基于网络药理学和动物实验探讨当归补血汤抗肝纤维化的作用

1

作者 陶柏楠 王咏兰 +3 位作者 刘道忠 万星 黄德斌 袁林 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期651-657,共7页

目的基于网络药理学和动物实验验证探讨当归补血汤抗肝纤维化的作用机制。方法通过检索TCMSP、TCMID数据库筛选出当归补血汤活性成分,运用PubChem平台获取靶点Canonical SMILES号,SwissTarget、TargetNet数据库筛选出当归补血汤对应的靶... 目的基于网络药理学和动物实验验证探讨当归补血汤抗肝纤维化的作用机制。方法通过检索TCMSP、TCMID数据库筛选出当归补血汤活性成分,运用PubChem平台获取靶点Canonical SMILES号,SwissTarget、TargetNet数据库筛选出当归补血汤对应的靶点,通过GeneCards、OMIM和TTD数据库检索获得肝纤维化相关疾病靶点,Venny 2.1.0获取当归补血汤活性成分靶点与肝纤维化的交集疾病靶点;STRING数据库获取PPI网络,Cytoscape 3.9.1软件获取核心靶点,构建“药物-活性成分-靶点”网络;DAVID数据库对核心靶点进行GO功能及KEGG通路富集分析,并进行可视化处理。动物实验验证网络药理学预测结果,采用腹腔注射CCl_(4)制备肝纤维化小鼠模型,造模同时给药,持续6周;采用HE、Masson染色观察肝组织病理学变化,试剂盒检测血清ALT、AST水平,ELISA法检测血清IL-6、TNF-α、IL-1β水平,Western blot法检测肝组织α-SMA、Col-1、p-PI3K、p-Akt、p-JNK、p-P38 MAPK蛋白表达。结果从当归补血汤中筛选得到作用于肝纤维化的活性成分29种,肝纤维化相关疾病靶点2901个,药物与疾病有259个交集基因,核心靶点为MAPK、c-Jun、Akt等。KEGG通路富集分析主要涉及癌症通路、PI3K/Akt信号通路、乙型肝炎、脂质与动脉硬化信号通路、MAPK信号通路等。动物实验结果表明,当归补血汤能够下调肝纤维化小鼠血清ALT、AST、IL-6、TNF-α、IL-1β水平和肝组织α-SMA、Col-1、p-PI3K、p-Akt、p-JNK、p-P38 MAPK蛋白表达。结论当归补血汤可通过多组分、多靶点、多通路发挥抗肝纤维化作用,其机制可能与下调炎症因子释放,调节PI3K/Akt和JNK/P38 MAPK信号通路相关。 展开更多

关键词 当归补血汤 肝纤维化 网络药理学 炎症因子 PI3K/AKT信号通路 JNK/P38 MAPK信号通路

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大黄素对人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞自噬的影响

2

作者 陶柏楠 王咏兰 +1 位作者 洪岚 袁林 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第1期1-7,共7页

目的基于cGAS/STING信号通路研究大黄素对人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(MH7A)自噬的潜在作用。方法采用CCK-8法检测MH7A细胞增殖的结果,并根据细胞存活率筛选出药物的浓度,并加入自噬抑制剂3-MA进一步验证大黄素对自噬的影响;采用MD... 目的基于cGAS/STING信号通路研究大黄素对人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(MH7A)自噬的潜在作用。方法采用CCK-8法检测MH7A细胞增殖的结果,并根据细胞存活率筛选出药物的浓度,并加入自噬抑制剂3-MA进一步验证大黄素对自噬的影响;采用MDC法检测MH7A细胞自噬情况;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测cGAS、STING、p-STING、LC3-I、LC3-II、P62和Beclin-1的蛋白表达水平。结果MDC染色结果提示,大黄素能够增强MH7A细胞自噬;Western blot结果提示,大黄素可降低MH7A细胞自噬相关蛋白cGAS、STING、p-STING和P62的表达,增加LC3-II和Beclin-1的表达。加入自噬抑制剂3-MA后,MH7A细胞P62蛋白表达升高,LC3-II和Beclin-1蛋白表达降低。结论大黄素可能通过下调cGAS/STING信号通路加速自噬,抑制MH7A细胞增殖。 展开更多

关键词 大黄素 MH7A细胞 cGAS/STING信号通路 自噬 类风湿关节炎

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大黄素抗类风湿关节炎的作用机制研究进展

3

作者 陶纯立 冯春艳 陶柏楠 《风湿病与关节炎》 2024年第1期67-70,80,共5页

类风湿关节炎是一种累及关节的自身免疫性疾病,临床表现为关节炎症、骨损伤和软骨破坏、关节功能障碍和畸形,以及关节外的器官损伤。近年来,天然药物治疗类风湿关节炎的研究取得了显著的成果,大黄素是中药大黄的主要活性成分之一,具有... 类风湿关节炎是一种累及关节的自身免疫性疾病,临床表现为关节炎症、骨损伤和软骨破坏、关节功能障碍和畸形,以及关节外的器官损伤。近年来,天然药物治疗类风湿关节炎的研究取得了显著的成果,大黄素是中药大黄的主要活性成分之一,具有良好的抗炎和抗氧化等作用。筛选近年来实验方法科学、研究方向新颖的文献,总结大黄素抗类风湿关节炎的作用机制,发现大黄素可通过减轻炎症反应、促进软骨细胞的增殖分化、抑制软骨细胞凋亡、延缓软骨细胞外基质降解等途径显示出抗类风湿关节炎的潜力。 展开更多

关键词 类风湿关节炎 大黄素 成纤维样滑膜细胞 细胞外基质 机制 研究进展 综述

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柔肝降酶方对CCl_(4)诱导大鼠肝纤维化的作用 被引量：2

4

作者 陶柏楠 王咏兰 +3 位作者 田梦杰 侯孜明 万星 袁林 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期741-747,共7页

目的探讨柔肝降酶方对肝纤维化大鼠的作用机制。方法将大鼠分为正常组、模型组、秋水仙碱组(0.2 mg/kg)和柔肝降酶方低、高剂量组(9.9、19.8 g/kg),每组10只,采用腹腔注射橄榄油CCl_(4)混合溶液(40%,3 mL/kg)制备肝纤维化大鼠模型,灌胃... 目的探讨柔肝降酶方对肝纤维化大鼠的作用机制。方法将大鼠分为正常组、模型组、秋水仙碱组(0.2 mg/kg)和柔肝降酶方低、高剂量组(9.9、19.8 g/kg),每组10只,采用腹腔注射橄榄油CCl_(4)混合溶液(40%,3 mL/kg)制备肝纤维化大鼠模型,灌胃给药6周后,检测血清ALT、AST水平,ELISA法检测血清TNF-α、IL-6水平,免疫组化法(IHC)检测肝组织α-SMA表达,Western blot法检测肝组织PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白(PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR)、自噬相关蛋白(P62、Beclin-1、LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ)、纤维化相关蛋白(α-SMA、Col-1)的表达。结果与正常组比较,模型组大鼠血清ALT、AST、TNF-α、IL-6水平、肝组织α-SMA阳性细胞表达及α-SMA、Col-1、Beclin-1、LC3-Ⅱ蛋白表达均升高(P<0.01),肝组织P62、p-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,柔肝降酶方各剂量组大鼠血清ALT、AST、TNF-α、IL-6水平、肝组织α-SMA阳性细胞表达及α-SMA、Col-1、Beclin-1、LC3-Ⅱ蛋白表达降低(P<0.01),肝组织P62、p-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01)。结论柔肝降酶方可能通过调控PI3K/Akt/mTOR信号通路抑制自噬,起到抗CCl_(4)诱导的大鼠肝纤维化作用。 展开更多

关键词 柔肝降酶方 肝纤维化 自噬 PI3K/Akt/mTOR信号通路

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柔肝降酶方含药血清抑制人肝星状细胞的活化及自噬

5

作者 陶柏楠 王咏兰 +5 位作者 江露 张宗星 刘道忠 万星 黄德斌 袁林 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2023年第33期5334-5341,共8页

背景:自噬在肝纤维化中发挥重要作用,可以通过诱导肝星状细胞活化促进肝纤维化的进程。前期研究表明,柔肝降酶方具有保护肝功能、抗炎、抗氧化应激反应等作用,其是否通过自噬抗肝纤维化的作用机制尚未阐明。目的:探讨柔肝降酶方含药血... 背景:自噬在肝纤维化中发挥重要作用,可以通过诱导肝星状细胞活化促进肝纤维化的进程。前期研究表明,柔肝降酶方具有保护肝功能、抗炎、抗氧化应激反应等作用,其是否通过自噬抗肝纤维化的作用机制尚未阐明。目的:探讨柔肝降酶方含药血清对脂多糖诱导的人肝星状细胞活化及自噬的影响及其潜在的作用机制。方法:用脂多糖建立人肝星状细胞活化模型,分成不同的处理组:(1)空白组:人肝星状细胞+空白血清;(2)模型组:人肝星状细胞+空白血清+脂多糖;(3)柔肝降酶方低、中、高剂量含药血清组:人肝星状细胞+低、中、高剂量柔肝降酶方含药血清+脂多糖;(4)柔肝降酶方高剂量含药血清联合雷帕霉素组:高剂量组基础上+雷帕霉素;(5)柔肝降酶方高剂量含药血清联合PI3K抑制剂组:高剂量组基础上+LY294002。CCK-8法观察细胞增殖情况;采用单丹磺酰尸胺染色法观察细胞自噬情况;WesternBlot检测细胞通路蛋白(PI3K、P-PI3K、AKT、P-AKT、mTOR、P-mTOR)、自噬相关蛋白(P62、Beclin-1、LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ)、人肝星状细胞活化标志蛋白(α-平滑肌肌动蛋白、Ⅰ型胶原纤维)表达水平的影响。结果与结论:(1)柔肝降酶方含药血清能够降低人肝星状细胞的增殖活性,下调Ⅰ型胶原纤维、α-平滑肌肌动蛋白的蛋白表达,上调自噬P62蛋白的表达,降低LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白的表达,且呈现剂量依赖性;(2)MDC荧光染色结果显示,柔肝降酶方含药血清可使细胞绿色斑点荧光强度降低;(3)加入自噬激动剂雷帕霉素后,P62蛋白表达降低,LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白表达升高;(4)经过柔肝降酶方含药血清处理后,PI3K、Akt、mTOR蛋白磷酸化水平升高,呈剂量依赖性,这种作用能被PI3K抑制剂LY294002减弱;(5)提示柔肝降酶方含药血清可能通过PI3K/Akt/mTOR信号通路抑制自噬,减少脂多糖诱导的人肝星状细胞活化。 展开更多

关键词 柔肝降酶方 细胞自噬 Akt mTOR LC3-Ⅱ 人肝星状细胞

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基于PI3K/AKT/mTOR通路的三百棒促进脂多糖诱导的RAW 264.7细胞自噬并抑制炎症 被引量：6

6

作者 张宗星 江露 +5 位作者 刘道忠 侯孜明 田梦杰 陶柏楠 冯佳 袁林 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2023年第4期573-583,共11页

三百棒来源于芸香科植物飞龙掌血Toddalia asiatica(L.)Lam的根,是一种天然土家族中草药,具有抗炎、抗风湿、抗肿瘤、抗微生物等药理活性。其毒副作用小,疗效显著的特点使之成为当前研究热点。许多天然产物已被证明可通过靶向PI3K/AKT/m... 三百棒来源于芸香科植物飞龙掌血Toddalia asiatica(L.)Lam的根,是一种天然土家族中草药,具有抗炎、抗风湿、抗肿瘤、抗微生物等药理活性。其毒副作用小,疗效显著的特点使之成为当前研究热点。许多天然产物已被证明可通过靶向PI3K/AKT/mTOR介导的自噬来抑制炎症及自身免疫性疾病,本项研究通过调节PI3K/AKT/mTOR信号通路来研究三百棒醇提物(Toddalia asiatica alcohol extract,TAAE)对自噬的影响,用脂多糖(LPS)诱导单核巨噬细胞(RAW 264.7)建立炎症模型,通过细胞毒性检测试剂盒检测TAAE对细胞活力的影响,并筛选出药物的浓度及干预时间,透射电镜和单丹磺酰尸胺染色检测巨噬细胞的生物学功能,酶联免疫吸附法检测上清液中相关炎症因子水平,Western blot检测自噬和通路相关蛋白的表达水平;并采用自噬早期抑制剂(3-MA)和通路PI3K激动剂(740Y-P)进一步验证自噬对炎症和信号通路的影响。实验结果表明TAAE可能通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路,促进自噬泡的形成、自噬体溶酶体融合和降解,降低LPS处理的RAW 264.7细胞中炎性细胞因子的表达和分泌。总体而言,本研究结果为三百棒的抗炎机制的研究提供了新的线索,并为临床更好的应用三百棒治疗炎症性疾病提供理论依据。 展开更多

关键词 三百棒 PI3K/AKT/mTOR通路 自噬 炎症 RAW 264.7细胞

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基于JAK2/STAT3信号通路探究鬼箭羽醇提物抗CCl_(4)诱导C57BL/6J小鼠肝纤维化作用机制 被引量：1

7

作者 王咏兰 陶柏楠 +3 位作者 陈明环 曾华华 马敏 黄德斌 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期875-881,共7页

目的基于JAK2/STAT3信号通路探究鬼箭羽醇提物抗CCl_(4)诱导C57BL/6J小鼠肝纤维化(hepatic fibrosis,HF)作用机制。方法将60只C57BL/6J小鼠随机分为空白组、模型组、鬼箭羽低剂量组(EAL)、鬼箭羽中剂量组(EAM)、鬼箭羽高剂量组(EAH)、... 目的基于JAK2/STAT3信号通路探究鬼箭羽醇提物抗CCl_(4)诱导C57BL/6J小鼠肝纤维化(hepatic fibrosis,HF)作用机制。方法将60只C57BL/6J小鼠随机分为空白组、模型组、鬼箭羽低剂量组(EAL)、鬼箭羽中剂量组(EAM)、鬼箭羽高剂量组(EAH)、水飞蓟宾(Silybin)阳性治疗组,每组10只。除正常组外,其余小鼠腹腔注射25%CCl_(4)花生油液1.6 mL·kg^(-1)诱导HF模型。同时,阳性治疗组给予12.6 mg·kg^(-1)的水飞蓟宾,EAL、EAM、EAH分别给予鬼箭羽醇提物72、140、280 mg·kg^(-1),每日1次,连续6周。当第6周治疗结束,空腹称质量,采血取肝,观察肝脏外形,计算肝脏指数,检测小鼠血清中ALT、AST、TNF-α、IL-6、IL-1β。检测肝组织α-SMA、Collagen-Ⅰ和JAK2/STAT3信号通路相关蛋白(JAK2、STAT3、p-JAK2、p-STAT3)表达。结果与模型组相比,EAM和EAH明显降低CCl_(4)导致的肝脏指数增加,抑制血清ALT、AST、α-SMA、collagen I升高;鬼箭羽干预组的肝形态结构、细胞炎性浸润、纤维变化及胶原沉积呈剂量依赖性优于模型组;EAM、EAH血清中TNF-α、IL-6和IL-1β表达明显低于模型组(P<0.05),肝组织中与JAK2/STAT3信号通路有关的JAK2、STAT3、p-JAK2、p-STAT3蛋白表达也明显低于模型组(P<0.05)。结论鬼箭羽醇提物具有抗CCl_(4)诱导小鼠HF作用,其机制可能与JAK2/STAT3信号通路的调控有关。 展开更多

关键词 鬼箭羽醇提物 肝纤维化 TNF-α JAK2 STAT3 IL-6

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儿茶素干预硬脂酰辅酶A去饱和酶-1表达抗小鼠肝纤维化损伤 被引量：1

8

作者 万星 陶柏楠 +3 位作者 邵文翠 金铮钰 黄德斌 袁林 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期305-310,共6页

目的探讨儿茶素(catechin,CA)是否通过影响SCD1表达抗四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl_(4))诱导的小鼠肝纤维化。方法48只C57bl/6雄性小鼠被随机分为6组:正常组、CCl_(4)组、CA 100、200、400 mg·kg^(-1)组(CA-L/M/H)、水飞蓟宾... 目的探讨儿茶素(catechin,CA)是否通过影响SCD1表达抗四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl_(4))诱导的小鼠肝纤维化。方法48只C57bl/6雄性小鼠被随机分为6组:正常组、CCl_(4)组、CA 100、200、400 mg·kg^(-1)组(CA-L/M/H)、水飞蓟宾组(200 mg·kg^(-1))。腹腔注射CCl_(4)造模,共6周,前3周给小鼠灌胃CA和水飞蓟宾。处死后,观察肝大体形态、测量肝指数,通过HE染色、AST、ALT检测肝损,Masson染色检测胶原沉积及免疫组织化学检测α-SMA、collagenⅠ的表达观察肝纤维化程度,ELISA检测甘油三酯、油红O染色观察脂质累积,进而QPCR、Western blot检测CA对脂肪酸限速酶SCD1表达的影响并用分子对接技术检测CA与SCD1相互作用模式。结果较正常组,CA明显降低ALT、AST、α-SMA、collagenⅠ、甘油三酯的含量,抑制了CCl_(4)引起的肝纤维化,减少脂质累积(P<0.05),量效依赖地降低SCD1mRNA和蛋白表达(P<0.05),与SCD1通过4个氢键(Arg74,Asn148,Trp184和Val187)和6个氨基酸形成的范德华力相互作用,结合自由能为-5.4 kcal·mol^(-1)。结论CA可量效依赖地对抗CCl_(4)引起的小鼠肝纤维化,其机制可能与抑制SCD1表达从而减少脂质合成有关。 展开更多

关键词 儿茶素 肝纤维化 SCD1 脂质 分子对接技术 CCl_(4)

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柔肝降酶方对四氯化碳诱导的大鼠急性肝损伤的作用研究

9

作者 向珊 陶柏楠 +5 位作者 侯孜明 田梦杰 冯佳 刘道忠 吴昊 袁林 《湖北民族大学学报（医学版）》 2023年第1期9-13,共5页

目的探讨柔肝降酶方对四氯化碳(CCl_(4))诱导的大鼠肝损伤的作用及机制。方法雄性SD大鼠40只随机分为对照组、模型组、柔肝降酶方组、水飞蓟宾组,每组10只。柔肝降酶方组以9.9 g/kg柔肝降酶方水煎液灌胃,水飞蓟宾组以54.6 mg/kg水飞蓟... 目的探讨柔肝降酶方对四氯化碳(CCl_(4))诱导的大鼠肝损伤的作用及机制。方法雄性SD大鼠40只随机分为对照组、模型组、柔肝降酶方组、水飞蓟宾组,每组10只。柔肝降酶方组以9.9 g/kg柔肝降酶方水煎液灌胃,水飞蓟宾组以54.6 mg/kg水飞蓟宾水溶液灌胃,对照组和模型组给予等剂量的生理盐水,连续给药7 d。给药结束2 h后,除对照组大鼠腹腔注射5 mL/kg橄榄油溶液外,其余各组大鼠腹腔注射等体积25%CCl_(4)橄榄油溶液制备急性肝损伤模型;1 d后使用谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)试剂盒检测大鼠血清ALT、AST;观察大鼠肝组织的形态学变化;Western blot检测炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、炎症因子白细胞介素-6(IL-6)蛋白表达水平,通路因子酪氨酸蛋白激酶1(JAK1)、磷酸化酪氨酸蛋白激酶1(p-JAK1)、信号传导及转录激活因子3(STAT3)、磷酸化信号传导及转录激活因子3(p-STAT3)蛋白表达水平。结果与对照组比较,模型组大鼠肝脏组织小叶结构破坏,肝细胞肿胀变形,大量脂肪空泡;血清ALT、AST水平显著升高(P<0.01);肝组织TNF-α、IL-6、p-JAK1、p-STAT3蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。与模型组比较,柔肝降酶方组和水飞蓟宾组大鼠肝脏结构损伤程度减轻;血清ALT、AST水平显著降低(P<0.05);肝组织TNF-α、IL-6、p-JAK1、p-STAT3蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论柔肝降酶方具有保护肝组织,减少炎症反应的作用,其机制可能与调节JAK1/STAT3信号通路有关。 展开更多

关键词 柔肝降酶方 肝损伤 四氯化碳 JAK1 STAT3

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中医扶正化瘀法抗肝纤维化机制研究进展

10

作者 陶纯立 陶柏楠 +1 位作者 王咏兰 冯春艳 《中医药临床杂志》 2023年第4期823-827,共5页

正虚血瘀是肝纤维化的主要病机,贯穿肝纤维化的始终。扶正化瘀法作为中医抗肝纤维化的一个重要方法,在临床和科研中对于抗肝纤维化的疗效不断取得进展。作者将近5年来中医药运用扶正化瘀法防治肝纤维化的实验研究进行了梳理,以肝纤维化... 正虚血瘀是肝纤维化的主要病机,贯穿肝纤维化的始终。扶正化瘀法作为中医抗肝纤维化的一个重要方法,在临床和科研中对于抗肝纤维化的疗效不断取得进展。作者将近5年来中医药运用扶正化瘀法防治肝纤维化的实验研究进行了梳理,以肝纤维化的现代医学机制为主线,对扶正化瘀法指导下的中医处方干预肝纤维化的作用机制展开综述,以期为防治肝纤维化提供中医思路和有效方案。 展开更多

关键词 肝纤维化 扶正化瘀法 机制研究 综述

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长时程采血法及儿茶素药代动力学参数研究

11

作者 陶柏楠 金铮钰 +1 位作者 张钰 万星 《湖北民族大学学报（医学版）》 2022年第2期1-4,9,共5页

目的建立新西兰兔长时间采血法以及测定新西兰兔血浆中儿茶素浓度的高效液相分析方法并计算儿茶素药代动力学参数。方法24只新西兰兔随机分成4组,每组6只:PE管颈总动脉插管组、PE管颈外静脉插管组、PVC管颈总动脉插管组、PVC管颈外静脉... 目的建立新西兰兔长时间采血法以及测定新西兰兔血浆中儿茶素浓度的高效液相分析方法并计算儿茶素药代动力学参数。方法24只新西兰兔随机分成4组,每组6只:PE管颈总动脉插管组、PE管颈外静脉插管组、PVC管颈总动脉插管组、PVC管颈外静脉插管组,比较不同材质插管及插管深浅对采血量、采血时长、溶血情况的影响;6只新西兰兔,单剂量(10 mg/kg)耳缘静脉注射儿茶素(Catechin,C),高效液相法测定不同时间点血浆中儿茶素的峰面积,外标法测浓度,DAS 2.0软件计算药代动力学参数。结果PE材质的插管在颈总动脉和颈外静脉插管时均导致溶血,而PVC材质插管不易溶血,PE材质的插管在颈外静脉插管时,随着插管的深入,溶血加深(P<0.05);插管深浅对颈总动脉出血速度无显著性影响,对颈外静脉出血速度有显著性影响,插管越深出血越快(P<0.05),HPLC法测定儿茶素的精密度、重复性和稳定性良好,RSD<5.0%,耳缘静脉注射儿茶素10 mg/kg后,主要药代学参数分别为:药时曲线下面积(AUC):(125.97±15.75)mg/(L·min)、达峰时间(MRT):(478.80±78.45)min、t1/2z:(451.20±103.76)min、CLz(0.08±0.01)L/(kg·min^(-1))、Vz:(51.27±5.20)L/kg。结论颈外静脉插管有助于长时程采血,PVC插管不致溶血,深度插管有利于准确快速采血;儿茶素半衰期有利于静脉注射给药或口服给药。 展开更多

关键词 儿茶素 药代动力学 高效液相色谱法 颈外静脉采血法 PVC管

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三百棒醇提物通过抗炎和凋亡作用减轻CIA大鼠的关节炎 被引量：3

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作者 张宗星 江露 +5 位作者 刘道忠 陶柏楠 侯孜明 田梦杰 冯佳 袁林 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期2203-2211,共9页

探讨三百棒醇提物(Toddalia asiatica alcohol extract,TAAE)通过磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠的治疗作用及其机制研究。首先建立CIA大鼠模型,然后每天口服TAAE和雷公藤多苷片(TGT),每周... 探讨三百棒醇提物(Toddalia asiatica alcohol extract,TAAE)通过磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠的治疗作用及其机制研究。首先建立CIA大鼠模型,然后每天口服TAAE和雷公藤多苷片(TGT),每周对后肢关节的肿胀程度进行评分。给药35 d后,苏木素-伊红(HE)染色观察组织病理学变化;酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞因子(TNF-α、IL-6)的水平;TUNEL法检测TAAE对大鼠滑膜组织细胞凋亡的影响;Western blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、caspase-3及通路相关蛋白PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt的表达水平;RT-qPCR检测Bax、Bcl-2、caspase-3、TNF-α、IL-6、IL-1β及通路相关蛋白PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt的mRNA水平。TAAE可减轻CIA大鼠关节肿胀程度,降低血清炎症因子水平,改善滑膜组织病理改变,促进滑膜组织细胞凋亡,抑制滑膜炎症。此外,RT-qPCR和Western blot实验结果显示TAAE上调促凋亡相关蛋白Bax水平,下调抑凋亡蛋白Bcl-2水平,激活caspase-3促进了滑膜组织细胞凋亡,TAAE还有效地下调了p-PI3K、p-Akt蛋白水平。该研究表明,TAAE对CIA大鼠的关节炎具有很好的治疗作用,并且对降低炎症反应具有很强的药理活性,其机制可能与抑制PI3K/Akt信号通路,促进滑膜细胞凋亡有关。总体而言,该研究为三百棒的抗炎机制的研究提供了新的线索,并为临床更好应用三百棒治疗炎症性及自身免疫性疾病提供理论依据。 展开更多

关键词 三百棒醇提物 类风湿性关节炎 凋亡 CIA PI3K/AKT信号通路

原文传递

基于自噬途径观察飞龙掌血醇提物对NSCLCA549细胞凋亡的影响 被引量：3

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作者 洪岚 吴昊 +7 位作者 田瑞 冯佳 侯孜明 田梦杰 陶柏楠 沈玺 曹春雨 袁林 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第20期78-85,共8页

目的:观察飞龙掌血醇提物对NSCLCA549细胞自噬和凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:体外培养A549细胞,采用细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测细胞增殖的情况,并计算A549细胞的存活率,筛选出药物的浓度。采用膜联蛋白V-异硫氰酸荧... 目的:观察飞龙掌血醇提物对NSCLCA549细胞自噬和凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:体外培养A549细胞,采用细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测细胞增殖的情况,并计算A549细胞的存活率,筛选出药物的浓度。采用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/碘化丙锭(PI)法检测各组及加入自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)后细胞凋亡情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组及加入3-MA后凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、微管相关蛋白1轻链3(LC3Ⅱ)、活化的胱天蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)、活化的聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(cleaved PARP1)及PARP1、活化的死亡激动剂(t-Bid)及Bid、泛素结合蛋白p62的表达情况。结果:与空白组比较,干预24 h,0.25 g·L^(-1)飞龙掌血醇提物组细胞存活率明显下降(P<0.05),0.5、1、2、4 g·L^(-1)飞龙掌血醇提物组细胞存活率显著下降(P<0.01);48 h时0.25、0.5、1、2、4 g·L^(-1)飞龙掌血醇提物组细胞存活率呈浓度依赖性显著下降(P<0.01),且4 g·L^(-1)飞龙掌血醇提物细胞的存活率不到10%。流式细胞术结果显示,与空白组比较,0.5 g·L^(-1)飞龙掌血醇提物组细胞的总凋亡率明显增加(P<0.05),1、2 g·L^(-1)飞龙掌血醇提物组时细凋亡率显著增加(P<0.01);与2 g·L^(-1)飞龙掌血醇提物组和3-MA组比较,3-MA联合飞龙掌血醇提物组凋亡率显著降低(P<0.01)。与空白组比较,1、2 g·L^(-1)飞龙掌血醇提物组促凋亡蛋白cleaved PARP1、Bax、t-Bid蛋白表达明显增加(P<0.05,P<0.01);Bid蛋白表达在2 g·L^(-1)飞龙掌血醇提物组显著减少(P<0.01);0.5、1、2 g·L^(-1)飞龙掌血醇提物组抗凋亡蛋白Bcl-2的蛋白表达明显减少(P<0.05,P<0.01);0.5、1、2 g·L^(-1)飞龙掌血醇提物组p62的蛋白表达显著下调(P<0.01),LC3Ⅱ蛋白表达显著上调(P<0.01),具有浓度依赖性。结论:飞龙掌血醇提物能显著抑制A549细胞的增殖,其机制可能与促进细胞自噬和诱导细胞凋亡,共同促进细胞死亡有关。 展开更多

关键词 飞龙掌血 肺癌 自噬 凋亡

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