卡西霉素生物合成途径中抗性基因calT的功能

1

作者 苟丽霞 解子晗 +3 位作者 张文丽 宋子涵 汪志军 韩铁生 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期643-648,共6页

目的研究卡西霉素产生菌教酒链霉菌NRRL 3882中编码MmpL家族同源蛋白的抗性基因calT的功能。方法利用λ-RED同源重组方法构建calT基因敲除质粒,通过接合转移和同源重组的方法得到双交换的calT基因敲除的突变株。通过HPLC分析突变株的代... 目的研究卡西霉素产生菌教酒链霉菌NRRL 3882中编码MmpL家族同源蛋白的抗性基因calT的功能。方法利用λ-RED同源重组方法构建calT基因敲除质粒,通过接合转移和同源重组的方法得到双交换的calT基因敲除的突变株。通过HPLC分析突变株的代谢产物,并对突变株及野生菌株的细胞内及细胞外卡西霉素的分布进行分析。结果突变株GLX30(ΔcalT)中卡西霉素的产量与野生菌株相比显著降低,且胞内卡西霉素的占比与野生菌株相比增加约3倍,说明calT与卡西霉素的转运功能相关。结论CalT为转运蛋白,负责将卡西霉素转运至胞外以实现教酒链霉菌对卡西霉素的抗性。 展开更多

关键词 卡西霉素 calT MmpL家族 生物合成

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通过统计优化培养条件增强链霉菌S-159的抗真菌活性

2

作者 刘孟欣 蔡楠 +2 位作者 王美芳 苟丽霞 韩铁生 《生物化工》 2023年第2期28-33,共6页

目的:采用统计实验方法优化培养条件,以增加链霉菌S-159抗真菌活性成分的产量。方法:首先采用Plackett-Burman设计以评估11个培养条件(包括2个虚拟变量)的显著性,发现大豆粉添加量、葡萄糖添加量、发酵时间和初始pH值为影响抗真菌活性... 目的:采用统计实验方法优化培养条件,以增加链霉菌S-159抗真菌活性成分的产量。方法:首先采用Plackett-Burman设计以评估11个培养条件(包括2个虚拟变量)的显著性,发现大豆粉添加量、葡萄糖添加量、发酵时间和初始pH值为影响抗真菌活性的最显著因素。接下来通过最速上升路径分析确定进一步优化的中心点,并使用响应面法(RSM)中的中心复合设计(CCD)进一步优化获得的4个显著因素。结果:实验结果符合二阶多项式模型,其确定系数(R^(2))为0.986,调整后的确定系数(Adj R^(2))为0.974。求解方程得到优化组合条件为大豆粉添加量23.53 g/L、葡萄糖添加量17.04 g/L、发酵时间60.20 h和初始pH值7.61,抗真菌活性实测值为410.5 U/mL,与该模型预测的413.6 U/mL基本一致,优化后链霉菌S-159代谢产物的抗真菌活性提高了1.7倍。结论:统计实验方法可用于链霉菌S-159的发酵培养条件优化,研究结果为链霉菌S-159的大范围应用提供了数据基础。 展开更多

关键词 链霉菌 抗真菌活性 PLACKETT-BURMAN设计 响应面法

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异烟肼致肝细胞损伤过程中组蛋白乙酰化对内质网应激的调控作用 被引量：2

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作者 李金凤 杜莹 +5 位作者 李标 张一杨 李莹淑 韩铁生 任琦 冯福民 《山东医药》 CAS 2018年第8期34-37,共4页

目的探讨异烟肼(INH)致肝细胞损伤过程中组蛋白乙酰化对内质网应激(ERS)的调控作用,旨在为INH致肝细胞损伤的预防提供依据。方法将人正常肝细胞株HL-7702(以下称HL-7702细胞)传代培养,取传5代对数生长期细胞随机分为观察组、对照组,观... 目的探讨异烟肼(INH)致肝细胞损伤过程中组蛋白乙酰化对内质网应激(ERS)的调控作用,旨在为INH致肝细胞损伤的预防提供依据。方法将人正常肝细胞株HL-7702(以下称HL-7702细胞)传代培养,取传5代对数生长期细胞随机分为观察组、对照组,观察组给予INH干预,对照组不予INH干预。采用ELISA法检测两组培养液上清ALT、AST活性。另取传5代对数生长期细胞接种于6孔板,RPMI 1640培养液培养24 h,随机将细胞分为空白对照组、INH组、C646组、INH+C646组、MS-275组和INH+MS-275组,空白对照组更换为2 mL新的RPMI 1640培养液;INH组更换为2 mL含INH 1 000μg/mL的RPMI 1640培养液;C646组更换为2 mL含C6465μmol/L的RPMI 1640培养液;INH+C646组更换为2 mL含C646 5μmol/L和INH 1 000μg/mL的RPMI 1640培养液;MS-275组更换为2 mL含MS-275 5μmol/L的RPMI 1640培养液;INH+MS-275组更换为2 mL含MS-2755μmol/L和INH 1 000μg/mL的RPMI 1640培养液。各组继续培养3 h,收集细胞,采用Real-time PCR法检测P300、HDAC1、GRP78、CHOP mRNA表达;收集培养液上清,采用ELISA法检测P300、HDAC1、GRP78、CHOP蛋白含量。结果观察组培养液上清ALT、AST活性均明显高于对照组(P均<0.05)。与空白对照组比较,INH组HDAC1、GRP78、CHOP mRNA表达和蛋白含量均明显增加,P300 mRNA表达和蛋白含量均明显降低(P均<0.05)。与INH组比较,INH+C646组P300、GRP78 mRNA表达和蛋白含量均明显降低(P均<0.05),CHOP mRNA表达和蛋白含量均明显升高(P均<0.05),而HDAC1 mRNA表达和蛋白含量变化不明显(P均>0.05);与INH组比较,INH+MS-275组HDAC1、CHOP mRNA表达和蛋白含量均明显降低(P均<0.05),GRP78 mRNA表达和蛋白含量均明显升高(P均<0.05),P300 mRNA表达和蛋白含量变化不明显(P均>0.05)。结论 INH致肝细胞损伤过程中组蛋白通过乙酰化参与调控ERS。 展开更多

关键词 肝损伤 异烟肼 组蛋白乙酰化 内质网应激

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抗结核药物性肝损伤患者外周血基因组DNA甲基化差异的筛查和验证 被引量：2

4

作者 李玉红 焦连丽 +5 位作者 郝明媛 任琦 崔丽华 韩铁生 郑国颖 冯福民 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期353-359,共7页

目的采用基因甲基化芯片技术筛选抗结核药物性肝损伤(anti-tuberculosis drug induced liver injury,ADLI)患者与非肝损伤患者间DNA差异甲基化基因位点。探讨DNA甲基化与ADLI发病机制的关系。方法选取2016年1月至2017年7月间唐山市第四... 目的采用基因甲基化芯片技术筛选抗结核药物性肝损伤(anti-tuberculosis drug induced liver injury,ADLI)患者与非肝损伤患者间DNA差异甲基化基因位点。探讨DNA甲基化与ADLI发病机制的关系。方法选取2016年1月至2017年7月间唐山市第四医院治疗的肺结核初治患者共137例,分为ADLI组(n=65)、非ADLI组(n=72)。收集研究对象的临床一般资料及全血标本。选择其中14例(7例ADLI,7例非ADLI)患者,提取全血标本的DNA,利用Illumina 850K芯片技术检测病例组和对照组DNA的差异甲基化情况。对芯片筛选出差异较大的甲基化基因DUSP22、HLA-C,进一步在剩余的65例病例组和58例对照组中采用甲基化特异PCR(MSP)方法验证甲基化水平,并采用荧光定量PCR检测DUSP22、HLA-C基因的m RNA水平。结果共检测853 307个CpG位点,病例组和对照组差异显著的位点共1 012个,其中高甲基化位点254个,低甲基化位点758个,主要位于基因体区。聚类分析结果显示,在细胞黏附、金属离子结合等过程中存在大量甲基化差异基因。病例组与对照组人类双特异性磷酸酶DUSP22基因、人类白细胞抗原HLA-C基因的甲基化率差异均有统计学意义(65. 6%vs 36. 9%、37. 9%vs 58. 5%,P <0. 05),对照组中DUSP22 m RNA表达水平高于病例组,而HLA-C m RNA表达水平低于病例组。结论外周血中DUSP22、HLA-C基因DNA甲基化与ADLI的发生相关。 展开更多

关键词 抗结核药物性肝损伤 DNA甲基化 基因芯片

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中西医结合治疗急性心肌梗塞191例临床观察(摘要) 被引量：1

5

作者 刘永年 张佩文 韩铁生 《中国中西医结合杂志》 CAS 1984年第7期444-444,共1页

我院自开展中西医结合治疗急性心肌梗塞(简称急梗)以来,疗效提高,病死率较以往显著下降,兹总结报道如下:一般资料 1977～1981年我院共收住急梗191例,均经临床和心电图及酶学检查确诊。其中男165例,女26例。年龄38～83岁。梗塞部位:前间... 我院自开展中西医结合治疗急性心肌梗塞(简称急梗)以来,疗效提高,病死率较以往显著下降,兹总结报道如下:一般资料 1977～1981年我院共收住急梗191例,均经临床和心电图及酶学检查确诊。其中男165例,女26例。年龄38～83岁。梗塞部位:前间壁77例(40.3%);前壁41例(21.4%);下壁54例(28.2%); 展开更多

关键词 生脉散 补气剂 复方丹参注射液 急性心肌梗塞 心气虚 随证加减 中西医结合治疗 中西医结合疗法 独参汤 心源性休克 合并心衰 早期休克 病死率 死亡率

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银线草的化学成分研究 被引量：1

6

作者 林晓莹 庄鹏宇 +2 位作者 苟丽霞 韩铁生 王晓霞 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期2542-2546,共5页

目的研究银线草Chloranthus japonicus Sieb.的化学成分。方法银线草95%乙醇提取物的乙酸乙酯部位采用硅胶、Sephadex LH-20、ODS、PHPLC进行分离鉴定,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。结果从中分离得到10个化合物,分别为... 目的研究银线草Chloranthus japonicus Sieb.的化学成分。方法银线草95%乙醇提取物的乙酸乙酯部位采用硅胶、Sephadex LH-20、ODS、PHPLC进行分离鉴定,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。结果从中分离得到10个化合物,分别为对羟基苯乙醇(1)、邻苯二甲酸异辛烷酯(2)、邻苯二甲酸二异丁酯(3)、伞花内酯(4)、乌索酸(5)、7α-羟基谷甾醇(6)、金粟兰酮E(7)、金粟兰酮B(8)、芹菜素(9)、β-谷甾醇(10)。结论化合物1~3、6为首次从金粟兰属植物中分离得到,化合物4、5、9为首次从该植物中分离得到。 展开更多

关键词 银线草 化学成分 分离鉴定

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MS-275对异烟肼致肝细胞损伤中内质网应激的影响 被引量：1

7

作者 李金凤 杜莹 +5 位作者 李标 张一杨 李莹淑 韩铁生 任琦 冯福民 《广东医学》 CAS 2018年第19期2874-2876,2880,共4页

目的探讨MS-275对异烟肼(INH)致肝细胞损伤过程中内质网应激(ERS)的影响。方法人正常肝细胞HL-7702接种于6孔板,预培养24 h,随机分为对照组、INH组(1 000μg/m L INH)、MS-275组(5μmol/L MS-275)、INH+MS-275组(1 000μg/m L INH+5μmo... 目的探讨MS-275对异烟肼(INH)致肝细胞损伤过程中内质网应激(ERS)的影响。方法人正常肝细胞HL-7702接种于6孔板,预培养24 h,随机分为对照组、INH组(1 000μg/m L INH)、MS-275组(5μmol/L MS-275)、INH+MS-275组(1 000μg/m L INH+5μmol/L MS-275),共4个组,经不同药物处理6 h后,收获细胞。RT-PCR法检测HDAC1、GRP78和CHOP的mRNA水平,ELISA法检测HDAC1、GRP78和CHOP的蛋白含量,CCK8法检测细胞存活率。结果 INH处理6 h后肝细胞即出现损伤。给予组蛋白去乙酰化酶抑制剂MS-275后,细胞内ERS标志性分子GRP78的mRNA和蛋白水平显著增加(P <0. 05);而CHOP的mRNA和蛋白表达则显著下降(P <0. 05),且肝细胞存活率明显增加(P <0. 05)。结论INH致肝损伤过程中MS-275可以通过调控ERS缓解肝细胞损伤。 展开更多

关键词 异烟肼 MS-275 内质网应激 肝损伤

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低汞触媒在电石法聚氯乙烯生产中的应用 被引量：2

8

作者 徐柯 苏维朵 +1 位作者 韩铁生 杨永峰 《聚氯乙烯》 CAS 2018年第12期21-26,40,共7页

介绍了陕西北元化工集团股份有限公司低汞触媒在电石法聚氯乙烯生产中的实际使用情况,包括触媒单耗、触媒使用时间、单台转化器乙炔含量、转化后总管乙炔含量、原料气总管压力、二氯乙烷产率、触媒倒翻等。通过改进触媒管理措施,触媒单... 介绍了陕西北元化工集团股份有限公司低汞触媒在电石法聚氯乙烯生产中的实际使用情况,包括触媒单耗、触媒使用时间、单台转化器乙炔含量、转化后总管乙炔含量、原料气总管压力、二氯乙烷产率、触媒倒翻等。通过改进触媒管理措施,触媒单耗稳定0.83 kg左右。 展开更多

关键词 聚氯乙烯 低汞触媒 转化器 单耗 乙炔 二氯乙烷

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废盐酸脱吸系统的技术改造 被引量：2

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作者 李鹏智 韩铁生 +1 位作者 乔志平 徐柯 《聚氯乙烯》 CAS 2016年第1期42-44,共3页

介绍了盐酸深度脱吸工艺流程,针对脱吸装置易泄漏、氯化钙易结晶、运行不稳定等问题,对浓酸脱吸塔出口管道、蒸汽冷凝水管、双效换热器等进行了改造,改造后脱吸装置运行平稳,并降低了生产成本。

关键词 氯乙烯 废盐酸 深度脱吸 技术改造

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纳米锰暴露对大鼠神经毒性及脉络丛相关基因转录水平的影响

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作者 许明颜 孟睿 +5 位作者 郝卓璐 马心怡 吴静雯 崔梦祥 孟春燕 韩铁生 《生态毒理学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期284-292,共9页

研究纳米二氧化锰(nano-MnO_(2))暴露后SD大鼠的神经毒性,以及对脉络丛相关基因转录水平的影响。将18只SD大鼠随机分为3组,分别为对照组、低剂量组和高剂量组。采用气管内注入法对大鼠进行染毒。低、高剂量组染毒剂量为200 mg·kg^(... 研究纳米二氧化锰(nano-MnO_(2))暴露后SD大鼠的神经毒性,以及对脉络丛相关基因转录水平的影响。将18只SD大鼠随机分为3组,分别为对照组、低剂量组和高剂量组。采用气管内注入法对大鼠进行染毒。低、高剂量组染毒剂量为200 mg·kg^(-1)和400 mg·kg^(-1)(以体质量计)的nano-MnO_(2)悬浊液,对照组灌注等量生理盐水。每周染毒一次,连续染毒12周。染毒结束后,对各组大鼠进行神经行为测试;取大鼠脉络丛组织进行转录组学测序;固定脉络丛组织并进行组织病理学观察;取脑组织进行电镜观察。热板仪实验结果显示,高剂量组热痛反应时间较对照组显著增加(P<0.05);旷场实验显示染毒后大鼠空间识别能力降低,兴奋性相对减弱;组织病理学结果显示,经nano-MnO_(2)染毒后大鼠脉络丛上皮细胞轮廓模糊,胞内空泡明显增多且变形加重,细胞连接疏松;脑皮质髓鞘受损;高通量测序结果中,KEGG代谢通路分析显示,在上调基因中,编码代谢型谷氨酸受体的Grm系列基因显著表达,提示nano-MnO_(2)干扰脑内的谷氨酸代谢;GO功能富集分析显示在分子功能类别中有关金属离子跨膜转运的钙、钾电压门控通道等相关基因表达差异较明显。nano-MnO_(2)染毒对SD大鼠脉络丛上皮细胞造成一定程度的损伤,影响脉络丛转运活性。 展开更多

关键词 纳米二氧化锰 脉络丛 亚急性毒性 高通量测序

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低汞触媒装填、操作及应用结果

11

作者 高龙 王建军 +1 位作者 赵来喜 韩铁生 《聚氯乙烯》 CAS 2016年第8期43-44,共2页

1低汞触媒的装填 低汞触媒含氯化汞质量分数为4％～6．5％，装填时要求均匀，无空管、漏管等现象，否则会影响触媒活性及触媒利用率，现结合陕西北元化工集团有限公司低汞触媒实际装填情况进行总结。

关键词 氯化汞 装填 应用 操作 质量分数 触媒 煤 利用率

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含汞废水中氯离子含量的有效控制措施

12

作者 徐柯 苏维朵 +2 位作者 徐振华 杨永峰 韩铁生 《聚氯乙烯》 CAS 2019年第3期41-46,共6页

介绍了含汞废水中氯离子产生的工艺流程及原因,分析了影响含汞废水中氯离子含量的因素,制定了控制含汞废水中氯离子含量的措施。

关键词 氯离子 含汞废水 脱吸 盐酸 碱洗塔 组合塔 温度

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预制墩柱技术在工程中的应用

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作者 陈春友 刘小宇 +1 位作者 林燕 韩铁生 《中文科技期刊数据库（全文版）工程技术》 2020年第11期243-243,245,共2页

本文针对实际桥梁工程中预制墩柱技术的成功应用,对其设计方案、施工方法、工程造价和施工环节注意要点进行深入分析,对预制墩柱与承台的拼装施工方法做出详细介绍,证明了该工艺技术在东北地区的可行性,极大促进了其在该区域内公路、市... 本文针对实际桥梁工程中预制墩柱技术的成功应用,对其设计方案、施工方法、工程造价和施工环节注意要点进行深入分析,对预制墩柱与承台的拼装施工方法做出详细介绍,证明了该工艺技术在东北地区的可行性,极大促进了其在该区域内公路、市政桥梁中的应用和发展。 展开更多

关键词 预制墩柱 桥梁工程 设计方案 套筒灌浆 施工方法

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教酒链霉菌中卡西霉素生物合成基因簇的calU3基因功能分析

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作者 苟丽霞 杨清浅 +2 位作者 刘孟欣 汪志军 韩铁生 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期418-426,共9页

卡西霉素(calcimycin)是重要的离子载体抗生素,具有广泛的生物活性,其生物合成基因簇已从教酒链霉菌(Streptomyces chartreusis)NRRL3882的基因组DNA中成功克隆,但其生物合成途径尚未阐明。本研究拟分析卡西霉素生物合成途径中calU3基... 卡西霉素(calcimycin)是重要的离子载体抗生素,具有广泛的生物活性,其生物合成基因簇已从教酒链霉菌(Streptomyces chartreusis)NRRL3882的基因组DNA中成功克隆,但其生物合成途径尚未阐明。本研究拟分析卡西霉素生物合成途径中calU3基因的功能。采用PCR-targeting方法构建calU3基因中断质粒,通过接合转移和同源重组的方法构建得到教酒链霉菌NRRL3882的ΔcalU3突变株,并对突变株进行calU3基因的互补分析,通过高效液相色谱(HPLC)及液相色谱-质谱(LC-MS)分析突变株及互补菌株的代谢产物。构建calU3的表达载体,纯化得到重组CalU3蛋白,对其进行紫外/可见光的吸光谱分析。结果显示calU3基因中断的突变株丧失产生卡西霉素及N-脱甲基卡西霉素的能力,但有色唑霉素(cezomycin)的积累,互补菌株恢复野生菌株产卡西霉素的能力。CalU3蛋白具有明显的黄色,在377 nm和455 nm有特征性的吸收峰。以上结果表明calU3和卡西霉素苯并噁唑环3位取代基团的形成相关。CalU3具有FAD-NAD(P)的结合位点,可能是一个FAD-NAD(P)依赖的氧化还原酶,负责催化活化的色唑霉素中苯并噁唑环的3位羟化反应,生成3-羟基色唑霉素。本研究初步阐明了calU3基因对卡西霉素的苯并噁唑环3位的修饰功能,为全面解析卡西霉素的生物合成途径打下了坚实基础。 展开更多

关键词 卡西霉素 生物合成 氧化还原酶 FAD依赖 calU3

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卡西霉素生物合成基因簇中调控基因calR1的功能

15

作者 苟丽霞 蔡楠 +2 位作者 刘孟欣 汪志军 韩铁生 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期1195-1204,共10页

【背景】卡西霉素(calcimycin)是重要的离子载体抗生素,其生物合成基因簇已从教酒链霉菌NRRL3882的基因组DNA中成功克隆,但基因簇内的部分生物合成基因及调控基因的功能有待研究。【目的】研究卡西霉素产生菌教酒链霉菌NRRL3882中编码T... 【背景】卡西霉素(calcimycin)是重要的离子载体抗生素,其生物合成基因簇已从教酒链霉菌NRRL3882的基因组DNA中成功克隆,但基因簇内的部分生物合成基因及调控基因的功能有待研究。【目的】研究卡西霉素产生菌教酒链霉菌NRRL3882中编码TylR家族同源转录调控蛋白的calR1基因的功能。【方法】通过PCR-targeting的方法,构建calR1基因敲除突变株及回补菌株,对突变菌株及回补菌株进行发酵,通过HPLC分析其代谢产物。利用荧光定量PCR检测ΔcalR1突变菌株和野生菌株的生物合成基因转录水平。【结果】calR1基因敲除突变株丧失产生卡西霉素的能力,但仍有中间产物噻唑霉素的积累,回补菌株中卡西霉素的产量有一定程度的恢复。RT-qPCR结果表明,卡西霉素合成相关的一些重要基因calC、calG、calU3等基因的表达量明显改变。【结论】TylR家族转录调控基因calR1是卡西霉素生物合成的调控基因。 展开更多

关键词 卡西霉素 TylR家族 调控基因 生物合成

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大肠杆菌甲基转移酶dcm基因的表达对变铅青链霉菌的多效性影响 被引量：2

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作者 高婕 韩铁生 +1 位作者 丰俊 贺新义 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1925-1931,共7页

【目的】大肠杆菌的dcm基因编码的DNA甲基转移酶可以特异性地将5′CCWGG3′(W=A/T)序列中第二个胞嘧啶变成5-甲基胞嘧啶。Dcm甲基转移酶发现已有37年了,但其确切的功能不明,本篇主要研究其对变铅青链霉菌的影响。【方法】通过构建克隆... 【目的】大肠杆菌的dcm基因编码的DNA甲基转移酶可以特异性地将5′CCWGG3′(W=A/T)序列中第二个胞嘧啶变成5-甲基胞嘧啶。Dcm甲基转移酶发现已有37年了,但其确切的功能不明,本篇主要研究其对变铅青链霉菌的影响。【方法】通过构建克隆、接合转移、异源表达及HPLC、酶切、Southern杂交等方法研究dcm基因的表达对变铅青链霉菌的多效性影响。【结果】首次发现变铅青链霉菌基因组中不含5-甲基胞嘧啶修饰,将dcm基因导入变铅青链霉菌后,接合子菌落比正常菌落小很多,并有放线紫红素产生。【结论】基因组的表观遗传修饰能激活沉默放线紫红素基因簇的表达这一现象,为基因组挖掘隐藏的活性天然产物提供了一条新途径。 展开更多

关键词 dcm甲基化 链霉菌 形态分化 放线紫红素

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卡西霉素生物合成调控基因calR2的功能 被引量：3

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作者 盖婧璇 韩铁生 +3 位作者 刘文秀 武策 汪志军 苟丽霞 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期1518-1526,共9页

【背景】卡西霉素(Calcimycin)是由教酒链霉菌NRRL3882产生的吡咯聚醚类抗生素,结构独特且具有广泛的生物活性,但其生物合成调控机制尚不清楚。【目的】研究卡西霉素生物合成基因簇上编码LuxR家族同源蛋白的潜在调控基因calR2的功能。... 【背景】卡西霉素(Calcimycin)是由教酒链霉菌NRRL3882产生的吡咯聚醚类抗生素,结构独特且具有广泛的生物活性,但其生物合成调控机制尚不清楚。【目的】研究卡西霉素生物合成基因簇上编码LuxR家族同源蛋白的潜在调控基因calR2的功能。【方法】通过PCR-targeting的方法对卡西霉素基因簇上的calR2基因进行中断,HPLC对突变株及回补菌株的代谢产物进行分析。利用荧光定量RT-PCR分析ΔcalR2突变菌株和野生菌株的基因转录水平差异。【结果】calR2基因中断的突变株不能产生卡西霉素,回补菌株则恢复产生卡西霉素的能力。RT-PCR结果表明卡西霉素生物合成的一些重要骨架基因在ΔcalR2突变株中的转录水平明显降低。【结论】LuxR家族转录调控基因calR2在卡西霉素生物合成过程中起正调控作用。 展开更多

关键词 卡西霉素 LuxR家族 调控基因 生物合成

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miRNA-122在异烟肼肝损伤大鼠中的调控机制 被引量：11

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作者 李玉红 朱凌妍 +6 位作者 田慎谦 王悦 牛琛 任琦 郑国颖 韩铁生 冯福民 《中国医院药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期97-102,共6页

目的:探讨miRNA-122在异烟肼致大鼠肝损伤中的调控机制。方法:采用异烟肼55 mg·kg-1·d-1连续灌胃3,7,10,14,21,28 d建立肝损伤大鼠模型,对照组给予等容积纯化水灌胃。全自动生化分析仪检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨... 目的:探讨miRNA-122在异烟肼致大鼠肝损伤中的调控机制。方法:采用异烟肼55 mg·kg-1·d-1连续灌胃3,7,10,14,21,28 d建立肝损伤大鼠模型,对照组给予等容积纯化水灌胃。全自动生化分析仪检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸转移酶(AST)活性;比色法检测肝组织中MDA含量和SOD酶活力,实时荧光定量PCR(RT-PCR)方法检测肝组织中miRNA-122、pri-miRNA-122、HNF4α、C/EBPα、Cycling G1、CAT-1表达水平;酶联免疫吸附法(ELISA)检测Cycling G1、CAT-1蛋白表达水平。结果:与对照组比较,肝组织病理变化在7 d表现为肝损伤;血浆ALT、AST的水平呈升高趋势(均P<0.01),且均在10 d发生明显上升(P<0.05);各用药组肝组织MDA含量逐渐升高,SOD活力却逐渐下降,miRNA-122表达水平整体呈下降趋势(P<0.01),其上游pri-miRNA-122及转录因子HNF4α、C/EBPαmRNA表达水平整体呈下降趋势(均P<0.01),其下游靶基因CyclingG1、CAT-1的mRNA及蛋白表达水平均呈上升趋势(均P<0.01)。结论:转录因子HNF-4α、C/EBPα调控miRNA-122低表达,miRNA-122低表达进一步调控其下游靶基因Cycling G1、CAT-1参与异烟肼致肝损伤的过程。 展开更多

关键词 异烟肼 大鼠 肝损伤 miRNA-122

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CYP3A5* 3和CYP3A4* 18B基因多态性与抗结核药物性肝损伤的关系 被引量：12

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作者 郭桐君 李玉红 +7 位作者 朱凌妍 王悦 田慎谦 牛琛 李艳辉 任琦 韩铁生 冯福民 《中华疾病控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期897-900,909,共5页

目的探讨CYP3A5*3和CYP3A4*18B基因多态性与抗结核药物性肝损伤的关系。方法采用病例对照研究设计,发生肝损伤的患者中随机选取175例作为病例组,未发生肝损伤的患者中随机选取185例作为对照组,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技... 目的探讨CYP3A5*3和CYP3A4*18B基因多态性与抗结核药物性肝损伤的关系。方法采用病例对照研究设计,发生肝损伤的患者中随机选取175例作为病例组,未发生肝损伤的患者中随机选取185例作为对照组,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术检测研究对象CYP3A5*3、CYP3A4*18B基因多态性。结果 CYP3A5*3-6986A>G位点AA、AG、GG基因型在病例组和对照组频率分别为4.5%、38.9%、56.6%和16.7%、41.1%、42.2%;CYP3A4*18B-20232G>A位点GG、GA、AA基因型在病例组和对照组频率分别为42.3%、46.9%、10.8%和58.9%、34.1%、7.0%,组间差异均有统计学意义(均有P<0.05)。交互作用分析中CYP3A5*3(G)/CYP3A4*18B(G)、CYP3A5*3(G)/CYP3A4*18B(A)分别与CYP3A5*3(A)/CYP3A4*18B(G)比较,差异均有统计学意义(均有P<0.05);CYP3A5*3(A)/CYP3A4*18B(A)与CYP3A5*3(A)/CYP3A4*18B(G)比较,差异无统计学意义(x^2=0.002,P=0.964)。结论 CYP3A5*3及CYP3A4*18B基因多态性与抗结核药物性肝损伤的发生均有关联;CYP3A5*3、CYP3A4*18B两个位点突变可能升高抗结核药物性肝损伤的发生风险,与均不突变相比,CYP3A5*3单一突变也可能升高抗结核药物性肝损伤发生的风险。 展开更多

关键词 抗结核药 肝 多态性 单核苷酸

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4种miRNAs在异烟肼致大鼠肝损伤肝组织中的表达分析 被引量：3

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作者 李玉红 朱凌妍 +6 位作者 牛琛 王悦 田慎谦 史哲 肖永红 韩铁生 冯福民 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第21期2121-2124,共4页

目的探讨4种miRNAs(miRNA-122、miRNA-192、miRNA-193及miRNA-125b1)在异烟肼致大鼠肝损伤的表达水平变化。方法 SD大鼠随机分为实验组48只和对照组8只。实验组给予异烟肼55 mg·kg-1·d-1,连续灌胃3,7,10,14,21,28 d,对照组给... 目的探讨4种miRNAs(miRNA-122、miRNA-192、miRNA-193及miRNA-125b1)在异烟肼致大鼠肝损伤的表达水平变化。方法 SD大鼠随机分为实验组48只和对照组8只。实验组给予异烟肼55 mg·kg-1·d-1,连续灌胃3,7,10,14,21,28 d,对照组给予等容积蒸馏水。肝组织经苏木精-伊红(HE)染色观察病理改变;测定血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性;实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测肝组织4种miRNAs表达水平。结果随着给药时间延长,miRNA-122、miRNA-192及miRNA-125b1表达水平整体下调(均P<0.01),均在3 d明显下降(均P<0.01);miRNA-193表达水平整体上调(P<0.01),10 d上调明显(P<0.05)。肝组织病理变化7 d出现肝损伤。血浆ALT、AST水平整体上调(均P<0.01),均在10 d上调明显(P<0.05)。miRNA-122、miRNA-192、miRNA-125b1发生低表达时间均早于ALT、AST及病理变化,均与ALT、AST存在线性相关(均P<0.05),且4种miRNAs表达之间也存在线性相关(均P<0.05)。结论miRNA-122、miRNA-192及miRNA-125b1发生异常低表达的时间均早于ALT、AST,可能是异烟肼致肝损伤的早期预警指标。 展开更多

关键词 异烟肼 肝损伤 微小RNAS

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