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试管牛和试管羊胚胎性别的鉴定 被引量：48
1
作者 黄淑帧 陈美珏 +4 位作者 黄英 孙琼 陆建英 任兆瑞 曾溢滔 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期65-68,共4页
奶牛和山羊的卵母细胞经过体外成熟、体外受精和体外发育至桑椹期 ,在显微操作下 ,吸取4～6个胚胎细胞 ,应用巢式PCR技术对其DNA进行SRY基因的测定以进行胚胎性别鉴定。共有27枚转有外源基因的试管牛胚胎和207枚转基因试管羊胚胎进行了... 奶牛和山羊的卵母细胞经过体外成熟、体外受精和体外发育至桑椹期 ,在显微操作下 ,吸取4～6个胚胎细胞 ,应用巢式PCR技术对其DNA进行SRY基因的测定以进行胚胎性别鉴定。共有27枚转有外源基因的试管牛胚胎和207枚转基因试管羊胚胎进行了SRY基因检测。选取10枚经过性别鉴定的牛胚胎移植于8头受体母牛和124枚已知性别的羊胚胎移植于44头受体母羊 ,移植后妊娠率分别为37 5% (牛 ,3/8)和61 4% (羊 ,27/44)。最后产生1头分娩牛犊和2头流产胎牛以及14头分娩羊羔和2头流产胎羊 ,它们的性别与胚胎性别鉴定的结果完全相符。 展开更多
关键词 体外受精 性别鉴定 早期胚胎 转基因家畜
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转人血清白蛋白基因试管牛的研究 被引量：11
2
作者 黄淑帧 黄英 +6 位作者 陈美珏 陈巍 黄赞 李华 李景春 任兆瑞 曾溢滔 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2000年第7期573-579,共7页
构建了含人血清白蛋白（hALB）基因的cDNA全序列、内含子1以及山羊β－酪蛋白基因启动子和5’端上游调控序列在内的乳腺表达载体pcDNA3.1－GCALBm，并通过显微注射将其导入经过体外受精（IVF）的奶牛受精卵中，体外培养到桑椹胚后期，... 构建了含人血清白蛋白（hALB）基因的cDNA全序列、内含子1以及山羊β－酪蛋白基因启动子和5’端上游调控序列在内的乳腺表达载体pcDNA3.1－GCALBm，并通过显微注射将其导入经过体外受精（IVF）的奶牛受精卵中，体外培养到桑椹胚后期，取出少许细胞，应用巢式PCR对其进行目的基因整合及性别的预鉴定，将10枚整合胚移植于8头受体母牛，结果有3头妊娠，受孕率为37.5％（3／8），其中2头于妊娠中期流产，另有1头足月分娩产下1头有人血清白蛋白基因整合的雄性转基因试管牛，转基因实验的总有效率为12.5％（1／8）。 展开更多
关键词 体外受精 转基因牛 乳腺生物反应器 hALB
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用DNA扩增法诊断血红蛋白病 被引量：11
3
作者 黄淑帧 周霞娣 +5 位作者 朱皓 曾溢滔 何铭熙 朱继棉 刘炜培 李伟文 《上海医学》 CAS 1988年第10期559-563,共5页
本文介绍一种快速、灵敏的基因诊断技术——聚合酶链反应体外扩增DNA,及其在α-和β-地中海贫血产前诊断和HbS基因检测的应用。聚合酶链反应的样本可以直接用溶解的羊水细胞或绒毛标本,也可以用从干血纸片抽提的DNA。扩增DNA的分析毋需... 本文介绍一种快速、灵敏的基因诊断技术——聚合酶链反应体外扩增DNA,及其在α-和β-地中海贫血产前诊断和HbS基因检测的应用。聚合酶链反应的样本可以直接用溶解的羊水细胞或绒毛标本,也可以用从干血纸片抽提的DNA。扩增DNA的分析毋需放射性DNA探针和Southern杂交,产前基因诊断可在5小时内完成。 展开更多
关键词 DNA 扩增 PCR 引物 抽提 珠蛋白基因 血红蛋白病
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人血清白蛋白基因乳腺表达载体在奶山羊乳腺中的瞬间表达 被引量：4
4
作者 黄淑帧 许叔祥 +4 位作者 陈巍 盛敏 马湛卢 杨华 曾溢滔 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第5期419-422,共4页
构建了包括人血清白蛋白 ( h ALB)基因的 c DNA全序列、内含子 1以及山羊β-酪蛋白基因启动子和 5′端上游调控序列在内的乳腺表达载体 pc DNA3.1 -GCALBm,采用直接注射法将其导入哺乳期的奶山羊乳腺组织 ,然后通过放射免疫法测定乳汁中... 构建了包括人血清白蛋白 ( h ALB)基因的 c DNA全序列、内含子 1以及山羊β-酪蛋白基因启动子和 5′端上游调控序列在内的乳腺表达载体 pc DNA3.1 -GCALBm,采用直接注射法将其导入哺乳期的奶山羊乳腺组织 ,然后通过放射免疫法测定乳汁中 h ALB的含量。结果显示 ,5头受试奶山羊的乳汁中有明显的 h ALB表达 ,注射后第 2天放免测定值从注射前的 4 .0 mg/L左右分别上升至 62 .2、59.2、36.2、4 2 .3、1 7.5mg/L,并持续表达在 2周以上 ,其中 1头受试羊乳汁中 h ALB的表达量维持在 80 mg/L左右 ,并超过了 1 0 0 d。而在乳腺组织中注射 pc DNA3.1空质粒或生理盐水的 4头对照奶山羊的乳汁中 ,放免测定值无变化。 展开更多
关键词 人血清白蛋白 乳腺表达 山羊 基因表达
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用DNA扩增法检测镰状细胞基因 被引量：1
5
作者 黄淑帧 盛敏 +7 位作者 赵久乔 仇效坤 曾溢滔 王启松 何铭熙 朱继棉 刘炜培 李伟文 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1989年第6期475-482,共8页
本文报道应用DNA扩增技术对国内首例镰状细胞特征患者(Hb s杂合子)进行基因诊断。方法是从患者干血标本中微量抽提基因组DNA,通过聚合酶链反应(PCR)扩增其β珠蛋白基因,经限制性内切酶MstⅡ消化后作电泳分析直接检测Hb S基因。本文介绍... 本文报道应用DNA扩增技术对国内首例镰状细胞特征患者(Hb s杂合子)进行基因诊断。方法是从患者干血标本中微量抽提基因组DNA,通过聚合酶链反应(PCR)扩增其β珠蛋白基因,经限制性内切酶MstⅡ消化后作电泳分析直接检测Hb S基因。本文介绍的DNA诊断技术快速、灵敏、简便,它不需要放射性同位素标记的探针,可以采用干血抽提的DNA,因此,对遗传病基因诊断和携带者的筛查具有重要价值。 展开更多
关键词 DNA扩增 Hbs基因 聚合酶链反应
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血红蛋白M Iwate(附一例报道)
6
作者 黄淑帧 曾溢滔 +8 位作者 程观炽 任兆瑞 李敏跃 刘德勤 张仁培 H.Lam B.B.Webber J.B.Wilson T.H.J.Huisman 《上海医学》 CAS 1983年第4期212-214,共3页
本文报道了一例祖籍是上海市宝山县的遗传性青紫的病人,家系调查中发现,此病至少遗传了四代。应用醋酸纤维薄膜电泳能从患者溶血液中分离出一种快速异常的血红蛋白。通过血红蛋白理化性质测定和结构分析,证实其α链N端第87位的组氨酸被... 本文报道了一例祖籍是上海市宝山县的遗传性青紫的病人,家系调查中发现,此病至少遗传了四代。应用醋酸纤维薄膜电泳能从患者溶血液中分离出一种快速异常的血红蛋白。通过血红蛋白理化性质测定和结构分析,证实其α链N端第87位的组氨酸被酪氨酸替代,即血红蛋白MIwate[α87(F8)His→Tyr]。该例异常血红蛋白在中国属首次报道。 展开更多
关键词 血红蛋白 理化性质 患者 溶血液 M Iwate 高压液相
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血红蛋白E-β°地中海贫血症(一个家系的分析)
7
作者 黄淑帧 陈美珏 +7 位作者 周霞娣 曾溢滔 廖适生 徐立卓 梁洪就 伍懿姬 曾宪平 张凤声 《新医学》 1981年第4期169-171,共3页
本文报道1例HbE复合β°地中海贫血患者及其家系各成员的血红蛋白分析结果,并对HbE的结构分析和β地中海贫血的类型进行了讨论。
关键词 血红蛋白 结构分析 分析(力学) 地中海贫血 双重杂合子 珠蛋白 地中海贫血基因 先证者 热稳定试验 热变性试验 贫血患者
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羟基脲(Hu)治疗β-地中海贫血的研究——Hu对珠蛋白基因表达的影响
8
作者 黄淑帧 任兆瑞 +5 位作者 陈美珏 许洪平 曾溢滔 G.P.Rodgers 曾凡一 A.N.Schechter 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 1993年第7期1-5,共5页
关键词 地中海贫血 珠蛋白 羟基脲 基因
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遗传病基因诊断技术(上)
9
作者 黄淑帧 曾溢滔 《上海医学检验杂志》 1990年第2期121-122,共2页
随着分子生物学的进展和重组DNA技术的进步,我们已能在DNA分子水平上对异常或缺陷的基因进行分析或检测,从而能在人体发育的任何时期对相应的遗传性疾病进行诊断。因为人体基因组(DNA)的类型从受精卵开始即已形成,只要获得受检者的基因... 随着分子生物学的进展和重组DNA技术的进步,我们已能在DNA分子水平上对异常或缺陷的基因进行分析或检测,从而能在人体发育的任何时期对相应的遗传性疾病进行诊断。因为人体基因组(DNA)的类型从受精卵开始即已形成,只要获得受检者的基因组DNA,应用恰当的DNA分析技术,便能鉴定出缺陷的基因,而不论该基因产物是否已经表达,开创了绕过基因产物通过直接检测基囚来诊断遗传疾病的新纪元。 展开更多
关键词 遗传病 基因 诊断
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构建反义RNA表达载体对β-地中海贫血进行基因治疗研究
10
作者 黄淑帧 任兆瑞 +5 位作者 曾溢滔 顾小锋 宫澜 陈云弟 盛敏 陈美珏 《医学研究通讯》 2003年第8期14-14,共1页
β地中海贫血(简称β地贫)是常见的、严重危害人民身体健康的遗传性血液病,在我国南方(两广地区)的发病率约为1%.该病目前尚无有效的根治方法,患者只有依赖定期输血才能维持其生命,但输血过度将引起铁质大量沉积,最终导致心力衰竭而过... β地中海贫血(简称β地贫)是常见的、严重危害人民身体健康的遗传性血液病,在我国南方(两广地区)的发病率约为1%.该病目前尚无有效的根治方法,患者只有依赖定期输血才能维持其生命,但输血过度将引起铁质大量沉积,最终导致心力衰竭而过早地夭亡.因此,探索β地贫治疗途径是疾病防治工作的一项重要任务. 展开更多
关键词 β—地中海贫血 基因治疗 反义RNA 治疗
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牛催乳素基因组及其cDNA全长序列的分子克隆和分析 被引量：30
11
作者 曹新 王强 +3 位作者 颜景斌 阳飞昆 黄淑帧 曾溢滔 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第9期768-773,共6页
通过LongPCR等技术首次克隆得到全长 9388bp的牛催乳素 (bPRL)基因组序列 (GenBank登录号AF4 2 6 315 ) ,其中包括bPRL基因全部 5个外显子和 4个内含子 ,5′端 85 4bp的上游调控区以及 3′端 6 9bp的UTR。AF4 2 6 315基因编码的蛋白质在... 通过LongPCR等技术首次克隆得到全长 9388bp的牛催乳素 (bPRL)基因组序列 (GenBank登录号AF4 2 6 315 ) ,其中包括bPRL基因全部 5个外显子和 4个内含子 ,5′端 85 4bp的上游调控区以及 3′端 6 9bp的UTR。AF4 2 6 315基因编码的蛋白质在GenBank中的序号为AAL2 80 75 ,由 2 2 9个氨基酸残基组成 ,1～ 30位氨基酸残基为信号肽序列 ,成熟的多肽含有 199个氨基酸残基。将bPRL基因组DNA真核表达载体转染COS 7细胞后通过RT PCR得到长度为80 4bp的bPRLcDNA序列 ,该序列涵盖了bPRL基因的全部ORF区 ,证明本研究所获得的bPRL基因组DNA具有转录的生物学功能。Blast搜索结果显示 ,GenBank数据库中收集有多条bPRL基因的mRNA和EST序列 ,各序列间存在多个SNP位点 ,主要分布于下游编码区和 3′端的UTR ,这些位点均未改变相应的氨基酸残基的性质 ,此外 。 展开更多
关键词 分子克隆 全长序列 长距离PCR 序列分析 牛催乳素基因组 CDNA
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人凝血IX因子基因乳腺组织特异性表达载体的构建及其在奶山羊乳腺中的分泌性表达 被引量：14
12
作者 张克忠 卢大儒 +2 位作者 邱信芳 黄英 黄淑帧 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第4期419-422,共4页
人凝血ＩＸ因子基因乳腺组织特异性表达载体的构建及其在奶山羊乳腺中的分泌性表达张克忠卢大儒邱信芳（复旦大学遗传学研究所上海２００４３３）黄英黄淑帧（上海市儿童医院医学遗传研究所上海２０００４０）血友病Ｂ（Ｈｅｍｏｐｈｉ... 人凝血ＩＸ因子基因乳腺组织特异性表达载体的构建及其在奶山羊乳腺中的分泌性表达张克忠卢大儒邱信芳（复旦大学遗传学研究所上海２００４３３）黄英黄淑帧（上海市儿童医院医学遗传研究所上海２０００４０）血友病Ｂ（ＨｅｍｏｐｈｉｌｉａＢ）是由于人凝血ＩＸ因子（ｈ... 展开更多
关键词 人凝血IX因子 基因表达 表达载体 基因工程 乳腺
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山羊β酪蛋白基因克隆及序列分析 被引量：9
13
作者 王强 陈美珏 +2 位作者 任兆瑞 黄淑帧 曾溢滔 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期17-23,共7页
用LongPCR技术克隆山羊 β酪蛋白 (CSN2 )全基因 13.7kb的序列 (GenBank登录号 :AF4 0 90 96 ) .利用PCR RFLP方法鉴定第 14和 192位氨基酸残基相应的核苷酸序列中出现的 2个多态性位点 ,其中第 192位氨基酸残基处的TspRⅠ位点是Saanen... 用LongPCR技术克隆山羊 β酪蛋白 (CSN2 )全基因 13.7kb的序列 (GenBank登录号 :AF4 0 90 96 ) .利用PCR RFLP方法鉴定第 14和 192位氨基酸残基相应的核苷酸序列中出现的 2个多态性位点 ,其中第 192位氨基酸残基处的TspRⅠ位点是Saanen奶山羊CSN2基因中新发现的 1个多态性位点 .生物信息学方法分析山羊CSN2基因可见 ,非编码区中的SINE和LINE序列内含多种乳蛋白基因表达调控元件 。 展开更多
关键词 山羊 β酪蛋白 基因克隆 PCR-RFLP 序列分析
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红系特异的GFP基因在转基因小鼠中的整合和表达 被引量：5
14
作者 颜景斌 肖艳萍 +2 位作者 陈美珏 黄淑帧 曾溢滔 《动物学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第2期263-268,共6页
应用荧光定量PCR技术对由位点控制区LCR的HS2元件和 β 珠蛋白基因启动子指导的红系特异表达绿色荧光蛋白 (GFP)基因的转基因小鼠中外源基因拷贝数进行测定 ,使用荧光显微镜和流式细胞仪检测小鼠外周血中GFP的表达水平 ,并运用荧光原位... 应用荧光定量PCR技术对由位点控制区LCR的HS2元件和 β 珠蛋白基因启动子指导的红系特异表达绿色荧光蛋白 (GFP)基因的转基因小鼠中外源基因拷贝数进行测定 ,使用荧光显微镜和流式细胞仪检测小鼠外周血中GFP的表达水平 ,并运用荧光原位杂交技术 (FISH)确定了其中两只转基因小鼠中外源基因的整合位点 ,结果表明 :在转基因小鼠中外源基因的拷贝数各不相同且相差较大 ,而且拷贝数与GFP基因的表达量之间未呈现出相关性 ;FISH分析确定出两只转基因小鼠的外源基因整合于不同的染色体上 ; 展开更多
关键词 荧光定量PCR 荧光原位杂交 转基因小鼠 拷贝数 表达 外源基因
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124例HbH患者α珠蛋白基因的分析 被引量：10
15
作者 陈坚 孙琼 +2 位作者 陈美珏 任兆瑞 黄淑帧 《上海医学》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期83-86,共4页
目的分析１２４例ＨｂＨ患者的α珠蛋白基因的分子缺陷状况及其分布，为ＨｂＨ的基因诊断和产前诊断提供科学依据。方法应用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交、限制性内切酶分析ＰＣＲ产物、血红蛋白电泳和ＬｏｎｇＰＣＲ等技术，对受检ＨｂＨ... 目的分析１２４例ＨｂＨ患者的α珠蛋白基因的分子缺陷状况及其分布，为ＨｂＨ的基因诊断和产前诊断提供科学依据。方法应用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交、限制性内切酶分析ＰＣＲ产物、血红蛋白电泳和ＬｏｎｇＰＣＲ等技术，对受检ＨｂＨ病患者的α珠蛋白基因组织进行了鉴定。结果在１２４例ＨｂＨ病患者中，缺失型患者有８３例，占６６．９％；其中右侧缺失型（α－３．７）４５例，占缺失型患者总数的５４．２％，主要分布于广东、湖北、云南等省区，左侧缺失型（α－４．２）３８例，占缺失型患者总数的４５．８％，主要分布在广西和江西；非缺失型患者４１例，占３３．１％；其中ＨｂＣｏｎｓｔｎｔＳｐｒｉｎｇ（ＨｂＣＳ）患者９例，占非缺失型患者总数的２２．０％，Ｈｂ广西（ＨｂＱＳ）患者３例，占非缺失型患者总数的７．３％，其他α＋地贫突变类型２９例，占非缺失型总数的７０．７％。结论不同地区ＨｂＨ患者的α珠蛋白基因的突变类型有明显的差异，该项研究为ＨｂＨ病的分子遗传学和ＨｂＨ病的基因诊断提供了依据。 展开更多
关键词 Α-地中海贫血 Α珠蛋白基因 贫血
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中国人凝血因子Ⅷ基因多态性和血友病A的产前诊断 被引量：7
16
作者 曾溢滔 陈美珏 +6 位作者 黄英 仇效坤 黄淑帧 陈淑蓉 王鸿利 董金瀚 蔡玲芳 《上海医学》 CAS CSCD 北大核心 1989年第7期373-377,共5页
本文应用克隆化的凝血因子Ⅷ(下称FⅧ)基因cDNA及其旁侧的DNA片段作为探针,分析了123名中国正常人和22例血友病A患者的FⅧ基因及其旁侧的多态性位点Bcl Ⅰ/18e,Xbal/221,MspI/St14和BgI I/DX13。获得了中国人上述4个位点的RFLP资料,并应... 本文应用克隆化的凝血因子Ⅷ(下称FⅧ)基因cDNA及其旁侧的DNA片段作为探针,分析了123名中国正常人和22例血友病A患者的FⅧ基因及其旁侧的多态性位点Bcl Ⅰ/18e,Xbal/221,MspI/St14和BgI I/DX13。获得了中国人上述4个位点的RFLP资料,并应用RFLP连锁分析对2例血友病A高危妊娠进行了产前诊断。 展开更多
关键词 血友病A 凝血因子Ⅷ 产前诊断
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转基因小鼠后代乳汁中外源基因的表达 被引量：4
17
作者 黄缨 颜景斌 +2 位作者 孙琼 黄英 黄淑帧 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期17-20,共4页
运用传统育种方法 ,用整合有人凝血因子 ( h F )的转基因小鼠进行近交和远交。通过选育 ,在其后代中出现 4只双重杂合子 ( 3♀ ,1 )及 2只纯合子小鼠 ( 2♀ )。收集雌鼠乳汁 ,用 ELISA测定其中 h F 蛋白含量。结果表明 ,相对于单纯杂... 运用传统育种方法 ,用整合有人凝血因子 ( h F )的转基因小鼠进行近交和远交。通过选育 ,在其后代中出现 4只双重杂合子 ( 3♀ ,1 )及 2只纯合子小鼠 ( 2♀ )。收集雌鼠乳汁 ,用 ELISA测定其中 h F 蛋白含量。结果表明 ,相对于单纯杂合子小鼠 ,纯合子小鼠的表达量无增高 ( P>0 .0 5) ,而双重杂合子小鼠的表达量有显著提高 ( P<0 .0 1 )。结果提示 ,选育双重杂合子转基因后代小鼠 ,是一条提高转基因动物外源基因表达水平的有效途径。 展开更多
关键词 转基因动物 杂交 选育 外源基因乳汁基因表达
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胚胎移植时机对牛体细胞克隆胚胎妊娠率的影响 被引量：5
18
作者 赵磊文 伏静 +3 位作者 管鹏飞 李华 黄淑帧 曾溢滔 《上海交通大学学报（农业科学版）》 2008年第2期96-100,共5页
以活体取卵OUP来源的牛卵母细胞为受体胞质,以Holstein奶牛的牛耳成纤维细胞作为供核细胞进行体细胞克隆,并将发育7 d的克隆囊胚和体内胚分别及体外胚进行移植,观察移植时机对受孕率的影响。依据代孕牛排卵后天数的不同分为3个实验组,... 以活体取卵OUP来源的牛卵母细胞为受体胞质,以Holstein奶牛的牛耳成纤维细胞作为供核细胞进行体细胞克隆,并将发育7 d的克隆囊胚和体内胚分别及体外胚进行移植,观察移植时机对受孕率的影响。依据代孕牛排卵后天数的不同分为3个实验组,组1:排卵后5～6 d(不含6 d);组2:排卵后6～7d;组3:排卵后7～8 d(不含7 d)。结果显示:对于体外胚胎而言,第2组的受孕率高于第1组(P>0.05),第3组的受孕率最低(P<0.05),且120 d的受孕率为0。与此相反,对于体内胚胎,第3组的受孕率高于其他2组。通过实验可以证明对于7 d的体外胚胎选择在代孕牛排卵后6—7 d移植可以得到较高的受孕率:而对于体内胚胎而言则应选择在受体牛排卵后7～8 d移植,可得到较高的妊娠率。 展开更多
关键词 体细胞核移植 受孕 牛 胚胎移植
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应用荧光原位杂交分析移植山羊体内的人源细胞 被引量：2
19
作者 肖艳萍 陈美珏 +3 位作者 盛敏 巩芷娟 王舒 黄淑帧 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期129-133,共5页
目的 应用荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)分析人造血干细胞(human hematopoietiestem cell,hHSC)经宫内移植至山羊体内后人源细胞的存在、比例及其动态变化。 方法 用人特异17号染色体卫星DNA探针对13头移植山... 目的 应用荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)分析人造血干细胞(human hematopoietiestem cell,hHSC)经宫内移植至山羊体内后人源细胞的存在、比例及其动态变化。 方法 用人特异17号染色体卫星DNA探针对13头移植山羊进行间期FISH(interphase FISH,IFISH)分析,并用人男性特异Y染色体卫星DNA探针对其中2头移值人男性HSC的山羊进行IFISH分析。标本采用外周血细胞滴片、骨髓涂片和肝脏组织印片。结果 在13头移植山羊中,11头山羊体内有人源细胞存在,其中2头为人男性细胞,证实这些山羊为人/山羊异种移植嵌合体;人源细胞比例随山羊月龄递减,最长已存活21个月;所检测月龄段的移植山羊外周血、骨髓和肝脏组织中人源细胞比例小于1‰,但其中2头山羊肝脏组织中人源细胞集中一处,局部比例高达207.92‰和392.41‰。结论 FISH检测出人源细胞能在山羊体内存在并长期存活,表明山羊是经宫内移植hHSC的合适受体;人源细胞在外周血和骨髓中比例低,而在肝脏组织局部比例高,提示山羊肝脏组织局部内环境适于人源细胞存活、增殖和分化。 展开更多
关键词 人造血于细胞 荧光原位杂交 移植 山羊
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反义RNA对地中海贫血红系细胞β-珠蛋白mRNA异常剪接的纠正作用 被引量：2
20
作者 陈云弟 顾小锋 +3 位作者 宫澜 任兆瑞 黄淑帧 曾溢滔 《上海医学》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期78-82,共5页
目的研究反义ＲＮＡ对β地中海贫血红系细胞ＩＶＳ２６５４Ｃ→Ｔ（β６５４）突变ｍＲＮＡ异常剪接的纠正作用。方法构建特异性针对β６５４ｍＲＮＡ前体异常剪接位点的反义ＲＮＡ表达载体，和不针对上述位点的反义对照载体，转染... 目的研究反义ＲＮＡ对β地中海贫血红系细胞ＩＶＳ２６５４Ｃ→Ｔ（β６５４）突变ｍＲＮＡ异常剪接的纠正作用。方法构建特异性针对β６５４ｍＲＮＡ前体异常剪接位点的反义ＲＮＡ表达载体，和不针对上述位点的反义对照载体，转染培养的β６５４红系细胞后，抽提总ＲＮＡ；以ＲＴＰＣＲ法作ｍＲＮＡ定量，检测正常和异常剪接的β珠蛋白ｍＲＮＡ产物的比例［β／（β＋β）］；以珠蛋白肽链体外生物合成分析红系细胞中β和α珠蛋白肽链合成的比例（β／α）。结果在ＲＮＡ水平，β６５４／β６５４纯合子的β／（β＋β）值由０．１９（转染后第０天）上升到０．５８（第８天），β６５４／βＡ杂合子由０．４５（０天）上升到０．８３（第８天）；在珠蛋白肽链水平，β６５４／β６５４细胞的β／α值由０．１６（０天）上升到０．５２（第８天），β６５４／βＡ细胞由０．３９（０天）上升到０．８４（第８天）。反义ＲＮＡ处理βＡ／βＡ红系细胞以及对照ＲＮＡ处理这３类红系细胞，对其ｍＲＮＡ剪接和珠蛋白肽链合成均影响不大。结论特异性反义ＲＮＡ能抑制红系细胞β６５４ｍＲＮＡ前体的异常剪接，部分恢复其正常剪接途径。 展开更多
关键词 Β-地中海贫血 反义RNA 贫血 MRNA Β-珠蛋白
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