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基于RAP1信号通路探讨右归丸延缓膝骨关节炎的软骨退变 被引量:1
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作者 范元赫 杨永菊 +2 位作者 马贤德 张宇 关雪峰 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2024年第4期137-142,I0035,I0036,共8页
目的通过右归丸治疗膝骨关节炎(KOA)模型大鼠,观察大鼠关节软骨形态及检测右归丸对RAP1信号通路表达和大鼠血清中的炎性因子表达,探讨右归丸对RAP1信号通路的表达及防治KOA的作用机制,为治疗提供理论基础。方法72只SPF级SD大鼠(雌雄各半... 目的通过右归丸治疗膝骨关节炎(KOA)模型大鼠,观察大鼠关节软骨形态及检测右归丸对RAP1信号通路表达和大鼠血清中的炎性因子表达,探讨右归丸对RAP1信号通路的表达及防治KOA的作用机制,为治疗提供理论基础。方法72只SPF级SD大鼠(雌雄各半)随机数字表法分为假手术组12只和造模组60只。造模组采用改良Hulth法建立膝关节OA模型,假手术组接受假手术。将造模成功的大鼠分为模型组(n=11)、右归丸低剂量组(n=12)、右归丸中剂量组(n=12)、右归丸高剂量组(n=12)及塞来昔布组(n=12)。给药阶段模型组、假手术组给予0.9%氯化钠溶液;右归丸低剂量组为等效浓度的1/2为0.5 g/d、右归丸中剂量组等效浓度为1 g/d、右归丸高剂量组为等效浓度2倍为2 g/d,塞来昔布组配置成悬浮(等效浓度为0.0072 g/d)。驱赶7周后检测并比较各组大鼠软骨病理,血清TNF-α、IL-1β和IL-18含量,以及大鼠软骨组织中RAP1、RAF、MEK1/2、ERK1/2、CREB、MMP3、MMP13、ADAMTS、C-fos、C-myc和C-Jun的表达水平。结果各组大鼠软骨病理检测结果显示:假手术组大鼠软骨组织未见异常,模型组大鼠关节软骨部分区域出现明显缺损,右归丸低剂量组大鼠关节软骨表面磨损较模型组有所减轻,而中、高剂量组及塞来昔布组大鼠软骨表面可见侵蚀现象明显改善。右归丸对KOA大鼠血清中的IL-1β、TNF-α、IL-18含量与模型组相比,右归丸高、中、低剂量组和塞来昔布组在大鼠血清中表达显著降低,差异具有统计学意义。与软骨组织中RAP1-RAF-MEKl/2-ERKl/2-CREB信号通路活化水平检测结果显示:与假手术组比较,模型组大鼠软骨组织中RAP1、RAF、MEK1/2、ERK1/2、CREB、MMP3、MMP13、ADAMTS、C-fos、C-myc和C-Jun的表达水平均显著升高,差异有显著统计学意义(P<0.01)。结果提示,在KOA发生时,RAP1-RAF-MEKl/2-ERKl/2-CREB信号转导通路激活,介导软骨组织中炎症反应及细胞凋亡的发生,这与以往研究结果一致。右归丸干预后,软骨组织中RAP1、RAF、MEK1/2、ERK1/2、CREB、MMP3、MMP13、ADAMTS、C-fos、C-myc和C-Jun蛋白表达水平均显著降低,差异有显著统计学意义(P<0.01)。结论右归丸能够抑制KOA大鼠软骨组织中RAP1-RAF-MEKl/2-ERKl/2-CREB信号通路的活化,降低炎性因子表达,从而延缓软骨退变。 展开更多
关键词 右归丸 骨关节炎 RAP1信号通路
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基于IL-6/JAK2/STAT3信号通路探讨灰树花提取物对溃疡性结肠炎大鼠结肠组织炎症反应的影响
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作者 金雪 马贤德 +5 位作者 赵卓 徐铭 王建光 杜晗 关洪全 韩晓伟 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期456-460,465,共6页
目的:探讨灰树花提取物通过调控白细胞介素6(IL-6)/蛋白酪氨酸激酶2(JAK2)/信号转导和激活因子3(STAT3)信号通路,对溃疡性结肠炎(UC)大鼠结肠组织炎症反应的影响及作用机制。方法:将40只SD大鼠随机分为空白对照组、UC模型组、灰树花治... 目的:探讨灰树花提取物通过调控白细胞介素6(IL-6)/蛋白酪氨酸激酶2(JAK2)/信号转导和激活因子3(STAT3)信号通路,对溃疡性结肠炎(UC)大鼠结肠组织炎症反应的影响及作用机制。方法:将40只SD大鼠随机分为空白对照组、UC模型组、灰树花治疗组、西药治疗组、联合治疗组,每组8只。采用3%DSS自由饮用法7 d建立UC大鼠模型后,治疗组分别灌胃灰树花提取物10 mg/(kg·d)、柳氮磺吡啶0.3 g/(kg·d)及等量两种药物,连续14 d。实验期间观察大鼠一般状态,计算疾病活动指数(DAI)评分;采用HE染色法观察大鼠结肠组织病理改变;Western blot检测大鼠结肠组织IL-6、JAK2、STAT3、pSTAT3蛋白表达水平;ELISA检测大鼠血清中IL-6含量;免疫组化法测定大鼠结肠组织中IL-6R、MPO蛋白含量及表达情况。结果:与空白对照组比较,UC模型组大鼠一般状态欠佳,DAI评分升高,HE染色可见明显的组织黏膜损伤与炎症细胞浸润;结肠组织IL-6、JAK2、STAT3、p-STAT3蛋白表达水平及IL-6R、MPO含量均显著升高(P<0.01);血清中IL-6含量显著升高(P<0.01),差异有统计学意义。与UC模型组比较,各治疗组大鼠的一般状态均有所改善,DAI评分降低,HE染色可见黏膜损伤有不同程度改善,偶见炎症细胞浸润;结肠组织IL-6、JAK2、STAT3、p-STAT3蛋白表达水平显著降低(P<0.01),结肠组织IL-6R和MPO含量及血清中IL-6含量均明显减少(P<0.01或P<0.05),差异有统计学意义。结论:灰树花提取物可通过调控IL-6/JAK2/STAT3信号通路相关因子表达,减轻UC大鼠结肠组织炎症反应。 展开更多
关键词 灰树花提取物 溃疡性结肠炎 白细胞介素6 蛋白酪氨酸激酶2 信号转导及转录激活蛋白3
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从自噬机制探讨眼针防治脑缺血再灌注损伤的研究进展
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作者 何树诺 马贤德 +3 位作者 徐畅 赵甲秀 王哲 张威 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2024年第10期135-138,共4页
自噬是经典的细胞死亡途径,在缺血、缺氧、营养物质匮乏等应激条件下被激活,适度自噬可以清除受损细胞内细胞器和错误折叠的蛋白质,超出细胞承受程度的自噬则会导致细胞死亡,自噬在细胞生存、分化、发育及内环境稳态等方面发挥重要作用... 自噬是经典的细胞死亡途径,在缺血、缺氧、营养物质匮乏等应激条件下被激活,适度自噬可以清除受损细胞内细胞器和错误折叠的蛋白质,超出细胞承受程度的自噬则会导致细胞死亡,自噬在细胞生存、分化、发育及内环境稳态等方面发挥重要作用。眼针可以通过抗细胞凋亡、抗内质网应激、抗氧化应激等通路调节自噬机制,改善脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia reperfusion injury,CIRI)。通过检索中国知网数据库、万方数据库、NCBI数据库从建库到2023年12月7日有关CIRI激活自噬的文献,结合眼针防治CIRI相关实验数据进行分析,总结CIRI与自噬之间机制及其在眼针防治CIRI过程中发挥的作用,为进一步科研及临床推广眼针治疗提供依据。 展开更多
关键词 眼针 自噬 脑缺血再灌注损伤
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基于血管新生机制探讨缺血性中风 被引量:1
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作者 朱娜 马贤德 刘树权 《实用中医内科杂志》 2024年第4期55-59,共5页
中风病又称卒中,其中缺血性中风约占所有中风患者的80%。当向大脑供应富氧血液的动脉阻塞并且氧气无法到达大脑组织时,就会发生缺血性中风。血管新生有助于侧支循环的建立,在缺血性脑卒中损伤的恢复中起着关键作用,故缺血性卒中发生后,... 中风病又称卒中,其中缺血性中风约占所有中风患者的80%。当向大脑供应富氧血液的动脉阻塞并且氧气无法到达大脑组织时,就会发生缺血性中风。血管新生有助于侧支循环的建立,在缺血性脑卒中损伤的恢复中起着关键作用,故缺血性卒中发生后,如何减轻缺血损伤及促进缺血区域血管生成,及时恢复大脑供血成为治疗的研究热点。文章综述了与缺血性中风血管生成相关的调控因子,以及促血管生成的中医药的种类和作用机制,为血管新生途径治疗缺血性中风提供理论基础。 展开更多
关键词 缺血性中风 血管生成 调控因子 中医药
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归脾汤对化疗肌无力大鼠抗炎机制的实验研究
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作者 宋予馨 雷萍 +2 位作者 魏东升 王艺 马贤德 《海南医学院学报》 CAS 北大核心 2024年第12期921-929,共9页
目的:结合课题组前期网络药理学及生物信息学分析结果,探讨归脾汤改善化疗肌无力的抗炎机制。方法:选取40只SPF级雄性SD大鼠按随机数字表法分为空白组、模型组、归脾汤低、中、高剂量组,每组8只。腹腔注射5‑氟尿嘧啶(28 mg/kg)连续5 d,... 目的:结合课题组前期网络药理学及生物信息学分析结果,探讨归脾汤改善化疗肌无力的抗炎机制。方法:选取40只SPF级雄性SD大鼠按随机数字表法分为空白组、模型组、归脾汤低、中、高剂量组,每组8只。腹腔注射5‑氟尿嘧啶(28 mg/kg)连续5 d,建立化疗肌无力模型,归脾汤低、中、高剂量组灌胃(0.5、1、2 g/mL),连续干预14 d。记录各组大鼠体质量及抓力,免疫荧光法检测腓肠肌组织中活性氧(ROS)表达水平;免疫组织化学法检测腓肠肌组织中缺氧诱导因子‑1α(HIF‑1α)蛋白表达;蛋白免疫印迹法检测腓肠肌组织中炎性因子IL‑1β、IL‑6、TNF‑α、趋化因子受体CCR1、CCR2、CCR7、CXCR‑4及TNF家族受体TNFR1、TRAF6蛋白表达情况。结果:与空白组相比,模型组大鼠体质量及抓力显著降低(均P<0.01);腓肠肌ROS产生显著增多(P<0.01);组化结果显示HIF‑1α表达升高(P<0.01);IL‑1β、IL‑6、TNF‑α、CCR1、CCR2、CCR7、CXCR‑4、TNFR1、TRAF6蛋白表达显著升高(P<0.01);与模型组比较,归脾汤低、中、高剂量组腓肠肌ROS产生显著减少(P<0.01);HIF‑1α蛋白表达显著升高(P<0.01)。IL‑1β、IL‑6、TNF‑α、CCR1、CCR2、CCR7、CXCR‑4、TNFR1和TRAF6蛋白表达显著减少(P<0.05)。结论:归脾汤可能通过抑制肌肉内炎症水平,诱导HIF‑1α的激活以对抗炎症所致的氧化应激,从而达到缓解化疗肌无力的作用。 展开更多
关键词 化疗 肌无力 归脾汤 炎症 TNF家族受体 趋化因子受体
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基于PERK-eIF2α信号通路探讨眼针对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织Atg12表达的影响 被引量:3
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作者 赵甲秀 潘茜 +7 位作者 于丹 王莹 邰东梅 马贤德 徐畅 何树诺 张威 王哲 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2023年第10期60-63,I0013,共5页
目的 通过检测各组脑组织中磷酸化蛋白激酶R样内质网激酶(phosphorylation protein kinase-like ER kinase, p-PERK)、磷酸化真核起始因子2α(phosphorylated α subunit of eukaryotic initiation factor 2,p-eIF2α)、自噬相关基因12(... 目的 通过检测各组脑组织中磷酸化蛋白激酶R样内质网激酶(phosphorylation protein kinase-like ER kinase, p-PERK)、磷酸化真核起始因子2α(phosphorylated α subunit of eukaryotic initiation factor 2,p-eIF2α)、自噬相关基因12(antigen, Atg12)蛋白表达水平的变化,探讨眼针是否能够通过调控内质网应激信号通路PERK-eIF2α影响脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia reperfusion injury, CIRI)大鼠脑组织Atg12的表达。方法 建立大鼠脑缺血再灌注损伤模型,实验分为4组,即:对照组、假手术组、模型组、眼针组。末次针刺后,对各组大鼠进行神经功能缺损评分,透射电镜观察各组大鼠自噬小体的表达情况,然后采用Western blot法检测脑组织中p-PERK、p-eIF2α、Atg12蛋白表达。结果 与对照组和假手术组相比,模型组大鼠神经功能缺损评分、脑组织中p-PERK、p-eIF2α、Atg12蛋白表达均升高,差异具有统计学意义(P<0.01),自噬小体数量增多;与模型组相比,眼针组大鼠神经功能缺损评分、脑缺血组织中p-PERK、p-eIF2α、Atg12的蛋白表达明显降低,差异具有统计学意义(P<0.01),自噬小体数量减少。结论 眼针能够降低脑缺血再灌注损伤模型大鼠脑组织自噬蛋白Atg12的表达,其机制可能与调控内质网应激通路PERK-eIF2α有关。 展开更多
关键词 脑缺血再灌注损伤 眼针疗法 PERK-eIF2α通路 Atg12
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益糖康调控2型糖尿病大鼠脂肪组织TLR4/MyD88/NF-κB通路实验研究 被引量:2
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作者 姜楠 于嘉祥 +4 位作者 马贤德 杨宇峰 冀天威 张文顺 石岩 《辽宁中医药大学学报》 CAS 2023年第3期14-18,共5页
目的观察益糖康对2型糖尿病大鼠脂肪组织TLR4/MyD88/NF-κB通路的影响,探讨益糖康对2型糖尿病的抗炎作用机制。方法将SPF级SD大鼠按照随机数字表法随机分为正常对照组(不做处理),模型组(蒸馏水,5 mL/kg),益糖康组(益糖康汤剂,5 g/kg)和... 目的观察益糖康对2型糖尿病大鼠脂肪组织TLR4/MyD88/NF-κB通路的影响,探讨益糖康对2型糖尿病的抗炎作用机制。方法将SPF级SD大鼠按照随机数字表法随机分为正常对照组(不做处理),模型组(蒸馏水,5 mL/kg),益糖康组(益糖康汤剂,5 g/kg)和二甲双胍组(150 mg/kg),每组10只。所有大鼠给药途径均为经口灌胃,每日1次,连续4周。干预4周后,称量各组大鼠的体质量,快速血糖仪测定各组大鼠空腹血糖(FPG),手工法测定各组大鼠血清中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量,称量白色脂肪(WAT)和棕色脂肪(BAT)总质量,并计算脂肪指数。酶联免疫吸附法检测肠黏膜组织中脂多糖(LPS)含量,脂肪组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,Western-blot法检测脂肪组织中Toll样受体4(TLR4)、髓样分化蛋白88(MyD88)、核转录因子-κB(NF-κB)蛋白表达水平。结果与正常对照组比较,其余3组大鼠的体质量,FPG、TG、TC、LDL-C、WAT、TNF-α含量,TLR4、MyD88、NF-κB表达水平均显著升高(P<0.01);HDL-C、BAT的水平均显著降低(P<0.01)。与模型组比较,益糖康组大鼠体质量显著升高(P<0.01),二甲双胍组没有显著差异(P>0.05),益糖康组和二甲双胍组大鼠FPG、TG、TC、LDL-C、WAT、TNF-α含量以及脂肪组织中TLR4、MyD88、NF-κB表达水平均显著降低(P<0.01),HDL-C、BAT的水平显著升高(P<0.01)。益糖康组大鼠体质量显著高于二甲双胍组(P<0.01)外,其余指标益糖康组和二甲双胍组之间比较均没有显著差异(P>0.05)。结论益糖康可能通过降低肠黏膜中LPS的含量进而抑制脂肪组织中TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的过度活化,发挥抗炎作用,最终实现调控糖脂代谢的作用。 展开更多
关键词 益糖康 脂多糖 TLR4/MyD88/NF-κB通路 脂肪组织炎症 2型糖尿病
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基于自噬蛋白ATG的表达探讨川芎嗪对药物性聋大鼠耳蜗自噬水平的干预机制
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作者 冷辉 刘传丽 +2 位作者 马贤德 张琦 王爱平 《中国耳鼻咽喉头颈外科》 CSCD 2023年第11期710-714,共5页
目的采用顺铂腹腔注射的方法制作药物性聋大鼠模型,并使用川芎嗪进行干预,观察川芎嗪对耳聋模型大鼠耳蜗组织自噬相关蛋白5(ATG5)、ATG12和ATG16表达水平的影响,探讨川芎嗪对药物性聋大鼠耳蜗自噬的干预机制。方法将110只大鼠适应性饲养... 目的采用顺铂腹腔注射的方法制作药物性聋大鼠模型,并使用川芎嗪进行干预,观察川芎嗪对耳聋模型大鼠耳蜗组织自噬相关蛋白5(ATG5)、ATG12和ATG16表达水平的影响,探讨川芎嗪对药物性聋大鼠耳蜗自噬的干预机制。方法将110只大鼠适应性饲养7 d后,随机分配成两组,空白组(n=45)和模型组(n=65),空白组和模型组分别注射等量的生理盐水和顺铂,连续7 d后,两组随机抽取5只大鼠进行模型评价。余下的空白组随机分配为空白对照组和川芎嗪对照组各20只,模型组随机分配为模型对照组,川芎嗪治疗组和抑制剂组各20只。空白对照组和模型对照组按照腹腔注射5 mg/(kg·d)的生理盐水,连续7 d。川芎嗪对照组和川芎嗪治疗组按照腹腔注射140 mg/(kg·d)的顺铂,连续7 d。抑制剂组按照腹腔注射30 mg/(kg·d)的3-MA抑制剂,连续7 d。通过光镜观察耳蜗毛细胞排列情况;免疫组化和Western-blot法检测自噬蛋白ATG5、ATG12和ATG16表达水平。结果通过听性脑干反应(ABR)模型评价检测结果显示,与空白组大鼠右耳检测数据中ABR阈值相比较,模型组ABR阈值显著提高(P<0.01)。免疫组化和Western-blot法显示,与空白对照组和川芎嗪对照组比较,模型对照组和川芎嗪治疗组大鼠耳蜗组织中自噬相关蛋白表达水平升高(P<0.05);与模型对照组比较,川芎嗪治疗组大鼠耳蜗组织中自噬相关蛋白表达水平升高(P<0.01);与模型对照组和川芎嗪治疗组比较,抑制剂组大鼠耳蜗组织中自噬相关蛋白表达水平降低(P<0.01),均有统计学意义。结论川芎嗪可能是通过上调自噬蛋白ATG5、ATG12和ATG16的表达水平,提高耳蜗组织中的自噬水平,从而实现治疗药物性聋的目的。 展开更多
关键词 顺铂 自噬 川芎嗪 自噬相关蛋白
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中药复方益糖康对糖尿病大鼠视网膜血管内皮生长因子、色素上皮衍生因子表达的影响 被引量:2
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作者 周晶 张瀚文 +2 位作者 马贤德 石岩 杨宇峰 《辽宁中医杂志》 CAS 2023年第4期187-190,I0007,I0008,共6页
目的 通过观察中药复方益糖康对糖尿病大鼠视网膜组织中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)与色素上皮衍生因子(pigment epithelium-derived factor, PEDF)表达的影响,探讨中药复方益糖康对糖尿病大鼠视网膜... 目的 通过观察中药复方益糖康对糖尿病大鼠视网膜组织中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)与色素上皮衍生因子(pigment epithelium-derived factor, PEDF)表达的影响,探讨中药复方益糖康对糖尿病大鼠视网膜的作用机制。方法 从80只SD大鼠中随机选取20只作为空白对照组。其余60只以腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin, STZ)溶液,小剂量、多次诱导的方法复制2型糖尿病大鼠模型,并随机分为中药组、西药组、模型组进行不同干预。中药组和西药组分别给予中药复方益糖康和羟苯磺酸钙进行灌胃,模型组及空白对照组给予相同体积生理盐水灌胃,连续给药12周观察大鼠血糖、视网膜结构变化及大鼠视网膜组织VEGF、PEDF蛋白的表达情况。结果 与空白对照组相比较,其余3组大鼠空腹血糖(fasting blood glucose, FBG)显著升高,3组大鼠视网膜组织中VEGF水平明显升高,PEDF水平均降低;给予药物干预后,与模型组相比较,中药组大鼠FBG则显著降低,大鼠视网膜组织中VEGF表达水平均显著下降,而PEDF蛋白的表达水平明显上升。结论 中药复方益糖康对糖尿病大鼠视网膜的保护作用是通过下调VEGF、上调PEDF的表达来实现的。 展开更多
关键词 中药复方益糖康 糖尿病视网膜病变 VEGF PEDF
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眼针联合运动疗法改善脑缺血再灌注损伤大鼠脑水肿干预机制的实验研究 被引量:2
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作者 姜宇晴 张威 +2 位作者 石冬一 马贤德 任路 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2023年第7期121-126,I0024,共7页
目的 观察眼针联合被动运动疗法对脑缺血再灌注损伤(Cerebral ischemia-reperfusion injury, CIRI)大鼠神经功能缺损评分的改善作用,探讨眼针联合运动疗法对CIRI大鼠血脑屏障保护作用的机制。方法 SPF级SD大鼠80只,采用随机数字法将大... 目的 观察眼针联合被动运动疗法对脑缺血再灌注损伤(Cerebral ischemia-reperfusion injury, CIRI)大鼠神经功能缺损评分的改善作用,探讨眼针联合运动疗法对CIRI大鼠血脑屏障保护作用的机制。方法 SPF级SD大鼠80只,采用随机数字法将大鼠随机分为两组:假手术组(15只)和造模组(65只)。然后采用线栓法对造模组大鼠进行CIRI模型复制,模型评价后,剔除造模失败大鼠,将符合成模标准的50只大鼠再次随机分为模型对照组(13只)、眼针组(12只)、运动组(12只)、眼针联合运动组(13只)。造模后,待大鼠完全清醒后,对各组大鼠施加相应的干预因素,每8 h干预1次,连续3 d。末次干预后,进行神经功能缺损评分,各组随机抽取3只大鼠进行血脑屏障通透性检测;随机抽取3只大鼠进行脑含水量检测;随机抽取3只大鼠,采用过量的10%水合氯醛腹腔注射麻醉处死,迅速将大鼠置于冰面上,开颅取全脑,置于4%多聚甲醛溶液中固定,最后各组剩余的大鼠处死后,采集大鼠脑皮质缺血灶周围半暗带脑组织,冻存于-80℃冰箱中,采用免疫组化法和免疫印迹法(Western blot)检测脑组织中缺氧诱导因子(hypoxia inducible factor-1,HIF-1)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)、基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)、紧密连接蛋白(zonula occludens 1,ZO-1)、紧密连接蛋白5(Claudin-5)的表达水平。结果 与假手术组比较,其余各组大鼠神经功能缺损评分、脑组织含水量、依文思蓝渗出量、HIF-1α、VEGF、MMP-2、MMP-9表达水平均显著升高(P<0.01),ZO-1、Claudin-5表达水平显著降低(P<0.01),差异有统计学意义;与模型对照组比较,眼针组、运动组和眼针联合运动组大鼠神经功能缺损评分、依文思蓝渗出量、HIF-1α、VEGF、MMP-2、MMP-9表达水平均显著降低(P<0.05),ZO-1、Claudin-5表达水平显著升高(P<0.01);眼针联合运动组大鼠依文思蓝渗出量显著降低(P<0.05),差异有统计学意义;与眼针组和运动组比较,眼针联合运动组大鼠神经功能缺损评分、脑组织含水量、依文思蓝渗出量、HIF-1α、VEGF、MMP-2、MMP-9均显著降低(P<0.05),ZO-1、Claudin-5表达水平显著升高(P<0.01),差异有统计学意义。结论 眼针联合运动疗法对CIRI大鼠的血脑屏障保护作用机制与其调控HIF-1α关键靶点及其下游蛋白表达水平密切相关。 展开更多
关键词 脑缺血再灌注 眼针联合运动 血脑屏障 HIF-1Α
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川芎嗪对顺铂耳毒性大鼠耳蜗组织Nrf2/NQO1信号通路相关蛋白表达影响 被引量:1
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作者 金婧 马贤德 +5 位作者 舒福 张琦 曲中源 马梽轩 冷辉 石磊 《辽宁中医药大学学报》 CAS 2023年第2期28-32,共5页
目的探讨川芎嗪(即四甲基吡嗪,tetramethylpyrazine,TMP)对顺铂耳毒性大鼠的作用机制,以及血清中谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)含量变化、耳蜗组织中肌腱膜纤维肉瘤癌基因(musculoaponeurotic fibrosarcoma,Maf)... 目的探讨川芎嗪(即四甲基吡嗪,tetramethylpyrazine,TMP)对顺铂耳毒性大鼠的作用机制,以及血清中谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)含量变化、耳蜗组织中肌腱膜纤维肉瘤癌基因(musculoaponeurotic fibrosarcoma,Maf)、血红素氧合酶1(HO-1)和还原型辅酶/醌氧化还原酶(NQO1)蛋白表达对其的影响。方法采用腹腔注射顺铂(4 mg/kg)诱导顺铂耳毒性大鼠模型。将大鼠随机分为空白对照组、空白+TMP组、模型对照组(M组)、模型+TMP组。通过比较大鼠听性脑干反应(auditory brainstem response,ABR)听力阈值的变化、基底膜铺片技术观察内耳毛细胞纤毛形态变化(硝酸银染色),评估TMP对顺铂耳毒性大鼠耳蜗毛细胞结构的影响。比色法测定大鼠血清中GSH-Px含量变化。Western blot检测法检测各组大鼠耳蜗组织中Maf、HO-1和NQO1的表达变化。结果与空白组相比,模型组大鼠血清中抗氧化酶GSH-Px活性显著下降(P<0.05),耳蜗组织中Maf、NQO1和HO-1基因表达均呈上升趋势;与模型对照组比较,模型+TMP组能够显著提高药物性耳聋大鼠血清中抗氧化酶GSH-Px(P<0.05)活性,增加耳蜗组织中Maf,NQO1和HO-1的蛋白的相对表达(P<0.05)。结论TMP对药物性耳聋大鼠病理损伤具有恢复作用,其机制可能与血清中GSH-Px含量变化和Nrf2/NQO1信号通路相关蛋白的表达有关。 展开更多
关键词 川芎嗪 氧化应激 药物性耳聋 Nrf2/NQO1
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“观眼识病,兼疗众疾”——眼针疗法的渊源、特色与传承 被引量:1
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作者 衣忠雪 咸楠星 +3 位作者 王哲 田维柱 马贤德 张威 《中医药学报》 CAS 2023年第12期46-50,共5页
眼针疗法是一种在眼眶内外特定的穴区进行针刺的微针疗法,由已故针灸名家彭静山教授创立。眼针疗法始终秉持传承创新的理念,在理论创新、临床研究、基础研究、标准化制定、国内外学术交流方面不懈努力。本文从眼针疗法的学术渊源、学术... 眼针疗法是一种在眼眶内外特定的穴区进行针刺的微针疗法,由已故针灸名家彭静山教授创立。眼针疗法始终秉持传承创新的理念,在理论创新、临床研究、基础研究、标准化制定、国内外学术交流方面不懈努力。本文从眼针疗法的学术渊源、学术特色、学术传承方面,探讨眼针疗法的建立、传承与发展情况,为进一步推进眼针疗法的研究和传承奠定基础。 展开更多
关键词 眼针疗法 微针疗法 观眼识病 彭静山
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化瘀明目方含药血清对高糖诱导的HRMECs功能紊乱模型血管形成的作用及机制研究
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作者 马孝秋 左韬 +1 位作者 马贤德 赵磊 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期1668-1677,共10页
目的探究化瘀明目方含药血清对高糖诱导的人视网膜微血管内皮细胞(Human retinal microvascular endothelial cells,HRMECs)血管形成的影响及可能机制。方法CCK-8法筛选合适的糖浓度和含药血清体积分数,建立单纯高糖因素诱导的HRMECs功... 目的探究化瘀明目方含药血清对高糖诱导的人视网膜微血管内皮细胞(Human retinal microvascular endothelial cells,HRMECs)血管形成的影响及可能机制。方法CCK-8法筛选合适的糖浓度和含药血清体积分数,建立单纯高糖因素诱导的HRMECs功能紊乱模型。将HRMECs分为6组,正常对照组予以正常ECM培养基(含5.5 mmol·L^(-1)葡萄糖)+10%空白血清;甘露醇对照组、模型组在正常对照组基础上分别加入19.5 mmol·L^(-1)甘露醇、19.5 mmol·L^(-1)D-葡萄糖;化瘀明目方低、中、高剂量组在模型组基础上分别加入10%低、中、高剂量含药血清(不加空白血清)。克隆实验检测细胞集落形成数,Transwell实验检测细胞迁移数,管腔形成实验检测细胞成管数,免疫荧光实验、Western Blot实验和RT-PCR实验检测第八因子(FactorⅧ)、血小板内皮细胞黏附分子1(CD31)、细胞分化因子(CD34)、血管内皮生长因子A(VEGFA)、血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)蛋白及mRNA表达水平。结果与正常对照组比较,模型组能够促进HRMECs集落形成(P<0.01)、细胞迁移(P<0.01)、管腔形成(P<0.01),FactorⅧ、CD31、CD34、VEGFA、VEGFR2蛋白及mRNA表达水平明显升高(P<0.01);与模型组比较,化瘀明目方低、中、高剂量含药血清抑制HRMECs集落形成(P<0.05,P<0.01)、细胞迁移(P<0.01)、管腔形成(P<0.05,P<0.01),FactorⅧ、CD31、CD34、VEGFA、VEGFR2蛋白及mRNA表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01);正常对照组与甘露醇对照组间各项检测的差异均无统计学意义(P>0.05)。结论化瘀明目方含药血清能够抑制高糖诱导下HRMECs细胞的增殖、迁移和管腔形成,预防或减轻血管新生,其机制可能与调控VEGFA/VEGFR2信号通路有关。 展开更多
关键词 化瘀明目方 糖尿病视网膜病变 人视网膜微血管内皮细胞(HRMECs) 血管新生 高糖
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线栓法制备大鼠脑缺血再灌注模型的方法研究 被引量:101
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作者 马贤德 孙宏伟 +1 位作者 柴纪严 赵金茹 《中华中医药学刊》 CAS 2009年第6期1200-1201,共2页
目的:建立一种比较系统,操作简单,成功率高的大鼠大脑中动脉缺血(MACO)再灌注动物模型,达到只要读者根据本文所述的方法操作就能制作出MACO再灌注模型的目的。方法:成年健康雄性SD大鼠40只,参照Longa法并适当改进建立MACO模型20只,假手... 目的:建立一种比较系统,操作简单,成功率高的大鼠大脑中动脉缺血(MACO)再灌注动物模型,达到只要读者根据本文所述的方法操作就能制作出MACO再灌注模型的目的。方法:成年健康雄性SD大鼠40只,参照Longa法并适当改进建立MACO模型20只,假手术组20只。将详细叙述手术过程以及再灌注时间点的合理选择。最后利用行为学测试、四氮唑(TTC)染色对模型成功与否进行判定。结论:线栓法是一种操作简单的制备MACO再灌注动物模型的方法,并且此方法的再灌注效果较为明显。 展开更多
关键词 动物模型 脑缺血 再灌注 线栓法
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川芎嗪激活Keap1/Nrf2通路抗顺铂致聋模型大鼠氧化应激损伤的作用研究
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作者 舒福 冷辉 +5 位作者 马贤德 王爱平 曲中源 马梽轩 金婧 石磊 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期443-448,共6页
目的探讨川芎嗪基于Keap1/Nrf2通路对顺铂致聋模型大鼠氧化应激损伤的作用及机制。方法80只Wistar大鼠随机均分为空白组(B组)与模型组(M组),M组大鼠腹腔注射顺铂4 mg·kg^(-1)·d^(-1)构建药物性聋模型后,将B组与M组各自再随机... 目的探讨川芎嗪基于Keap1/Nrf2通路对顺铂致聋模型大鼠氧化应激损伤的作用及机制。方法80只Wistar大鼠随机均分为空白组(B组)与模型组(M组),M组大鼠腹腔注射顺铂4 mg·kg^(-1)·d^(-1)构建药物性聋模型后,将B组与M组各自再随机均分为2组,分别是:空白对照组(BC组),空白+川芎嗪组(BC+TMP组),模型对照组(MC组),模型+川芎嗪组(MC+TMP组)。BC+TMP组和MC+TMP组腹腔注射川芎嗪140 mg·kg^(-1)·d^(-1),BC组和MC组腹腔注射等量生理盐水,均每日1次,连续2周。行ABR检测后用比色法检测各组大鼠血清中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD),运用蛋白质印迹法检测各组大鼠耳蜗组织中Keap1、Nrf2、p-Nrf2的蛋白表达水平,运用免疫荧光双标技术检测各组大鼠耳蜗组织中Keap1、Nrf2、Keap1/Nrf2共表达水平。结果M组大鼠ABR阈值明显高于B组(P<0.05),M组大鼠耳蜗毛细胞出现大量溶解破坏等病理改变;MC+TMP组ABR阈值低于MC组(P<0.05),其耳蜗毛细胞损伤程度低于MC组。与BC组比较,MC组大鼠血清中MDA含量明显升高(P<0.05),SOD活性水平明显降低(P<0.05)。与MC组比较,MC+TMP组大鼠MDA含量明显更低(P<0.05),SOD活性水平明显更高(P<0.05)。MC组Nrf2与p-Nrf2蛋白表达水平较BC组明显升高(P<0.05),MC+TMP组的Nrf2与p-Nrf2蛋白表达水平明显高于MC组(P<0.05);MC组Keap1蛋白表达水平较BC组明显升高(P<0.05),MC+TMP组Keap1蛋白表达水平明显低于MC组(P<0.05)。免疫荧光双标结果显示,MC组Keap1、Nrf2、Keap1与Nrf2共表达水平较BC组明显升高(P<0.05),MC+TMP组的Keap1表达水平明显低于MC组(P<0.05),Nrf2、Keap1与Nrf2共表达水平明显高于MC组(P<0.05)。结论顺铂可导致大鼠耳蜗毛细胞损伤,川芎嗪可通过激活Keap1/Nrf2通路减轻顺铂所致大鼠耳蜗组织的氧化应激损伤,从而发挥对耳蜗毛细胞的保护作用。 展开更多
关键词 川芎嗪 Keap1/Nrf2通路 顺铂 氧化应激
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眼针对MCAO/R大鼠大脑缺血区半暗带脑组织中BDNF和TrkB表达的影响及其脑保护作用机制 被引量:21
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作者 马贤德 侯殿东 张威 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期549-553,I0002,共6页
目的:观察眼针对局灶性大脑中动脉缺血再灌注(MCAO/R)模型大鼠大脑缺血区半暗带脑组织中脑原性神经生长因子(BDNF)和酪氨酸激酶受体B(TrkB)表达水平的影响,探讨眼针对缺血性脑病的脑保护作用机制。方法:62只SD大鼠随机分为空白对照组(11... 目的:观察眼针对局灶性大脑中动脉缺血再灌注(MCAO/R)模型大鼠大脑缺血区半暗带脑组织中脑原性神经生长因子(BDNF)和酪氨酸激酶受体B(TrkB)表达水平的影响,探讨眼针对缺血性脑病的脑保护作用机制。方法:62只SD大鼠随机分为空白对照组(11只)、假手术组(11只)和模型复制组(40只)。模型复制组大鼠采用线栓法建立脑缺血再灌注模型,将模型复制成功的大鼠(32只)随机分为模型组(16只)及眼针组(16只);眼针组大鼠参照人体取穴方法,取肝区、上焦区、下焦区和肾区进行针刺干预。再灌注后2h即开始针刺,每8h1次,连续针刺10次,末次干预后30min,断髓处死大鼠,剥离缺血区域周围半暗带部位的脑组织,采用RTPCR和Western blotting法检测大鼠脑组织中BDNF和TrkB mRNA及蛋白表达水平。结果:与空白对照组比较,假手术组大鼠半暗带脑组织中BDNF和TrkB mRNA和蛋白表达水平均无明显变化(P>0.05);与假手术组比较,模型组大鼠半暗带脑组织中BDNF和TrkB mRNA和蛋白表达水平均升高(P<0.01);与模型组比较,眼针组MCAO/R模型大鼠半暗带脑组织中BDNF和TrkB mRNA和蛋白表达水平上升(P<0.05或P<0.01)。结论:脑缺血再灌注损伤发生后可促进BDNF及其受体TrkB表达以对抗损伤。眼针可通过上调BDNF及其受体TrkB表达水平实现其脑保护作用。 展开更多
关键词 眼针 脑缺血再灌注 脑源性神经生长因子 酪氨酸激酶受体B
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山茱萸对苯扎氯铵诱导的干眼症小鼠结膜、角膜及泪腺炎性因子调控的作用研究 被引量:11
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作者 马贤德 刘洋 +3 位作者 李睿 刘昱麟 宫照东 姜开运 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期1329-1335,共7页
目的观察山茱萸对干眼症模型小鼠的干预作用,探讨山茱萸对干眼症模型小鼠的抗炎作用机制。方法60只BALB/c小鼠随机分为6组,每组10只,分别为:空白对照组、模型对照(生理盐水,20 mL·kg^-1)组、阳性对照(石斛夜光丸,2.5 g·kg^-1... 目的观察山茱萸对干眼症模型小鼠的干预作用,探讨山茱萸对干眼症模型小鼠的抗炎作用机制。方法60只BALB/c小鼠随机分为6组,每组10只,分别为:空白对照组、模型对照(生理盐水,20 mL·kg^-1)组、阳性对照(石斛夜光丸,2.5 g·kg^-1)组、低剂量(山茱萸水煎剂,12 g·kg^-1)组、中剂量(山茱萸水煎剂,24 g·kg^-1)组、高剂量(山茱萸水煎剂,48 g·kg^-1)组。除空白对照组外,其余各组小鼠均采用苯扎氯铵滴眼法诱导干眼症模型小鼠,然后灌胃相应药物,每日1次,连续4周。通过检测各组小鼠泪液分泌量、泪膜破裂时间,评价山茱萸水煎剂对干眼症模型小鼠的干预作用。采用Western Blot法检测结膜及角膜组织中白细胞介素1β(Interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素6(Interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子α(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)表达水平;采用免疫组织化学法检测各组小鼠泪腺组织中IL-1β、IL-6、TNF-α表达水平。结果泪液质量检测结果:药物干预前,与空白对照组比较,模型复制的5组小鼠泪液测试滤纸湿润长度、泪膜破裂时间显著减小(P<0.01);模型复制的5组小鼠组间差异无统计学意义(P>0.05)。药物干预后,与空白对照组比较,其余5组小鼠泪液测试滤纸湿润长度、泪膜破裂时间均显著缩短(P<0.01);与模型对照组比较,各药物干预组小鼠泪液测试滤纸湿润长度、泪膜破裂时间均不同程度增加(P<0.01)。结膜及角膜IL-1β、IL-6、TNF-α表达检测结果:药物干预后,与空白对照组比较,模型对照组小鼠结膜及角膜组织中IL-1β、IL-6、TNF-α的表达水平显著升高(P<0.01);与模型对照组比较,阳性药物组及山茱萸水煎剂低、中、高剂量组小鼠IL-1β、IL-6表达水平显著降低(P<0.01),阳性药物组及山茱萸水煎剂、中、高剂量组小鼠TNF-α表达水平显著降低(P<0.01)。泪腺IL-1β、IL-6、TNF-α表达检测结果:与空白对照组比较,模型对照组小鼠泪腺组织中IL-1β、IL-6、TNF-α的表达水平显著上调(P<0.01);与模型对照组比较,除山茱萸水煎剂低剂量组小鼠的TNF-α表达水平差异无统计学意义外,其余各药物干预的小鼠IL-1β、IL-6、TNF-α表达水平均显著降低(P<0.01)。结论山茱萸水煎剂对干眼症模型小鼠具有明显的增加泪液分泌及抗炎作用,其作用机制与山茱萸水煎剂抑制结膜、角膜和泪腺组织中IL-1β、IL-6、TNF-α的表达水平密切相关。 展开更多
关键词 干眼症 炎症反应 山茱萸 炎性因子 苯扎氯铵
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快速性心律失常大鼠针刺血清对心肌细胞内Ca^(2+)浓度影响的研究 被引量:6
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作者 马贤德 韩涛 +2 位作者 田国伟 荆秦 张小卿 《中华中医药学刊》 CAS 2013年第12期2680-2682,I0026,共4页
目的:观察快速性心律失常大鼠针刺血清对乳鼠心肌细胞内Ca2+的影响,以探讨针刺治疗心律失常的离子通道机制。方法:取新生SD大鼠心肌细胞进行原代培养,5 d后应用荧光分子探针Fluo-3AM染色,应用激光共聚焦技术分别观察正常大鼠血清、模型... 目的:观察快速性心律失常大鼠针刺血清对乳鼠心肌细胞内Ca2+的影响,以探讨针刺治疗心律失常的离子通道机制。方法:取新生SD大鼠心肌细胞进行原代培养,5 d后应用荧光分子探针Fluo-3AM染色,应用激光共聚焦技术分别观察正常大鼠血清、模型大鼠血清和针刺大鼠血清对乳鼠心肌细胞Ca2+浓度变化的影响。结果:与空白对照组相比,模型血清组和针刺血清组Ca2+平均荧光强度值均增加,差异有统计学意义(P<0.01);与模型血清组相比,针刺血清组Ca2+平均荧光强度值降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:快速性心律失常大鼠血清中有某种活性物质可以增加心肌细胞内Ca2+浓度;而针刺降低了血清中该物质含量,从而起到治疗快速性心律失常的作用。 展开更多
关键词 心律失常 钙离子 针刺血清
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白色念珠菌肠道感染对脾虚模型小鼠小肠组织中IL-10和IL-12影响的实验研究 被引量:5
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作者 马贤德 孙杨 +1 位作者 孙宏伟 关洪全 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2015年第11期2226-2229,I0004,共5页
目的:通过观察脾虚小鼠感染白色念珠菌后小肠黏膜病理变化及小肠黏膜组织中IL-10、IL-12 mRNA及蛋白表达水平的变化,探讨脾虚小鼠感染白色念珠菌的部分免疫机制。方法:健康SPF级昆明种小白鼠60只,随机分为两组:空白组(N组,30只);脾虚模... 目的:通过观察脾虚小鼠感染白色念珠菌后小肠黏膜病理变化及小肠黏膜组织中IL-10、IL-12 mRNA及蛋白表达水平的变化,探讨脾虚小鼠感染白色念珠菌的部分免疫机制。方法:健康SPF级昆明种小白鼠60只,随机分为两组:空白组(N组,30只);脾虚模型组(M组,30只)。对脾虚模型组小鼠采用饮食不节加劳倦过度的方法复制脾虚小鼠模型。模型复制成功后,再次分别将N组及M组小鼠各随机分为两组:空白对照组(N1组,15只);空白感染白念组(N2组,15只);脾虚模型对照组(M1,15只);脾虚感染白念组(M2,15只)。分别令N2和M2组小鼠感染白色念珠菌,白念菌浓度为2×108CFU/m L,剂量为0.2 m L/10 g体重。于染菌后第21天进行相关指标检测。采用HE染色的方法,观察各组小鼠小肠组织病理变化;采用RT-PCR法检测各组小鼠小肠组织中IL-10、IL-12 mRNA表达水平;采用western-blot法检测各组小鼠小肠组织中IL-10、IL-12表达水平。结果:与空白对照组比较,空白感染白念组、脾虚模型对照组、脾虚感染白念组小鼠小肠组织中IL-12、IL-10 mRNA及蛋白的表达水平均有所上调(P<0.01),脾虚感染白念组IL-12表达水平上调最为明显;空白感染白念组IL-10上调最为明显。结论:脾虚小鼠比正常小鼠对白色念珠菌更加容易发生感染,感染的发生机制可能与机体的总体免疫功能相关,免疫功能正常状态下,可能与IL-10表达水平升高相关,免疫功能低下状态下,可能与IL-12表达水平升高相关。 展开更多
关键词 脾虚证 白色念珠菌 感染 IL-10 IL-12
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白色念珠菌肠道感染对脾虚小鼠小肠组织中Perforin和Granzyme的影响 被引量:3
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作者 马贤德 韩晓伟 关洪全 《中国中医基础医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期1519-1521,共3页
目的:通过对脾虚感染白色念珠菌小鼠小肠超微结构及黏膜组织中Perforin、Granzyme表达水平的观察,探讨机体在脾虚状态下感染白色念珠菌的部分免疫机制。方法:健康SPF级昆明种小白鼠60只,按随机数字表法分为空白对照组(N1组15只)、空白... 目的:通过对脾虚感染白色念珠菌小鼠小肠超微结构及黏膜组织中Perforin、Granzyme表达水平的观察,探讨机体在脾虚状态下感染白色念珠菌的部分免疫机制。方法:健康SPF级昆明种小白鼠60只,按随机数字表法分为空白对照组(N1组15只)、空白感染白念组(N2组15只)、脾虚模型对照组(M1组15只)、脾虚感染白念组(M2组15只)。分别令N2和M2组小鼠感染白色念珠菌,白念菌浓度为2×108CFU/ml,剂量为0.2 ml/10 g体质量,于染菌后第21天进行相关指标检测。采用RT-PCR法检测各组小鼠小肠组织中穿孔素(Perforin)、颗粒酶(Granzyme)m RNA表达水平;采用western-blot法检测各组小鼠小肠组织中Perforin、Granzyme表达水平。结果:各组小鼠小肠组织中Perforin、Granzyme m RNA及蛋白表达水平检测结果显示,与N1组比较,N2组、M1组、M2组小鼠小肠组织中Perforin、Granzyme m RNA及蛋白表达水平显著升高;与N2组比较,M1组Perforin、Granzyme m RNA及蛋白表达水平显著降低,而M2组Perforin、Granzyme m RNA及蛋白表达水平显著升高;与M1组比较,M2组Perforin、Granzyme m RNA及蛋白表达水平显著升高。结论:小肠局部黏膜组织中Perforin和Granzyme高表达水平可能是造成小肠黏膜局部损伤的免疫机制之一。 展开更多
关键词 脾虚证 白色念珠菌 感染 穿孔素 颗粒酶
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