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乳腺注射法表达人组织型纤溶酶原激活剂的研究
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作者 安靓 李振林 +2 位作者 黄伟民 黄吴建 李进 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 2004年第11期43-46,共4页
目的 :构建tPA乳腺定位表达载体 ,使其在牛乳汁中高效表达 ,观察目的基因表达的规律及其影响因素 ,为建立新型牛乳腺生物反应器提供理论基础。方法 :RT PCR法克隆目的基因 ,通过酶切、连接、分离、纯化等方法构建含tPA cDNA的乳腺定位... 目的 :构建tPA乳腺定位表达载体 ,使其在牛乳汁中高效表达 ,观察目的基因表达的规律及其影响因素 ,为建立新型牛乳腺生物反应器提供理论基础。方法 :RT PCR法克隆目的基因 ,通过酶切、连接、分离、纯化等方法构建含tPA cDNA的乳腺定位表达载体 ;采用乳腺注射法将融合基因转入小鼠及牛的乳腺组织中。结果 :乳腺注射外源基因后 ,tPA可在小鼠和牛的乳汁中表达。结论 :乳腺注射法可使目的基因在乳腺组织中稳定地表达较长的时间 ,其表达量与显微注射法没有明显的差异 ,表明外源基因的表达不受转基因方法的影响。但tPA在牛乳汁中的表达量明显高于小鼠的表达量 ,提示不同动物的乳蛋白调控系统有一定的差异 ,可能受着不同的因素或调控系统的影响。 展开更多
关键词 乳腺组织 定位表达 小鼠 乳汁 注射法 PA RT-PCR法 人组织型纤溶酶原激活剂 目的基因 外源基因
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