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药品全生命周期监管概况及启示 被引量:3
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作者 巢琳琳 金志虎 +11 位作者 甘玉玺 臧德跃 曹生田 冯珊珊 邓俊成 林柏佑 黄后双 谢天柱 陈润桦 孙晓 李静 金毅 《医疗装备》 2021年第18期27-29,共3页
该研究通过分析和借鉴美日欧等国家和地区及人用药品注册技术要求国际协调会议(ICH)药品全生命周期监管的概况和特色,了解我国药品监管的现状,探讨药品全生命周期监管的启示,建议加强技术支撑,加大与互联网、人工智能等多学科融合,在IC... 该研究通过分析和借鉴美日欧等国家和地区及人用药品注册技术要求国际协调会议(ICH)药品全生命周期监管的概况和特色,了解我国药品监管的现状,探讨药品全生命周期监管的启示,建议加强技术支撑,加大与互联网、人工智能等多学科融合,在ICH框架下发挥更大作用。 展开更多
关键词 药品 全生命周期监管 信息技术
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磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)在ORFV感染过程中变化规律及其对ORFV病毒复制增殖的影响 被引量:4
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作者 黄后双 赵魁 +7 位作者 张頔 张月香 张希牧 周艳龙 徐宝成 魏广兴 宋德光 高丰 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期852-858,共7页
磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol kinase 3-kinase,PI3Ks)蛋白家族参与对细胞增殖、分化、凋亡等多种细胞功能的调节。课题组前期利用Illumina/Solexa高通量测序技术对羊传染性脓疱病毒(Orf virus,ORFV)感染OFTu细胞前后mRNA表... 磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol kinase 3-kinase,PI3Ks)蛋白家族参与对细胞增殖、分化、凋亡等多种细胞功能的调节。课题组前期利用Illumina/Solexa高通量测序技术对羊传染性脓疱病毒(Orf virus,ORFV)感染OFTu细胞前后mRNA表达谱进行比较分析发现,PI3K在感染后宿主细胞中显著上调表达。为进一步验证,利用荧光定量PCR、Western blot方法分别从基因转录水平和蛋白表达水平对羊传染性脓疱病毒(Orf virus,ORFV)感染不同时间段(0、3、6、12、24、48、72h)Hela细胞中PI3K的表达变化规律进行分析,与未接毒细胞相比,PI3K在感染后不同时间段均呈上升趋势,且随着感染时间延长而增加,该结果与表达谱分析结果一致。为进一步明确PI3K对ORFV侵染复制的影响,利用PI3K特异性抑制剂LY294002对PI3K进行抑制处理后接种ORFV,收集感染后不同时间段(12、24、48、72h)细胞进行定量PCR检测和TCID50测定,结果显示,加入LY294002处理的Hela细胞,其病毒滴度低于未处理细胞中的病毒滴度,由此可见阻断PI3K对ORFV的入侵具有抑制作用。上述研究结果表明,PI3K对ORFV在宿主细胞中的复制增殖具有明显的促进作用。该研究结果不仅有助于对参与ORFV侵染过程相关信号通路的研究,而且将为深入揭示ORFV致病分子机制奠定基础。 展开更多
关键词 羊传染性脓疱病毒 PI3K LY294002 促进 复制增殖
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宿主细胞CyPB基因的克隆及表达分析 被引量:1
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作者 毕经影 宋德光 +6 位作者 张頔 黄后双 王春霞 王改丽 田忠华 高丰 赵魁 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期545-548,574,共5页
CyPB作为亲环蛋白(cyclophilins,CyPs)家族成员之一,是环孢菌素A、K506、雷帕霉素等免疫抑制药物在细胞内的主要结合蛋白。本课题组前期利用抑制性消减杂交技术对羊传染性脓疱病病毒(orf virus,ORFV)感染MDBK前后宿主细胞差异基因进行... CyPB作为亲环蛋白(cyclophilins,CyPs)家族成员之一,是环孢菌素A、K506、雷帕霉素等免疫抑制药物在细胞内的主要结合蛋白。本课题组前期利用抑制性消减杂交技术对羊传染性脓疱病病毒(orf virus,ORFV)感染MDBK前后宿主细胞差异基因进行筛选时发现,正向文库中CyPB显著上调表达,但其在ORFV侵染过程中的作用尚不清楚。为了进一步明确CyPB对ORFV侵染复制的影响,根据从GenBank中获取的牛源CyPB基因编码区全长651bp基因序列,设计1对针对牛源CyPB基因的特异性引物,利用RT-PCR方法扩增获得CyPB基因全长基因序列。将获得的CyPB基因连接至PET-32a载体,转化到BL21菌株中,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析可见在25 000处有与预期大小一致的蛋白条带。上述结果表明,本研究成功诱导表达纯化出His-CyPB融合蛋白,该结果将为针对牛源CyPB蛋白功能的研究提供重要的物质基础。 展开更多
关键词 ORFV 宿主细胞CpyB 原核表达 纯化
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羊传染性脓疱病毒通过激活PI3K/Akt通路抑制HeLa细胞凋亡 被引量:2
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作者 吕丽君 黄后双 +6 位作者 关继羽 周艳龙 王帅 贺文琦 宋德光 高丰 赵魁 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期413-419,共7页
磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/Akt信号通路是参与细胞增殖、分化和凋亡调控的重要通路之一,多种病毒可通过对该通路的调控而实现对宿主细胞的感染。作为一种重要的人兽共患传染病病原,羊传染性脓疱病毒(Orf virus,ORFV)被证实能够诱导PI3K/Ak... 磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/Akt信号通路是参与细胞增殖、分化和凋亡调控的重要通路之一,多种病毒可通过对该通路的调控而实现对宿主细胞的感染。作为一种重要的人兽共患传染病病原,羊传染性脓疱病毒(Orf virus,ORFV)被证实能够诱导PI3K/Akt通路的活化。利用PI3K特异性抑制剂LY294002靶向抑制PI3K/Akt通路后,以荧光染色和流式细胞荧光分选技术(FACS)分析该通路的抑制对ORFV感染HeLa细胞凋亡的影响,结果显示抑制PI3K/Akt通路后可使ORFV感染HeLa细胞发生凋亡,该结果表明ORFV感染HeLa细胞产生的凋亡抑制可能与PI3K/Akt通路的激活相关。为进一步明确PI3K/Akt通路介导ORFV感染HeLa细胞凋亡抑制的途径,本研究利用蛋白质印迹法对PI3K/Akt通路3个关键的下游分子GSK-3β、MDM2和Bad的表达情况进行检测,在经PI3K特异性抑制剂LY294002处理后的ORFV感染HeLa细胞中,Bad表达显著上调,而GSK-3β和MDM2的表达无显著变化。结果表明,ORFV通过激活PI3K/Akt/Bad信号通路抑制受感染HeLa细胞发生凋亡。 展开更多
关键词 ORFV HELA细胞 凋亡 PI3K/AKT BAD
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对药物刺激性研究技术指导原则(2014版)的病理学探讨及改进建议 被引量:1
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作者 金毅 臧德跃 +7 位作者 曹生田 冯珊珊 邓俊成 黄后双 谢天柱 陈润桦 孙晓 李静 《今日药学》 CAS 2021年第8期578-580,共3页
《药物刺激性、过敏性和溶血性研究技术指导原则》(2014版),对中国药物安全性评价检验工作具有重要的指导作用。在近几年实践及相关文献基础上,以病理学学科特点为依据,探讨和提出对2014版药物刺激性研究指导原则的改进建议。
关键词 刺激性试验 病理学 非临床安全性评价 动物实验
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实验病理学在药品监管中的建设与发展初探
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作者 金毅 巢琳琳 +14 位作者 金志虎 甘玉玺 臧德跃 曹生田 冯珊珊 邓俊成 林柏佑 黄后双 薛有安 王汝仙 谢泳娇 谢天柱 陈润桦 孙晓 李静 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期417-421,共5页
通过分析我国实验病理学在药品监管中的历史、背景和局限性,初步探索了实验病理学在药品监管中的发展、地位和作用,阐述了为适应当代全程药品监管和全生命周期医药研发的新理念,需要提升实验病理学的学科定位和作用,更广泛深入到医药研... 通过分析我国实验病理学在药品监管中的历史、背景和局限性,初步探索了实验病理学在药品监管中的发展、地位和作用,阐述了为适应当代全程药品监管和全生命周期医药研发的新理念,需要提升实验病理学的学科定位和作用,更广泛深入到医药研发的多个关键环节。在实验病理学建设和发展的实践方面,自2014年至今坚持开展多方位的学术交流与培训,特别是近3年举办了约80场次对全国专业人员开放的实验病理学公益网络学习会,使我国实验病理学在互联网+公益培训的先进理念和实践上已走在世界前列。2020年广东省药品监督管理局批准建设实验病理学重点实验室及深圳市专家人才联合会、成立实验病理学专业委员会,对提升专业人员水平、加强实验病理学在药品监管中的作用做了一些探索和努力。 展开更多
关键词 实验病理学 药品监管 全生命周期 毒性病理学 药效病理学
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