几种超分辨率荧光显微技术的原理和近期进展 被引量：20

1

作者 吕志坚 陆敬泽 +1 位作者 吴雅琼 陈良怡 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1626-1634,共9页

在生命科学领域,人们常常需要在细胞内精确定位特定的蛋白质以研究其位置与功能的关系.多年来,宽场/共聚焦荧光显微镜的分辨率受限于光的阿贝/瑞利极限,不能分辨出200nm以下的结构.近年来,随着新的荧光探针和成像理论的出现,研究者开发... 在生命科学领域,人们常常需要在细胞内精确定位特定的蛋白质以研究其位置与功能的关系.多年来,宽场/共聚焦荧光显微镜的分辨率受限于光的阿贝/瑞利极限,不能分辨出200nm以下的结构.近年来,随着新的荧光探针和成像理论的出现,研究者开发了多种实现超出普通共聚焦显微镜分辨率的三维超分辨率成像方法.主要介绍这些方法的原理、近期进展和发展趋势.介绍了光源的点扩散函数(point spread function,PSF)的概念和传统分辨率的定义,阐述了提高xy平面分辨率的方法.通过介绍单分子荧光成像技术,引入了单分子成像定位精度的概念,介绍了基于单分子成像的超分辨率显微成像方法,包括光激活定位显微技术(photoactivated localization microscopy,PALM)和随机光学重构显微技术(stochastic optical reconstruction microscopy,STORM).介绍了两大类通过改造光源的点扩散函数来提高成像分辨率的方法,分别是受激发射损耗显微技术(stimulated emission depletion,STED)和饱和结构照明显微技术(saturated structure illumination microscopy,SSIM).比较了不同的z轴提取信息的方法,并阐述了这些方法与xy平面上的超分辨率显微成像技术相结合所得到的各种三维超分辨率显微成像技术的优劣.探讨了目前超分辨率显微成像的发展极限和方向. 展开更多

关键词 超分辨率荧光显微技术 点扩散函数 PALM STORM STED SSIM

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自适应光学技术在深层动态荧光显微成像中的应用和发展 被引量：14

2

作者 毛珩 Tao Louis 陈良怡 《红外与激光工程》 EI CSCD 北大核心 2016年第6期9-15,共7页

荧光显微成像技术是开展微观生命科学研究的重要手段和工具,使用该技术可以观察生物体内的精细结构、动态追踪生物体内组织、细胞、细胞核、蛋白、小分子等不同尺度的生命活动过程。其中,研究深层组织高时空分辨率荧光显微成像技术,是... 荧光显微成像技术是开展微观生命科学研究的重要手段和工具,使用该技术可以观察生物体内的精细结构、动态追踪生物体内组织、细胞、细胞核、蛋白、小分子等不同尺度的生命活动过程。其中,研究深层组织高时空分辨率荧光显微成像技术,是当前成像领域一个前沿问题。应用自适应光学技术实时补偿经由不透明散射、非均匀生物组织传播而引入的复杂波前畸变已被证实是实现上述技术的一种有效途径。文中首先归纳了深层动态荧光显微成像的需求和特点,随后分别介绍了自适应光学技术近几年在共聚焦显微成像、随机光学重构显微成像、光激活定位显微成像、受激辐射光淬灭显微成像、双光子/多光子激发显微成像中的相关应用,并对今后的研究问题和发展方向提出展望。 展开更多

关键词 荧光显微成像 自适应光学 深层组织 波前传感 波前校正

原文传递

结构光照明显微镜重建算法研究进展 被引量：2

3

作者 周博 王昆浩 陈良怡 《中国光学（中英文）》 EI CAS CSCD 北大核心 2022年第6期1211-1227,共17页

作为现代超分辨成像技术的早期组成部分,结构照明显微镜(SIM)已经发展了近20年。其近期在活细胞中实现了高达60 nm和564 Hz的最佳时空分辨率组合,但也存在一些源于内在重建过程的缺点。本文综述了SIM技术的最新进展,包括超分辨率(SR)重... 作为现代超分辨成像技术的早期组成部分,结构照明显微镜(SIM)已经发展了近20年。其近期在活细胞中实现了高达60 nm和564 Hz的最佳时空分辨率组合,但也存在一些源于内在重建过程的缺点。本文综述了SIM技术的最新进展,包括超分辨率(SR)重建算法、性能评估及SIM与其他成像技术的集成,以便为生物学家提供实用指导。 展开更多

关键词 结构光照明显微镜 超分辨率成像

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改良的小波变换算法在生物微粒检测中的应用(英文)

4

作者 章永登 陈良怡 徐涛 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1144-1150,共7页

荧光图像的微粒检测已经成为了生物学研究中不可或缺的工具之一.介绍了一种改良的小波变换算法(improved wavelet transform,IWT),该方法实现简单,能够以很高的速度和精度来进行生物微粒的检测.IWT 源自多尺度小波乘积算法(wavelet mult... 荧光图像的微粒检测已经成为了生物学研究中不可或缺的工具之一.介绍了一种改良的小波变换算法(improved wavelet transform,IWT),该方法实现简单,能够以很高的速度和精度来进行生物微粒的检测.IWT 源自多尺度小波乘积算法(wavelet multiscale products,WMP),但它不仅解决了 WMP算法遇到的问题,而且在处理各类图像的时候具有更强的适应性.使用人工合成的图像和真实的图像来定量地分析 IWT、WMP以及多尺度方差稳定变换算法(multiscale variance stabilizing transform,MSVST)的检测效果.实验结果表明,IWT 在大多数情况下的检测效果比 WMP 好很多,且与更为复杂的MSVST 算法相当.此外,在处理相同图像时,IWT 的速度比 MSVST 快 20%.因此,IWT 算法能够普遍适用于各种生物微粒的自动化检测,其简单准确的特点使之成为荧光图像分析更好的选择. 展开更多

关键词 微粒检测 IWT WMP MSVST

原文传递

银杏叶提取物在大鼠脑缺血再灌注损伤中的保护作用 被引量：30

5

作者 胡波 孙圣刚 +2 位作者 梅元武 陈良怡 童萼塘 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期436-440,共5页

目的:研究银杏叶提取物(GbE)对大鼠脑缺血再灌注损伤皮质内自由基、氨基酸动态平衡的影响及其对原代培养的大鼠海马神经元内游离钙离子浓度([Ca^(2+)]i)的影响和特征。方法:采用高压液相色谱仪测量大鼠大脑皮质中氨基酸(Glu、Asp、GABA... 目的:研究银杏叶提取物(GbE)对大鼠脑缺血再灌注损伤皮质内自由基、氨基酸动态平衡的影响及其对原代培养的大鼠海马神经元内游离钙离子浓度([Ca^(2+)]i)的影响和特征。方法:采用高压液相色谱仪测量大鼠大脑皮质中氨基酸(Glu、Asp、GABA、Gly)的浓度;MDA和GSH-Px采用TBA法测量,SOD采用嘌呤法测量。使用显微荧光检测系统检测单个原代培养的海马神经元内游离钙离子浓度([Ca^(2+)]i)的变化和特征。结果:与非治疗组比较,GbE各浓度治疗组的缺血大脑皮质内Glu、Asp和MDA含量在各时间观察点(缺血3h、缺血再灌注1h和缺血再灌注2h)均明显降低(P<0.01或P<0.05),而SOD和GSH-Px含量则在各时间观察点均明显升高(P<0.01或P<0.05);GbE 10mg/kg、15mg/kg治疗组缺血大脑皮质内的GA-BA和Gly含量在各时间观察点均有所降低(P<0.05)。与GbE 5mg/kg治疗组比较,GbE 10mg/kg、15mg/kg治疗组大脑皮质内的Glu、Asp和MDA含量在各时间观察点较低(P<0.05),而GABA、Gly、SOD和GSH-Px含量则较高(P<0.05);GbE 10mg/kg治疗组与15mg/kg治疗组之间差异无显著性。当向原代培养的神经元同时给予谷氨酸1×10^(-5)mol/L和GbE 25μg/ml 20s时所诱导的〔Ca^(2+)〕i明显低于单独使用谷氨酸1×10^(-5)mol/L所诱导的[Ca^(2+)]i变化,其峰值明显下降,且? 展开更多

关键词 脑缺血 再灌注损伤 银杏叶提取物 自由基 氨基酸 游离钙

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SH-SY5Y细胞上的钙库及钙振荡机理研究 被引量：7

6

作者 陈良怡 叶琴 +4 位作者 瞿安连 邹寿彬 康国新 周专 康华光 《生物物理学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第2期215-220,共6页

使用显微荧光测量的方法，对未分化和分化的ＳＨ－ＳＹ５Ｙ神经杂交瘤细胞上进行的实验，发现存在着毒蕈碱受体激动剂Ｃａｒｂａｃｈｏｌ激发的钙振荡，并展示了几种类型的钙振荡模式。它是由于毒蕈碱受体Ｍ３引起的，其机理与细胞的钙... 使用显微荧光测量的方法，对未分化和分化的ＳＨ－ＳＹ５Ｙ神经杂交瘤细胞上进行的实验，发现存在着毒蕈碱受体激动剂Ｃａｒｂａｃｈｏｌ激发的钙振荡，并展示了几种类型的钙振荡模式。它是由于毒蕈碱受体Ｍ３引起的，其机理与细胞的钙库和钙通道有关。在用钙通道阻滞剂Ｖｅｒａｐａｍｉｌ和ＣｄＣｌ２抑制钙通道的情况下，钙振荡仍能继续。但在胞外完全无钙时，振荡很大程度上被抑制。另外，振荡的频率也与刺激物浓度及胞外钙浓度有关。最后并讨论了振荡可能的发生机制。 展开更多

关键词 钙库 钙振荡 神经杂交瘤细胞 显微荧光测量

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线粒体和细胞内钙自稳平衡 被引量：15

7

作者 陈良怡 邹寿彬 康华光 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2000年第5期483-488,共6页

线粒体对胞浆钙信号调节作用的研究已经历较长时间 .近年 ,随着研究方法和技术的不断改进 ,发现在绝大多数生理条件下 ,线粒体都能参与胞内钙通信过程 .线粒体可感受其周围钙微区的存在从而摄取钙 ,又可以通过钠 钙交换和大分子孔道将... 线粒体对胞浆钙信号调节作用的研究已经历较长时间 .近年 ,随着研究方法和技术的不断改进 ,发现在绝大多数生理条件下 ,线粒体都能参与胞内钙通信过程 .线粒体可感受其周围钙微区的存在从而摄取钙 ,又可以通过钠 钙交换和大分子孔道将钙释放出来 ,因此可以调节胞浆钙信号的时空特性 ,影响相关的细胞功能 .但是 ,由于技术上的局限性 ,目前的研究仍然存在模糊不清和自相矛盾之处 。 展开更多

关键词 线粒体 钙自稳平衡 钙微区 钠-钙交换 钙信号

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胞内游离钙离子浓度的定量检测技术 被引量：9

8

作者 陈良怡 徐涛 +1 位作者 邹寿彬 康华光 《中国医疗器械杂志》 CAS 2000年第6期349-353,356,共6页

钙离子是单个细胞生存和死亡的信号 ,并调控它的种种功能。新的荧光染料的开发和成象技术的发展 。

关键词 胞内 游离钙离子 定量检测

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胞内钙信号系统 被引量：12

9

作者 邹寿彬 陈良怡 康华光 《生命的化学》 CAS CSCD 2000年第6期254-257,共4页

关键词 钙通道 钙信号 钙振荡 细胞 钙离子

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SH-SY5Y细胞的钙缓冲研究 被引量：1

10

作者 叶琴 陈良怡 +1 位作者 瞿安连 徐涛 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期352-355,共4页

目的 :研究SH SY5Y神经杂交瘤细胞的钙缓冲能力。方法 :通过膜片钳手段 ,测量未分化的SH SY5Y细胞钙离子通道电流 ;并应用显微荧光测量游离钙离子浓度和高钾去极化的方法 ,研究胞内Ca2 + 浓度上升后浓度恢复的动力学过程。结果 :未分化... 目的 :研究SH SY5Y神经杂交瘤细胞的钙缓冲能力。方法 :通过膜片钳手段 ,测量未分化的SH SY5Y细胞钙离子通道电流 ;并应用显微荧光测量游离钙离子浓度和高钾去极化的方法 ,研究胞内Ca2 + 浓度上升后浓度恢复的动力学过程。结果 :未分化的SH SY5Y细胞存在钙离子通道电流 ;在刺激时间间隔较短时 (<15 0s) ,胞内钙浓度的恢复过程会由于缓冲机制的饱和而变慢 ;而时间间隔 >15 0s时 ,缓冲物质则可以基本恢复使得胞内钙的恢复过程基本保持不变。结论 展开更多

关键词 钙通道 钙缓冲蛋白 SH-SY5Y细胞 胞内钙浓度

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知柏地黄丸浸液对大鼠嗜铬细胞内钙的作用 被引量：2

11

作者 叶琴 陈良怡 +1 位作者 张春光 周专 《华中理工大学学报》 CSCD 北大核心 2000年第6期108-110,共3页

运用Fura 2显微荧光测量技术 ,在单个大鼠肾上腺嗜铬细胞上 ,测量中药知柏地黄丸浸液对胞内游离钙浓度 ([Ca2 + ]i)的作用 .实验发现 ,知柏地黄丸浸液作用于大鼠嗜铬细胞 ,数s内即可导致 [Ca2 + ]i的升高 ;而将标准胞外液换为无钙胞外... 运用Fura 2显微荧光测量技术 ,在单个大鼠肾上腺嗜铬细胞上 ,测量中药知柏地黄丸浸液对胞内游离钙浓度 ([Ca2 + ]i)的作用 .实验发现 ,知柏地黄丸浸液作用于大鼠嗜铬细胞 ,数s内即可导致 [Ca2 + ]i的升高 ;而将标准胞外液换为无钙胞外液或加入L 型钙通道抑制剂均可抑制知柏地黄丸浸液对 [Ca2 + ]i的作用 .这表明知柏地黄丸浸液可以引起细胞外Ca2 + 内流 ,而该内流主要通过L 型钙通道的开放 . 展开更多

关键词 知柏地黄丸浸液 嗜铬细胞 胞内游离钙浓度

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一种遗传算法的细胞跨膜信号传递调控模型

12

作者 吴鸿修 仇建斌 +1 位作者 陈良怡 娄雪林 《华中理工大学学报》 CSCD 北大核心 1999年第9期52-54,共3页

分析了跨膜信号传导稳态模型以及电生理实验数据的局限性，针对生理情况下随机刺激和响应的特点，采用遗传算法优化模型动力学参数．

关键词 基因算法 跨膜信号传导 调控模型 细胞

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多光子激发技术及其在生命科学中的应用

13

作者 娄雪林 陈良怡 +1 位作者 瞿安连 周专 《生命科学》 CSCD 2001年第5期232-235,共4页

多光子激发技术是２０世纪９０年代初发展起来的新技术，其研究和应用前景十分广阔，本文对多光子激发的原理、优缺点以及近年来它的应用领域作了简介。

关键词 多光子激发 生命科学 理论研究 临床应用

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超分辨荧光显微镜中的解卷积技术及应用(特邀) 被引量：2

14

作者 赵唯淞 黄园园 +3 位作者 韩镇谦 曲丽颖 李浩宇 陈良怡 《中国激光》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第1期314-329,共16页

超分辨荧光显微镜突破了光学衍射极限造成的空间分辨率限制,使得生物学家能够在生命体和细胞具有活性的状态下,对其功能与结构进行高精度动态记录,有望揭示更多重要的生命现象细节。然而,由于超分辨荧光显微技术的成像视场、深度、分辨... 超分辨荧光显微镜突破了光学衍射极限造成的空间分辨率限制,使得生物学家能够在生命体和细胞具有活性的状态下,对其功能与结构进行高精度动态记录,有望揭示更多重要的生命现象细节。然而,由于超分辨荧光显微技术的成像视场、深度、分辨率、速度等不易兼得,所以解卷积作为一种最有效且直接的求解逆问题的框架,被广泛应用于增强超分辨显微镜的时空分辨率。研究人员聚焦于通过相应算法设计实现高质量显微图像的重建,在一定程度上克服了超分辨荧光显微镜的硬件限制,可以更好地恢复生物信息。本文首先介绍了解卷积方法的基本原理及其发展历程,接着列举了不同解卷积技术在不同模态下的重建原理和效果以及这些技术在生物学上的应用,最后总结了基于深度学习的解卷积方法在超分辨荧光显微镜技术上的最新进展和未来的发展潜力,并对包括傅里叶环相关的定量评估图像重建质量的方法的最新进展进行了阐述。 展开更多

关键词 显微 解卷积 超分辨显微镜 活细胞成像 计算成像 荧光显微镜

原文传递

三磷酸肌醇影响钙释放的数学模型研究 被引量：3

15

作者 杨华 陈良怡 +1 位作者 齐欢 吴鸿修 《生物物理学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期344-350,共7页

此模型主要说明激动剂诱发的Ca2 +振荡实验中Ca2 +释放的若干特征。模型假设内质网(ER)上三磷酸肌醇(IP3)受体/Ca2 +通道是由相互独立的三亚基组成 ,每个亚基可以结合IP3 或促进或抑制Ca2 + 释放。可看出IP3 受体/Ca2 + 通道随Ca2 + 变... 此模型主要说明激动剂诱发的Ca2 +振荡实验中Ca2 +释放的若干特征。模型假设内质网(ER)上三磷酸肌醇(IP3)受体/Ca2 +通道是由相互独立的三亚基组成 ,每个亚基可以结合IP3 或促进或抑制Ca2 + 释放。可看出IP3 受体/Ca2 + 通道随Ca2 + 变化成钟形反应、随IP3 的变化呈上升趋势。Ca2 + 振荡的频率和振幅与Ca2 + 依赖性IP3 的最大泵入速率 (v6)有很大关系。当Ca2 + 振荡对v6变化较敏感时 ,Ca2 + 振荡的振幅与v6 有近似的线性关系。扩展的模型可分析IP3 对钙依赖不同程度下的情况。 展开更多

关键词 IP3 Ca^2+振荡 振荡参数 钙释放 细胞

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膜片钳放大器的低噪声设计 被引量：3

16

作者 康国新 邹寿彬 +2 位作者 陈良怡 杨岳峰 康华光 《电子学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2000年第9期42-45,共4页

本文论述用于测量细胞膜离子通道电流的放大器的电路方案 .因被测电流在 1pA到nA级的范围内 ,而输出电压要求达到计算机便于处理的数值 .故需采用多级放大电路 .被测电流属极微弱的信号 ,噪声问题是设计中的关键 .对于多级放大器来说 ,... 本文论述用于测量细胞膜离子通道电流的放大器的电路方案 .因被测电流在 1pA到nA级的范围内 ,而输出电压要求达到计算机便于处理的数值 .故需采用多级放大电路 .被测电流属极微弱的信号 ,噪声问题是设计中的关键 .对于多级放大器来说 ,前置放大级 (探头电路 )的低噪声设计至关重要 .文中分析放大电路中的主要元、器件的背景噪声 ,用噪声电流和噪声电压的功率密度谱 (PDS)SI(f)和Sv(f)来表征其特性 .给出了所设计的PC Ⅱ型膜片钳放大器的主要性能参数和记录的电流波形 . 展开更多

关键词 膜片钳 放大器 低噪声设计

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三磷酸肌醇影响钙释放的两个作用 被引量：2

17

作者 杨华 陈良怡 +1 位作者 齐欢 吴鸿修 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 2001年第3期385-388,411,共5页

此模型主要说明激动剂诱发的 Ca2 +振荡实验中影响 Ca2 +释放的两个因素 :(a)三磷酸肌醇 (IP3)抑制Ca2 + 从内质网 ER中释放。 (b) IP3通过 Gq作用磷酸酶 C促使 Ca2 + 从 ER释放。模型假设 ER上 IP3受体是相互独立的亚基组成的四聚物 ,... 此模型主要说明激动剂诱发的 Ca2 +振荡实验中影响 Ca2 +释放的两个因素 :(a)三磷酸肌醇 (IP3)抑制Ca2 + 从内质网 ER中释放。 (b) IP3通过 Gq作用磷酸酶 C促使 Ca2 + 从 ER释放。模型假设 ER上 IP3受体是相互独立的亚基组成的四聚物 ,每个亚基可以结合 Ca2 + 和 IP3。IP3受体 / Ca2 + 通道的缓慢恢复到稳定状态是钙对自身释放抑制的原因。钙振荡的关键是最大 Ca2 +依赖性 IP3的进入速率 (v6 )和 IP3的衰减时间常数 (v7)的比值 : 当 v6 / v7<0 .2 8,不振荡 ;II当 0 .2 8<v6 / v7<0 .5 72振荡 ;III当 v6 / v7>0 .5 展开更多

关键词 IP3 Ca^2+振荡 振荡参数 三磷酸肌醇 钙释放

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α-LTX毒素和细胞分泌过程

18

作者 叶琴 陈良怡 +2 位作者 邹寿彬 康华光 瞿安连 《生命科学》 CSCD 2001年第4期167-169,166,共4页

α－ｌａｔｒｏｔｏｘｉｎ（ａ－ＬＴＸ）是一种突触前毒素；在细胞膜上它有两种受体。细胞内分泌过程是神经突触传递的必要步骤之一；与细胞内游离钙离子浓度密切相关，ａ－ＬＴＸ可以钙依赖性和钙不依赖性两种方式来影响细胞的分泌过... α－ｌａｔｒｏｔｏｘｉｎ（ａ－ＬＴＸ）是一种突触前毒素；在细胞膜上它有两种受体。细胞内分泌过程是神经突触传递的必要步骤之一；与细胞内游离钙离子浓度密切相关，ａ－ＬＴＸ可以钙依赖性和钙不依赖性两种方式来影响细胞的分泌过程，对于研究分泌的分子机制和钙不依赖分泌有重要作用。 展开更多

关键词 α-latrotoxin 突触前神经毒素 细胞分泌 受体 突触传递 α-LTX

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如何达到有效益的网络营销

19

作者 陈良怡 《广告主》 2008年第11期98-98,共1页

对于客户而言，提到网络营销，多少都有些期待，但又怕受伤害。期待的是，互联网的快速发展，帮助行销人员拓展了新的行销渠道，能让品牌透过互联网上丰富多元的形式与消费者有更多互动接触；但另一方面，面对这样一个新兴媒体，如何有... 对于客户而言，提到网络营销，多少都有些期待，但又怕受伤害。期待的是，互联网的快速发展，帮助行销人员拓展了新的行销渠道，能让品牌透过互联网上丰富多元的形式与消费者有更多互动接触；但另一方面，面对这样一个新兴媒体，如何有效运用、评估，也常是行销人员心中浮现的疑问。 展开更多

关键词 网络营销 效益 行销渠道 新兴媒体 有效运用 互联网 消费者 期待

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膜片钳等电生理技术在中医研究中的应用

20

作者 叶琴 陈良怡 瞿安连 《中医研究》 2002年第2期24-24,共1页

关键词 膜片钳 电生理技术 中医研究 病机

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