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一株异养硝化-好氧反硝化细菌的筛选及氮转化特性研究
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作者 蒋慧慧 王强 +2 位作者 付维来 饶志明 张显 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期250-260,共11页
水产养殖过程中氮元素超标易造成水质恶化,威胁水产动物的生长繁殖,亟需安全、高效的脱氮方法。从福建某水产养殖池底的污泥中筛选出一株氨氮降解菌,菌种鉴定后进行适应性驯化,并研究不同条件对菌株生长和氨氮降解的影响,随后又以亚硝... 水产养殖过程中氮元素超标易造成水质恶化,威胁水产动物的生长繁殖,亟需安全、高效的脱氮方法。从福建某水产养殖池底的污泥中筛选出一株氨氮降解菌,菌种鉴定后进行适应性驯化,并研究不同条件对菌株生长和氨氮降解的影响,随后又以亚硝态氮为唯一氮源检测菌株的好氧反硝化特性。菌株经16S rRNA鉴定为阿氏芽孢杆菌Bacillus aryabhattai,命名为JN01;驯化后,菌株的生长、氨氮去除率均有不同程度提高,初始NH_(4)^(+)-N浓度为200 mg/L的氮去除率最高达87.29%;影响菌株脱氮的单因素实验结果表明,当NH_(4)^(+)-N浓度为200 mg/L、丁二酸钠为碳源、碳氮比为15∶1、pH 7.5、培养温度为30℃时,菌株的氨氮降解率可以达到92.78%。在亚硝态氮为唯一氮源的条件下,菌株JN01也能进行好氧反硝化转化,NO_(2)^(-)-N降解率为82.30%。B.aryabhattai JN01具有良好的异养硝化和好氧反硝化特性,具备同时解决养殖废水中氨氮和亚硝酸盐超标的应用潜力。 展开更多
关键词 阿氏芽孢杆菌 异养硝化 好氧反硝化 氨氮 亚硝态氮
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不同来源S-腺苷甲硫氨酸合酶在大肠杆菌中的表达及催化应用 被引量:1
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作者 Hero Nmeri Godspower 乔郅钠 +1 位作者 徐美娟 饶志明 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期26-33,共8页
S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosylmethionine,SAM)是一种重要的代谢中间体,对机体代谢活动的正常运行起重要作用,它是由底物L-甲硫氨酸和ATP在SAM合酶催化下生成的,目前主要应用于医药行业。该研究首先以蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus和谷氨酸... S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosylmethionine,SAM)是一种重要的代谢中间体,对机体代谢活动的正常运行起重要作用,它是由底物L-甲硫氨酸和ATP在SAM合酶催化下生成的,目前主要应用于医药行业。该研究首先以蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus和谷氨酸棒杆菌Corynebacterium glutamicum基因组为模板扩增出SAM合酶编码基因BcmetK和CgmetK,以pETDueT1质粒为载体,以大肠杆菌E.coli BL21(DE3)为底盘细胞,构建了SAM合成菌株E.coli BL21/pETDuet1-BcmetK和E.coli BL21/pETDuet1-CgmetK。其次,针对SAM合成菌株全细胞催化合成体系条件进行了优化,重组大肠杆菌E.coli BL21/pETDuet1-BcmetK在最优条件[L-甲硫氨酸浓度50 mmol/L、ATP浓度50 mmol/L、1.2%(体积分数)的OD_(600)值约9.0的细胞悬浮液、600 mmol/L pTSoNa、50 mmol/L MgSO_(4)、100 mmol/L K_(2)SO_(4)、45℃、pH 8.0]下,连续转化5 h,获得了464 mg/L的SAM。重组大肠杆菌E.coli BL21/pETDuet1-CgmetK在最优条件[L-甲硫氨酸浓度50 mmol/L、ATP浓度40 mmol/L、0.8%(体积分数)的OD_(600)值约9.0的细胞悬浮液、800 mmol/L pTSoNa、50 mmol/L MgSO 4、100 mmol/L K_(2)SO 4、45℃、pH 8.5]下,连续转化5 h,获得了528 mg/L的SAM,可见,谷氨酸棒杆菌来源的SAM合酶催化能力优于蜡状芽孢杆菌来源的,更有利于SAM的合成。该研究成功构建了SAM合成菌株,虽然产量水平不高,但为SAM的可持续生物合成提供了重要借鉴。 展开更多
关键词 蜡状芽孢杆菌 谷氨酸棒杆菌 大肠杆菌 S-腺苷甲硫氨酸合酶 S-腺苷甲硫氨酸 全细胞催化
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半理性设计提高甲酸脱氢酶(Cb FDH)活力及热稳定性
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作者 倪晗朦 胡孟凯 +4 位作者 张恒维 张显 潘学玮 饶志明 周楠迪 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期1-8,共8页
甲酸脱氢酶(formate dehydrogenase,FDH)是NADH循环再生的最佳酶之一,广泛应用于食品、医药和化工等行业。但是野生型甲酸脱氢酶普遍存在酶活低、催化效率差等缺点,导致产品转化率较低,影响产品的工业化生产。为了获得具有更佳催化性能... 甲酸脱氢酶(formate dehydrogenase,FDH)是NADH循环再生的最佳酶之一,广泛应用于食品、医药和化工等行业。但是野生型甲酸脱氢酶普遍存在酶活低、催化效率差等缺点,导致产品转化率较低,影响产品的工业化生产。为了获得具有更佳催化性能的甲酸脱氢酶,作者以博伊丁假丝酵母(Candida boidinii)来源的甲酸脱氢酶为模板,利用HOTSPOT WIZARD v3.1进行三维结构模拟预测,构建了P68G、Q197K两个突变体,比酶活较野生型分别提高了11%和33%。这是由于P68G氨基酸残基侧链的苯环被氢取代,减少了甲酸盐底物进入口袋的空间位阻;而Q197K侧链酰胺基突变为胺丁基增强了酶的柔性。然而这两个突变点对甲酸脱氢酶的热稳定性产生了负面影响,因此在I239位引入半胱氨酸突变与C262构成二硫键以提高其热稳定性,最终获得一株热稳定性显著提高,比酶活较野生型提高31%、较I239C提高45%的突变株Cb FDH Q197K/I239C。通过半理性预测蛋白质结构提高了甲酸脱氢酶的活力和热稳定性,为高效构建性能稳定、还原力强的甲酸脱氢酶提供了理论基础。 展开更多
关键词 甲酸脱氢酶 半理性设计 博伊丁假丝酵母 定点突变 辅酶循环
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基于二氧化钒超材料的双窄带太赫兹吸收器
4
作者 曹俊豪 饶志明 李超 《太赫兹科学与电子信息学报》 2023年第12期1410-1416,共7页
提出一种基于二氧化钒(VO_(2))超材料的吸收器,由3层结构组成,从上往下分别为2个VO_(2)圆、中间介质层和金属底板。仿真数据表明,该吸收器有2个很强的吸收峰,分别为4.96 THz和5.64 THz,相对应的吸收率为99.1%和98.5%。利用阻抗匹配理论... 提出一种基于二氧化钒(VO_(2))超材料的吸收器,由3层结构组成,从上往下分别为2个VO_(2)圆、中间介质层和金属底板。仿真数据表明,该吸收器有2个很强的吸收峰,分别为4.96 THz和5.64 THz,相对应的吸收率为99.1%和98.5%。利用阻抗匹配理论和电场分布进行分析,阐明了吸收的物理机制,并进一步分析了结构参数对吸收率的影响。所提出的吸收器具有可调谐的特点,能够灵活调控吸收率,为太赫兹波的调控、滤波等功能的实现提供了良好的方案。该吸收器在图像处理、生物探测和无线通信领域都有潜在的应用。 展开更多
关键词 太赫兹 超材料 二氧化钒 吸收器
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流动注射化学发光测定甲基对硫磷 被引量:24
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作者 饶志明 王建宁 +1 位作者 李隆弟 张新荣 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2001年第4期373-377,共5页
首次研究了农药甲基对硫磷在碱性介质中(pH:11.5~12.0)与鲁米诺和过氧化氢产生化学发光的行为及反应机理,并发现水溶性高分子聚乙二醇对该反应具有显著的增效作用,据此建立了流动注射化学发光测定甲基对硫磷的新方法。... 首次研究了农药甲基对硫磷在碱性介质中(pH:11.5~12.0)与鲁米诺和过氧化氢产生化学发光的行为及反应机理,并发现水溶性高分子聚乙二醇对该反应具有显著的增效作用,据此建立了流动注射化学发光测定甲基对硫磷的新方法。甲基对硫磷的浓度在 5×10-8~1.0 ×10-5g/mL范围内与化学发光强度呈良好的线性关系;检出限为 2×10-8g/mL;对 1.0×10-6g/mL甲基对硫磷进行了11次平行测定,相对标准偏差小于4%;标准加入回收率为83%~94%。该法应用于谷物中农药残余量的测定,结果满意。 展开更多
关键词 化学发光 流动注射 甲基对硫磷 聚乙二醇-400 有机磷杀虫剂 谷物 农药残留量测定
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流动注射化学发光测定盐酸普萘洛尔 被引量:11
6
作者 饶志明 吴秋莲 +2 位作者 谢国平 许环环 张秀青 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2004年第12期1660-1662,共3页
研究在硫酸盐酸介质下,心得安(盐酸普萘洛尔)与铈和罗丹明B的化学发光行为,并对影响化学发光强度的诸因素进行实验和探讨,建立了流动注射化学发光法检测心得安的新方法。其线性范围为8.0×10-5~8.0×10-3g/L;检出限为2×10... 研究在硫酸盐酸介质下,心得安(盐酸普萘洛尔)与铈和罗丹明B的化学发光行为,并对影响化学发光强度的诸因素进行实验和探讨,建立了流动注射化学发光法检测心得安的新方法。其线性范围为8.0×10-5~8.0×10-3g/L;检出限为2×10-5g/L;对1.0mg/L心得安连续11次测定的相对标准偏差为15%。该方法应用于心得安片剂含量测定并与标准方法(中国药典法)比较,结果满意。 展开更多
关键词 心得安 盐酸普萘洛尔 中国药典 化学发光 含量测定 片剂 行为 连续 流动注射 相对标准偏差
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利用Cr_2O_3-LaCoO_3-Pt纳米材料催化发光测定大气中的氨分子 被引量:29
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作者 饶志明 施进军 张新荣 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第9期1668-1671,共4页
研究了氨分子在Cr2 O3 纳米粒子 (粒径 5 0~ 80nm)表面的化学发光行为 ,发现这种纳米材料对氨分子具有较强的选择性 .进一步的研究表明 ,在掺杂了LaCoO3 纳米粒子 (粒径 2 0nm)和Pt纳米粒子 (粒径≤ 10nm)后 ,化学发光强度增强了近 2 5... 研究了氨分子在Cr2 O3 纳米粒子 (粒径 5 0~ 80nm)表面的化学发光行为 ,发现这种纳米材料对氨分子具有较强的选择性 .进一步的研究表明 ,在掺杂了LaCoO3 纳米粒子 (粒径 2 0nm)和Pt纳米粒子 (粒径≤ 10nm)后 ,化学发光强度增强了近 2 5倍 .在最佳反应条件下 ,化学发光强度与氨分子的浓度在 15 .0× 10 -6~ 75 0× 10 -6内呈良好的线性关系 (r=0 995 ) ,检出限为 4 0× 10 -6. 展开更多
关键词 纳米材料 催化发光 测定 大气 氨分子 Cr2O3-LaCoO3-Pt 纳米粒子 化学发光分析 氧化铬 钴酸镧
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水稻抗稻瘟病近等基因系的cDNA微阵列分析 被引量:14
8
作者 饶志明 董海涛 +4 位作者 庄杰云 柴荣耀 樊叶杨 李德葆 郑康乐 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第10期887-893,共7页
应用cDNA微阵列对来源于中 15 6 /谷梅 2号重组自交系的水稻抗稻瘟病近等基因系G2 0 5和G71的稻瘟病菌胁迫基因表达谱进行了分析 ,发现有 3个cDNA克隆的表达仅在抗病基因系G2 0 5接种病原菌 12h后受到诱导 ,其中两个为功能已知基因 ,另... 应用cDNA微阵列对来源于中 15 6 /谷梅 2号重组自交系的水稻抗稻瘟病近等基因系G2 0 5和G71的稻瘟病菌胁迫基因表达谱进行了分析 ,发现有 3个cDNA克隆的表达仅在抗病基因系G2 0 5接种病原菌 12h后受到诱导 ,其中两个为功能已知基因 ,另一个为功能未知的新基因。另有 35个差异表达克隆在两个近等基因系中均检测到 ,其中 17个克隆的表达在G2 0 5和G71均受到病原菌的诱导 ,另外 18个克隆的表达则在G2 0 5和G71均受到病原菌的抑制。序列分析表明 ,这些稻瘟病菌应答基因分别与防卫反应、信号传递、逆境胁迫和光合作用及糖代谢等功能相关 ,为植物抗病机制提供了相关信息。另外 ,Northern还证实了编码富含甘氨酸蛋白基因 (GlycinerichproteinGrp)的表达受稻瘟病病原菌的诱导 ,是一个稻瘟病诱导相关基因。 展开更多
关键词 水稻 抗稻瘟病近等基因系 cDNA微阵列分析 表达谱 抗病性
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测定双嘧达莫的化学发光新方法 被引量:7
9
作者 饶志明 张旺华 +2 位作者 李求忠 谢国平 杨辉琴 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2004年第3期278-280,共3页
提出了双嘧达莫与高锰酸钾和罗丹明B的化学发光新体系 ,并发现表面活性剂吐温 80可显著增强该体系的化学发光 ,据此建立了流动注射化学发光测定双嘧达莫的新方法。该方法选择性好 ,灵敏度高 ,线性范围宽 ,双嘧达莫在 5 0× 10 -8~... 提出了双嘧达莫与高锰酸钾和罗丹明B的化学发光新体系 ,并发现表面活性剂吐温 80可显著增强该体系的化学发光 ,据此建立了流动注射化学发光测定双嘧达莫的新方法。该方法选择性好 ,灵敏度高 ,线性范围宽 ,双嘧达莫在 5 0× 10 -8~ 5 0× 10 -5g·mL-1范围内与发光信号呈线性关系 ,检出限 1 7× 10 -8g·mL-1,RSD为 1 1% (n =11,cs=1 0× 10 -6g·mL-1双嘧达莫浓度 )。 展开更多
关键词 双嘧达莫 化学发光方法 高锰酸钾 罗丹明B 流动注射 心血管系统药物 片剂 含量测定 吐温-80
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基于TiO_2-Y_2O_3粉体催化发光甲醇气体传感器的研究 被引量:10
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作者 饶志明 谢静宜 +2 位作者 刘林洁 曾玉云 蔡文联 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第6期532-536,共5页
发现当甲醇气体通过TiO2-Y2O3(质量比为3∶1)粉体表面时,可被空气中的O2催化氧化产生强烈的化学发光,基于此研制了一种新型的甲醇气体传感器.此传感器对甲醇的检测具有较高灵敏度和较强的选择性.在波长490nm处进行定量分析,催化发光强... 发现当甲醇气体通过TiO2-Y2O3(质量比为3∶1)粉体表面时,可被空气中的O2催化氧化产生强烈的化学发光,基于此研制了一种新型的甲醇气体传感器.此传感器对甲醇的检测具有较高灵敏度和较强的选择性.在波长490nm处进行定量分析,催化发光强度与甲醇浓度在一定范围内呈良好的线性关系,其线性范围为25.74~12870mg/m3(r=0.9995,n=8);检出限为8.58mg/m3(信噪比=3).外来物质如正己烷、三氯甲烷、苯、无水乙醇、甲醛、丙酮、氨、甲苯与甲醇共存时,除了丙酮、乙醇和氨分别引起干扰外,苯与其它气体不干扰测定.该传感器工作时间可持续80h以上,是一种长寿命的、性能稳定的气体传感器,并成功地实现了对甲醇气体的实时在线检测. 展开更多
关键词 催化发光 甲醇 气体传感器 TiO2-Y2O3粉体
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双光子J-C模型中原子与光场的纠缠及纠缠度 被引量:6
11
作者 饶志明 谢芳森 +2 位作者 胡利云 曾明生 李小平 《江西师范大学学报(自然科学版)》 CAS 2004年第5期387-390,共4页
该文提出了在双光子J-C模型中利用二能级原子与单模场的相互作用,制备出原子与光场的纠缠态.随着时间的演化,原子与光场组成体系的纠缠度呈现出周期性变化规律.研究结果表明:在失谐量等于拉比频率时,该体系的纠缠度将长时间处于最大纠缠态.
关键词 纠缠度 光场 J-C模型 二能级原子 双光子 纠缠态 失谐量 模场 单模 频率
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gsh 1基因的克隆及其在巴斯德毕赤氏酵母中的表达 被引量:5
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作者 饶志明 艾丽静 +2 位作者 沈微 方慧英 诸葛健 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期257-260,共4页
利用PCR技术克隆了来源于Saccharomyces cerevisiae ALJ036的γ-L-谷氨酰-L-半胱氨酸合成酶(γ-glutamyl-cysteine synthetase)编码基因gsh1,连接多拷贝表达载体pGAPZA,转化Pichia pastorisx-33,构建了重组菌P.pastorisx-33(pGAPZA-gsh... 利用PCR技术克隆了来源于Saccharomyces cerevisiae ALJ036的γ-L-谷氨酰-L-半胱氨酸合成酶(γ-glutamyl-cysteine synthetase)编码基因gsh1,连接多拷贝表达载体pGAPZA,转化Pichia pastorisx-33,构建了重组菌P.pastorisx-33(pGAPZA-gsh1);在高浓度Zeocin平板上筛选多拷贝阳性转化子,并通过PCR进行了验证.对阳性转化子的γ-L-谷氨酰-L-半胱氨酸合成酶酶活力进行了测定,结果显示,重组酵母的γ-L-谷氨酰-L-半胱氨酸合成酶的酶活是宿主菌的3.0倍,在液体YEPD中重组菌GSH的产量为42.2mg/L,是宿主菌的1.6倍. 展开更多
关键词 GSH 1 巴斯德毕赤氏酵母 克隆 表达 谷胱甘肽 γ- 谷氨酰半胱氨酸合成酶
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水稻稻瘟病菌胁迫应答cDNA片段的表达及定位 被引量:6
13
作者 饶志明 董海涛 +4 位作者 庄杰云 柴荣耀 樊叶杨 李德葆 郑康乐 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期105-108,共4页
以抗稻瘟病品系 G2 0 5为材料 ,应用 c DNA微阵列分别获得了一个受稻瘟病菌诱导的含 NBS- L RR的 c DNA克隆 (暂命名为 RIM1,rice induced by Magnaporthe grisea)和一个受稻瘟病菌抑制的编码腈水解酶 (Nitrilase)的 c DNA克隆(暂命名为... 以抗稻瘟病品系 G2 0 5为材料 ,应用 c DNA微阵列分别获得了一个受稻瘟病菌诱导的含 NBS- L RR的 c DNA克隆 (暂命名为 RIM1,rice induced by Magnaporthe grisea)和一个受稻瘟病菌抑制的编码腈水解酶 (Nitrilase)的 c DNA克隆(暂命名为 N IT) ,并通过 Northern得到证实。RFLP分析将 RIM1和 N IT分别定位于水稻第 2和第 3染色体上 ,它们均位于控制水稻稻瘟病部分抗性 展开更多
关键词 水稻 CDNA微阵列 腈水解酶 基因定位 稻瘟病
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太湖流域土壤微生物基因组总DNA分离纯化及其质粒文库的初步构建 被引量:6
14
作者 饶志明 赵有玺 +4 位作者 李辉 王正祥 沈微 方惠英 诸葛健 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 2004年第6期774-777,共4页
采用研磨 /冻融和SDS/蛋白酶K热处理以及CTAB处理等理化方法 ,直接从太湖流域土壤样品中抽提得到微生物总基因组DNA .所得粗DNA用透析袋法以及NucleaotrapsuspensionDNA纯化试剂盒进行了纯化 .纯化过的DNA能够满足常用限制性内切酶酶切... 采用研磨 /冻融和SDS/蛋白酶K热处理以及CTAB处理等理化方法 ,直接从太湖流域土壤样品中抽提得到微生物总基因组DNA .所得粗DNA用透析袋法以及NucleaotrapsuspensionDNA纯化试剂盒进行了纯化 .纯化过的DNA能够满足常用限制性内切酶酶切、细菌 16SrDNA通用引物和随机引物进行PCR扩增的要求 .将所得纯品DNA经过EcoRI部分酶切之后与酶切并脱磷酸的pSK-空载体连接 ,再以大肠杆菌JM10 9为宿主细胞初步构建了土壤微生物基因组文库 .图 6参 展开更多
关键词 太湖流域 土壤微生物 DNA分离纯化 质粒文库
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高效液相色谱测定发酵液中1,3-二羟基丙酮(DHA)方法的建立 被引量:9
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作者 饶志明 徐美娟 +2 位作者 沈微 方慧英 诸葛健 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期61-64,共4页
建立了简单且准确的测定1,3-二羟基丙酮(DHA)的高效液相色谱(HPLC)方法。以AlltimaC18(5μm,250×4.6mm)为分离柱,5%甲醇水溶液(0.05%H3PO4调pH至3.0),流速为1ml/min,用紫外检测器在200nm处检测DHA。结果测得DHA标准样品的保留时间... 建立了简单且准确的测定1,3-二羟基丙酮(DHA)的高效液相色谱(HPLC)方法。以AlltimaC18(5μm,250×4.6mm)为分离柱,5%甲醇水溶液(0.05%H3PO4调pH至3.0),流速为1ml/min,用紫外检测器在200nm处检测DHA。结果测得DHA标准样品的保留时间为6.2min,并测得DHA的线性范围为0.1~10.0g/L,用HPLC法测得以甘油为底物发酵产DHA发酵液中DHA含量为6.2g/L,并证明高效液相色谱法可有效应用于产DHA发酵过程中产物的检测。 展开更多
关键词 1 3-二羟基丙酮 高效液相色谱 检测
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基于氧化钛-氧化钇粉体催化发光甲醛气体传感器的研究 被引量:5
16
作者 饶志明 蔡亚萍 +2 位作者 方良周 修福荣 李顺兴 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2006年第6期832-834,共3页
研究了甲醛在TiO2-Y2O3(质量比为3: 1)粉体表面催化发光行为,发现基于这种催化剂的气体传感器对甲醛的检测具有高灵敏度和较强的选择性.在波长490 nm处进行定量分析,催化发光强度与甲醛浓度在一定范围内呈良好的线性关系,其线性范围... 研究了甲醛在TiO2-Y2O3(质量比为3: 1)粉体表面催化发光行为,发现基于这种催化剂的气体传感器对甲醛的检测具有高灵敏度和较强的选择性.在波长490 nm处进行定量分析,催化发光强度与甲醛浓度在一定范围内呈良好的线性关系,其线性范围为0.08~40 mL/m^3(r=0.9991,n=6);检出限为0.03 mL/m^3(S/N=3).外来物质如环己烷、正己烷、三氯甲烷、苯、乙醇、甲醇、乙醛、氨、水蒸气等与甲醛共存时,除了乙醇和氨分别引起干扰外,水蒸气与其它气体不干扰测定.该传感器工作时间可达80 h以上,是一种长寿命的、性能稳定的气体传感器,并成功地实现了对甲醛的实时在线检测. 展开更多
关键词 催化发光 甲醛 气体传感器 氧化钛-氧化钇粉体
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基因芯片技术在微生物学研究中的应用 被引量:7
17
作者 饶志明 张荣珍 +2 位作者 王正祥 方慧英 诸葛健 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 2003年第8期61-65,共5页
近年来 ,基因芯片技术的诞生使得在一个实验中就可以同时对成千上万个基因进行转录水平的表达和DNA同源性分析成为可能。该项技术已被应用于揭示许多微生物体的转录表达和基因组的差异 ,随着越来越多的微生物基因组全序列测定的完成 ,... 近年来 ,基因芯片技术的诞生使得在一个实验中就可以同时对成千上万个基因进行转录水平的表达和DNA同源性分析成为可能。该项技术已被应用于揭示许多微生物体的转录表达和基因组的差异 ,随着越来越多的微生物基因组全序列测定的完成 ,基因芯片正逐渐成为许多微生物学研究领域中的一项常规技术。归纳了该技术在微生物生理 ,致病性 ,流行病学 ,生态 ,进化 ,代谢工程及发酵优化等研究中的应用。 展开更多
关键词 基因芯片技术 微生物学 基因表达谱 基因组
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根癌农杆菌介导工业化产甘油假丝酵母的遗传转化 被引量:5
18
作者 饶志明 张君胜 +2 位作者 沈微 方慧英 诸葛健 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期868-871,共4页
通过构建质粒pCAM3300-zeocin,将其电击转化到根癌农杆菌LBA4404中.将含有目的质粒pCAM3300-zeocin的根癌农杆菌和工业化产甘油假丝酵母(Candida glycerinogenes)WL2002-5共培养,利用zeocin抗性基因为筛选标记,实现了pCAM3300-zeocin对... 通过构建质粒pCAM3300-zeocin,将其电击转化到根癌农杆菌LBA4404中.将含有目的质粒pCAM3300-zeocin的根癌农杆菌和工业化产甘油假丝酵母(Candida glycerinogenes)WL2002-5共培养,利用zeocin抗性基因为筛选标记,实现了pCAM3300-zeocin对产甘油假丝酵母的转化.并根据产甘油假丝酵母的生长特性,对转化条件进行了优化,在共培养时间为24h,产甘油假丝酵母和根癌农杆菌的细胞比例为1∶(500~1000)时最高转化率达到2个转化子/104个酵母细胞.初步建立了根癌农杆菌介导转化产甘油假丝酵母的转化方法. 展开更多
关键词 产甘油假丝酵母 转化 根癌农杆菌 zeocin基因
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农杆菌介导籼稻Xa21基因的转化及其遗传研究 被引量:4
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作者 饶志明 黄英金 +4 位作者 肖晗 潘晓云 廖军铖 刘宜柏 孙宗修 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 2003年第3期320-324,共5页
应用农杆菌介导转化体系 ,成功地将Xa2 1基因导入籼稻幼胚来源的愈伤组织 ,获得籼稻优良恢复系T461、优良常规品种粤香占和中 1 0 63个品种共 3 3个独立的转基因株系。PCR和Southern分析结果表明 ,Xa2 1基因已整合到转基因植株基因组中... 应用农杆菌介导转化体系 ,成功地将Xa2 1基因导入籼稻幼胚来源的愈伤组织 ,获得籼稻优良恢复系T461、优良常规品种粤香占和中 1 0 63个品种共 3 3个独立的转基因株系。PCR和Southern分析结果表明 ,Xa2 1基因已整合到转基因植株基因组中。接种分析表明 ,T0 代转基因植株的白叶枯病抗性得到不同程度的提高 ,转基因植株自交T1代白叶枯病抗性表现出分离 ,且大多为 1~ 2个整合位点的孟德尔方式遗传 ,与Southern分析结果一致。 展开更多
关键词 农杆菌介导 籼稻 XA21基因 转化 遗传
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谷氨酸棒杆菌高丝氨酸脱氢酶编码基因hom的敲除 被引量:6
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作者 饶志明 张君胜 +2 位作者 沈微 方慧英 诸葛健 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期59-63,共5页
以谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)标准菌株ATCC13032染色体为模板,设计引物PCR扩增高丝氨酸脱氢酶编码基因(hom),在hom基因内部插入一段来源于质粒pET28a的卡那霉素抗性基因(Km),得到基因元件hom::Km;通过电击转化法将hom::K... 以谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)标准菌株ATCC13032染色体为模板,设计引物PCR扩增高丝氨酸脱氢酶编码基因(hom),在hom基因内部插入一段来源于质粒pET28a的卡那霉素抗性基因(Km),得到基因元件hom::Km;通过电击转化法将hom::Km转入出发菌株替换原菌株的hom,在含卡那霉素的平板上挑取阳性转化子,通过PCR验证得到高丝氨酸脱氢酶缺陷的重组菌。发酵结果表明重组菌C.g-hom::Km-8发酵60h赖氨酸产量达到4.7g/L,是出发菌株谷氨酸棒杆菌ATCC13032(0.7g/L)的6.7倍。 展开更多
关键词 赖氨酸 高丝氨酸脱氢酶缺陷 谷氨酸棒杆菌
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