年第5期307-309,共3页

作者首次采用多聚酶链反应技术检测感染恙虫病立克次体的媒介恙螨，包括成虫的幼虫。证实ＰＣＲ是一可用于恙虫病流行病学调查的新的敏感方法。

关键词 聚合酶链反应 恙虫病 立克次氏体

原文传递