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Tamm-Horsfall糖蛋白放免分析测定盒的研制
1
作者 韩世泉 周棱 刘一兵 《同位素》 CAS 北大核心 1992年第2期88-92,共5页
采用氯化钠沉淀及SephadexG-100层析方法,从正常人尿中提纯了Tamm-Horsfall糖蛋白(THP)。用提纯的THP免疫家免制备了THP抗血清,抗体工作液滴度1:20000至1:40 000,亲和常数0.99×10^(10)l·mol^1,与人β_2-mG、白蛋白和IgG交叉... 采用氯化钠沉淀及SephadexG-100层析方法,从正常人尿中提纯了Tamm-Horsfall糖蛋白(THP)。用提纯的THP免疫家免制备了THP抗血清,抗体工作液滴度1:20000至1:40 000,亲和常数0.99×10^(10)l·mol^1,与人β_2-mG、白蛋白和IgG交叉反应分别小于0.02%,0.0001%和0.0004%。并采用双抗加PEG的方法制备了THP放免分析测定盒,对人血清和尿中THP进行测定。测定范围50—2000ng/ml,批内及批间变异系数分别为(1.6-2.9)%(n=6)和(2.3-4.2)%(n=6),回收率(96.2—103.9)%,正常人血清THP为(123.3±21.9)ng/ml(n=14),24小时尿THP排泄量为(29.0-43.9)mg(n=3)。 展开更多
关键词 放免测定盒 肾 THP 免疫 放射性
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促甲状腺激素化学发光免疫分析的研究 被引量：6
2
作者 尹东光 贺佑丰 +5 位作者 刘一兵 沈德存 韩世泉 官国英 罗志福 钟儒刚 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2004年第7期893-896,共4页
抗原、抗体间可发生特异性免疫反应 ,将发光物质标记在抗体上 ,经免疫反应和化学发光反应 ,测量光信号可对待测抗原进行定性、定量分析。本实验以吖啶酯DMAE·NHS标记TSH单克隆抗体 ,建立了TSH化学发光免疫分析方法。该方法分析灵... 抗原、抗体间可发生特异性免疫反应 ,将发光物质标记在抗体上 ,经免疫反应和化学发光反应 ,测量光信号可对待测抗原进行定性、定量分析。本实验以吖啶酯DMAE·NHS标记TSH单克隆抗体 ,建立了TSH化学发光免疫分析方法。该方法分析灵敏度为 0 .0 1mIU/L ,批内相对标准偏差为 4 .2 9%～ 6 71% ,批间相对标准偏差为 4 .36 %～ 8.14 % ;平均回收率为 98%。与TSHIRMA法的相关方程为Y =0 .0 2 +0 .92X ,相关系数为 0 .993;与CibaCorningTSHCLIA测量值的相关方程为Y =- 0 .16 +0 .92X ,相关系数为 0 .986。 展开更多
关键词 促甲状腺激素 化学发光免疫分析 相关系数 糖蛋白激素 甲状腺
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几种主要化学发光物质的发光性能及其化学发光免疫分析体系 被引量：23
3
作者 尹东光 贺佑丰 +3 位作者 刘一兵 沈德存 韩世泉 罗志福 《标记免疫分析与临床》 CAS 2002年第4期225-230,共6页
文章综述了目前国际上免疫分析中应用的几种主要的化学发光物质的结构、发光机理、发光性能和特点以及其免疫分析体系。
关键词 化学发光物质 发光性能 化学结构 化学发光免疫分析体系
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高灵敏度人促甲状腺激素(hTSH)酶联免疫分析试剂盒 被引量：5
4
作者 官国英 韩世泉 +3 位作者 王玉肖 刘一兵 王晶晶 刘挺 《原子能科学技术》 EI CAS CSCD 2002年第2期129-133,共5页
以辣根过氧化物酶标记链亲合素 (SA) ,二株识别人促甲状腺激素 (hTSH)高度特异的单克隆抗体分别用于包被微孔和生物素化 ,以四甲基联苯胺 (TMB)为底物 ,建立了高灵敏度人促甲状腺激素生物素 亲合素酶联免疫分析 (sTSH BA ELISA)试剂盒... 以辣根过氧化物酶标记链亲合素 (SA) ,二株识别人促甲状腺激素 (hTSH)高度特异的单克隆抗体分别用于包被微孔和生物素化 ,以四甲基联苯胺 (TMB)为底物 ,建立了高灵敏度人促甲状腺激素生物素 亲合素酶联免疫分析 (sTSH BA ELISA)试剂盒的制备方法。本试剂盒的灵敏度为 0 0 2mIU/L ,批内变异系数 <7 8% ,批间变异系数 <9 6% ,回收率为 93 3 %～ 1 0 7 8% ,特异性鉴定显示与其它糖蛋白激素 (如FSH ,HCG ,LH)无明显的交叉反应性。正常参考值范围为 0 3～ 4 1mIU/L。本法所制备的试剂盒与中国原子能科学研究院同位素研究所的TSH IRMA试剂盒的相关方程为 y =1 .2xIRMA+0 1 4,相关系数r =0 969。本试剂盒较常规ELISA灵敏度高、简便、快速 。 展开更多
关键词 人促甲状腺激素 生物素-亲合素系统 酶联免疫分析 放射性检测 TSH-IRMA试剂盒 临床检测
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标记免疫分析技术的发展点评 被引量：13
5
作者 尹东光 贺佑丰 +3 位作者 刘一兵 沈德存 韩世泉 罗志福 《标记免疫分析与临床》 CAS 2003年第1期40-42,共3页
关键词 标记免疫分析技术 RIA EIA FIA ELEIA
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氟喹诺酮类药物胶体金试纸的研制 被引量：7
6
作者 冯婷婷 刘一兵 +3 位作者 侯惠仁 贾娟娟 李振华 韩世泉 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第9期54-58,共5页
用针对抗氟喹诺酮类(fluoroquinolones,FQs)药物的广谱性单克隆抗体建立了可以同时检测11种FQs药物的胶体金免疫层析方法。该试纸条用20nm的胶体金标记单抗,将诺氟沙星-卵清蛋白喷涂在检测线上,羊抗小鼠二抗喷涂在质控线上。该胶体金试... 用针对抗氟喹诺酮类(fluoroquinolones,FQs)药物的广谱性单克隆抗体建立了可以同时检测11种FQs药物的胶体金免疫层析方法。该试纸条用20nm的胶体金标记单抗,将诺氟沙星-卵清蛋白喷涂在检测线上,羊抗小鼠二抗喷涂在质控线上。该胶体金试纸对猪肉和虾中环丙沙星、恩诺沙星和氧氟沙星的检测限都是30ng/g,对诺氟沙星、培氟沙星、依诺沙星、麻保沙星、洛美沙星、达氟沙星、沙拉沙星和二氟沙星8种药物在以上两种样品中添加浓度为100ng/g时都可被检出,整个检测过程包括样品前处理的时间可在20min内完成。试验结果表明符合对这11种FQs药物在鸡肉和虾中残留现场大量筛查的要求。 展开更多
关键词 氟喹诺酮 胶体金 免疫层析 多残留快速检测
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化学发光物质9-[2′，6′-二甲基-4′-(琥珀酰亚胺氧羰基)苯氧羰基]-10-甲基吖啶-单甲基-磺酸盐的合成 被引量：4
7
作者 尹东光 贺佑丰 +5 位作者 刘一兵 沈德存 韩世泉 罗志福 焦正 吴明红 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第2期223-228,共6页
报道了一种化学发光物质吖啶酯衍生物9-[2′，6′-二甲基-4′-（琥珀酰亚胺氧羰基）苯氧羰基]-10-甲基吖啶-单甲基-磺酸盐（DMAE·NHS）的合成，合成共经历7个步骤，每步合成的产物经IR，^1H NMR，MS和元素分析表征，结果表明合成... 报道了一种化学发光物质吖啶酯衍生物9-[2′，6′-二甲基-4′-（琥珀酰亚胺氧羰基）苯氧羰基]-10-甲基吖啶-单甲基-磺酸盐（DMAE·NHS）的合成，合成共经历7个步骤，每步合成的产物经IR，^1H NMR，MS和元素分析表征，结果表明合成产物为所期望的化合物，该合成产物显示为一种非常理想的化学发光物质。 展开更多
关键词 吖啶酯 9-[2′ 6′-二甲基-4′-(琥珀酰亚胺氧羰基)苯氧羰基]-10-甲基吖啶-单甲基-磺酸盐(DMAE·NHS) 化学发光 合成
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磺胺喹噁啉酶联免疫分析方法的建立 被引量：5
8
作者 刘超 刘一兵 +2 位作者 韩世泉 许文革 张莉玲 《原子能科学技术》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第2期142-147,共6页
利用抗磺胺喹啞啉（SQ）多抗建立酶联免疫分析方法，以测定SQ在动物源食品中的残留。方法学鉴定结果表明：灵敏度为o．2ng／mL，批内、批间变异分别为7．8％～10．0％、10．5％～12．0％；牛奶、蜂蜜、鸡肉、鸡蛋样品的添加回收率分别... 利用抗磺胺喹啞啉（SQ）多抗建立酶联免疫分析方法，以测定SQ在动物源食品中的残留。方法学鉴定结果表明：灵敏度为o．2ng／mL，批内、批间变异分别为7．8％～10．0％、10．5％～12．0％；牛奶、蜂蜜、鸡肉、鸡蛋样品的添加回收率分别在93．1％～107．0％、69．0％～104．0％、40．0％～73．6%、50．0％～84．0％之间。牛奶稀释实验表明，测定值与稀释度呈线性相关，相关系数R=0．997。 展开更多
关键词 磺胺喹啞啉 酶联免疫分析 兽药残留
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免疫分析固相技术(Ⅱ) 被引量：6
9
作者 吴冯波 王衍真 +2 位作者 韩世泉 贺佑丰 侯惠仁 《标记免疫分析与临床》 CAS 1999年第1期31-35,共5页
关键词 免疫分析 固相技术 固相材料改性 蛋白质改性
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吖啶酯DMAE·NHS发光性能的研究 被引量：5
10
作者 尹东光 贺佑丰 +3 位作者 刘一兵 沈德存 韩世泉 罗志福 《标记免疫分析与临床》 CAS 2004年第3期163-167,共5页
本文研究了吖啶酯 (DMAE·NHS)的发光性能 ,结果表明 ,DMAE·NHS的发光为闪光型 ,在 0 .4s时发光强度达到最大 ,发光半衰期约为 0 .9s。DMAE·NHS的发光强度为 6 .11× 10 18cps/mol,发光启动试剂的组成及表面活性剂对... 本文研究了吖啶酯 (DMAE·NHS)的发光性能 ,结果表明 ,DMAE·NHS的发光为闪光型 ,在 0 .4s时发光强度达到最大 ,发光半衰期约为 0 .9s。DMAE·NHS的发光强度为 6 .11× 10 18cps/mol,发光启动试剂的组成及表面活性剂对其发光强度有影响。DMAE·NHS的热稳定性随pH值增大和温度升高而降低。 展开更多
关键词 吖啶脂 发光动力学 发光强度 热稳定性
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前列腺抗原酶促化学发光免疫分析方法学的建立 被引量：3
11
作者 张雪峰 刘一兵 +4 位作者 贾娟娟 许文革 李子颖 陈永利 韩世泉 《原子能科学技术》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第2期112-116,共5页
应用鲁米诺-过氧化氢发光体系建立定量测定血清前列腺特异性抗原含量的酶促化学发光免疫分析方法。该方法测量范围为1.5～80μg/L,灵敏度为0.12μg/L,批内变异<5%,批间变异<15%。回收率为83.8%～118.7%,稀释实验测定值与稀释度呈... 应用鲁米诺-过氧化氢发光体系建立定量测定血清前列腺特异性抗原含量的酶促化学发光免疫分析方法。该方法测量范围为1.5～80μg/L,灵敏度为0.12μg/L,批内变异<5%,批间变异<15%。回收率为83.8%～118.7%,稀释实验测定值与稀释度呈线性相关,相关系数为0.999。本方法与免疫放射分析方法的相关方程y=1.07x+0.68,相关系数r=0.97。 展开更多
关键词 酶促化学发光免疫分析方法 前列腺特异性抗原 单克隆抗体
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恩诺沙星单克隆抗体的制备及酶联免疫分析方法的建立 被引量：4
12
作者 冯婷婷 刘一兵 +3 位作者 李子颖 贾娟娟 袁志刚 韩世泉 《同位素》 CAS 2009年第1期5-9,共5页
采用抗恩诺沙星单克隆抗体建立酶联免疫吸附法(ELISA)用以检测恩诺沙星在动物源性食品中的残留。经方法学鉴定,本方法的检测范围为0.5～50μg/L,灵敏度为0.2μg/L,批内变异系数<10%,批间变异系数<20%。鸡肉、鱼肉、虾和蜂蜜样品... 采用抗恩诺沙星单克隆抗体建立酶联免疫吸附法(ELISA)用以检测恩诺沙星在动物源性食品中的残留。经方法学鉴定,本方法的检测范围为0.5～50μg/L,灵敏度为0.2μg/L,批内变异系数<10%,批间变异系数<20%。鸡肉、鱼肉、虾和蜂蜜样品的回收率分别为95.5%～107.5%、80.0%～101.3%、105.7%～122.7%和93.3%～111.3%。方法学鉴定结果符合免疫分析的基本要求。 展开更多
关键词 恩诺沙星(ENR) 单克隆抗体 酶联免疫分析
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滤纸干血-新生儿促甲状腺素酶联免疫分析试剂盒的研制 被引量：2
13
作者 官国英 王晶晶 +7 位作者 韩世泉 于洁 王玉肖 刘一兵 李丽波 陈志东 张彬彬 傅宝国 《同位素》 CAS 2003年第2期92-95,共4页
以辣根过氧化物酶标记链亲合素(SA),两株识别人促甲状腺素(hTSH)高度特异的单克隆抗体分别用于包被微孔和生物素化,以四甲基联苯胺(TMB)为底物,建立了滤纸干血-新生儿促甲状腺素生物素-亲合素酶联免疫分析(NeonatalTSH-BA-ELISA)试剂盒... 以辣根过氧化物酶标记链亲合素(SA),两株识别人促甲状腺素(hTSH)高度特异的单克隆抗体分别用于包被微孔和生物素化,以四甲基联苯胺(TMB)为底物,建立了滤纸干血-新生儿促甲状腺素生物素-亲合素酶联免疫分析(NeonatalTSH-BA-ELISA)试剂盒的制备方法。本方法的灵敏度为0.5mIU/L,批内变异系数<15%,批间变异系数<20%,回收率为90.1%～103.3%。本方法所制备的试剂盒与NeonatalTSH-IR-MA(磁颗粒法)试剂盒具有良好的相关性,相关方程为y=1.01x+0.34,相关系数为r=0.873。本试剂盒无放射性,操作简便、快速,适用于临床检测和科研应用。 展开更多
关键词 滤纸干血—新生儿促甲状腺素酶联免疫分析试剂盒 血清 TSH水平 诊断 原发性甲状腺机能减退
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广谱检测磺胺类药物的酶联免疫分析方法的建立 被引量：6
14
作者 刘超 韩世泉 刘一兵 《标记免疫分析与临床》 CAS 2012年第5期286-290,共5页
目的利用抗磺胺类药物多抗建立酶联免疫分析方法,测定磺胺类药物在动物源食品中的残留。方法以抗磺胺类药物抗体包被微孔板,辣根过氧化物酶(HRP)标记磺胺类半抗原磺胺噻唑(ST),磺胺间甲氧嘧啶为标准品建立酶联免疫分析方法。结果本方法... 目的利用抗磺胺类药物多抗建立酶联免疫分析方法,测定磺胺类药物在动物源食品中的残留。方法以抗磺胺类药物抗体包被微孔板,辣根过氧化物酶(HRP)标记磺胺类半抗原磺胺噻唑(ST),磺胺间甲氧嘧啶为标准品建立酶联免疫分析方法。结果本方法的标准曲线测定范围为0.3～100ng/mL。方法学鉴定结果表明,灵敏度为0.2ng/mL,批内、批间变异分别为9.2%～14.4%、10.5%～12.7%。牛奶、蜂蜜、水产品及鸡肉、鸡蛋样品的添加回收率分别在79.3%～88.9%、65.5%～136.4、63.0%～83.3%、59.3%～78.1%之间。牛奶稀释实验表明,测定值与稀释度呈线性相关,相关系数r=0.997。结论本方法可同时快速测定动物源性食品中23种磺胺类药物的残留,对19种磺胺类药物的检测灵敏度高于10ng/mL。 展开更多
关键词 广谱检测 磺胺类药物 酶联免疫分析 兽药残留
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AFP 单克隆抗体的研制及其在免疫分析中的初步应用 被引量：2
15
作者 刘一兵 陈键 +2 位作者 韩世泉 王衍真 贺佑丰 《同位素》 CAS 1998年第2期70-74,共5页
获得了四株分泌ＡＦＰ（甲胎蛋白）单克隆抗体的杂交瘤细胞株并已稳定传代。其中Ａ４Ａ１１、Ａ１４Ｃ１１在ＡＦＰＩＲＭＡ中得到了很好的配对，经ＲＩＡ鉴定其滴度分别为１∶８００００和１∶１５００００，亲和常数分别为１．７×... 获得了四株分泌ＡＦＰ（甲胎蛋白）单克隆抗体的杂交瘤细胞株并已稳定传代。其中Ａ４Ａ１１、Ａ１４Ｃ１１在ＡＦＰＩＲＭＡ中得到了很好的配对，经ＲＩＡ鉴定其滴度分别为１∶８００００和１∶１５００００，亲和常数分别为１．７×１０９Ｌ／ｍｏｌ和１．４×１０１０Ｌ／ｍｏｌ。Ａ１４Ｃ１１作为包被抗体应用于ＡＦＰＥＬＩＳＡ中也得到较好的结果。 展开更多
关键词 甲胎蛋白 AFP单克隆抗体 肿瘤 免疫放射分析
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人促甲状腺激素酶联免疫吸附分析试剂盒的研制 被引量：2
16
作者 王晓静 官国英 +2 位作者 韩世泉 刘一兵 王玉肖 《同位素》 CAS 2002年第2期97-99,共3页
TSH多抗用于固相包被,一株TSH单抗与辣根过氧化物酶偶联制备TSH酶标记物,以四甲基联苯胺(TMB)为底物,采用二步法,建立了TSH酶联免疫吸附分析法(ELISA)。本方法灵敏度为0.06 mIU/L,批内CV≤5.9％(n=8),批间CV≤9.1％(n=7)。回收率为(98.4... TSH多抗用于固相包被,一株TSH单抗与辣根过氧化物酶偶联制备TSH酶标记物,以四甲基联苯胺(TMB)为底物,采用二步法,建立了TSH酶联免疫吸附分析法(ELISA)。本方法灵敏度为0.06 mIU/L,批内CV≤5.9％(n=8),批间CV≤9.1％(n=7)。回收率为(98.4～101.4)％。77例正常人血清的TSH均值为1.96mIU/L,用本法与IRMA法同时测定23例病人血样,两者相关方程为Y=1.01X—0.47,相关系数r=0.992。本方法具有简便、快速和准确的特点,适于临床检测和科研应用。 展开更多
关键词 人促甲状腺激素 酶联免疫分析法 试剂盒 甲状腺疾病 临床诊断
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磺胺甲恶唑酶联免疫分析法的建立 被引量：2
17
作者 冯婷婷 李子颖 +3 位作者 刘一兵 许文革 官国英 韩世泉 《同位素》 CAS 北大核心 2007年第1期20-23,共4页
建立了磺胺甲恶唑（Sulfamethoxazole，SMX）酶联免疫分析方法，用以检测动物源性食品中SMX的残留。利用辣根过氧化物酶（HRP）标记SMX，兔抗SMX抗体制备固相抗体，通过标本中的SMX和一定量酶标SMX竞争结合固相抗SMX多抗，标本中SMX的... 建立了磺胺甲恶唑（Sulfamethoxazole，SMX）酶联免疫分析方法，用以检测动物源性食品中SMX的残留。利用辣根过氧化物酶（HRP）标记SMX，兔抗SMX抗体制备固相抗体，通过标本中的SMX和一定量酶标SMX竞争结合固相抗SMX多抗，标本中SMX的量和显色后的OD450呈负相关的原理检测标本中的SMX含量。经方法学鉴定，本方法的灵敏度为0．067μg／L，批内变异系数〈10％，批间变异系数〈20％。牛奶、肉类、鸡蛋、蜂蜜样品的回收率分别为94．9％～116．0％、82．0％～107．6％、81．6％～94．9％、89．0％～93．0％，符合免疫分析方法的要求。 展开更多
关键词 磺胺甲恶唑(SMX) 酶联免疫分析(ELISA) 酶标抗原
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白蛋白酶联免疫分析试剂盒的研制 被引量：2
18
作者 官国英 刘忠瑞 +3 位作者 李丽波 侯惠仁 王晶晶 韩世泉 《同位素》 CAS 2010年第3期182-185,共4页
采用竞争性ELISA法检测人尿中白蛋白(Albumin,Alb)的含量。将Alb抗体包被96孔微孔板,Alb与辣根过氧化物酶结合形成酶标记物,建立了白蛋白酶联免疫分析(Alb-ELISA)方法。结果显示,本方法分析灵敏度为0.28 mg/L;批内、批间变异系数分别为2... 采用竞争性ELISA法检测人尿中白蛋白(Albumin,Alb)的含量。将Alb抗体包被96孔微孔板,Alb与辣根过氧化物酶结合形成酶标记物,建立了白蛋白酶联免疫分析(Alb-ELISA)方法。结果显示,本方法分析灵敏度为0.28 mg/L;批内、批间变异系数分别为2.63%～5.28%和2.40%～4.26%;回收率为95.0%～106.4%;高浓度Alb样品系列倍比稀释后,测定值与稀释度呈线性相关,相关系数为r=0.997 4。本试剂盒操作简便、快速,适用于临床检测和科研应用。 展开更多
关键词 白蛋白(Albumin Alb) 酶联免疫分析(ELISA) 试剂盒
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免疫分析固相技术(Ⅰ) 被引量：2
19
作者 吴冯波 王衍真 +2 位作者 韩世泉 贺佑丰 侯惠仁 《标记免疫分析与临床》 CAS 1998年第4期219-223,240,共6页
关键词 免疫分析 固相分离 材料 蛋白固定
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HE4两种融合蛋白的基因构建和原核表达 被引量：1
20
作者 张雪峰 刘一兵 +3 位作者 李子颖 贾娟娟 王斌 韩世泉 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1666-1669,共4页
目的:构建人附睾蛋白4(HE4)的原核表达系统,纯化重组蛋白并检测其活性。方法:提取卵巢透明癌细胞总RNA,利用RT-PCR技术扩增HE4基因,分别构建pGEX-4T-1-HE4和PET26b-HE4两种原核表达系统。以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白... 目的:构建人附睾蛋白4(HE4)的原核表达系统,纯化重组蛋白并检测其活性。方法:提取卵巢透明癌细胞总RNA,利用RT-PCR技术扩增HE4基因,分别构建pGEX-4T-1-HE4和PET26b-HE4两种原核表达系统。以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白表达,最后采用SDS-PAGE和HE4商品化免疫分析试剂盒对表达产物进行鉴定。结果:成功构建了两种HE4融合蛋白的重组表达质粒,表达产物经SDS-PAGE鉴定,分别在相对分子量约38 000处和12 000处见到表达条带,并可与HE4单克隆抗体特异性结合。结论:采用原核表达方法获得了HE4的两种融合蛋白,为下一步开发免疫分析诊断试剂奠定了基础。 展开更多
关键词 卵巢癌 人附睾蛋白4(HE4) 克隆 表达
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