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1,25-(OH)_(2)-VitD3通过抑制Snail1-SMAD3/SMAD4复合物形成减轻糖尿病肾病肾小管间质纤维化
1
作者 黄成宠 董蓉 +1 位作者 李正胜 袁静 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期325-331,共7页
目的研究1,25-(OH)2-VitD3(VitD3)对糖尿病肾病肾小管间质纤维化的影响.方法NRK-52E肾小管上皮细胞分为对照组(5.5 mmol/L葡萄糖培养基处理)、高糖组(25 mmol/L葡萄糖的培养基处理)和高糖加VitD3组(25 mmol/L葡萄糖培养基联合10-8 mol/L... 目的研究1,25-(OH)2-VitD3(VitD3)对糖尿病肾病肾小管间质纤维化的影响.方法NRK-52E肾小管上皮细胞分为对照组(5.5 mmol/L葡萄糖培养基处理)、高糖组(25 mmol/L葡萄糖的培养基处理)和高糖加VitD3组(25 mmol/L葡萄糖培养基联合10-8 mol/L VitD3).实时定量PCR和Western blot法分别检测NRK-52E细胞Snail家族转录抑制物1(Snail1)、SMAD家族成员3(SMAD3)、SMAD4、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和上皮钙黏蛋白(E-cadherin)的mRNA和蛋白表达;免疫荧光细胞化学染色检测Snail1、SMAD3、SMAD4的表达及定位;通过染色质免疫沉淀检测Snail1与SMAD3/SMAD4形成的复合物与柯萨奇病毒-腺病毒受体(CAR)的启动子结合情况;荧光素酶报告检测Snail1、SMAD3/SMAD4和E-cadherin的相互作用;采用小干扰RNA(siRNA)抑制细胞Snail1、SMAD4的表达后,通过实时定量PCR检测E-cadherin的mRNA表达.SD大鼠随机分为对照组、DKD组和VitD3处理组.DKD组和VitD3处理组通过注射链脲佐菌素(STZ)先制备DKD模型,DKD造模成功后,VitD3处理组予60ng/kgVitD3灌胃,对照组和DKD组给予生理盐水灌胃;DKD组和VitD3处理组同时皮下注射胰岛素(1~2)U/kg控制血糖,持续8周.采用实时定量PCR和Western blot法分别检测肾组织中Snail1、SMAD3、SMAD4、α-SMA、E-cadherin的mRNA和蛋白水平,免疫组织化学检测肾组织Snail1、SMAD3、SMAD4、α-SMA和E-cadherin的表达及定位.结果与对照组相比,高糖处理的NRK-52E细胞及DKD肾组织Snail1、SMAD3、SMAD4和α-SMA的mRNA和蛋白表达均上调,E-cadherin表达下调;给予VitD3干预后,DKD模型中Snail1、SMAD3、SMAD4、α-SMA和E-cadherin的表达水平恢复到与对照组接近.染色质免疫沉淀提示Snail1、SMAD3/SMAD4与CAR的启动子Ⅳ结合,而VitD3能够阻止Snail1、SMAD3/SMAD4与CAR的启动子Ⅳ结合;荧光素酶报告检测证实Snail1、SMAD3/SMAD4和E-cadherin的互作关系;用siRNA抑制Snail1、SMAD4的mRNA后,上调高糖诱导下E-cadherin的表达.结论VitD3可抑制Snail1-SMAD3/SMAD4的复合物的形成,减轻糖尿病肾病肾小管间质纤维化. 展开更多
关键词 1 25-(OH)2-VitD3 Snail1-SMAD3/SMAD4复合物 糖尿病肾病 肾间质纤维化
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环状RNA与肾脏纤维化的研究进展
2
作者 丁婕 杨宇齐 +6 位作者 查艳 代露 黄成宠 解笳 张勇强 李正胜 袁静 《临床肾脏病杂志》 2023年第12期1034-1040,共7页
慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)对人体健康构成严重危害,患病率高。CKD主要特征是肾脏正常的细胞被细胞外基质(extracellular matrix,ECM)取代,而CKD的结局是肾小球硬化和肾小管间质纤维化。目前,纤维化有关的机制较少,缺乏有... 慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)对人体健康构成严重危害,患病率高。CKD主要特征是肾脏正常的细胞被细胞外基质(extracellular matrix,ECM)取代,而CKD的结局是肾小球硬化和肾小管间质纤维化。目前,纤维化有关的机制较少,缺乏有效的治疗。近来研究发现,存在于肾脏外泌体中有一种环状RNA(circular RNA,circRNA),其参与各种肾脏疾病的病理过程,与肾脏纤维化发生、发展密切相关。circRNA参与细胞死亡、侵袭、转移、上皮间充质转化等多种生物学过程,可作为肾脏病诊断的新型标志物及治疗靶点。本文将针对应用circRNA在肾脏纤维化治疗中的作用及展望进行综述。 展开更多
关键词 环状RNA 微小RNA 慢性肾脏病
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长链非编码RNA C2dat1通过影响CaMK2D/NF-κB信号通路参与糖尿病肾间质纤维化
3
作者 黄成宠 董蓉 +7 位作者 俞佳丽 代露 余芳芳 吴立波 刘璐 李正胜 查艳 袁静 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期209-216,共8页
目的研究长链非编码RNA C2dat1在不同时期糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)大鼠肾脏中的表达变化以及其与肾间质纤维化的关系。方法48只雄性SD大鼠,随机分为两组:对照组和DKD组,每组24只。对照组给予普通饲料喂养,DKD组给予高... 目的研究长链非编码RNA C2dat1在不同时期糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)大鼠肾脏中的表达变化以及其与肾间质纤维化的关系。方法48只雄性SD大鼠,随机分为两组:对照组和DKD组,每组24只。对照组给予普通饲料喂养,DKD组给予高脂饲料喂养,自由饮水。喂食8周后,干预前禁食不禁水12 h,DKD组予一次性腹腔注射链脲佐菌素,对照组给予同等剂量的柠檬酸钠缓冲液。72 h后,连续3 d测定随机末梢血糖浓度≥16.7 mmol/L,尿糖定性为阳性,糖尿病模型成功。在3、6、9和12周采集大鼠尿液、血液和肾脏样本。采用全自动生化仪检测尿蛋白24 h排泄率、尿肌酐和血清总胆固醇;HE染色观察肾脏组织病理变化;免疫组织化学染色检测钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶2D(calcium/calmodulin-dependent protein kinaseⅡdelta,CaMK2D)、p65、p50、α-SMA、E-cardherin相关蛋白质的表达;实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)检测lncRNA C2dat1和CaMK2D的表达;通过相关性分析,探究lncRNA C2dat1与α-SMA、E-cardherin和CaMK2D的关系。用高糖诱导肾小管上皮细胞HK-2,干预后24、48、72 h收集细胞,qPCR检测lncRNA C2dat1及CaMK2D的表达。结果与对照组大鼠比较,DKD组大鼠出现典型的多饮、多食,体重明显降低,血糖升高,尿蛋白24 h排泄率增加,尿肌酐降低,总胆固醇升高。HE染色结果显示,对照组大鼠肾小球结构完整,基底膜正常,未见系膜增生与炎症细胞浸润,而DKD组大鼠肾小球增大,基底膜均匀增厚。DKD组CaMK2D、p50、α-SMA表达高于对照组,E-cardherin表达低于对照组。DKD组lncRNA C2dat1和CaMK2D mRNA的表达高于对照组。在高糖诱导的HK-2细胞中,lncRNA C2dat1和CaMK2D的表达也高于对照组。相关性分析提示,lncRNA C2dat1与α-SMA和CaMK2D呈正相关,与E-cardherin呈负相关。结论在DKD进展过程中,高表达的lncRNA C2dat1可能通过调节CaMK2D表达激活NF-κB信号通路促进糖尿病肾间质纤维化。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 肾间质纤维化 NF-ΚB信号通路 lncRNA C2dat1
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瘦组织指数与维持性血液透析患者动静脉内瘘丧失功能的关系
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作者 代露 田茂露 +4 位作者 查艳 刘璐 李正胜 黄成宠 袁静 《中华肾脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期32-35,共4页
通过多中心横断面研究分析2020年6月1日至2020年9月30日贵州省20家血液透析中心接受维持性血液透析(maintenance hemodialysis,MHD)治疗患者的临床资料,探讨瘦组织指数(lean tissue index,LTI)水平与动静脉内瘘丧失功能(arteriovenous f... 通过多中心横断面研究分析2020年6月1日至2020年9月30日贵州省20家血液透析中心接受维持性血液透析(maintenance hemodialysis,MHD)治疗患者的临床资料,探讨瘦组织指数(lean tissue index,LTI)水平与动静脉内瘘丧失功能(arteriovenous fistula dysfunction,AFD)的相关关系。根据是否发生AFD分为AFD组和非AFD两组,用人体成分分析仪测量LTI。结果发现,2781例MHD患者的AFD发生率为30.0%(835/2781);中位LTI水平为15.2(13.2,17.5)kg/m^(2)。与非AFD组相比,AFD组患者LTI较低(P<0.05)。按LTI三分位数分组中,低LTI组(LTI≤13.9 kg/m^(2))AFD发生率最高(35.5%,334/940),高LTI组(LTI>16.6 kg/m^(2))AFD发生率最低(26.3%,241/916),3组的差异有统计学意义(χ^(2)=20.182,P<0.001)。多因素Logistic回归分析结果显示,中LTI组(13.9 kg/m^(2)<LTI≤16.6 kg/m^(2))和高LTI组发生AFD的风险均低于低LTI组(以低LTI组为参照,OR=0.800,95%CI 0.650~0.986,P=0.036;OR=0.772,95%CI 0.616~0.966,P=0.024)。提示MHD患者低水平LTI与AFD风险增加独立相关。 展开更多
关键词 肾透析 动静脉瘘 危险因素 瘦组织指数
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长链非编码RNA XIST与肾脏疾病关系的研究进展
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作者 解笳 杨宇齐 +7 位作者 邓翼遥 李正胜 黄成宠 代露 丁婕 张勇强 查艳 袁静 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第16期1253-1256,共4页
肾脏疾病已成为重要的公共卫生问题,其发病率逐年上升,目前医学领域对肾脏疾病机制的认识尚浅,进一步了解其发病机制具有重要意义。已有研究证实,长链非编码RNA(lncRNA)X染色体失活特异性转录本(XIST)与肾脏疾病关系密切。基于此,本文... 肾脏疾病已成为重要的公共卫生问题,其发病率逐年上升,目前医学领域对肾脏疾病机制的认识尚浅,进一步了解其发病机制具有重要意义。已有研究证实,长链非编码RNA(lncRNA)X染色体失活特异性转录本(XIST)与肾脏疾病关系密切。基于此,本文总结了lncRNA XIST作为调节因子在肾脏疾病发病机制中的作用,以期为今后的研究提供一些思路。 展开更多
关键词 肾疾病 长链非编码RNA XIST 糖尿病肾病 膜性肾病 急性肾损伤
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