目的利用环状RNA(circular RNA,circRNA)分子表达NY-ESO-1抗原表位,并利用一种新型类脂材料C1制备circRNA肿瘤疫苗,初步评价其在细胞内的转染效率和对T细胞的激活情况。方法体外转录合成表达增强绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescen...目的利用环状RNA(circular RNA,circRNA)分子表达NY-ESO-1抗原表位,并利用一种新型类脂材料C1制备circRNA肿瘤疫苗,初步评价其在细胞内的转染效率和对T细胞的激活情况。方法体外转录合成表达增强绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)和NY-ESO-1抗原表位的mRNA和circRNA,并转染COS7细胞,体外检测目的蛋白的表达情况。利用C1材料和商用转染试剂TransIT-mRNA作为mRNANY-ESO-1和circRNANY-ESO-1的递送系统制备疫苗,比较其转染效率。结果mRNAEGFP、circRNAEGFP体外转染COS7细胞24 h后,荧光显微镜下可见明显的EGFP表达。mRNANY-ESO-1、circRNANY-ESO-1转染COS7-A*02:01细胞后可以刺激靶向NY-ESO-1/HLA-A2的T细胞受体工程化T细胞(T cell receptor-engineered T cells,TCR-T)分泌细胞因子IFN-γ。circRNANY-ESO-1能够更持久地表达目的抗原并刺激靶细胞释放IFN-γ,在体外对细胞株共培养的条件下,C1材料的递送效果较商用转染试剂好。结论相较于线性mRNA,circRNA转染COS7-A*02:01细胞后能够更有效、更持久地激活T细胞,未来可能是一种更适合用于临床治疗肿瘤的分子。类脂材料C1能够有效递送线性mRNA分子和circRNA分子。本研究为circRNA肿瘤疫苗的研究提供了新思路。展开更多
文摘目的利用环状RNA(circular RNA,circRNA)分子表达NY-ESO-1抗原表位,并利用一种新型类脂材料C1制备circRNA肿瘤疫苗,初步评价其在细胞内的转染效率和对T细胞的激活情况。方法体外转录合成表达增强绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)和NY-ESO-1抗原表位的mRNA和circRNA,并转染COS7细胞,体外检测目的蛋白的表达情况。利用C1材料和商用转染试剂TransIT-mRNA作为mRNANY-ESO-1和circRNANY-ESO-1的递送系统制备疫苗,比较其转染效率。结果mRNAEGFP、circRNAEGFP体外转染COS7细胞24 h后,荧光显微镜下可见明显的EGFP表达。mRNANY-ESO-1、circRNANY-ESO-1转染COS7-A*02:01细胞后可以刺激靶向NY-ESO-1/HLA-A2的T细胞受体工程化T细胞(T cell receptor-engineered T cells,TCR-T)分泌细胞因子IFN-γ。circRNANY-ESO-1能够更持久地表达目的抗原并刺激靶细胞释放IFN-γ,在体外对细胞株共培养的条件下,C1材料的递送效果较商用转染试剂好。结论相较于线性mRNA,circRNA转染COS7-A*02:01细胞后能够更有效、更持久地激活T细胞,未来可能是一种更适合用于临床治疗肿瘤的分子。类脂材料C1能够有效递送线性mRNA分子和circRNA分子。本研究为circRNA肿瘤疫苗的研究提供了新思路。
