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中性粒细胞胞外诱捕网浸润促进尿道创伤后尿道成纤维细胞活化和增生性瘢痕形成
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作者 陈烨辉 许以城 +3 位作者 阮中天 林婷婷 薛学义 许宁 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 2024年第1期103-109,共7页
目的:探讨中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)对创伤后尿道瘢痕形成的影响。方法:(1)2021年6月至2022年12月,收集福建医科大学附属第一医院泌尿外科患者的临床样本,比较尿道创伤患者(n=20)与健康志愿者(n=20)血液和尿液NETs水平的差异,并分析... 目的:探讨中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)对创伤后尿道瘢痕形成的影响。方法:(1)2021年6月至2022年12月,收集福建医科大学附属第一医院泌尿外科患者的临床样本,比较尿道创伤患者(n=20)与健康志愿者(n=20)血液和尿液NETs水平的差异,并分析其与尿道瘢痕形成的关系。(2)从尿道瘢痕组织中提取原代尿道成纤维细胞,体外诱导中性粒细胞以获得NETs,分别以生理盐水、0.5 mg/L NETs和1.5 mg/L NETs处理尿道成纤维细胞,探索NETs对尿道成纤维细胞活化和胶原合成的影响。(3)构建尿道创伤新西兰兔模型,将动物分为非手术组、手术+转化生长因子β1(TGF-β1)注射(阳性对照)组、手术+生理盐水注射组和手术+脱氧核糖核酸酶I(DNase I)溶液注射组,探索NETs降解剂DNase I对尿道瘢痕形成的治疗作用。结果:尿道创伤后,患者尿液NETs水平显著升高(P<0.05),而血液NETs水平无显著差异(P>0.05)。尿道创伤新西兰兔模型中,创伤后尿液NETs水平越高,形成的尿道瘢痕纤维化程度越高(P<0.05);在细胞层面上,NETs促进尿道成纤维细胞活力、迁移与胶原合成(P<0.05)。在新西兰兔尿道创伤模型中,创伤后尿道注射DNase I可降低局部NETs水平,抑制尿道瘢痕形成(P<0.05)。结论:NETs浸润促进尿道创伤后尿道成纤维细胞活化和增生性瘢痕形成。 展开更多
关键词 中性粒细胞胞外诱捕网 创伤后尿道狭窄 瘢痕形成 尿道成纤维细胞
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基于MEMS技术的压力感应内藏式膀胱造瘘器的设计与安全性检测
2
作者 林婷婷 陈烨辉 +5 位作者 李晓东 许宁 孙雄林 魏勇 薛学义 郑清水 《医学理论与实践》 2019年第13期1972-1974,1983,共4页
目的:研制一种基于微电子机械系统(Micro electro-mechanical system,MEMS)技术设计,能实时监测膀胱压力又安全的新型内藏式的膀胱造瘘器。方法:运用计算机辅助下MEMS技术设计膀胱造瘘器;按照GB/T16886国家医疗机械生物学评价标准进行... 目的:研制一种基于微电子机械系统(Micro electro-mechanical system,MEMS)技术设计,能实时监测膀胱压力又安全的新型内藏式的膀胱造瘘器。方法:运用计算机辅助下MEMS技术设计膀胱造瘘器;按照GB/T16886国家医疗机械生物学评价标准进行细胞毒性实验及致敏实验,评价其安全性。结果:细胞毒性实验显示,实验组细胞毒性反应级别均≤1级,细胞溶解率均<10%,与阴性对照组无明显差别;皮肤刺激实验显示,实验组中,生理盐水浸提液和橄榄油浸提液的原发性刺激指数分别为0.375±0.440与0.375±0.209,对皮肤刺激程度均为极轻微,与空白对照组无明显差别(P分别为0.568与0.765)。结论:该膀胱造瘘器在实验条件下无细胞毒性及致敏性,可进行临床试用,进一步评价其安全性及临床实用性。 展开更多
关键词 膀胱造瘘器 MEMS技术 安全性检测
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前列腺结石对PSA 4~10μg/L患者前列腺穿刺活检结果的影响 被引量：1
3
作者 黄鹏 陈烨辉 +7 位作者 陈少豪 李晓东 陈东宁 林婷婷 魏勇 郑清水 许宁 薛学义 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期718-724,共7页
目的:探讨前列腺结石对PSA 4~10μg/L患者前列腺穿刺活检结果的影响。方法:回顾性分析2017年1月至2019年6月317例PSA 4~10μg/L行前列腺穿刺活检的患者资料,收集其年龄、身体质量指数(BMI)、前列腺体积(PV)、TPSA、FPSA/TPSA、PSA密度(P... 目的:探讨前列腺结石对PSA 4~10μg/L患者前列腺穿刺活检结果的影响。方法:回顾性分析2017年1月至2019年6月317例PSA 4~10μg/L行前列腺穿刺活检的患者资料,收集其年龄、身体质量指数(BMI)、前列腺体积(PV)、TPSA、FPSA/TPSA、PSA密度(PSAD)、前列腺影像报告和数据系统第二版(PI-RADS V2)评分、前列腺结石情况、病理结果等资料。采用Logistic回归分析和受试者工作特征(ROC)曲线评估前列腺结石对PSA 4~10μg/L患者前列腺穿刺活检结果的影响。结果:多因素分析显示,年龄和PI-RADS评分是前列腺穿刺活检阳性的独立危险因素,而PV、FPSA/TPSA和结石负荷是其独立保护因素;PI-RADS评分和结石负荷、FPSA/TPSA分别是临床显著性前列腺癌检出的独立危险因素与独立保护因素;结石类型亚组分析显示,分布于外周区者活检阳性率和临床显著性癌检出率显著高于其余组;而分布于中央区和移行区者活检阳性率和临床显著性癌检出率低于外周区组和无结石组。结论:合并前列腺结石的PSA 4~10μg/L患者穿刺阳性率及临床显著性癌检出率较低,尤其是中央区和移行区前列腺结石患者,对于部分患者可减少不必要穿刺。 展开更多
关键词 前列腺结石 PSA 前列腺穿刺活检 预测因素
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如何培养幼儿对篮球游戏的兴趣
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作者 陈烨辉 吴海 钟莉 《体育风尚》 2019年第3期192-192,共1页
随着教育行业的不断发展,人们越来越重视学生的素质教育,篮球教学是学生体育素质教学中的重要组成部分。幼儿虽然年纪小,无法进行复杂的篮球运动,但是同样可以培养幼儿对篮球游戏的兴趣,通过篮球游戏提高幼儿的身体素质,促进幼儿综合素... 随着教育行业的不断发展,人们越来越重视学生的素质教育,篮球教学是学生体育素质教学中的重要组成部分。幼儿虽然年纪小,无法进行复杂的篮球运动,但是同样可以培养幼儿对篮球游戏的兴趣,通过篮球游戏提高幼儿的身体素质,促进幼儿综合素质的提高。 展开更多
关键词 幼儿 篮球游戏 兴趣培养
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基于网络药理学的济脉通片降压机制研究 被引量：23
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作者 李波 雷珊珊 +6 位作者 李贺 陈烨辉 郑祥 陈奕公 钱柳青 吕圭源 陈素红 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期49-57,共9页
目的采用网络药理学阐明济脉通片多成分-多靶点-多途径的作用理念,为进一步研究济脉通片降压药效物质基础和机制提供一定理论参考。方法通过TCMSP数据库,结合口服利用度(≥30%)和类药性分析(≥0.18)参数,筛选济脉通片的活性成分;通过Dru... 目的采用网络药理学阐明济脉通片多成分-多靶点-多途径的作用理念,为进一步研究济脉通片降压药效物质基础和机制提供一定理论参考。方法通过TCMSP数据库,结合口服利用度(≥30%)和类药性分析(≥0.18)参数,筛选济脉通片的活性成分;通过Drugbank和TCMSP数据库进行靶点预测分析;通过GENCARD数据库筛选出高血压疾病相关基因;结合DAVID和KEGG数据库进行GO分析和通路分析;使用Cystoscope软件构建"化合物-靶点-作用通路"网络图。结果经筛选后得到济脉通片的33个化合物,148个潜在靶基因并映射到了223条信号通路,其中31条信号通路与高血压的发生发展密切相关,其中AGE-RAGE signaling pathway in diabetic complications、PI3K-Akt signaling pathway、TNF signaling pathway、Adrenergic signaling in cardiomyocytes和Focal adhesion为重要的通路枢纽。结论济脉通片主要通过多成分、多靶点、多通路调节血管内皮功能、炎症反应、钙钠离子转运、糖脂代谢等参与血管舒张、改善炎症、调节机体代谢、调节离子转运等而产生降压作用。 展开更多
关键词 济脉通片 网络药理学 高血压 血管内皮功能 糖脂代谢
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骨髓间充质干细胞外泌体微小RNA-200a通过Wnt/β-连环蛋白通路抑制肾小管上皮细胞上皮-间充质转化 被引量：5
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作者 孙雄林 林婷婷 +10 位作者 陈少豪 董汝男 朱君明 陈航 陈佳茵 林云知 蔡海 黄金杯 郑清水 许宁 陈烨辉 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期2207-2210,共4页
目的探讨骨髓间充质干细胞(BMMSCs)来源外泌体miR-200a对肾小管间质纤维化的影响及其机制。方法2019年3月至2020年7月,收集从4周龄SD大鼠(福建医科大学动物实验中心)提取的BMMSCs来源外泌体,与从新西兰兔提取的肾小管上皮细胞共培养,提... 目的探讨骨髓间充质干细胞(BMMSCs)来源外泌体miR-200a对肾小管间质纤维化的影响及其机制。方法2019年3月至2020年7月,收集从4周龄SD大鼠(福建医科大学动物实验中心)提取的BMMSCs来源外泌体,与从新西兰兔提取的肾小管上皮细胞共培养,提取BMMSCs来源外泌体,与肾小管上皮细胞共培养,蛋白免疫印迹(Western blot)检测上皮-间充质转化(EMT)标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)蛋白的相对表达水平,明确外泌体对EMT的影响。构建过表达和低表达miR-200a的BMMSCs,分别与肾小管上皮细胞共培养,Western blot检测E-cadherin、N-cadherin和Vimentin蛋白及Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路各标志蛋白的表达水平。双荧光素酶报告实验验证肾小管上皮细胞中miR-200a与β-catenin基因CTNNB1是否直接结合。使用方差分析和独立样本t检验分析组间差异。结果高剂量外泌体组E-cadherin表达水平较低剂量组更低(0.51±0.09比0.78±0.12,t=3.115,P<0.05),而N-cadherin(2.05±0.22比1.40±0.13,t=6.478,P<0.001)和Vimentin(1.01±0.13比0.75±0.12,t=2.987,P<0.05)表达水平高于后者。高表达miR-200a外泌体处理组E-cadherin表达水平较低表达miR-200a外泌体处理组降低(0.71±0.09比1.48±0.14,t=4.751,P<0.05),而N-cadherin(1.55±0.12比0.75±0.10,t=11.603,P<0.01)和Vimentin(0.88±0.07比0.37±0.04,t=6.039,P<0.05)表达水平前者较后者更高。Wnt/β-catenin信号通路标志蛋白糖原合成酶激酶3β(GSK3β)表达量在组间差异无统计学意义(0.89±0.21比0.92±0.15,t=0.130,P>0.05),而低表达miR-200a外泌体处理组p-GSK3β、β-catenin和T细胞因子-1(TCF-1)表达水平均高于高表达miR-200a外泌体处理组(1.89±0.17比1.15±0.12,t=4.125,P<0.05;1.32±0.09比0.74±0.15,t=4.962,P<0.05;0.96±0.08比0.38±0.05,t=6.740,P<0.05)。双荧光素酶报告实验显示,野生型β-CTNNB1肾小管上皮细胞中,miR-200a组细胞荧光活性显著低于miR-NC组(0.51±0.07比0.98±0.08,t=13.251,P<0.01),差异有统计学意义。而突变型β-CTNNB1的细胞中,miR-200a组细胞荧光活性与miR-NC组差异无统计学意义(0.94±0.05比0.96±0.07,t=0.247,P>0.05)。结论BMMSCs来源外泌体miR-200a通过直接作用β-catenin基因CTNNB1,降低β-catenin表达,抑制Wnt/β-catenin通路激活,从而抑制肾小管上皮细胞EMT过程。 展开更多
关键词 肾间质纤维化 上皮-间充质转化 骨髓间充质干细胞 微小RNA-200a Wnt/β-连环蛋白通路
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良性前列腺增生患者并发膀胱结石的危险因素分析 被引量：8
7
作者 陈烨辉 林婷婷 +6 位作者 李晓东 蔡海 黄金杯 郑清水 薛学义 魏勇 许宁 《临床泌尿外科杂志》 2018年第12期965-967,971,共4页
目的:探讨良性前列腺增生(BPH)患者并发膀胱结石的危险因素。方法:回顾性分析2016年4月～2017年9月我院就诊的321例BPH患者的资料,分别将其分为并发膀胱结石组(n=27)与无并发膀胱结石组(n=294),采用Logistic回归分析BPH患者并发膀胱结... 目的:探讨良性前列腺增生(BPH)患者并发膀胱结石的危险因素。方法:回顾性分析2016年4月～2017年9月我院就诊的321例BPH患者的资料,分别将其分为并发膀胱结石组(n=27)与无并发膀胱结石组(n=294),采用Logistic回归分析BPH患者并发膀胱结石的危险因素。结果:BPH患者的膀胱结石发生率为6.5%。多因素分析显示,年龄、前列腺尿道角(PUA)、前列腺突入膀胱程度(IPP)、前列腺移行带体积(TZV)是BPH患者并发膀胱结石的独立危险因素(P<0.05)。结论:年龄、PUA、IPP和TZV较大的BPH患者易发生膀胱结石。 展开更多
关键词 前列腺增生 膀胱结石 危险因素
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前列腺癌微环境中癌相关成纤维细胞对细胞缝隙连接通讯的影响 被引量：1
8
作者 陈东宁 陈烨辉 +8 位作者 蔡海 孙雄林 林云知 李晓东 林婷婷 魏勇 郑清水 薛学义 许宁 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期1431-1433,共3页
目的观察前列腺癌微环境中癌相关成纤维细胞(CAFs)对细胞缝隙连接通讯(GJIC)的影响。方法取前列腺癌组织分离培养及鉴定CAFs,分别将(0、0.25、0.50、0.75、1.00 g/L)浓度的CAFs培养液与处于对数生长期的前列腺癌PC-3细胞(购自中国科学... 目的观察前列腺癌微环境中癌相关成纤维细胞(CAFs)对细胞缝隙连接通讯(GJIC)的影响。方法取前列腺癌组织分离培养及鉴定CAFs,分别将(0、0.25、0.50、0.75、1.00 g/L)浓度的CAFs培养液与处于对数生长期的前列腺癌PC-3细胞(购自中国科学院上海生命科学研究院细胞资源中心)共同培养,采用荧光漂白恢复技术检测各组前列腺癌PC-3细胞缝隙连接(GJ)功能,蛋白质印迹法(Western blot)检测各组细胞间隙连接蛋白43(Cx43)蛋白的表达。组间比较采用方差分析。结果成功分离培养CAFs,前列腺癌PC-3细胞与不同浓度CAFs(0.00、0.25、0.50、0.75、1.00 g/L)共培养后,细胞内荧光恢复程度逐渐减弱[(49.40±5.42)%、(45.36±3.23)%、(36.57±3.95)%、(29.18±5.51)%、(21.81±4.58)%,F=18.067,P<0.05],细胞GJIC水平逐渐减弱,呈明显的剂量-效应依赖关系,差异有统计学意义(t=1.109、3.313、4.531、6.734,P<0.05)。同时,各组CAFs中的Cx43蛋白的表达水平分别为0.723±0.065、0.641±0.084、0.425±0.078、0.314±0.067、0.267±0.059。随着共培养CAFs浓度的增加,细胞内Cx43蛋白表达水平反而逐渐降低,差异有统计学意义(t=1.337、5.084、7.589、8.997,P<0.05)。结论CAFs可下调前列腺癌PC-3细胞Cx43蛋白的表达水平,抑制前列腺癌PC3细胞的细胞间缝隙连接功能。 展开更多
关键词 前列腺癌 癌相关成纤维细胞 细胞缝隙连接通讯
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细胞外基质刚度通过FAK/ROCK-1/YAP通路调控尿道成纤维细胞活化 被引量：1
9
作者 陈烨辉 陈佳茵 +7 位作者 朱君明 陈航 柯志滨 林菲 薛学义 魏勇 郑清水 许宁 《中华实验外科杂志》 CAS 北大核心 2022年第3期500-502,共3页
目的探讨基质刚度对尿道成纤维细胞(UFBs)活化的影响及其机制。方法2020年6月至2021年2月从福建医科大学附属第一医院泌尿外科手术患者获得的尿道瘢痕组织中提取原代UFBs;用聚二甲基矽氧烷分别以60∶1(Soft)、40∶1(Moderate)、30∶1(St... 目的探讨基质刚度对尿道成纤维细胞(UFBs)活化的影响及其机制。方法2020年6月至2021年2月从福建医科大学附属第一医院泌尿外科手术患者获得的尿道瘢痕组织中提取原代UFBs;用聚二甲基矽氧烷分别以60∶1(Soft)、40∶1(Moderate)、30∶1(Stiff)的比例加入固化剂,制备不同刚度的基质凝胶,将UFBs接种其上培养。倒置显微镜观察在不同刚度基质凝胶上生长的UFBs形态学特点;蛋白质印迹法(Western blot)检测UFBs活化标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白(collagenⅠ)和Ⅲ型胶原蛋白(collagenⅢ)表达水平;进一步检测FAK/ROCK-1/YAP通路标志蛋白表达水平,并观察整合素抑制剂Cilengtide(20 ng/ml)对其影响,探索基质刚度是否通过此通路影响UFBs活化;采用方差分析和独立样本t检验比较组间差异。结果随着基质凝胶刚度的增加,接种其上的UFBs形态由椭圆形转变为偏梭形,细胞伪足增长、增多;Soft、Moderate、Stiff组UFBs的α-SMA相对表达量分别为(0.140±0.004、0.815±0.030和1.385±0.051,F=989.247,P<0.05);collagenⅠ相对表达量分别为(0.138±0.004、0.947±0.021和1.263±0.028,F=2415.159,P<0.05);collagenⅢ相对表达量分别为(0.284±0.005、1.089±0.017和1.374±0.038,F=1661.310,P<0.05),均随基质刚度增加而升高;Stiff组中UFBs的p-FAK(1.282±0.029比0.430±0.009,t=48.262,P<0.05)、ROCK-1(1.366±0.111比0.474±0.034,t=13.300,P<0.05)和YAP(1.272±0.020比0.908±0.007,t=30.254,P<0.05)表达水平均显著高于Soft组,而p-YAP(0.589±0.006比1.028±0.008,t=-74.860,P<0.05)表达水平显著低于Soft组;在加入整合素抑制剂Cilengtide后,基质刚度增加引起的p-FAK、ROCK-1、YAP和p-YAP表达改变均减弱。结论细胞外基质刚度通过整合素介导的FAK/ROCK-1/YAP通路调控人尿道成纤维细胞活化。 展开更多
关键词 尿道成纤维细胞 FAK/ROCK-1/YAP通路 尿道狭窄
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癌相关成纤维细胞外泌体携带微小RNA-20a靶向CX43调控细胞缝隙连接促进PC-3细胞侵袭和迁移
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作者 李晓东 陈烨辉 +8 位作者 林婷婷 薛学义 郑清水 陈佳茵 朱君明 柯志滨 陈少豪 陈东宁 许宁 《中华实验外科杂志》 CAS 北大核心 2021年第2期301-304,共4页
目的探讨癌相关成纤维细胞(CAFs)来源外泌体微小RNA(miR)-20a对前列腺癌细胞间通讯连接(GJIC)、侵袭和转移能力的影响及其机制。方法构建CAFs来源近红外荧光蛋白(IRFPs)标记外泌体,以不同浓度(0、10、100、200 mg/L)与PC-3细胞共培养。... 目的探讨癌相关成纤维细胞(CAFs)来源外泌体微小RNA(miR)-20a对前列腺癌细胞间通讯连接(GJIC)、侵袭和转移能力的影响及其机制。方法构建CAFs来源近红外荧光蛋白(IRFPs)标记外泌体,以不同浓度(0、10、100、200 mg/L)与PC-3细胞共培养。蛋白质印迹法检测PC-3细胞中CX43蛋白的相对表达水平;荧光漂白恢复技术测定PC-3细胞间缝隙连接功能;Transwell小室侵袭和迁移实验检测PC-3侵袭能力。构建高表达和低表达miR-20a的CAFs,分别与PC-3细胞共培养,检测缝隙链接蛋白43(Connexin 43,CX43)表达、细胞缝隙连接功能、细胞迁移和侵袭能力。双荧光素酶报告实验验证PC-3细胞中miR-20a与CX43基因是否直接结合。用Student’t检验分析组间差异。结果PC-3细胞的CX43表达水平及细胞缝隙连接功能均随外泌体浓度增加而降低(0.715±0.058、0.544±0.039、0.313±0.028和0.196±0.020,F=19.031,P<0.05),差异有统计学意义。Transwell小室检测结果表明,CAFs来源外泌体促进PC-3细胞迁移[各组每视野穿膜细胞数分别为(176.0±9.2)、(485.0±12.8)、(159.5±9.7)和(198.0±10.5)个,F=11.475,P<0.01]和侵袭[各组每视野穿膜细胞数分别为(150.0±8.4)、(443.0±21.7)、(182.0±11.2)和(153.5.0±10.1)个,F=16.306,P<0.01],差异有统计学意义;增强细胞缝隙连接能抑制此效应(F=14.052,P<0.01;F=14.804,P<0.01)。高表达miR-20a组的PC-3细胞的CX43表达水平(0.126±0.062比0.834±0.103,t=9.430,P<0.05)、荧光恢复率[(25.02±7.85)%比(46.65±6.98)%,t=5.782,P<0.05]均显著低于低表达miR-20a组,但细胞的迁移[(502.5±18.6)个比(128.5.0±9.4)个,t=9.120,P<0.05]和侵袭能力(458.0±16.8比194.5±9.2,t=6.286,P<0.05)均显著高于表达miR-20a组,差异均有统计学意义。双荧光素酶报告实验结果显示,野生型CX43的PC-3细胞中,转染miR-20a的细胞荧光活性显著低于miR-NC组(0.46±0.08比0.99±0.14,t=10.208,P<0.05),差异有统计学意义;而突变型CX43的PC-3细胞中,miR-20a组与miR-NC组细胞荧光活性差异无统计学意义(0.94±0.06比0.97±0.08,t=0.142,P>0.05)。结论CAFs来源外泌体miR-20a通过直接作用CX43基因,下调PC-3细胞CX43的表达,从而显著降低细胞间通讯连接功能,增强前列腺癌细胞的增殖、侵袭和转移能力。 展开更多
关键词 癌相关成纤维细胞 外泌体 微小RNA
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