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急性砷染毒的L-02细胞的基因芯片分析 被引量:3
1
作者 顾永清 杨磊 +5 位作者 王国荃 袁秉祥 潘泽民 应康 李遥 谢毅 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期558-560,共3页
目的 用基因芯片分析急性砷染毒时人正常肝细胞 (L 0 2细胞 )基因表达谱的变化。方法 亚砷酸钠染毒L 0 2细胞 2、15、2 4h与未染毒的L 0 2细胞作表达谱基因芯片杂交。结果 L 0 2细胞用砷剂染毒后不同时间基因表达谱不同。hCYR6 1基... 目的 用基因芯片分析急性砷染毒时人正常肝细胞 (L 0 2细胞 )基因表达谱的变化。方法 亚砷酸钠染毒L 0 2细胞 2、15、2 4h与未染毒的L 0 2细胞作表达谱基因芯片杂交。结果 L 0 2细胞用砷剂染毒后不同时间基因表达谱不同。hCYR6 1基因在细胞染毒 2h后就表达增加 ,而在 15h和 2 4h后均不再升高 ;在细胞染毒后的不同时段 ,细胞金属硫蛋白Ⅳ及金属硫蛋白Ⅲ同源基因的表达均显著增加 ;热休克蛋白 86基因在细胞染毒 2h未增加 ,在 15h和2 4h表达均增加。结论 细胞接触砷毒后进入应激状态 ,合成最必需的与解毒功能相关的蛋白 。 展开更多
关键词 急性砷染毒 L-02细胞 基因芯片 肝细胞 亚砷酸钠
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家校合作——社区教育的未来 被引量:5
2
作者 顾永清 朱卫红 《曲靖师范学院学报》 2004年第2期96-99,共4页
家校合作可以促进青少年学生的健康成长 ,促进“教育社会”的诞生 ,强化教育机构的自我管理 ,是我国社区教育的未来发展趋势。
关键词 家校合作 社区教育 教育社会
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ARG1基因的生物信息学和基因表达谱分析 被引量:4
3
作者 顾永清 杨磊 +2 位作者 潘泽民 袁红琳 谢毅 《农垦医学》 2003年第2期81-83,共3页
目的 :对ARG1进行生物信息学和基因表达谱分析 ,并对其可能的抗砷机理进行探讨。方法 :对砷相关基因ARG1作进一步的生物信息学分析 ,用不同浓度砷染毒L - 0 2细胞两周以上 ,抽RNA转膜作Northern杂交 ,以及人类多组织膜的Northern杂交。... 目的 :对ARG1进行生物信息学和基因表达谱分析 ,并对其可能的抗砷机理进行探讨。方法 :对砷相关基因ARG1作进一步的生物信息学分析 ,用不同浓度砷染毒L - 0 2细胞两周以上 ,抽RNA转膜作Northern杂交 ,以及人类多组织膜的Northern杂交。结果 :Northern杂交结果显示该基因在未染毒L - 0 2细胞中几乎不表达 ,在砷染毒细胞中该基因的表达量明显增加 ,在 2 .3Kb处有一个单一的条带 ,且随剂量增加表达量亦增加。生物信息学分析显示ARG1具有一个液泡 -ATP酶 (Vacuolar -ATPase ,V -ATPase)样的功能域。结论 :ARG1是一条新的全长抗砷相关基因 ,其抗砷机理可能是通过液泡 展开更多
关键词 ARGl基因 生物信息学 基因表达谱 分析 NORTHERN杂交 致癌 致畸 致突变
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不含氨基末端的PIF1解螺旋酶的纯化和初步功能研究 被引量:3
4
作者 顾永清 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期272-275,共4页
目的从分子水平阐述人类PIF1解螺旋酶的生理功能,纯化只含有解螺旋酶模序,不含N-末端的PIF1蛋白——PIF1△N,并对其生物化学活性进行检测。方法以Hela细胞的cDNA文库为模版,PCR扩增得到PIF1的540~1 923的cDNA序列,在cDNA的5′端引入六... 目的从分子水平阐述人类PIF1解螺旋酶的生理功能,纯化只含有解螺旋酶模序,不含N-末端的PIF1蛋白——PIF1△N,并对其生物化学活性进行检测。方法以Hela细胞的cDNA文库为模版,PCR扩增得到PIF1的540~1 923的cDNA序列,在cDNA的5′端引入六聚组氨酸标签后插入pET20b表达载体,得到重组质粒pET20-PIF1△N。通过共转化此重组质粒和一个编码稀有rRNA的质粒,PIF1△N蛋白在大肠杆菌中得到表达。在4℃通过一系列亲和层析柱,用高效液相纯化系统纯化了PIF1△N蛋白,并检测其生物化学活性。结果从Hela细胞的cDNA文库中克隆了PIF1蛋白的540~1 923的基因片段,使其在大肠杆菌中成功表达。建立了纯化PIF1△N蛋白的亲和层析方法,并检测了其ATP酶活性。结论不含N-末端的PIF1蛋白-PIF1△N,具有依赖镁离子和DNA的ATP酶活性。 展开更多
关键词 PIF1解螺旋酶 蛋白纯化 ATP酶
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充分发挥辅导员、班主任在高校学风建设中的重要作用 被引量:17
5
作者 顾永清 《曲靖师范学院学报》 2006年第5期5-7,共3页
当前加强学风建设具有不容忽视的重要性和紧迫性,新建本科院校尤其要切实加强学风建设。曲靖师范学院的具体做法是:充分发挥辅导员、班主任在学风建设中的重要作用,重点抓好八个方面的工作,努力建设和培育优良的学风。
关键词 高等教育 学风建设 辅导员 班主任
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高师院校教师角色定位综述 被引量:7
6
作者 顾永清 《曲靖师范学院学报》 2004年第5期65-67,共3页
为充分发挥高师院校教师的人才优势 ,提高教育教学质量 ,必须对高师院校教师的角色进行准确定位。总体上看 ,高师院校教师的角色应定位为七种类型 :学者、专家的角色 ;教育者的角色 ;示范者的角色 ;研究者的角色 ;组织管理者角色 ;引导... 为充分发挥高师院校教师的人才优势 ,提高教育教学质量 ,必须对高师院校教师的角色进行准确定位。总体上看 ,高师院校教师的角色应定位为七种类型 :学者、专家的角色 ;教育者的角色 ;示范者的角色 ;研究者的角色 ;组织管理者角色 ;引导者的角色 ;合作者的角色。 展开更多
关键词 高师院校 教师角色 教育者 引导者 研究者 示范者 合作者
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构建和谐社会与心理健康 被引量:7
7
作者 顾永清 《曲靖师范学院学报》 2005年第2期78-83,共6页
改革越深化、经济越发展,社会生活节奏越加快、矛盾越复杂。要构建社会主义和谐社会,心理健康就越显得重要。当前要充分把握心理健康标准及其重要性,调查研究心理不健康的主要表现,克服心理异常,医治心理疾病,积极促进社会主义和谐社会... 改革越深化、经济越发展,社会生活节奏越加快、矛盾越复杂。要构建社会主义和谐社会,心理健康就越显得重要。当前要充分把握心理健康标准及其重要性,调查研究心理不健康的主要表现,克服心理异常,医治心理疾病,积极促进社会主义和谐社会的构建和发展。 展开更多
关键词 心理健康 心理挫折 心理异常 改革开放 构建 和谐社会
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大学生思想品德状况及教育对策——以曲靖师范学院为例 被引量:1
8
作者 顾永清 《曲靖师范学院学报》 2008年第1期11-14,共4页
根据问卷调查和征文比赛收集资料整理发现:当前大学生思想品德状况主流是积极健康的,他们关心国家发展、民族兴旺;成才欲望强烈,认同社会主义道德信念,对自身价值定位准确,关心学校发展等,同时也存在着思想复杂,学习目标不明确,求职危... 根据问卷调查和征文比赛收集资料整理发现:当前大学生思想品德状况主流是积极健康的,他们关心国家发展、民族兴旺;成才欲望强烈,认同社会主义道德信念,对自身价值定位准确,关心学校发展等,同时也存在着思想复杂,学习目标不明确,求职危机强烈,人际关系淡漠,诚信缺失等问题。究其原因,主要是主客观两方面诸多原因所致,对此,高校党组织和教职员工应充分发挥"管理育人、教书育人、服务育人"的功能,以德化人、以情感人、以理服人,引导和促进大学生和谐健康成长成才。 展开更多
关键词 高等教育 大学生 思想品德 心理问题 教育对策
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人类PIF1蛋白质N-末端多肽的表达纯化和生物学活性研究
9
作者 顾永清 朴金莲 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 2009年第2期139-143,共5页
解螺旋酶参与几乎体内所有的DNA代谢,具有重要的生理功能。为了从分子水平阐述人类PIF1解螺旋酶的生理功能,我们以HeLa细胞的cDNA文库为模版,PCR扩增得到PIF1基因5’端含有1~534核苷酸的cDNA序列一PIFAC。在PIF△C的5’端引入六组... 解螺旋酶参与几乎体内所有的DNA代谢,具有重要的生理功能。为了从分子水平阐述人类PIF1解螺旋酶的生理功能,我们以HeLa细胞的cDNA文库为模版,PCR扩增得到PIF1基因5’端含有1~534核苷酸的cDNA序列一PIFAC。在PIF△C的5’端引入六组氨酸标签后插入pET15b表达载体,得到重组质粒pET15-PIF△C。以此重组质粒转化Rosetta TM2(DE3)感受态细胞,使PIFAC蛋白质在大肠杆菌中得到表达。在4℃通过快速液相色谱纯化系统,通过一系列色谱层析柱纯化了PIFAC蛋白质。以纯化的PIFAC蛋白质免疫家兔制备了抗血清,并检测了纯化的PIFAC的生物化学活性。结果显示不含解旋酶模序的人类PIF1蛋白质的N-末端,具有使单链DNA复性的特性。PIF1解螺旋酶具有解开DNA双链和使双链DNA复性这一矛盾的特性,暗示了人类PIF1解螺旋酶可能参与损伤DNA的修复,包括断裂的双链DNA的修复。 展开更多
关键词 PIF1解螺旋酶 PIFΔC蛋白质 蛋白质纯化 单链DNA复性
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人类重组PIF1解螺旋酶C-末端多肽的纯化及其抗体制备 被引量:1
10
作者 顾永清 Kenji Kamiya 《农垦医学》 2008年第6期449-452,共4页
目的:表达纯化人类PIF1解螺旋酶C-末端的338-641氨基酸的多肽PIF338-641,同时用纯化蛋白制备特异抗体。方法:从HeLa细胞的cDNA文库中PCR扩增得到PIF1解螺旋酶C-末端1012-1926的cDNA片段(对应氨基酸338-641),插入N-末端融合有六聚组氨酸... 目的:表达纯化人类PIF1解螺旋酶C-末端的338-641氨基酸的多肽PIF338-641,同时用纯化蛋白制备特异抗体。方法:从HeLa细胞的cDNA文库中PCR扩增得到PIF1解螺旋酶C-末端1012-1926的cDNA片段(对应氨基酸338-641),插入N-末端融合有六聚组氨酸的表达载体pET15b产生pET15b-PIF338-641重组质粒,转化RosettaTM2(DE3)感受态细胞,使PIF338-641蛋白在大肠杆菌中表达,用自制的镍亲和柱纯化PIF338-641蛋白,并以纯化蛋白免疫家兔制备抗血清。结果:PIF338-641蛋白在大肠杆菌中成功表达,纯化了PIF338-641蛋白并制备了PIF338-641蛋白抗血清。结论:制备的PIF338-641蛋白抗体能与蛋白发生特异的免疫反应。 展开更多
关键词 PIF1解螺旋酶 蛋白纯化 抗体制备
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生物化学实验教学改革总结
11
作者 顾永清 周祖钊 +2 位作者 彭小玲 潘泽民 袁红琳 《农垦医学》 2003年第6期423-425,共3页
为适应 2 1世纪对人才的需要 ,教学理念的改革和转变是非常重要的。教学的重要目标不仅是传授知识 ,而且是对学生进行科学思维能力的训练和创造力的培养。为此 ,在生物化学的实验教学中 ,培养学生的主观能动、发散思维、求异思维等训练 ... 为适应 2 1世纪对人才的需要 ,教学理念的改革和转变是非常重要的。教学的重要目标不仅是传授知识 ,而且是对学生进行科学思维能力的训练和创造力的培养。为此 ,在生物化学的实验教学中 ,培养学生的主观能动、发散思维、求异思维等训练 ;减少灌输式 。 展开更多
关键词 训练 生物化学实验教学 传授知识 灌输式 启发性 求异思维 教学理念 培养学生 改革 适应
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钙调素结合蛋白
12
作者 顾永清 《生命的化学》 CAS CSCD 1993年第5期20-22,共3页
1980年Kakiuch等用钙调素亲和层析柱,从小鸡砂囊分离出一种蛋白质。因其与钙调素结合,命名为caldesmon(CD)。意为钙调素结合蛋白。随后,发现此蛋白普遍存在于平滑肌和非平滑肌组织中。CD除与钙调素结合外,还与多种蛋白质如肌动蛋白、原... 1980年Kakiuch等用钙调素亲和层析柱,从小鸡砂囊分离出一种蛋白质。因其与钙调素结合,命名为caldesmon(CD)。意为钙调素结合蛋白。随后,发现此蛋白普遍存在于平滑肌和非平滑肌组织中。CD除与钙调素结合外,还与多种蛋白质如肌动蛋白、原肌球蛋白。 展开更多
关键词 调钙蛋白 结合蛋白 蛋白 结构
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PCR检测HPV DNA诊断女性生殖道尖锐湿疣
13
作者 顾永清 袁红琳 +1 位作者 彭小玲 周祖钊 《农垦医学》 1999年第4期243-245,共3页
目的:应用聚合酶链反应(RCR)检测HPVDNA诊断女性生殖道尖锐湿疣。方法:应用PCR法对门诊女性生殖道尖锐湿疣标本中HPV6.11型进行检测。结果:9例病理学检测阳性标本有8例检测出HPV6.11望病毒.20例病理检测阴性标本也有4例检出HPV6... 目的:应用聚合酶链反应(RCR)检测HPVDNA诊断女性生殖道尖锐湿疣。方法:应用PCR法对门诊女性生殖道尖锐湿疣标本中HPV6.11型进行检测。结果:9例病理学检测阳性标本有8例检测出HPV6.11望病毒.20例病理检测阴性标本也有4例检出HPV6.11型病毒。结论:PCR是诊断尖锐湿疣快速、简便、敏感性高和特异性强的方法。病因不明的假性湿疣的一部分病例可能是尚未出现典型病变的早期尖锐湿疣。 展开更多
关键词 女性 生殖道 尖锐湿疣 HPV-DNA 聚合酶链反应
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参与碱基切除修复的AP内切酶1的克隆和蛋白质纯化
14
作者 顾永清 KAMIYA Kenji 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 2008年第6期713-716,共4页
碱基切除修复途径是去除氧化和甲基化碱基的最主要途径。在碱基切除修复过程中,多个蛋白质,诸如DNA糖基酶、APE1内切酶、DNA聚合酶beta和DNA连接酶在体内的精密调节下高度协调地作用,从而切除受损碱基,使DNA恢复正常序列。碱基切除修复... 碱基切除修复途径是去除氧化和甲基化碱基的最主要途径。在碱基切除修复过程中,多个蛋白质,诸如DNA糖基酶、APE1内切酶、DNA聚合酶beta和DNA连接酶在体内的精密调节下高度协调地作用,从而切除受损碱基,使DNA恢复正常序列。碱基切除修复对维持基因组的稳定及抑制肿瘤发生等生理过程有重要作用。为了进一步从分子水平阐明APE1的作用机制,我们从HeLa细胞的cDNA文库中克隆得到APE1基因,使APE1在大肠杆菌中得到表达,并用蛋白质纯化的快速液相层析法经过一系列层析柱纯化了重组APE1蛋白质,APE1的生物化学功能研究正在进行中。 展开更多
关键词 碱基切除修复 AP内切酶1 蛋白质纯化
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恶性肿瘤组织的端粒酶活性分析
15
作者 顾永清 何玲 +1 位作者 潘泽民 周祖钊 《农垦医学》 2003年第4期235-237,共3页
目的 :检测端粒酶活性在恶性肿瘤和良性肿瘤及正常组织的表达 ,以探讨端粒酶活性对恶性肿瘤检测的意义。方法 :采用端粒重复序列扩增分析法 (telomericrepeatamplificationprotocolassay ,TRAP)检测 87例恶性肿瘤和 4 7例对照组织中端... 目的 :检测端粒酶活性在恶性肿瘤和良性肿瘤及正常组织的表达 ,以探讨端粒酶活性对恶性肿瘤检测的意义。方法 :采用端粒重复序列扩增分析法 (telomericrepeatamplificationprotocolassay ,TRAP)检测 87例恶性肿瘤和 4 7例对照组织中端粒酶的活性。结果 :恶性肿瘤端粒酶活性阳性检出 85 .0 6 % (74 / 87) ,明显高于对照组织 ,(P<0 .0 1) ;端粒酶活性与组织类型无明显相关性。结论 :与对照组织相比 ,恶性肿瘤组织中端粒酶活性明显升高 。 展开更多
关键词 恶性肿瘤 端粒酶活性 检测 端粒重复序列扩增分析法
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电离辐射调控细胞命运在放射性肺损伤中的作用及治疗进展 被引量:2
16
作者 顾永清 敖兴坤 朱娇娇 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期153-163,共11页
放射性肺损伤是胸部肿瘤放疗及骨髓移植预处理后常见的并发症,是患者放疗剂量的重要限制因素。一旦放射性肺损伤进展至放射性肺纤维化阶段,将严重降低患者生活质量,同时引起患者呼吸衰竭最终导致死亡。电离辐射可诱导细胞发生凋亡、上... 放射性肺损伤是胸部肿瘤放疗及骨髓移植预处理后常见的并发症,是患者放疗剂量的重要限制因素。一旦放射性肺损伤进展至放射性肺纤维化阶段,将严重降低患者生活质量,同时引起患者呼吸衰竭最终导致死亡。电离辐射可诱导细胞发生凋亡、上皮间质转化、衰老、焦亡及铁死亡等命运,不同细胞响应于电离辐射下的不同损伤形式在放射性肺损伤的发生发展中具有重要作用。本文以电离辐射刺激后不同细胞发生不同命运转归为切入点,简述放射性肺损伤的发病机制,并对其临床防治进行综述。 展开更多
关键词 电离辐射 放射性肺损伤 放射性肺纤维化 细胞命运
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充分发挥教师的主导作用是教学优化的关键
17
作者 顾永清 《曲靖师范学院学报》 2001年第6期5-7,共3页
教学优化是教师和学生乃至全社会追求的教育目标之一 ,要实现教学优化 ,教师首先必须忠诚党和人民的教育事业 ,认真贯彻执行教育方针 ;其次要努力学习专业知识和人类的一切优秀文化成果 ,认真钻研教学内容 ,选择制定最优的教学方案 ;第... 教学优化是教师和学生乃至全社会追求的教育目标之一 ,要实现教学优化 ,教师首先必须忠诚党和人民的教育事业 ,认真贯彻执行教育方针 ;其次要努力学习专业知识和人类的一切优秀文化成果 ,认真钻研教学内容 ,选择制定最优的教学方案 ;第三要以改革创新的教育教学思想为指导 ,认真地备好课 ;第四要变“精讲多练”为“精讲巧练” ;第五要教会学生学习 ,培养发展学生的智力 ,促使其形成良好的个性心理品质 .只有这样 ,才能最终实现教学优化的预期目标 . 展开更多
关键词 教师与学生 主导地位 精讲巧练 教学优化 学习方法 知识 素质
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人类抗砷相关基因hARRG cDNA抗砷功能的研究 被引量:6
18
作者 潘泽民 杨磊 +5 位作者 吴顺华 刘开泰 顾永清 王国荃 应康 谢毅 《中国地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期140-142,共3页
目的探讨人类抗砷相关基因hARRGcDNA对砷化物的抵抗作用。方法将人类抗砷相关基因hARRGcDNA基因开放阅读框克隆于真核表达载体pcDNA4/HisC中。通过磷酸钙共沉淀方法将带hARRGcDNA基因开放阅读框的表达质粒与空pcDNA4/HisC质粒分别转染... 目的探讨人类抗砷相关基因hARRGcDNA对砷化物的抵抗作用。方法将人类抗砷相关基因hARRGcDNA基因开放阅读框克隆于真核表达载体pcDNA4/HisC中。通过磷酸钙共沉淀方法将带hARRGcDNA基因开放阅读框的表达质粒与空pcDNA4/HisC质粒分别转染到人正常肝L鄄02细胞中,细胞分别用2、4、6、8、10μmol/LNaAsO2染毒,根据染砷细胞存活数确定hARRGcDNA的抗砷性。结果生物信息学分析hARRG蛋白为膜外蛋白,转染含hARRGcDNA基因开放阅读框的pcDNA4/HisC质粒在砷环境中细胞存活数目多于未带hARRG基因开放阅读框的空质粒。结论hARRGcDNA基因具有一定的抗砷作用。 展开更多
关键词 相关基因 开放阅读框 细胞存活 转染 DNA基因 人类 表达质粒 克隆 数目 真核表达载体
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砷化物对人类金属硫蛋白-3cDNA基因表达的影响 被引量:5
19
作者 潘泽民 杨磊 +4 位作者 刘开泰 顾永清 王国荃 应康 谢毅 《环境与健康杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期221-223,共3页
目的探讨砷化物对人类正常肝细胞金属硫蛋白MetallothioneinMT-3cDNA基因表达的影响。方法利用SMART方法克隆cDNA基因,生物信息学分析克隆基因的同源性、染色体定位、基因结构和对该基因编码蛋白质进行分析并对该蛋白质进行跨膜信息分析... 目的探讨砷化物对人类正常肝细胞金属硫蛋白MetallothioneinMT-3cDNA基因表达的影响。方法利用SMART方法克隆cDNA基因,生物信息学分析克隆基因的同源性、染色体定位、基因结构和对该基因编码蛋白质进行分析并对该蛋白质进行跨膜信息分析,基因芯片方法检测染砷L-02细胞MT-3基因的表达。结果成功克隆MT-3cDNA基因,经生物信息学分析可知,该基因定位在人16号染色体16q13区段,跨膜信息分析发现MT-3基因编码蛋白质可以穿出生物膜,基因芯片结果证实染砷的人正常肝L-02细胞在染砷早期MT-3基因表达增高。结论该研究发现人类MT-3基因是砷化物作用的一个相关基因,早期参与了砷代谢解毒。 展开更多
关键词 金属硫蛋白 CDNA基因
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通过基因敲除研究HSP12的酒精耐受功能
20
作者 顾永清 Hitoshi Shimoi 《农垦医学》 2003年第3期157-161,共5页
目的:研究热休克蛋白12(HSP12)在酵母酒精耐受性中的作用。方法:通过对酵母酒精耐受突变株K11和其亲本株K7抽提mRNA作表达谱基因芯片杂交,研究基因表达谱的变化。对其中一条异常高表达的基因HSP12用SFH-PCR(short flanking homology PCR... 目的:研究热休克蛋白12(HSP12)在酵母酒精耐受性中的作用。方法:通过对酵母酒精耐受突变株K11和其亲本株K7抽提mRNA作表达谱基因芯片杂交,研究基因表达谱的变化。对其中一条异常高表达的基因HSP12用SFH-PCR(short flanking homology PCR)的方法敲除HSP12基因,对HSP12敲除株的表型进行酒精耐受性研究。结果:基因芯片杂交结果显示K11高表达基因共有41条,其中HSP12高达50倍。但是HSP12基因敲除株对酒精的耐受性相对于未敲除株没有显著性变化。结论:在酵母很多基因共同参与对酒精的耐受性,单一基因HSP12的功能丧失,可以被其它基因的功能所弥补。 展开更多
关键词 基因敲除 HSPl2 酒精耐受功能 热休克蛋白12 基因芯片杂交 基因表达谱
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