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牛病毒性腹泻病毒SYBR Green I实时定量RT-PCR检测方法的建立及应用 被引量:6
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作者 韩猛立 黄新 +1 位作者 钟发刚 唐思静 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期333-339,共7页
[目的]在建立一种快速定量的用于检测牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的实时荧光定量RT-PCR检测方法.[方法]根据GenBank公布的BVDV 5′端非编码区(5′ UTR)核苷酸序列,软件分析后设计特异性扩增引物,建立SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法.[... [目的]在建立一种快速定量的用于检测牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的实时荧光定量RT-PCR检测方法.[方法]根据GenBank公布的BVDV 5′端非编码区(5′ UTR)核苷酸序列,软件分析后设计特异性扩增引物,建立SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法.[结果]建立的方法只能检测到BVDV,而与猪瘟病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、牛轮状病毒及牛冠状病毒没有交叉反应,具有高度的特异性;在102~108copies/μL模板范围内具有良好的线性关系,所制作的标准曲线相关系数为0.998,最低可检测下限可达到102 copies/μL,具有灵敏度高的特点;不同情况下3次重复实验,变异系数均小于1.5%,具有重复性好的特点.[结果]成功建立了一种用于检测BVDV的实时荧光定量RT-PCR技术,并可用于临床样品的检测,适用于BVDV的快速诊断和流行病学调查. 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 实时荧光定量RT-PCR SYBR Green
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牛IFN-α、IFN-β及IFN-γ mRNA实时SYBR GreenⅠ定量RT-PCR检测方法的建立及应用 被引量:4
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作者 韩猛立 杨井泉 +3 位作者 姚守秀 黄新 薄新文 钟发刚 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期762-767,共6页
为建立灵敏度高、特异性强、能够快速检测牛α-、β-、γ-干扰素(BoIFN-α、BoIFN-β、BoIFN-γ)mRNA的实时荧光定量PCR方法,本研究根据GenBank中登录的BoIFN-α、BoIFN-β和BoIFN-γ基因序列,分别在其保守区内设计并合成特异引物,以牛3... 为建立灵敏度高、特异性强、能够快速检测牛α-、β-、γ-干扰素(BoIFN-α、BoIFN-β、BoIFN-γ)mRNA的实时荧光定量PCR方法,本研究根据GenBank中登录的BoIFN-α、BoIFN-β和BoIFN-γ基因序列,分别在其保守区内设计并合成特异引物,以牛3-磷酸甘油脱氢酶(GAPDH)mRNA为内参,建立SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法。将BoIFN-α、BoIFN-β和BoIFN-γcDNA分别克隆到pMD18-T载体中,转化大肠杆菌DH5α内,经PCR及测序鉴定,将得到的阳性重组质粒制备成标准品,建立SYBR Green荧光定量PCR标准曲线并分析溶解曲线,进行灵敏性、特异性和重复性试验。结果表明:BoIFN-α、BoIFN-β、BoIFN-γ和GAPDH基因的Ct值与标准品稀释度在1×101copies/μL~1×107copies/μL内均呈良好的线性关系,相关系数均大于0.991。熔解曲线分析表明,产物为特异的单峰,特异性和重复性较好。本研究建立的检测牛IFN-α、IFN-β和IFN-γmRNA的实时荧光定量PCR方法,为牛IFN mRNA水平上的定量分析奠定了基础。 展开更多
关键词 SYBR GreenⅠ 实时荧光定量PCR α-干扰素 Β-干扰素 γ-干扰素
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牛病毒性腹泻病毒巢式RT-PCR检测方法的建立及应用 被引量:6
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作者 韩猛立 李娜 +4 位作者 黄新 薄新文 王新华 赵玉龙 钟发刚 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期6-9,15,共5页
参照多株不同基因型和基因亚型牛病毒性腹泻病毒(BVDV)5′UTR相对保守的基因序列,设计3对引物,其中1对能够扩增不同基因型BVDV 5′UTR片段(288 bp),另2对分别能够扩增BVDV-1型和BVDV-2型5′UTR片段(195 bp和116 bp)。扩增片段大小与预... 参照多株不同基因型和基因亚型牛病毒性腹泻病毒(BVDV)5′UTR相对保守的基因序列,设计3对引物,其中1对能够扩增不同基因型BVDV 5′UTR片段(288 bp),另2对分别能够扩增BVDV-1型和BVDV-2型5′UTR片段(195 bp和116 bp)。扩增片段大小与预计片段一致。对PCR反应条件进行优化,建立了一种特异、敏感的RT-nPCR检测方法。敏感性试验表明,敏感性为10-2TCID50/mL。特异性试验表明,对猪瘟兔化弱毒疫苗株、牛轮状病毒、牛传染性鼻气管炎病毒的检测结果均为阴性。通过对新疆部分地区无BVD临床症状的牛场208份奶牛血样检测,阳性率为50.43%,表明该方法具有快速、简便、特异性强和灵敏度高等特点,可以作为BVDV隐性感染临床诊断的有效方法。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 RT-nPCR 检测 应用
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新疆肉羊产业发展现状及未来养殖模式展望
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作者 赵文娟 张星星 +5 位作者 杨庆勇 钟发钢 韩猛立 黄新 张倩 吴桐忠 《现代畜牧科技》 2024年第3期112-115,共4页
新疆是羊肉的重要生产地和消费地,肉羊产业对新疆农牧业增效及农牧民增收致富具有重要意义。当前新疆地区羊肉供给严重不足,满足不了当地消费需求,养殖模式与方法相对分散与落后,与现代化、集约化养殖模式存在很大差距。该文分析了新疆... 新疆是羊肉的重要生产地和消费地,肉羊产业对新疆农牧业增效及农牧民增收致富具有重要意义。当前新疆地区羊肉供给严重不足,满足不了当地消费需求,养殖模式与方法相对分散与落后,与现代化、集约化养殖模式存在很大差距。该文分析了新疆肉羊产业的发展现状及面临的挑战和问题,探讨发展肉羊智慧化养殖的趋势及意义,对新疆肉羊产业发展智慧养殖的前景进行了展望,并提出发展标准化规模养殖、加强科技队伍建设、完善科技支撑体系、加快饲草料产业发展、推广智慧化养殖技术、打造规模化羊场智慧管理云平台等建议,为新疆肉羊产业健康、可持续发展提供参考。 展开更多
关键词 新疆 肉羊产业 发展现状 养殖模式
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犬瘟热病毒巢式RT-PCR检测方法的建立及初步应用 被引量:5
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作者 杨井泉 韩猛立 +2 位作者 朱艳平 黄新 薄新文 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期1098-1103,共6页
【目的】建立一种犬瘟热病毒(CDV)RT-nested PCR检测方法。【方法】根据CDV弱毒株Onderstepoort的核衣壳蛋白(NP)基因序列设计套式引物,进行特异性、敏感性、重复性实验。【结果】特异性试验表明,该方法可以特异扩增出CDV NP基因片段,但... 【目的】建立一种犬瘟热病毒(CDV)RT-nested PCR检测方法。【方法】根据CDV弱毒株Onderstepoort的核衣壳蛋白(NP)基因序列设计套式引物,进行特异性、敏感性、重复性实验。【结果】特异性试验表明,该方法可以特异扩增出CDV NP基因片段,但从RNA病毒狂犬病病毒(RV)、DNA病毒犬细小病毒(CPV)以及正常Vero细胞中均未扩增出该条带。敏感性试验表明,RT-PCR可以扩增10-3稀释度的病毒RNA,而建立的RT-nested PCR可以扩增10-6稀释度的病毒RNA,后者的敏感性明显高于前者。重复性实验表明,不同情况下的3次重复实验,结果相同。用RT-nested PCR对石河子地区疑似感染CDV的病料进行检测,结果表明,该研究建立的RT-nested PCR不仅能有效的检测CDV感染,而且能够检测不同组织的样品。【结论】建立的RT-nested PCR检测方法,适用于动物CDV的快速诊断和流行病学调查。 展开更多
关键词 犬瘟热病毒 反转录巢式PCR lit—PCR NP基因
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牛病毒性腹泻病毒的分子生物学特性及发病机制研究进展 被引量:1
6
作者 韩猛立 张倩 +4 位作者 赵文娟 张星星 吴桐忠 黄新 钟发钢 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期4632-4645,共14页
牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)是影响全世界养牛业的重要病原体之一,给畜牧业造成了巨大经济损失。BVDV由2种生物型和多种不同基因亚型毒株组成,这些毒株具有不同的抗原性、细胞病理学和致病性发病机制。尽管世... 牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)是影响全世界养牛业的重要病原体之一,给畜牧业造成了巨大经济损失。BVDV由2种生物型和多种不同基因亚型毒株组成,这些毒株具有不同的抗原性、细胞病理学和致病性发病机制。尽管世界各国为控制和预防BVDV的发生与流行做出诸多努力,但仍有BVDV感染动物的报道。笔者主要围绕BVDV的分子生物学、发病机制以及宿主对病毒感染的免疫反应尤其是免疫逃避策略、免疫防控等方面进行论述,阐述了BVDV通过劫持宿主免疫系统以确保病毒复制成功的一些免疫逃避策略,以期为遏制BVDV的出现和传播,从而实现净化、控制该病毒提供参考。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 分子生物学 发病机制
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塔城地区某奶牛场牛支原体的分离鉴定及药敏试验 被引量:2
7
作者 孟凡艳 王旭 +7 位作者 吴桐忠 张星星 韩猛立 张倩 钟发刚 胡建军 黄新 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2023年第3期74-78,共5页
为确定新疆塔城地区某奶牛场部分断奶犊牛出现咳嗽、流脓性鼻涕、腹泻等症状的发病病因,本试验通过对采集到的发病犊牛鼻拭子样品进行分离培养、形态学观察、生化试验、16S rRNA基因和oppD/F基因PCR扩增与测序、药敏试验等。分离培养显... 为确定新疆塔城地区某奶牛场部分断奶犊牛出现咳嗽、流脓性鼻涕、腹泻等症状的发病病因,本试验通过对采集到的发病犊牛鼻拭子样品进行分离培养、形态学观察、生化试验、16S rRNA基因和oppD/F基因PCR扩增与测序、药敏试验等。分离培养显示3株分离株在改良Thiaucourt’s琼脂培养基平板上生长出典型的“煎蛋样”菌落,狄氏染色菌落中心呈深蓝色。生化试验中分离株不发酵葡萄糖与甘露醇,不水解精氨酸,不分解尿素,明胶液化试验为阴性。PCR扩增分离株16S rRNA基因测序结果显示,分离株与GenBank数据库中牛支原体16S rRNA基因序列的相似性在98.73%以上;牛支原体特异性基因oppD/F阳性且相似性达99.74%以上。通过药敏试验从9种药物里选择出替加环素、红霉素2种最为敏感的药物。研究结果表明,造成此次犊牛肺炎的病原菌为牛支原体,为临床防治牛支原体病提供了参考。 展开更多
关键词 犊牛支原体肺炎 分离鉴定 PCR检测 药敏试验
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新疆牛源溶血性曼氏杆菌和多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及耐药性和毒力分析
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作者 贾开文 操义恒 +8 位作者 王子杰 胡亚辉 周霞 黄新 钟发刚 吴桐忠 韩猛立 张星星 张倩 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期201-206,共6页
为鉴定新疆石河子地区某规模化牛场表现呼吸道感染症状荷斯坦病牛的细菌性病原及其分离株的血清型、耐药基因和毒力基因携带情况,本研究无菌采集病死牛病变组织,采用常规细菌分离培养及PCR方法鉴定细菌,采用PCR方法检测其血清型、耐药... 为鉴定新疆石河子地区某规模化牛场表现呼吸道感染症状荷斯坦病牛的细菌性病原及其分离株的血清型、耐药基因和毒力基因携带情况,本研究无菌采集病死牛病变组织,采用常规细菌分离培养及PCR方法鉴定细菌,采用PCR方法检测其血清型、耐药基因和毒力基因携带情况,采用K-B纸片法检测其耐药表型。结果显示,从病变组织样品中分离了4株荚膜A1型的溶血性曼氏杆菌(Mh-1、Mh-2、Mh-3、Mh-4);耐药表型显示4株Mh对β-内酰胺类(青霉素)、氨基糖苷类(链霉素)和糖肽类(替考拉宁)药物耐药;耐药基因仅检测到β-内酰胺类基因blaTEM;分离菌株Mh-1携带8类9种毒力基因中的5种(LKT-C、gs60、fbpA、gapA、ptfA),Mh-2携带其中的4种(LKT-C、plpB、dnaN、ptfA),Mh-3携带其中的7种(LKT-C、plpB、gs60、fbpA、gapA、dnaN、ptfA),Mh-4携带其中的6种(LKT-C、plpB、gs60、fbpA、gapA、ptfA)。同时分离出1株荚膜A型,脂多糖L3型的多杀性巴氏杆菌(Pm-1);Pm-1仅对克林霉素耐药;Pm-1携带6类12种不同的毒力基因(exbD、tonB、hsf2、ptfA、oma87、ompA、ompH、plpB、psl、nanB、tbpA、pmHAS)。将Mh和Pm-1均以3.2×10^(8) cfu/mL的剂量感染30只小鼠进行致病性试验,结果显示,4株Mh感染小鼠于3 d内陆续全部死亡,Pm-1感染小鼠于10 h内全部死亡,表明分离菌株Mh和Pm-1均携带致病性毒力基因,且具有较强的致病性。结果表明,新疆石河子地区某集约化牛场表现为呼吸道症状病死牛的细菌性病原是牛源Mh和Pm混合感染,两者均携带与呼吸道粘附侵染相关的IV型菌毛基因ptfA,且Pm-1株主要对青、链霉素耐药,对大多数药物较敏感,为本地区牛呼吸道疾病综合征的流行病学调查与临床治疗提供参考依据。 展开更多
关键词 牛呼吸道感染 多杀性巴氏杆菌 溶血性曼氏杆菌 耐药表型 耐药基因和毒力基因
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犊牛肺炎大肠杆菌的分离鉴定、耐药性及致病力检测
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作者 操义恒 吴桐忠 +8 位作者 王子杰 张乾义 张星星 张倩 韩猛立 钟发刚 黄新 周霞 李劼 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期100-104,111,共6页
为确定新疆石河子地区某规模化牛场表现为呼吸道症状病死犊牛的细菌性病原,本研究采用常规细菌分离、PCR及生化鉴定方法从采集的病牛组织中分离并鉴定病原菌,采用PCR方法对其系统进化分群、采用K-B纸片扩散法检测细菌的药物敏感性、采用... 为确定新疆石河子地区某规模化牛场表现为呼吸道症状病死犊牛的细菌性病原,本研究采用常规细菌分离、PCR及生化鉴定方法从采集的病牛组织中分离并鉴定病原菌,采用PCR方法对其系统进化分群、采用K-B纸片扩散法检测细菌的药物敏感性、采用PCR方法分别检测细菌的耐药基因和毒力基因,经腹腔注射菌液进行小鼠的致病性试验,对分离菌株进行生物学特性研究。分离及鉴定结果显示,从病死犊牛的肺脏分离鉴定出的2株大肠杆菌(E1和E2)分属于A群和B1群;药敏试验结果显示两株分离菌对青霉素、阿莫西林、头孢他啶、头孢唑啉、头孢拉定、头孢哌酮、美罗培南、链霉素、妥布霉素、多西环素、麦迪霉素、阿奇霉素、氟苯尼考、替考拉宁、克林霉素耐药;且2株分离菌均检测到β-内酰胺类的blaTEM、喹诺酮类的aac(6')-Ib、gyrA共3种耐药基因以及crl、csgA、fimH、pap、motA、hlyE、iucD、ompA、espA、LuxS、fyuA、pta共12种毒力基因;分离菌株耐药基因与耐药表型的结果表明分离菌株表现较强的多重耐药现象;小鼠的致病性试验结果显示分离菌株均为致病性大肠杆菌,E1菌株感染小鼠在32 h内全部死亡,E2菌株感染后36 h内死亡3只小鼠。感染小鼠死亡后剖检发现肺脏大面积出血。结果表明新疆石河子地区某规模化牛场表现为呼吸道症状病死犊牛的病原是致病性大肠杆菌,且分离菌表现较强的多重耐药现象并携带大量的毒力基因,但E2菌株的耐药基因与耐药表型相关性不强。本研究为新疆地区大肠杆菌所致犊牛肺炎的防治提供参考依据。 展开更多
关键词 犊牛肺炎 致病性大肠杆菌 耐药表型 耐药基因 毒力基因
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败血性牦牛源圣保罗沙门菌的分离与鉴定
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作者 马雪 吴桐忠 +11 位作者 黄新 张星星 韩猛立 王子杰 操义恒 王巧梅 俞杰 张丽媛 张予辉 周霞 钟发刚 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期1240-1244,1294,共6页
为阐明引起新疆和静县某牧场牦牛发生败血症的主要细菌性病原及病原的生物学特性,本研究剖检并采集发病牦牛的病变组织经细菌的分离培养、形态学观察、生化分析、PCR扩增沙门菌肠毒素(stn)基因和16S rRNA基因、血清分型及MLST分型鉴定... 为阐明引起新疆和静县某牧场牦牛发生败血症的主要细菌性病原及病原的生物学特性,本研究剖检并采集发病牦牛的病变组织经细菌的分离培养、形态学观察、生化分析、PCR扩增沙门菌肠毒素(stn)基因和16S rRNA基因、血清分型及MLST分型鉴定、药敏试验和小鼠致病性试验及组织病理学观察等方法对分离菌株的生物学特性进行分析。结果显示,分离的2株菌在XLD和HE固体培养基上形成黑色、光滑、湿润、具有金属光泽的菌落,镜检为革兰氏阴性短杆菌;分离菌生化特征与沙门菌相似度达98%;PCR扩增结果显示,分别扩增到260 bp的stn基因及1500 bp的16S rRNA基因,16S rRNA基因的测序分析结果显示分离菌属于肠道沙门菌肠道亚种;血清型鉴定为圣保罗型沙门菌(1,4,5,12:e,h:1,2);MLST分型为ST3134;药敏试验结果显示分离菌对四环素耐药。将小鼠随机分为实验组与对照组,实验组通过灌胃接种菌液0.2 mL/只,接种剂量分别为5×10^(3)cfu/mL、5×10^(2)cfu/mL、5×10^(1)cfu/mL,结果显示感染后7 d,3个实验组小鼠死亡率分别为60%(3/5)、20%(1/5)和0(0/5)。采集病死小鼠肺、肝、脾组织制备病理切片,观察结果显示,感染组小鼠的脾、肺组织充血出血,肝细胞出现坏死等。本研究从疑似败血症牦牛脏器中分离到两株沙门菌,分型鉴定均为圣保罗沙门菌,该分型在新疆地区尚无报道。本研究为新疆牦牛沙门菌病的防控提供科学依据。 展开更多
关键词 牦牛 沙门菌 分离鉴定 血清分型
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细菌性牛呼吸道疾病的研究进展 被引量:44
11
作者 韩猛立 +2 位作者 钟发刚 黄新 谭鹏飞 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第5期165-172,共8页
牛呼吸道疾病(BRD)是由多种病毒和细菌与外界环境相互作用而引起的一种严重的呼吸系统疾病,是引起舍饲牛发病和死亡的主要原因,给北美和世界养牛业造成巨大的经济损失。作者就引起BRD的主要细菌性病原体如溶血性曼氏杆菌、多杀性巴氏杆... 牛呼吸道疾病(BRD)是由多种病毒和细菌与外界环境相互作用而引起的一种严重的呼吸系统疾病,是引起舍饲牛发病和死亡的主要原因,给北美和世界养牛业造成巨大的经济损失。作者就引起BRD的主要细菌性病原体如溶血性曼氏杆菌、多杀性巴氏杆菌、昏睡嗜血杆菌、牛支原体及其他相关病原体和临床症状、病理学变化、饲养管理和治疗药物的选择等进行了阐述,以期为该病的治疗和防控提供参考。 展开更多
关键词 细菌 病原体 牛呼吸道疾病综合症
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北屯市部分猪场主要传染病抗体检测与分析
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作者 李军 蒲新竹 +6 位作者 李伟 杨青强 侯小林 黄新 吴桐忠 黄佐兴 韩猛立 《新疆农垦科技》 2023年第2期46-49,共4页
为了解北屯市周边地区养猪场主要疫病免疫效果。采集北屯市周边地区5个养猪场不同猪群的1 008份血清样本,应用ELISA抗体检测方法,对其进行口蹄疫(FMD)、猪瘟(CSF)与猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)抗体检测。结果表明,该地区口蹄疫病毒(FMDV)... 为了解北屯市周边地区养猪场主要疫病免疫效果。采集北屯市周边地区5个养猪场不同猪群的1 008份血清样本,应用ELISA抗体检测方法,对其进行口蹄疫(FMD)、猪瘟(CSF)与猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)抗体检测。结果表明,该地区口蹄疫病毒(FMDV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRSSV)的平均血清抗体阳性率分别为84.33%(850/1 008)、86.61%(873/1 008)和87.30%(880/1 008),且各养殖场之间差异不显著(P> 0.05),猪群整体免疫符合国家相关规定(> 70%)。说明北屯市周边地区猪场主要疫病免疫效果良好,但距离创建净化场还有差距,需要动物防疫部门和养猪场共同努力,修改完善免疫方案,切实提高猪群免疫水平,为北屯市养猪行业健康发展奠定坚实基础。 展开更多
关键词 口蹄疫 猪瘟 猪繁殖与呼吸综合征 抗体监测 效果分析
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牛病毒性腹泻病毒与宿主细胞的相互作用研究 被引量:4
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作者 韩猛立 黄新 +3 位作者 宋天增 杨井泉 薄新文 钟发刚 《湖北农业科学》 北大核心 2012年第8期1519-1523,共5页
自1946年Olafson等首次在美国纽约州发现牛病毒性腹泻病毒(BVDV)以来,该病毒在世界各地广泛流行和传播,尤其对一些畜牧业发达国家的奶业和牛肉业造成了巨大损失。了解牛病毒性腹泻病的致病机理,研制出更加安全可靠有效的疫苗,对控制该... 自1946年Olafson等首次在美国纽约州发现牛病毒性腹泻病毒(BVDV)以来,该病毒在世界各地广泛流行和传播,尤其对一些畜牧业发达国家的奶业和牛肉业造成了巨大损失。了解牛病毒性腹泻病的致病机理,研制出更加安全可靠有效的疫苗,对控制该病的发生和蔓延尤为重要。对BVDV的病原学、生物学特性以及对宿主细胞的相互作用等进行了阐述,以期为BVDV的预防及治疗奠定基础。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒(BVDV) 分子生物学 细胞生物学 宿主细胞
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牛病毒性腹泻病流行现状与防制 被引量:10
14
作者 韩猛立 黄新 +1 位作者 钟发刚 薄新文 《中国奶牛》 2010年第3期35-38,共4页
牛病毒性腹泻是由牛病毒性腹泻病毒引起的多种动物感染的一类重要传染病,给世界畜牧业尤其是养牛业以及相关产业造成巨大的经济损失。本文主要阐述了牛病毒性腹泻的国内外流行现状、发展趋势以及防治概况,以期为我国防治该病提供一些借... 牛病毒性腹泻是由牛病毒性腹泻病毒引起的多种动物感染的一类重要传染病,给世界畜牧业尤其是养牛业以及相关产业造成巨大的经济损失。本文主要阐述了牛病毒性腹泻的国内外流行现状、发展趋势以及防治概况,以期为我国防治该病提供一些借鉴和参考。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻 流行现状 防制
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主要病毒性牛呼吸道疾病的研究进展 被引量:2
15
作者 韩猛立 黄新 钟发刚 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第12期177-181,共5页
牛呼吸道疾病(bovine respiratory disease,BRD)是引起舍饲牛发病和死亡的主要原因,给北美和世界养牛业造成巨大的经济损失。BRD是由多种病毒、细菌与外界环境相互作用,如应激、环境因素与多种病毒、细菌和支原体等而引起的一种严重的... 牛呼吸道疾病(bovine respiratory disease,BRD)是引起舍饲牛发病和死亡的主要原因,给北美和世界养牛业造成巨大的经济损失。BRD是由多种病毒、细菌与外界环境相互作用,如应激、环境因素与多种病毒、细菌和支原体等而引起的一种严重的呼吸系统疾病。作者就引起BRD的常见和严重的病原牛传染性鼻气管炎病毒(infectious bovine rhinotracheitis virus,IBRV)和牛呼吸道合胞体病毒(bovine respiratory syncytial virus,BRSV)的生物学特性、细胞感染和致病机制等进行简要概述,以期为该病的防制和研究提供参考。 展开更多
关键词 牛疱疹病毒I型 牛呼吸道合胞体病毒 牛呼吸道疾病 免疫抑制
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牛源多杀性巴氏杆菌血清分型及毒力相关基因的检测研究 被引量:16
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作者 邬琴 张星星 +6 位作者 顾晓晓 陶乔孝慈 黄新 韩猛立 吴桐忠 周霞 钟发刚 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第6期1910-1920,共11页
为确定新疆北疆部分地区疑似病例中分离的牛源多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)流行的血清型、ST型及毒力相关基因的分布情况,本研究以分离的17株牛源Pm为研究对象,采用荚膜多重PCR分型法、脂多糖多重PCR分型法(LPS-mPCR)、多... 为确定新疆北疆部分地区疑似病例中分离的牛源多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)流行的血清型、ST型及毒力相关基因的分布情况,本研究以分离的17株牛源Pm为研究对象,采用荚膜多重PCR分型法、脂多糖多重PCR分型法(LPS-mPCR)、多位点序列分型法(MLST)及PCR方法检测17株Pm分离株的荚膜型、脂多糖型、MLST型及7类共25个毒力相关基因的分布情况。结果显示,13株Pm的荚膜脂多糖型为A∶L3型,ST型均为ST1型,4株Pm荚膜脂多糖型为B∶L2型,ST型均为ST44;17株Pm毒力相关基因(exbB、exbD、fimA、fur、hgbA、hsf2、nanB、oma87、ompA、ompH、plpB、psl、ptfA、sodA、sodC、tonB和tbpA)的检出率高达100%,toxA基因的检出率为0。结果表明,从新疆北疆部分地区规模化牛场疑似病例中分离的Pm主要血清型为A∶L3∶ST1型。 展开更多
关键词 多杀性巴氏杆菌(Pm) 荚膜 脂多糖 多位点序列分型(MLST) 毒力相关基因
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多杀性巴氏杆菌分离鉴定及序列分析 被引量:8
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作者 黄新 +6 位作者 韩猛立 王正荣 何延华 谭鹏飞 薄新文 钟发刚 王新华 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期10-16,共7页
旨在了解新疆地区多杀性巴氏杆菌主要流行株的特性。通过病原的分离纯化、PCR扩增及测序,分析8株多杀性巴氏杆菌的血清型,16SrDNA基因、ompH基因和ompA基因的差异。结果表明,3株羊源、2株牛源和1株禽源分离株为荚膜A型,1株牦牛源分离株... 旨在了解新疆地区多杀性巴氏杆菌主要流行株的特性。通过病原的分离纯化、PCR扩增及测序,分析8株多杀性巴氏杆菌的血清型,16SrDNA基因、ompH基因和ompA基因的差异。结果表明,3株羊源、2株牛源和1株禽源分离株为荚膜A型,1株牦牛源分离株为荚膜B型,1株标准株为荚膜E型,均具有很强的致病性。分离株与GenBank公布的代表株的16SrDNA基因、ompH及ompA基因同源性分别为93%~100%、93%~100%、98%~100%。ompH基因的ORF氨基酸C端最后10个氨基酸变化较大,分离到5株ompA基因的ORF氨基酸序列N端多出6个氨基酸(M-K-R-I-I-Q)替代原先的起始位置。可见:新疆主要流行株为强致病性的荚膜A型,且有出现变异趋势。 展开更多
关键词 多杀性巴氏杆菌 16S RDNA ompH基因 ompA基因 序列分析
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新疆石河子地区牛病毒性腹泻病毒的分子流行病学调查 被引量:21
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作者 李娜 韩猛立 +4 位作者 黄新 薄新文 王新华 赵玉龙 钟发刚 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 2009年第6期706-711,共6页
根据GenBank中公布的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)5'UTR保守区基因序列,设计3对引物,应用逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)检测方法对采自石河子地区3个场的64份牛全血样品进行核酸检测及测序。结果表明:BVDV阳性率为39.06%(25/64),其中有2... 根据GenBank中公布的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)5'UTR保守区基因序列,设计3对引物,应用逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)检测方法对采自石河子地区3个场的64份牛全血样品进行核酸检测及测序。结果表明:BVDV阳性率为39.06%(25/64),其中有22对母子对应样品,母牛阳性率为40.91%,犊牛为45.45%,提示新疆石河子地区BVDV垂直感染较严重。9头牛表现临床症状,阳性率为22%,其余为临床健康牛,阳性率为41.81%,数据显示新疆石河子地区奶牛BVDV隐性感染严重。测序得到2条不同的序列,经5'UTR区域核酸序列同源性比较和系统发生分析表明2株病毒与VEDEVAC(匈牙利弱毒疫苗株)亲缘关系最近,同源性达96.2%~100%,用DNASTAR软件进行基因与系统发生进化关系分析属于BVDV-1b基因亚型,未检测到BVDV-2型病毒。提示新疆石河子地区BVDV流行株为BVDV-1b亚型,且经生物型鉴定,所测阳性样品为非致细胞病变型。本研究可为今后的流行病学研究和疫苗应用等防制措施提供依据。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 分子流行病学 调查
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规模化猪场仔猪源大肠杆菌分离培养及血清型鉴定 被引量:5
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作者 马长宾 陈文武 +3 位作者 崔蕾 韩猛立 黄新 钟发刚 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2016年第9期43-45,共3页
猪源大肠杆菌易引起仔猪消化道传染病,主要危害1月龄以内的仔猪,常发生严重的腹泻和败血症。常见的有仔猪黄痢、仔猪白痢、仔猪水肿病,具有流行面广、发病率和死亡率高等特点,严重制约养猪业发展。
关键词 猪源大肠杆菌 血清型鉴定 规模化猪场 分离培养 仔猪黄痢 仔猪水肿病 仔猪白痢 传染病
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疑似断奶仔猪多系统衰竭综合征的诊断报告 被引量:4
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作者 黄新 +3 位作者 韩猛立 何延华 钟发刚 薄新文 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期1747-1751,共5页
【目的】对一例发生于新疆沙湾某集约化猪场疑似仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的病原进行诊断,为进一步防治该病提供依据。【方法】使用临床剖解、细菌分离、PCR、RT-PCR等方法,同时对PCR产物进行了克隆、测序。【结果】该病的发生是由猪... 【目的】对一例发生于新疆沙湾某集约化猪场疑似仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的病原进行诊断,为进一步防治该病提供依据。【方法】使用临床剖解、细菌分离、PCR、RT-PCR等方法,同时对PCR产物进行了克隆、测序。【结果】该病的发生是由猪圆环病毒2型(PCV-2)、猪繁殖与呼吸道综合征病毒(PRRSV)、猪肺炎支原体等病原共感染引起的。【结论】该猪场已经存在PMWS的主要病原,是导致仔猪死亡的主要原因。 展开更多
关键词 疑似仔猪多系统衰竭综合征 PCR RT—PCR 诊断
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