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MeRIP-qPCR技术检测RNA m^(6)A甲基化修饰对t(8;21)AML细胞中KDM4B基因表达的调控作用
1
作者 李雨晴 邵杨柳 +2 位作者 李梦月 王莉莉 高晓宁 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期382-388,共7页
目的:通过MeRIP联合逆转录实时定量PCR(RT-qPCR)技术,证明WTAP介导的RNA m^(6)A修饰对伴t(8;21)急性髓系白血病(AML)细胞中KDM4B基因的直接调控作用。方法:采用靶向WTAP或KDM4B基因的短发夹RNA(small hairpin RNA,shRNA)慢病毒载体沉默t... 目的:通过MeRIP联合逆转录实时定量PCR(RT-qPCR)技术,证明WTAP介导的RNA m^(6)A修饰对伴t(8;21)急性髓系白血病(AML)细胞中KDM4B基因的直接调控作用。方法:采用靶向WTAP或KDM4B基因的短发夹RNA(small hairpin RNA,shRNA)慢病毒载体沉默t(8;21)AML细胞系Kasumi-1和SKNO-1中WTAP或KDM4B基因表达,以转染随机打乱序列(scramble)的shRNA的细胞为对照。用超纯RNA提取试剂盒(DNaseⅠ)提取细胞RNA,Magna MeRIP^(TM)m^(6)A Kit试剂盒富集甲基化修饰片段,并通过RT-qPCR检测m^(6)A甲基化修饰的RNA区域;采用蛋白免疫印迹实验(Western blot)和逆转录实时定量PCR(RT-qPCR)技术检测细胞中WTAP、KDM4B蛋白和mRNA的表达水平。采用克隆形成实验检测细胞体外克隆形成能力。结果:沉默Kasumi-1细胞中WTAP的表达后,m^(6)A甲基化修饰在KDM4B mRNA 3’UTR的富集程度显著下降(P<0.01),沉默Kasumi-1和SKNO-1细胞中WTAP的表达可显著抑制KDM4B蛋白(P<0.001)和mRNA表达水平(Kasumi-1:P<0.001;SKNO-1:P<0.01)、细胞体外克隆形成能力下降(Kasumi-1:P<0.001;SKNO-1:P<0.01)。结论:t(8;21)AML细胞系中,WTAP通过调控KDM4B基因mRNA 3’UTR的m^(6)A修饰调控KDM4B的表达,沉默KDM4B表达可以抑制t(8;21)AML细胞增殖。 展开更多
关键词 MeRIP-qPCR 急性髓系白血病 t(8 21)染色体易位 KDM4B RNA m^(6)A甲基化修饰
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长期定位施肥对棕壤有机氮组分及剖面分布的影响 被引量：27
2
作者 高晓宁 韩晓日 +3 位作者 刘宁 左仁辉 吴正超 杨劲峰 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期2820-2827,共8页
【目的】揭示施肥对土壤供氮潜力的影响。【方法】以土壤有机氮作为土壤肥力的重要指标采用Bremner法对棕壤29年长期定位试验的有机氮组成进行分级。【结果】单施化肥处理对耕层土壤有机氮含量及其组成无明显影响;有机肥和化肥配施,耕... 【目的】揭示施肥对土壤供氮潜力的影响。【方法】以土壤有机氮作为土壤肥力的重要指标采用Bremner法对棕壤29年长期定位试验的有机氮组成进行分级。【结果】单施化肥处理对耕层土壤有机氮含量及其组成无明显影响;有机肥和化肥配施,耕层土壤各形态酸解有机氮的含量都有不同程度的提高,其中氨基酸态氮的增加最为明显。在不同施肥处理中的顺序是氨基酸态氮>非酸解态氮>酸解氨态氮>酸解未知态氮>氨基糖态氮。各形态有机氮的剖面分布相似,含量均随土层的加深而降低。不同处理对有机氮各组分含量变化的作用表现为有机无机配施处理>单施有机肥处理>单施化肥处理、不施肥处理。【结论】长期有机无机肥配施显著提高了土壤的供氮潜力,是维持土壤肥力最优的施肥方式。 展开更多
关键词 棕壤 长期定位施肥 有机氮组分
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4个杜鹃花品种对干旱胁迫的生理响应及抗旱性评价 被引量：22
3
作者 高晓宁 赵冰 +1 位作者 刘旭梅 黄文梅 《浙江农林大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期597-607,共11页
杜鹃花Rhododendron抗旱性较差,限制了它们在北方干旱地区园林绿化中的应用。研究杜鹃花的抗旱性可为它们在北方园林中的应用提供理论依据。以西洋杜鹃‘蓝茵’Rh.‘Lan Yin’‘国旗红’Rh.‘Quoqihong’‘爱丁堡’Rh.‘Aidingbao’‘... 杜鹃花Rhododendron抗旱性较差,限制了它们在北方干旱地区园林绿化中的应用。研究杜鹃花的抗旱性可为它们在北方园林中的应用提供理论依据。以西洋杜鹃‘蓝茵’Rh.‘Lan Yin’‘国旗红’Rh.‘Quoqihong’‘爱丁堡’Rh.‘Aidingbao’‘粉珍珠’Rh.‘Fenzhenzhu’等4个杜鹃花品种为试验材料,研究其叶片解剖结构及不同程度干旱胁迫对杜鹃花品种叶片生理指标的影响,并用隶属函数法对其抗旱性进行评价,筛选与抗旱性关联较大的叶片解剖及生理指标。结果表明:随着干旱胁迫程度的增加,4个品种的总含水量、可溶性糖、脯氨酸质量分数等显著升高(P<0.05),叶绿素、类胡萝卜素、可溶性蛋白质量分数、细胞膜稳定性等显著降低(P<0.05),超氧化物歧化酶、过氧化物酶活性等先显著增强后会受到一定的抑制(P<0.05),‘蓝茵’和‘爱丁堡’的过氧化氢质量摩尔浓度随干旱胁迫的增加而下降,‘国旗红’和‘粉珍珠’的过氧化氢质量摩尔浓度先显著降低再显著升高(P<0.05)。抗旱性为‘蓝茵’<‘国旗红’<‘粉珍珠’<‘爱丁堡’。叶片解剖结构上,栅栏组织厚度、栅栏组织厚度与海绵组织厚度比和叶片结构紧密度与杜鹃花抗旱性关联紧密,对应的相关度分别为0.850,0.733,0.711。生理指标上,脯氨酸质量分数、叶片相对含水量和过氧化氢质量摩尔浓度与杜鹃花抗旱性关联紧密,对应的相关度为:0.893,0.703,0.699。以上6个指标可以作为评价杜鹃花抗旱性的主要指标。 展开更多
关键词 植物学 杜鹃花 干旱胁迫 抗旱性
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长期不同施肥处理对棕壤氮储量的影响 被引量：13
4
作者 高晓宁 韩晓日 +3 位作者 战秀梅 孙振涛 姜琳琳 陈赫 《植物营养与肥料学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期567-572,共6页
为揭示施肥对棕壤氮素状况的影响,利用29年长期肥料定位试验,研究了不同施肥处理条件下土壤全氮在0—60 cm土层的分布特征,并在此基础上计算0—60 cm土层氮库的储量变化。结果表明,不同施肥处理土壤全氮含量、C/N比值均随土层深度增加... 为揭示施肥对棕壤氮素状况的影响,利用29年长期肥料定位试验,研究了不同施肥处理条件下土壤全氮在0—60 cm土层的分布特征,并在此基础上计算0—60 cm土层氮库的储量变化。结果表明,不同施肥处理土壤全氮含量、C/N比值均随土层深度增加而降低,其影响主要表现在表层;而对0—60 cm土层全氮储量有显著影响(P<0.05)。长期不同施肥处理后土壤全氮及其储量变化趋势为:高量有机肥区>低量有机肥区>化肥区>无肥区>试验前(1979年),特别是高量有机肥和化肥配合施用效果最显著;单施化肥处理土壤全氮含量和储量虽有缓慢提高,但差异不显著。说明土壤氮素含量的提高与施肥措施密切相关,有机肥和化肥配合施用能提高土壤全氮含量和储量,是维持土壤肥力的最优施肥方式。 展开更多
关键词 土壤全氮 全氮储量 C/N比 长期定位施肥
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政府委托下应急物资生产能力代储系统激励契约设计 被引量：25
5
作者 高晓宁 田军 冯耕中 《管理工程学报》 CSSCI CSCD 北大核心 2019年第1期182-188,共7页
政府委托生产企业进行能力代储,是扩大应急物资供应保障的一种重要途径,提高代储企业的努力水平对有效发挥这一系统的作用具有重要影响。但由于存在信息不对称因素,政府无法完整地观测到企业的行为,也无法全面掌握企业市场运作的所有有... 政府委托生产企业进行能力代储,是扩大应急物资供应保障的一种重要途径,提高代储企业的努力水平对有效发挥这一系统的作用具有重要影响。但由于存在信息不对称因素,政府无法完整地观测到企业的行为,也无法全面掌握企业市场运作的所有有价值信息,为此,论文探讨了政府与代储企业的委托代理关系,研究了不对称信息条件下政府与代储企业之间的利益博弈,提出了针对委托代储企业的激励机制,建立了相应的激励契约模型,通过设置激励系数有效控制应急物资生产能力储备水平,同时设计了收益奖惩系数,根据实际效果对委托代储企业实施奖罚。通过双重激励措施,鼓励企业改善信息共享程度,激励企业增加努力水平。最后,运用MATLAB试验平台对模型求解并结合算例进行了数值计算和分析。结果表明,激励契约模型存在最优激励系数和最优奖惩系数,通过协调可以达到双方联合最优收益值,从而实现最大化社会效益。 展开更多
关键词 应急物资 生产能力储备 委托代储系统 激励契约模型
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FLT3基因3′-非翻译区-荧光素酶报告载体的构建及其活性鉴定 被引量：5
6
作者 高晓宁 林季 +2 位作者 李永辉 王莉莉 于力 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2010年第3期694-697,共4页
为分析FMS样酪氨酸激酶3(FMS-liketyrosine kinase3,FLT3)基因3′-非翻译区(3′-untranslated region,3′-UTR)可能的微小RNA(miRNA)调控位点,构建FLT3基因3′-UTR-荧光素酶报告载体,与miRNA共转染293T细胞,分析miRNA对其调控作用。采用... 为分析FMS样酪氨酸激酶3(FMS-liketyrosine kinase3,FLT3)基因3′-非翻译区(3′-untranslated region,3′-UTR)可能的微小RNA(miRNA)调控位点,构建FLT3基因3′-UTR-荧光素酶报告载体,与miRNA共转染293T细胞,分析miRNA对其调控作用。采用PCR方法从HepG2细胞基因组DNA中扩增FLT3基因3′-UTR区序列,插入经PstI和EcoRI双酶切的经过改造的荧光素酶报告载体pGL3-control(pGL3-control-m);通过Target Scan5.1软件预测可能与FLT3基因3′-UTR作用的miRNA;采用FuGENEHD转染试剂包裹荧光素酶报告重组子和miRNA真核表达载体共转染293T细胞,双荧光素酶检测试剂盒测定荧光素酶活性。结果表明,成功构建了含有804bp的FLT3基因3′-UTR序列的荧光素酶报告重组子,通过酶切和基因测序的方法鉴定正确;miRNA靶位点预测显示,FLT3基因3′-UTR可能是miRNA-15a、miRNA-15b、miRNA-16、miRNA-195、miRNA-424、miRNA-497的作用靶点;与对照组相比,miRNA-15a、15b、195可使荧光素酶报告重组子的荧光素酶活性降低20%左右。结论:成功构建了FLT3基因3′-UTR-荧光素酶报告载体,而miRNA-15a、miRNA-15b、miRNA-195可抑制其荧光素酶活性。 展开更多
关键词 FLT3基因 microRNA 3’-非翻译区 荧光素酶报告载体 基因调控 基因转染
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S100A4反义核酸抑制神经母细胞瘤细胞侵袭的作用 被引量：4
7
作者 高晓宁 唐锁勤 +3 位作者 张晓飞 杨光 刘英 于芳 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期204-206,共3页
目的　探讨S10 0A4基因在神经母细胞瘤 (NB)细胞侵袭和转移中的作用及其可能机制。方法　将S10 0A4反义核酸转染NB细胞系LA N 6,RT PCR检测S10 0A4、基质金属蛋白酸 (MMP 2 )mRNA水平 ,Transwell检测细胞迁移和侵袭能力。结果　转染反... 目的　探讨S10 0A4基因在神经母细胞瘤 (NB)细胞侵袭和转移中的作用及其可能机制。方法　将S10 0A4反义核酸转染NB细胞系LA N 6,RT PCR检测S10 0A4、基质金属蛋白酸 (MMP 2 )mRNA水平 ,Transwell检测细胞迁移和侵袭能力。结果　转染反义核酸的LA N 6细胞S10 0A4、MMP 2mRNA表达与对照组相比 ,分别下调 3 5.6%和 2 5.5% ,趋化和侵袭细胞数较对照组明显减少 (P均 <0 .0 5)。结论　反义封闭S10 0A4基因可抑制LA N 6细胞迁移和侵袭力 ,伴MMP 2mRNA表达减低 ,因此 ,S10 0A4基因在NB侵袭转移过程中发挥作用 ;其作用机制可能与增加瘤细胞运动能力 ,调节MMP 展开更多
关键词 S100A4基因 反义寡核苷酸 神经母细胞瘤 基质金属蛋白酶-2 肿瘤转移 细胞侵袭
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晚期儿童神经母细胞瘤的临床和预后分析 被引量：7
8
作者 高晓宁 唐锁勤 林季 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 2007年第4期351-354,共4页
目的探讨晚期儿童神经母细胞瘤的临床特点、治疗策略和预后。方法对63例确诊为III～IV期的神经母细胞瘤患者的临床资料进行回顾性分析,有60例患者接受了手术切除和(或)化疗和(或)局部放疗,其中14例患者还接受了自体外周血造血干细胞移... 目的探讨晚期儿童神经母细胞瘤的临床特点、治疗策略和预后。方法对63例确诊为III～IV期的神经母细胞瘤患者的临床资料进行回顾性分析,有60例患者接受了手术切除和(或)化疗和(或)局部放疗,其中14例患者还接受了自体外周血造血干细胞移植治疗。结果63例患者中,男女比例为2.7∶1,中位年龄4岁;常见首发症状为发热、腹痛、腹部肿块、腿痛或关节疼痛;常见原发部位为肾上腺(38%)、腹膜后(35%)、后纵隔(17%)、盆腔(6%)和颈部(2%);确诊时常见转移部位为局部(41%)和(或)远处(37%)淋巴结、骨髓(60%)、骨(46%)、肝脏(16%)。中位生存时间32.7个月,2年生存率44.3%。年龄>1岁(P<0.05)、血清神经元特异性烯醇化酶>100mg/L(P<0.05)、血清乳酸脱氢酶>1500U/L(P<0.01)、血清铁蛋白>150mg/L(P<0.05)是预后不良指标。完整切除原发肿瘤可延长患者总体生存时间(P<0.05);强烈化疗联合自体外周血造血干细胞移植的综合治疗可延长患者总体生存时间(P<0.01)。结论晚期儿童神经母细胞瘤临床表现多样,预后差,熟悉其临床和实验室检查特点尽早明确诊断、完整切除原发肿瘤、进行自体外周血造血干细胞移植支持下的强烈化疗的综合治疗有利于改善预后。 展开更多
关键词 神经母细胞瘤 治疗 预后 儿童
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三氧化二砷诱导神经母细胞瘤细胞凋亡的线粒体机制 被引量：4
9
作者 高晓宁 林季 +1 位作者 唐锁勤 黄东生 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2006年第23期1769-1772,共4页
目的探讨三氧化二砷(As2O3)诱导人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞凋亡效应及其对线粒体膜电位的影响。方法比色法观察As2O3对神经母细胞瘤SK-N-SH细胞增殖的影响;AnnexinⅤ荧光探针和流式细胞仪检测早期凋亡细胞;罗丹明123(Rhodamine123)荧光... 目的探讨三氧化二砷(As2O3)诱导人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞凋亡效应及其对线粒体膜电位的影响。方法比色法观察As2O3对神经母细胞瘤SK-N-SH细胞增殖的影响;AnnexinⅤ荧光探针和流式细胞仪检测早期凋亡细胞;罗丹明123(Rhodamine123)荧光探针染色后,荧光显微镜下观察活细胞线粒体改变,并经流式细胞仪分析线粒体膜电位变化。结果As2O3明显抑制SK-N-SH细胞的增殖;As2O3诱导SK-N-SH细胞早期凋亡时线粒体膜电位降低。结论降低线粒体膜电位可能是As2O3诱导神经母细胞瘤细胞凋亡的机制之一。 展开更多
关键词 三氧化二砷/药理学 神经母细胞瘤/病理学 细胞凋亡 线粒体
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肝脾γδT细胞淋巴瘤及其与EB病毒感染的关系 被引量：5
10
作者 高晓宁 唐锁勤 +1 位作者 刘英 王建文 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2006年第6期1134-1137,共4页
为探讨肝脾γδT细胞淋巴瘤的临床及病理特点及其与EB病毒感染的关系,对1例9岁女性肝脾γδT细胞淋巴瘤的患者进行了临床观察,采集骨髓液涂片行瑞氏染色,骨髓活检和肝脏活检的组织切片后常规化学染色及免疫组织化学标记,用EB病毒寡核苷... 为探讨肝脾γδT细胞淋巴瘤的临床及病理特点及其与EB病毒感染的关系,对1例9岁女性肝脾γδT细胞淋巴瘤的患者进行了临床观察,采集骨髓液涂片行瑞氏染色,骨髓活检和肝脏活检的组织切片后常规化学染色及免疫组织化学标记,用EB病毒寡核苷酸探针(EBER)原位杂交。结果显示,患儿长期发热、贫血、血小板减低,肝脾进行性肿大,伴慢性活动性EB病毒感染,血清乳酸脱氢酶、铁蛋白呈进行性增高,多形性小淋巴细胞浸润骨髓基质,肝内增生浸润的淋巴细胞强表达T细胞标记物CD3和活化细胞毒性标记物粒酶B,EB病毒mRNA阴性。结论肝脾γδT细胞淋巴瘤具有独特的临床和组织病理特征,肝脏和(或)脾脏和(或)骨髓病理检查及免疫表型分析有助于诊断;EB病毒感染可能是γδT细胞发生恶性转化后的晚期事件。 展开更多
关键词 肝脾ΓΔT细胞淋巴瘤 EB病毒感染 淋巴瘤
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毕业实习前本科护生应对突发事件的现状调查 被引量：7
11
作者 高晓宁 靳英辉 +3 位作者 田昕玉 黄海超 孟繁洁 窦昊颖 《护士进修杂志》 2014年第22期2037-2038,共2页
目的了解护生实习前应对突发事件的现状。方法自行设计调查问卷,对我校2010级123名将要实习的本科护生进行调查。结果护生实习前具备应对输血反应、化疗药物外渗和针刺伤的能力分别为26.02%、0.00%和46.34%,差异有统计学意义(P=0.000)... 目的了解护生实习前应对突发事件的现状。方法自行设计调查问卷,对我校2010级123名将要实习的本科护生进行调查。结果护生实习前具备应对输血反应、化疗药物外渗和针刺伤的能力分别为26.02%、0.00%和46.34%,差异有统计学意义(P=0.000)。结论护生实习前处理应对突发事件的能力低。专业课教师和临床教学老师应采取多种教学方法,不断完善教学内容,以提高护生应对突发事件的能力。 展开更多
关键词 护生 突发事件 应对能力
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去甲基化处理对NK-92MI细胞系抑制性受体KIR表达的影响 被引量：3
12
作者 高晓宁 林季 +4 位作者 王莉莉 高丽 靳海杰 孙敬芬 于力 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第3期656-660,共5页
为分析NK细胞系NK-92MI细胞中抑制性杀伤细胞免疫球蛋白样受体(killer cell immnoglobulin-like re-ceptor,KIR)的基因启动子区的甲基化模式及去甲基化处理对基因表达的影响,探讨基因kir可能的表达调控机制,采用亚硫酸氢盐测序法检测NK-... 为分析NK细胞系NK-92MI细胞中抑制性杀伤细胞免疫球蛋白样受体(killer cell immnoglobulin-like re-ceptor,KIR)的基因启动子区的甲基化模式及去甲基化处理对基因表达的影响,探讨基因kir可能的表达调控机制,采用亚硫酸氢盐测序法检测NK-92MI细胞kir2DL1和kir2DL2/2DL3基因启动子区的甲基化水平,应用甲基化抑制剂5-氮胞苷处理NK-92MI细胞以诱导CpG岛去甲基化,RT-PCR方法检测其基因表达。结果显示:kir2DL1和kir2DL2/2DL3基因启动子区CpG二核苷酸甲基化频率依次在25%-88%、5%-80%之间;应用甲基化抑制剂5-氮胞苷可以诱导NK-92MI细胞重新表达kir2DL1基因,并使kir2DL1、kir2DL2和kir2DL3基因表达量增加。结论:启动子甲基化参与调控NK-92MI细胞基因kir表达。 展开更多
关键词 杀伤细胞免疫球蛋白样受体 NK-92MI细胞系 去甲基化处理
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MicroRNA-193b对K562细胞C-KIT蛋白表达及生物学行为的影响 被引量：2
13
作者 高晓宁 林季 +4 位作者 高丽 丁一 李景欣 王莉莉 于力 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2011年第6期1343-1347,共5页
本研究探讨microRNA-193b(miR-193b)对K562白血病细胞系C-KIT蛋白表达及生物学行为的影响。采用HiPerFect转染试剂介导FAM荧光标记的miR-193b mimic或阴性对照分别转染过表达C-KIT的K562细胞系,采用流式细胞术检测FAM阳性细胞百分比以... 本研究探讨microRNA-193b(miR-193b)对K562白血病细胞系C-KIT蛋白表达及生物学行为的影响。采用HiPerFect转染试剂介导FAM荧光标记的miR-193b mimic或阴性对照分别转染过表达C-KIT的K562细胞系,采用流式细胞术检测FAM阳性细胞百分比以监测转染效率,采用Western blot检测C-KIT和磷酸化C-KIT蛋白表达水平,采用CCK-8试剂检测细胞生长曲线,采用AnnexinⅤ染色后流式细胞仪检测细胞凋亡,采用流式细胞仪检测粒系分化标志CD11b和CD15阳性细胞百分比。结果显示,miR-193b或阴性对照转染的K562细胞中,FAM阳性细胞可达80%左右;与对照组相比,过表达miR-193b可明显抑制K562细胞中C-KIT、磷酸化C-KIT蛋白表达水平,同时,K562细胞的增殖受到抑制,凋亡细胞、CD11b阳性细胞、CD15阳性细胞的百分比均有增加。结论:miR-193b可抑制K562细胞C-KIT表达,并抑制细胞增殖;该增殖抑制作用可能与miR-193b诱导的细胞凋亡、分化有关,本研究为进一步分析miR-193b在白血病发生中的作用提供了实验依据。 展开更多
关键词 miR-193b K562细胞 C-KIT 急性髓系白血病
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启动子甲基化调控NK-92MI细胞KIR3DL1基因表达 被引量：5
14
作者 高晓宁 于力 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期668-671,675,共5页
目的:观察NK细胞系NK-92MI细胞中KIR3DL1基因启动子区的甲基化模式及去甲基化和组蛋白乙酰化对基因表达的影响,探讨KIR3DL1基因的表达调控机制。方法:采用亚硫酸氢盐测序法检测NK-92MI细胞中KIR3DL1基因启动子区的甲基化状况,应用甲基... 目的:观察NK细胞系NK-92MI细胞中KIR3DL1基因启动子区的甲基化模式及去甲基化和组蛋白乙酰化对基因表达的影响,探讨KIR3DL1基因的表达调控机制。方法:采用亚硫酸氢盐测序法检测NK-92MI细胞中KIR3DL1基因启动子区的甲基化状况,应用甲基化抑制剂5-氮胞苷和(或)组蛋白去乙酰化转移酶抑制剂曲古抑菌素A处理NK-92MI细胞以诱导CpG岛去甲基化和组蛋白乙酰化,观察启动子区CpG岛甲基化和组蛋白乙酰化与KIR3DL1基因表达的关系。结果:NK-92MI细胞中KIR3DL1基因启动子区高甲基化,CpG二核苷酸甲基化频率在70%～100%之间;应用终浓度为2.5μmol/L和5μmol/L的5-氮胞苷作用72h可以诱导NK-92MI细胞中KIR3DL1mRNA表达量分别增加66.6%和114.6%;单用终浓度为50nmol/L的曲古抑菌素A不能诱导NK-92MI细胞中KIR3DL1mRNA表达量增加;此外,曲古抑菌素A和5-氮胞苷联用与单用5-氮胞苷相比也没有协同作用。结论:NK-92MI细胞中KIR3DL1基因表达受启动子甲基化调控。 展开更多
关键词 杀伤细胞抑制性受体 基因表达调控 DNA甲基化 组蛋白乙酰化
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阿齐霉素与克林霉素交替治疗儿童支原体肺炎的疗效观察 被引量：11
15
作者 高晓宁 唐锁勤 《中国药物应用与监测》 CAS 2006年第3期42-43,共2页
目的:探讨阿奇霉素、克林霉素交替治疗儿童支原体肺炎的疗效。方法:对确诊的支原体肺炎患儿进行随机分组,单用阿奇霉素组予静滴阿奇霉素针剂,1次1d,10mg1kg1d,疗程为3d;单用克林霉素组予盐酸克林霉素40mg1kg1d,分2次静脉滴注,疗程为7d;... 目的:探讨阿奇霉素、克林霉素交替治疗儿童支原体肺炎的疗效。方法:对确诊的支原体肺炎患儿进行随机分组,单用阿奇霉素组予静滴阿奇霉素针剂,1次1d,10mg1kg1d,疗程为3d;单用克林霉素组予盐酸克林霉素40mg1kg1d,分2次静脉滴注,疗程为7d;阿奇霉素、克林霉素交替治疗组第1d～3d予静滴阿奇霉素针剂,1次1d,10mg1kg1d,第4d～7d予盐酸克林霉素40mg1kg1d,分2次静脉滴注。结果:单用阿奇霉素组与阿奇霉素、克林霉素交替治疗组疗效比较及单用克林霉素组与阿奇霉素、克林霉素交替治疗组疗效比较,均有显著性差异(p<0.05);克林霉素副反应发生率低于阿齐霉素(p<0.05)。结论:阿奇霉素、克林霉素交替应用治疗支原体肺炎,疗效优于单用阿奇霉素或克林霉素。 展开更多
关键词 阿奇霉素 克林霉素 支原体肺炎
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虐待老年人评估量表研究进展 被引量：3
16
作者 高晓宁 陈珊珊 +2 位作者 王云云 王泓午 窦昊颖 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2017年第23期5998-6000,共3页
老年人虐待是全球普遍存在的健康和社会问题,发生率为3.2%-27.5%。联合国将老年虐待分为身体虐待、精神虐待、经济剥夺和疏忽照顾4类,而美国、英国和澳大利亚等国家在此基础上增加了性虐待、遗弃和自我疏忽。老年人一旦遭受虐待,就可能... 老年人虐待是全球普遍存在的健康和社会问题,发生率为3.2%-27.5%。联合国将老年虐待分为身体虐待、精神虐待、经济剥夺和疏忽照顾4类,而美国、英国和澳大利亚等国家在此基础上增加了性虐待、遗弃和自我疏忽。老年人一旦遭受虐待,就可能对其身心健康造成损害,甚至导致过早死亡。因此,一些发达国家通过制定老年人虐待评估量表、 展开更多
关键词 虐待 评估量表
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DNA甲基化调控K562细胞系kir3dl1基因表达 被引量：4
17
作者 高晓宁 于力 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2008年第3期472-475,共4页
为分析kir3dl1基因启动子区的甲基化模式及其与基因表达的关系,探讨kir3dl1基因的表达调控机制,采用亚硫酸氢盐测序法检测K562细胞中kir3dl1基因启动子区的甲基化状况,应用甲基化抑制剂5-氮胞苷处理K562细胞以诱导CpG岛去甲基化,观察启... 为分析kir3dl1基因启动子区的甲基化模式及其与基因表达的关系,探讨kir3dl1基因的表达调控机制,采用亚硫酸氢盐测序法检测K562细胞中kir3dl1基因启动子区的甲基化状况,应用甲基化抑制剂5-氮胞苷处理K562细胞以诱导CpG岛去甲基化,观察启动子区CpG岛甲基化与kir3dl1基因表达的关系。结果显示:K562细胞中kir3dl1基因核心启动子区CpG二核苷酸甲基化频率在20%-100%之间;K562细胞中kir3dl1基因启动子序列在转录因子E2F可能的结合位点上存在1个碱基的突变,并形成1个新的被甲基化的CpG二核苷酸;应用甲基化抑制剂5-氮胞苷可以诱导不表达kir3dl1基因的K562细胞重新表达该基因。结论:K562细胞中kir3dl1基因表达受启动子甲基化调控,对转录因子E2F的深入研究有助于了解其在kir3dl1基因表达调控中可能的作用。 展开更多
关键词 kir3dl1基因 基因表达调控 DNA甲基化 K562细胞系
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叶酸受体及其在介导药物靶向肿瘤细胞治疗中的应用 被引量：4
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作者 高晓宁 唐锁勤 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2005年第5期911-914,共4页
肿瘤细胞表面过度表达一系列受体,能与特异性的配体结合并诱导细胞内化。以这些受体为作用靶点,使药物与特异性配体结合即可将药物主动靶向肿瘤细胞。叶酸受体在多种肿瘤细胞特别是髓细胞白血病细胞中都有过度表达,它可通过介导细胞内... 肿瘤细胞表面过度表达一系列受体,能与特异性的配体结合并诱导细胞内化。以这些受体为作用靶点,使药物与特异性配体结合即可将药物主动靶向肿瘤细胞。叶酸受体在多种肿瘤细胞特别是髓细胞白血病细胞中都有过度表达,它可通过介导细胞内化将叶酸摄取入细胞胞浆,利用叶酸受体进行肿瘤,特别是白血病的靶向性治疗颇有应用前景。本文就叶酸受体生物学性质、染色体定位及与配体的相互作用,叶酸受体在正常组织、肿瘤组织,特别是白血病细胞中的分布特点,以及叶酸受体介导主动靶向肿瘤细胞,特别是白血病细胞的研究进展进行了概述。 展开更多
关键词 叶酸受体 白血病 靶向治疗
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去甲基化处理对NK-92MI细胞杀伤活力的影响 被引量：1
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作者 高晓宁 王莉莉 +1 位作者 林季 于力 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第4期924-928,共5页
为观察DNA去甲基化处理对NK细胞系NK-92MI细胞抑制性KIR表达及细胞杀伤活力的影响,探讨抑制性kir基因去甲基化与NK细胞功能之间的可能联系,采用甲基化抑制剂5-氮胞苷处理NK-92MI细胞,采用流式细胞术检测NK-92MI细胞表面KIR3DL1、KIR2DL2... 为观察DNA去甲基化处理对NK细胞系NK-92MI细胞抑制性KIR表达及细胞杀伤活力的影响,探讨抑制性kir基因去甲基化与NK细胞功能之间的可能联系,采用甲基化抑制剂5-氮胞苷处理NK-92MI细胞,采用流式细胞术检测NK-92MI细胞表面KIR3DL1、KIR2DL2/KIR2DL3、KIR2DL1表达及细胞活力,并采用流式细胞仪将NK-92MI细胞分选为KIR3DL1阳性和KIR3DL1阴性细胞群,采用乳酸脱氢酶释放法检测NK-92MI细胞对白血病细胞系K562的杀伤活力。结果显示:应用终浓度为1.0、2.5和5μmol/L的5-氮胞苷作用72小时可以诱导NK-92MI细胞KIR3DL1、KIR2DL2/KIR2DL3、KIR2DL1表达增加,同时NK-92MI对K562细胞的杀伤活力降低,5-氮胞苷在1-5μmol/L范围内不影响NK-92MI的细胞活力,KIR3DL1阳性NK-92MI细胞的杀伤活力较KIR3DL1阴性细胞的杀伤活力低。结论:去甲基化处理通过诱导抑制性KIR表达增加抑制NK-92MI细胞的杀伤活力。 展开更多
关键词 细胞毒性 NK-92MI细胞 杀伤细胞免疫球蛋白样受体 5-氮胞苷 DNA甲基化
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三氧化二砷对人神经母细胞瘤细胞凋亡作用的影响 被引量：1
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作者 高晓宁 黄东生 +2 位作者 唐锁勤 张晓飞 杨婷婷 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 2005年第2期163-166,共4页
目的　三氧化二砷(As2O3 )通过诱导细胞凋亡和诱导细胞分化效应治疗急性早幼粒细胞白血病(APL)患者已取得很好疗效。与APL细胞相似,神经母细胞瘤(NB)细胞也是分化成熟受阻,该文对As2O3 在体外对人神经母细胞瘤细胞凋亡作用的影响及可能... 目的　三氧化二砷(As2O3 )通过诱导细胞凋亡和诱导细胞分化效应治疗急性早幼粒细胞白血病(APL)患者已取得很好疗效。与APL细胞相似,神经母细胞瘤(NB)细胞也是分化成熟受阻,该文对As2O3 在体外对人神经母细胞瘤细胞凋亡作用的影响及可能的机制进行探讨。方法　比色法观察As2O3 对神经母细胞瘤SK N SH细胞增殖的影响;Giemsa染色观察细胞形态学改变;Annexinⅴ/PI双染色流式细胞术检测细胞凋亡;免疫细胞化学染色方法检测bcl 2蛋白表达变化。结果　As2O3 明显抑制SK N SH细胞增殖,抑制作用呈剂量时间依赖效应,并出现细胞凋亡的形态学改变;流式细胞仪检测4. 0μmol/LAs2O3 作用SK N SH细胞72h后,早期凋亡细胞比例( 9. 9±0. 8 )%,与对照组( 3. 7±0. 2 )%相比明显增多,差异有显著性(P< 0. 05 );分别以1. 0, 2. 0,4. 0μmol/L的As2O3 处理SK N SH细胞72h后,bcl 2表达随As2O3 浓度增加呈降低趋势,bcl 2表达阳性率分别为(26. 3±8. 0)%, (15. 0±4. 5)%和(4. 8±3. 2)%,与对照组(73. 6±6. 1)%相比,差异有显著性(P<0. 01)。结论As2O3 可在体外抑制神经母细胞瘤细胞增殖,诱导凋亡,bcl 2参与了其调节作用。 展开更多
关键词 神经母细胞瘤 三氧化二砷 细胞凋亡
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