树突状细胞扫描电镜样本制备方法 被引量：12

1

作者 陶忠芬 蔡永国 +4 位作者 杨仕明 可金星 黄文琪 肖桃元 房殿春 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第12期1299-1300,共2页

目的　探讨具有特殊结构的悬浮树突状细胞的扫描电镜制样方法。方法　对比观察细胞离心成团与自然沉降法制备扫描电镜样品对细胞形态学的影响。结果　自然沉降法能很好地显示树突状细胞的形态结构。结论　自然沉降法是制作具有特殊结构... 目的　探讨具有特殊结构的悬浮树突状细胞的扫描电镜制样方法。方法　对比观察细胞离心成团与自然沉降法制备扫描电镜样品对细胞形态学的影响。结果　自然沉降法能很好地显示树突状细胞的形态结构。结论　自然沉降法是制作具有特殊结构悬浮细胞的扫描电镜制样方法。 展开更多

关键词 树突状细胞 扫描电镜 制备方法 自然沉降法 样本 制样方法 细胞形态学 对比观察 形态结构 特殊结构

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电镜样品取材的意义与应用 被引量：7

2

作者 陶忠芬 可金星 +2 位作者 肖桃元 黄文琪 王莉 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期273-274,共2页

关键词 电子显微镜 样品 取材 固定

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大鼠膀胱平滑肌过度充盈后钙离子分布的变化 被引量：2

3

作者 陶忠芬 李文刚 +3 位作者 路菊 可金星 宋波 肖桃元 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期608-609,共2页

目的观察大鼠膀胱平滑肌细胞钙离子在亚细胞水平的分布变化,同时探讨钙离子超微结构示踪方法。方法健康雌性W istar大鼠10只,分实验组(膀胱过度充盈2 h+排空后2 h)和正常对照组各5只,用草酸钾-戊二醛灌注固定取膀胱组织制样透射电镜观... 目的观察大鼠膀胱平滑肌细胞钙离子在亚细胞水平的分布变化,同时探讨钙离子超微结构示踪方法。方法健康雌性W istar大鼠10只,分实验组(膀胱过度充盈2 h+排空后2 h)和正常对照组各5只,用草酸钾-戊二醛灌注固定取膀胱组织制样透射电镜观察。结果示踪钙离子呈20 nm直径高电子密度细颗粒状,正常对照组大鼠膀胱平滑肌示踪钙离子数量少,散在分布于滑面内质网内,实验组示踪钙离子在损伤肌细胞内数量明显增多,弥漫密集分布,尤其聚集在线粒体周围。结论急性尿潴留时膀胱平滑肌功能和结构损害与细胞内钙超载密切相关。钙示踪法是观察细胞内钙超载的可靠方法。 展开更多

关键词 膀胱平滑肌 钙离子 急性尿潴留 透射电镜 大鼠

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树突状细胞的培养与扫描电镜样品制备 被引量：2

4

作者 陶忠芬 可金星 +1 位作者 黄文琪 肖桃元 《电子显微学报》 CAS CSCD 2005年第4期439-439,共1页

关键词 扫描电镜样品 树突状细胞 电镜样品制备 自然沉降法 悬浮细胞 对比观察 涂片法

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电镜样品取材实验带教的体会 被引量：4

5

作者 陶忠芬 可金星 +2 位作者 肖桃元 黄文琪 王莉 《局解手术学杂志》 2005年第2期117-117,共1页

关键词 电镜 取材 教学

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浅谈电镜技术实验教学的体会 被引量：3

6

作者 陶忠芬 江海东 +2 位作者 李飞 路菊 可金星 《局解手术学杂志》 2009年第5期338-338,共1页

关键词 电子显微镜 实验 教学

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中心实验室大型仪器的规范化管理 被引量：3

7

作者 陶忠芬 可金星 张正治 《局解手术学杂志》 2004年第1期20-20,22,共2页

关键词 中心实验室 大型仪器 规范化管理 实验教学 小组负责制

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超顺磁性氧化铁标记骨髓间充质干细胞的实验研究 被引量：2

8

作者 陶忠芬 江澈 +2 位作者 李飞 路菊 张正治 《局解手术学杂志》 2011年第1期22-24,共3页

目的探讨超顺磁性氧化铁纳米颗粒(SPIO)标记青山羊骨髓间充质干细胞的方法,并确定标记颗粒在细胞内的具体位置,评价标记效果。方法抽取骨髓离心,分离间充质干细胞制成单细胞悬液传代培养及扩增,用SPIO标记第三代骨髓间充质干细胞,显微... 目的探讨超顺磁性氧化铁纳米颗粒(SPIO)标记青山羊骨髓间充质干细胞的方法,并确定标记颗粒在细胞内的具体位置,评价标记效果。方法抽取骨髓离心,分离间充质干细胞制成单细胞悬液传代培养及扩增,用SPIO标记第三代骨髓间充质干细胞,显微镜下观察发现细胞内胞吞入大量SPIO颗粒后消化培养细胞,离心成团,于2.5%戊二醛固定,透射电镜常规制样,镜下观察并采集图像。结果电镜下骨髓间充质干细胞的超微结构保存良好,胞质内出现大量电子密度高的SPIO颗粒,呈小团状或点状分布,主要位于溶酶体内及滑面内质网、线粒体及胞浆中的膜性结构上,细胞膜表面和核膜上也可见少量的散在颗粒。结论透射电镜下显示用SPIO标记骨髓间充质干细胞阳性率高,超微结构保存良好,准确定位了SPIO在胞内的位置,此法可为干细胞移植的示踪提供依据。 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 超顺磁性氧化铁 透射电镜

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培养神经细胞透射电镜样本制备方法的探讨

9

作者 陶忠芬 可金星 +4 位作者 陈继兰 路菊 文灿 黄文琪 肖桃元 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第24期2375-2376,共2页

目的探讨培养神经细胞透射电镜样本制备的新方法。方法分离SD大鼠大脑皮层神经细胞,培养于铺有琼脂糖和多聚赖氨酸薄膜的盖玻片上,适时固定、取膜,按常规程序制作超薄切片,电镜观察。结果电镜观察神经细胞及髓鞘超微结构清晰,原有位置... 目的探讨培养神经细胞透射电镜样本制备的新方法。方法分离SD大鼠大脑皮层神经细胞,培养于铺有琼脂糖和多聚赖氨酸薄膜的盖玻片上,适时固定、取膜,按常规程序制作超薄切片,电镜观察。结果电镜观察神经细胞及髓鞘超微结构清晰,原有位置关系和连接方式保存良好,可见细胞间的紧密连接。结论薄膜细胞培养法是培养细胞超微结构研究的好方法,也适用于培养细胞电镜免疫组化、电镜原位杂交的研究。 展开更多

关键词 培养细胞 透射电镜 样品制备

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电镜样品制备技术的应用

10

作者 陶忠芬 江海东 +2 位作者 李飞 路菊 可金星 《局解手术学杂志》 2008年第6期443-443,F0004,共2页

随着科技和经济的高速发展，科研、医疗及诊断水平快速提高，电子显微镜在现代生物医学研究中的应用越来越广泛，研究内容越来越丰富，针对性越来越强，加之生物样品多样化，对电镜样品制备技术提出了更多更高的要求。为了避免实验的盲... 随着科技和经济的高速发展，科研、医疗及诊断水平快速提高，电子显微镜在现代生物医学研究中的应用越来越广泛，研究内容越来越丰富，针对性越来越强，加之生物样品多样化，对电镜样品制备技术提出了更多更高的要求。为了避免实验的盲目性，避免因解释不够、实验准备不充分、操作不当引起的纠纷，减少实验的失败率，务必要抓好电镜样品制备技术。 展开更多

关键词 电镜样品 制备 咨询

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创伤应激大鼠甲状腺肾上腺皮质形态学研究 被引量：7

11

作者 肖桃元 可金星 +3 位作者 艾国平 陶忠芬 黄文琪 粟永萍 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第13期1130-1132,共3页

目的　探讨创伤应激情况下应激器官甲状腺和肾上腺的形态与功能变化。方法　对大鼠爆炸伤后不同时相点的肾上腺和甲状腺进行光、电镜观察。结果　爆炸损伤后引起动物强烈应激反应 ,应激器官肾上腺和甲状腺发生一系列病理变化 ,病理过程... 目的　探讨创伤应激情况下应激器官甲状腺和肾上腺的形态与功能变化。方法　对大鼠爆炸伤后不同时相点的肾上腺和甲状腺进行光、电镜观察。结果　爆炸损伤后引起动物强烈应激反应 ,应激器官肾上腺和甲状腺发生一系列病理变化 ,病理过程表现为 3期 :伤后早期 (第 1～ 3天 )为过度应激期 ,表现为细胞内颗粒大量排空 ,甚至引起细胞破裂 ,皮质激素和甲状腺素过度释放 ;继之 (第 7天 )为功能衰竭期 ,滤泡塌陷、细胞退变和萎缩 ;以后 (第 2 0～ 2 6天 )出现修复改变。结论　爆炸伤后引起动物过度应激反应 ,创伤后应激性疾病 (PTSD) 展开更多

关键词 爆炸伤 应激 肾上腺 甲状腺 超微结构

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建筑材料的扫描电镜样品制备技术与观察 被引量：5

12

作者 路菊 王莉 +3 位作者 黄文琪 陶忠芬 肖桃元 可金星 《电子显微学报》 CAS CSCD 2005年第4期388-388,共1页

关键词 样品制备技术 扫描电镜 建筑材料 水泥制品 表面粗糙 制备方法 陶瓷粉末 电镜观察 工作参数

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开放型电子显微镜实验室的建设与管理 被引量：7

13

作者 程绪鹏 可金星 +3 位作者 陶忠芬 黄文琪 王莉 肖桃元 《实验室研究与探索》 CAS 2004年第8期98-99,共2页

分析了研究型及研究服务型封闭性电子显微镜实验室存在的弊端,着重从提高电子显微镜的有效使用率,提高科研服务质量等方面,说明建立开放型电子显微镜实验室的必要性。并根据工作实践总结了开放型电子显微镜实验室运行的经验。

关键词 电子显微镜 开放型实验室 管理

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大鼠肺放射性损伤的超微结构观察 被引量：4

14

作者 肖桃元 王久惠 +6 位作者 陶忠芬 韦建 可金星 李涛 路菊 田路 谭永红 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第21期2034-2037,共4页

目的观察放射性肺损伤的超微病理变化,并探讨放射性肺炎和肺纤维化的发生机制。方法SD雄性大鼠77只,分实验组63只和正常对照组14只,实验组用8MV直线加速器30、20、10Gy3个剂量一次性照射右半胸,左半胸作为实验对照,分7个时相点(1、3、7... 目的观察放射性肺损伤的超微病理变化,并探讨放射性肺炎和肺纤维化的发生机制。方法SD雄性大鼠77只,分实验组63只和正常对照组14只,实验组用8MV直线加速器30、20、10Gy3个剂量一次性照射右半胸,左半胸作为实验对照,分7个时相点(1、3、7、14、28、90、180d)活杀动物,取右肺中叶组织作光、电镜观察。结果各实验组放射损伤早期(1～30d)Ⅰ型上皮损伤,吞噬细胞增多、活跃;Ⅱ型上皮激活;肺泡隔毛细血管内皮损伤、增生,血小板、红细胞聚集,微血栓形成;间质水肿。后期(60～180d)Ⅱ型上皮异常增殖,成纤维细胞/胶原增生,血管萎缩减少,肺泡纤维化。各实验组损伤病变程度与照射剂量相关。结论肺泡隔血管内皮病变、血液循环障碍和间质水肿是放射性肺损伤早期的主要病理变化,是肺纤维化的始动因素;成纤维细胞激活、Ⅱ型上皮细胞异常增殖、吞噬细胞等分别参与肺纤维化进程,是多种因素综合作用的结果。 展开更多

关键词 放射损伤 超微病理 肺 大鼠

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Cytodex-3微载体负载人骨髓间充质干细胞的培养及扫描电镜样品的制备与观察 被引量：3

15

作者 路菊 陶忠芬 +1 位作者 黄文琪 可金星 《电子显微学报》 CAS CSCD 2006年第B08期243-244,共2页

关键词 骨髓间充质干细胞 扫描电镜样品 样品制备技术 培养条件 微载体 载人 定向诱导分化 扫描电镜观察

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高原反应的脑病理与水通道蛋白-4(AQP4)的相关性实验研究 被引量：3

16

作者 杨晓文 可金星 +5 位作者 陈代伦 陶忠芬 孙伟 黄文琪 王莉 肖桃元 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第16期1685-1689,共5页

目的研究高原反应的脑病理变化及发病机制.方法Wistar大白鼠56只,分正常对照和实验组,实验组进入模拟5 000 m高原环境饲养,取4、24、48 h、3 d、2、4周各组各时相点动物活杀取脑作光、电镜一般形态学观察,硝酸镧示踪血管通透性观察,水... 目的研究高原反应的脑病理变化及发病机制.方法Wistar大白鼠56只,分正常对照和实验组,实验组进入模拟5 000 m高原环境饲养,取4、24、48 h、3 d、2、4周各组各时相点动物活杀取脑作光、电镜一般形态学观察,硝酸镧示踪血管通透性观察,水通道蛋白(AQP4)和mRNA光、电镜免疫组化和原位杂交,GLU(glutamate,谷氨酸),GABA(gamm-aminobutyric,γ氨基丁酸)含量检测.结果光、电镜观察显示实验组早期(4～72 h)脑毛细血管内皮细胞出现吞饮泡增多、线粒体肿胀、紧密连接松弛、胶质足肿胀以及(24、48 h)硝酸镧漏出血管腔等病理改变,神经细胞无明显病理变化;免疫组化和原位杂交显示AQP4在血管内皮细胞、胶质纤维阳性表达,AQP4 mRNA在毛细血管内皮细胞核和胶质细胞核呈阳性表达,二者的表达情况在实验组早期增高.结论BBB病变是动物进入高原出现较早的病理变化;早期胶质细胞肿胀可能是一种保护性调节;AQP4 mRNA的表达变化可能是调节BBB通透性并维持水平衡的分子机制. 展开更多

关键词 高原反应 水通道蛋白-4 胶质细胞 血脑屏障

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悬浮状物质的样品制备及扫描电镜观察 被引量：4

17

作者 路菊 陶忠芬 可金星 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期368-369,共2页

目的通过改进悬浮状物质的样品制备,以提高扫描电镜观察的图像质量。方法将体外培养的人骨髓间充质干细胞(hMSCs)悬液经2.5%的戊二醛(pH7.2～7.4)固定后,用吸管直接吸出固定液,经洗涤、梯度脱水、叔丁醇梯度置换,再制成细胞悬液进行涂片... 目的通过改进悬浮状物质的样品制备,以提高扫描电镜观察的图像质量。方法将体外培养的人骨髓间充质干细胞(hMSCs)悬液经2.5%的戊二醛(pH7.2～7.4)固定后,用吸管直接吸出固定液,经洗涤、梯度脱水、叔丁醇梯度置换,再制成细胞悬液进行涂片,空干燥,离子溅射镀膜进行扫描电镜观察。结果hMSCs饱满、表面结构清晰,凸现质量改善明显。结论用直接移液法处理悬浮物质扫描电镜样品明显优于传统的样品制作方法。 展开更多

关键词 悬浮状物质 样品制备 扫描电镜

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高原环境中大鼠脑水肿与水通道蛋白4的表达变化 被引量：5

18

作者 杨晓文 可金星 +2 位作者 陶忠芬 黄文琪 孙伟 《中国临床康复》 CSCD 北大核心 2005年第9期84-86,共3页

目的:探讨大鼠在模拟5000m高原环境下脑水肿脑组织水通道蛋白4(aquaporin4,AQP4)的表达变化及意义。方法:实验选用Wistar大白鼠56只按随机数字法将大鼠分为正常对照组8只、实验组48只,其中实验组按在模拟高原环境中饲养时间分为饲养4,24... 目的:探讨大鼠在模拟5000m高原环境下脑水肿脑组织水通道蛋白4(aquaporin4,AQP4)的表达变化及意义。方法:实验选用Wistar大白鼠56只按随机数字法将大鼠分为正常对照组8只、实验组48只,其中实验组按在模拟高原环境中饲养时间分为饲养4,24,48,72h,2周和4周组,每组8只。在各时相点取大鼠大脑半球组织,测定脑组织含水率,作AQP4免疫组织化学染色和组织原位杂交,用图像分析软件检测AQP4抗体和基因阳性表达相对灰度值,了解AQP4在大鼠大脑的表达变化。结果:饲养4,48,72h组大鼠脑组织含水率明显高于正常对照组(P<0.05～0.01),大鼠在模拟高原环境中饲养2周时含水率逐渐下降,饲养4周组脑组织含水率接近正常对照组。AQP4在脑毛细血管壁及胶质纤维呈阳性表达,正常对照组大鼠AQP4平均相对灰度值(averagerelativegray,ARG)(1.268±0.119)明显低于饲养4h组(1.392±0.098)(t=5.258,P<0.05);饲养24,48和72h组AQP4阳性表达增强,ARG值显著增加(t=2.967～5.652,P<0.01);饲养2周组ARG值有所下降(t=5.239,P<0.05)。AQP4mRNA在胶质细胞核和神经细胞核表达阳性,变化规律与AQP4蛋白变化基本一致,即24,48和72h组阳性细胞数率增加(t=3.045～5.526,P<0.01),阳性染色增强,饲养2周组阳性表达率下降(t=4.687,P<0.05)。结论:AQP4与血脑屏? 展开更多

关键词 脑水肿 高原病 血脑屏障

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核心蛋白聚糖对兔屈趾肌腱损伤位点胶原纤维形成以及成纤维细胞增殖的延迟效应 被引量：2

19

作者 熊雁 张正治 +4 位作者 可金星 路菊 陶忠芬 潘峰 孙玮 《中国临床康复》 CSCD 北大核心 2005年第30期101-103,i0003,共4页

目的:观察兔屈肌腱损伤位点直接注射核心蛋白聚糖后对胶原纤维形成的作用,以及其改善兔屈肌腱损伤后的愈合效果。方法:实验于2004-09/2005-04在解放军第三军医大学高原军事医学系中心实验室进行。选取成年日本大耳白兔18只。按术后不同... 目的:观察兔屈肌腱损伤位点直接注射核心蛋白聚糖后对胶原纤维形成的作用,以及其改善兔屈肌腱损伤后的愈合效果。方法:实验于2004-09/2005-04在解放军第三军医大学高原军事医学系中心实验室进行。选取成年日本大耳白兔18只。按术后不同时间随机分成2,4,8周组,每组6只。①取兔后肢的第2趾,暴露深屈肌腱,横行切断。右侧肌腱缝合位点直接注射核心蛋白聚糖100μL(0.25g/L)为实验趾;左侧肌腱缝合位点注射磷酸盐缓冲液(1倍的磷酸盐缓冲液)100μL为对照趾。石膏固定。②各组兔肌腱大体粘连性状观察:于术后2,4,8周分别暴露粘连组织、腱鞘和肌腱,观察肌腱粘连形状(肌腱粘连分为4级,I级为无粘连,V级为广泛粘连)。③各组兔肌腱缝合段组织学观察:于术后2,4,8周取实验趾和对照趾肌腱缝合区切片。随机取2个标本切片做苏木精-伊红染色观察成纤维细胞计数;2个标本切片做Masson3色染色观察胶原纤维含量;2个标本行透射电镜观察肌腱愈合中成纤维细胞及胶原纤维的超微结构。结果:18只兔均进入结果分析。①兔肌腱大体粘连性状观察结果:8周组,实验趾吻合口光滑,愈合良好,Ⅰ,Ⅱ级粘连,肌腱滑动性好;对照趾吻合口形成Ⅳ,Ⅴ级粘连,与腱鞘很难分离,肌腱滑动性极差。②兔肌腱缝合段成纤维细胞计数结果:2周组实验趾显著少于对照趾[(708.67±73.30),(4289.33±55.79)个/视野]。4周组实验趾多于对照趾[(6734.83±192.91),(3322.33±183.32)个/视野]。8周组实验趾和对照趾无明显差异[(3525.17±166.36),(3267.50±167.91)个/视野]。③兔肌腱缝合段胶原纤维含量观察结果:光镜下观察,8周组实验趾胶原纤维含量明显增多,排列规则,胶原束直径一致,胶原纤维成熟。对照趾胶原纤维不规则,胶原束直径大小不一,成熟度有所增加。④兔肌腱缝合段超微结构观察结果:8周组实验趾胶原原纤维成熟排列规则,粗细均匀,纤维周期横纹清晰,腱细胞细胞质空泡减少。对照趾胶原原纤维不排列,纤维周期横纹不清晰,腱细胞活跃,胞突增多,胞质内大量空泡。结论:①核心蛋白聚糖对胶原的形成和成熟起到一个调节作用,使胶原束的直径更加一致,达到一个理想的胶原愈合。②延迟成纤维细胞的增殖,能够明显改善肌腱损伤后的愈合质量。 展开更多

关键词 腱损伤 蛋白聚糖类 成纤维细胞 粘连

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扫描电镜在人羊膜负载猪骨髓间充质干细胞生长形态学研究中的应用 被引量：1

20

作者 黄文琪 可金星 +2 位作者 陶忠芬 闫国和 肖桃元 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期319-319,共1页

关键词 扫描电子显微镜 人羊膜 猪骨髓 充质干细胞 生长形态学 皮肤损伤

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