遗传多样性研究中的分子生物学方法 被引量：5

1

作者 黄百渠 曾庆华 尹东 《东北师大学报（自然科学版）》 CAS CSCD 1996年第3期90-92,共3页

论述了遗传多样性研究在物种保护中的地位，并介绍了同工酶和蛋白质分析，限制性片段长度多态标记，多聚酶链式反应，随机扩增多态性ＤＮＡ，扩增和错配对检测以及基因克隆和转移等分子生物学技术在遗传多样性研究中的应用和前景．

关键词 遗传多样性 分子生物学 物种保护

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拟南芥菜(Arabidopsis thaliana)子叶中蛋白体形成的超微结构和免疫电镜定位研究 被引量：3

2

作者 黄百渠 《实验生物学报》 CSCD 1989年第3期247-257,共11页

本文对拟南芥菜(Arabidopsis thaliana)种子发育过程中贮藏蛋白的积累和蛋白体的形成进行了超微结构和免疫电镜定位的研究。常规超薄切片的电镜观察表明,在开花后第10天(10 DAF),高电子密度的蛋白质物质开始在子叶细胞的液泡中沉积。这... 本文对拟南芥菜(Arabidopsis thaliana)种子发育过程中贮藏蛋白的积累和蛋白体的形成进行了超微结构和免疫电镜定位的研究。常规超薄切片的电镜观察表明,在开花后第10天(10 DAF),高电子密度的蛋白质物质开始在子叶细胞的液泡中沉积。这一过程一直延续到种子接近成熟(14 DAF),这时液泡中充满了蛋白质物质,转变成为大的蛋白体。利用了该种植物主要种子贮藏蛋白之一的12 s球蛋白的单克隆抗体作为免疫探针,以蛋白质A-胶体金电镜技术对12 s种子蛋白进行了细胞内定位,证实了在液泡中积累的物质为种子贮藏蛋白。实验结果表明在拟南芥菜中,子叶细胞中的液泡是蛋白体的前体,肯定了蛋白体的发生起源于液泡的观点。本文还对应用胶体金电镜技术进行细胞内定位的某些问题作了初步探讨。 展开更多

关键词 拟南芥菜 子叶 蛋白体 电镜术

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拟南芥菜种子贮藏蛋白性质的鉴定

3

作者 黄百渠 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1990年第1期32-38,共7页

采用多种凝胶电泳技术对用过滤层析法分离的拟南芥菜(Arabidopsis thaliana)的主要种子蛋白(组分Ⅰ和Ⅱ)进行了研究。结果表明,组分Ⅰ在 SDS 电泳中被分离成分子量分别为34、31、29、28和19—20kD 的6条带,组分Ⅱ分离形成3条低分子量的... 采用多种凝胶电泳技术对用过滤层析法分离的拟南芥菜(Arabidopsis thaliana)的主要种子蛋白(组分Ⅰ和Ⅱ)进行了研究。结果表明,组分Ⅰ在 SDS 电泳中被分离成分子量分别为34、31、29、28和19—20kD 的6条带,组分Ⅱ分离形成3条低分子量的带(10—12kD)。未变性蛋白质凝胶电泳分析揭示了组分Ⅰ为一呈中性的蛋白质,而组分Ⅱ则是一带正电荷的碱性蛋白质,其等电点高于8.8。在 IEF/SDS 双维电泳中,组分Ⅰ至少被分离成16个多肽分子,即每一条 SDS 带包含有3—4个具相同分子量,不同等电点的多肽分子。组分Ⅰ和Ⅱ的这些性质与在其他双子叶植物种子中已被鉴定的12s 和1.7s 贮藏球蛋白的完全符合,因此被确定为拟南芥菜的两种主要种子贮藏蛋白。这两种球蛋白在种子发育后期的一个特定时期内(开花后10—14天)积累,并在成熟种子中占总蛋白的绝大部分。 展开更多

关键词 拟南芥菜 种子 贮藏蛋白 凝胶电泳

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用RAPD技术鉴定两个小冰麦易位系 被引量：48

4

作者 鲍晓明 黄百渠 +2 位作者 李松涛 张忠廷 王斌 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1993年第1期81-87,共7页

本文对从小冰麦异附加系中选育出的两个抗锈品系小冰麦33号,小冰麦34号及其原始亲本新曙光一号和抗源供体天兰冰草进行了RAPD分析,确定了小冰麦33号和小冰麦34号是含一段冰草DNA的易位系。文中还讨论了RAPD做为一种准确、快速鉴定易位... 本文对从小冰麦异附加系中选育出的两个抗锈品系小冰麦33号,小冰麦34号及其原始亲本新曙光一号和抗源供体天兰冰草进行了RAPD分析,确定了小冰麦33号和小冰麦34号是含一段冰草DNA的易位系。文中还讨论了RAPD做为一种准确、快速鉴定易位系的方法的可行性。 展开更多

关键词 易位 RAPD 小冰麦 天兰冰草 抗锈生状

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用SSR探针进行番茄品种的DNA指纹分析 被引量：28

5

作者 栾雨时 安利佳 +2 位作者 黄百渠 张文俊 何孟元 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期51-53,共3页

用放射性同位素γ－３２Ｐ－ＡＴＰ标记人工合成的简单重复序列（ＧＡＴＡ）４，与经ＤｒａⅠ酶切的８个番茄品种的ＤＮＡ进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交，得到的ＤＮＡ指纹在品种间差异很大，在品种内单株间无差异。经统计计算，任意两个品... 用放射性同位素γ－３２Ｐ－ＡＴＰ标记人工合成的简单重复序列（ＧＡＴＡ）４，与经ＤｒａⅠ酶切的８个番茄品种的ＤＮＡ进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交，得到的ＤＮＡ指纹在品种间差异很大，在品种内单株间无差异。经统计计算，任意两个品种间具有完全相同ＤＮＡ指纹的概率为１．１×１０－４，呈现了高度的品种特异性。 展开更多

关键词 番茄 SSR探针 DNA指纹 品种鉴定 简单重复序列

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有机-无机杂化纳米材料的制备、表征及性质 被引量：11

6

作者 康振辉 王恩波 +6 位作者 王轶博 由万胜 胡长文 黄百渠 乌垠 历锡亮 焦明大 《东北师大学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期60-63,共4页

利用低温固相反应首次制备了 [(CH3 ) 4 N] 3 PW12 O4 0 ·6H2 O(Ⅰ ) ,[(CH3 ) 4 N] 6P2 Mo18O62 ·9H2 O(Ⅱ ) ,[HMTAH2 ] 2 ·SiW12 O4 0 ·7H2 O(Ⅲ )等纳米粒子 ,并用红外光谱、透射电镜、X射线粉末衍射等手段进... 利用低温固相反应首次制备了 [(CH3 ) 4 N] 3 PW12 O4 0 ·6H2 O(Ⅰ ) ,[(CH3 ) 4 N] 6P2 Mo18O62 ·9H2 O(Ⅱ ) ,[HMTAH2 ] 2 ·SiW12 O4 0 ·7H2 O(Ⅲ )等纳米粒子 ,并用红外光谱、透射电镜、X射线粉末衍射等手段进行表征 .结果表明 ,粒子大小均一 ,平均粒子直径为 4～ 8nm ,并具有潜在的电荷转移盐性质及非线性光学性质 . 展开更多

关键词 有机-无机杂化纳米材料 室温固相反应 多金属氧酸盐 电荷转移盐 非线性光学性质

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组蛋白乙酰化与癌症 被引量：10

7

作者 刘春艳 孙海晶 +1 位作者 陆军 黄百渠 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第1期19-23,共5页

由于组蛋白被修饰所引起的染色质结构的改变 ,在真核生物基因表达调控中发挥着重要的作用 ,这些修饰主要包括甲基化、乙酰化、磷酸化和泛素化等 ,其中组蛋白乙酰化尤为重要 .组蛋白乙酰转移酶 (HAT)和组蛋白去乙酰化酶 (HDAC)参与决定... 由于组蛋白被修饰所引起的染色质结构的改变 ,在真核生物基因表达调控中发挥着重要的作用 ,这些修饰主要包括甲基化、乙酰化、磷酸化和泛素化等 ,其中组蛋白乙酰化尤为重要 .组蛋白乙酰转移酶 (HAT)和组蛋白去乙酰化酶 (HDAC)参与决定组蛋白乙酰化状态 .HAT通常作为多亚基辅激活物复合体的一部分 ,催化组蛋白乙酰化 ,导致染色质结构的松散、激活转录 ;而HDAC是多亚基辅抑制物复合体的一部分 ,使组蛋白去乙酰化 ,导致染色质集缩 ,并抑制基因的转录 .编码这些酶的基因染色体易位易于导致急性白血病的发生 .另一方面 ,已经确定了一些乙酰化修饰酶的基因在染色体上的位置 ,它们尤其倾向定位于染色体的断裂处 .综述了HAT和HDAC参与的组蛋白乙酰化与癌症发生之间关系的最新进展 ,以期进一步阐明组蛋白乙酰化修饰酶的生物学功能以及它们在癌症发生过程中的作用 . 展开更多

关键词 组蛋白乙酰化 组蛋白乙酰转移酶 组蛋白去乙酰化酶 癌症 肿瘤发生

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二种重组α-乙酰乳酸脱羧酶在啤酒生产中降低双乙酰的作用 被引量：7

8

作者 尹东 曾庆华 +3 位作者 卢大宁 栾恒淳 黄百渠 李彦舫 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第6期405-408,共4页

利用已构建的含有短芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｂｒｅｖｉｓ）和产气肠杆菌（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ　ａｅｒｏｇｅｎｅｓ）α－乙酰乳酸脱羧酶（α－ａｃｅｔｏｌａｃｔａｔｅ ｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅ， α-ＡＬＤＣ）基因的... 利用已构建的含有短芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｂｒｅｖｉｓ）和产气肠杆菌（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ　ａｅｒｏｇｅｎｅｓ）α－乙酰乳酸脱羧酶（α－ａｃｅｔｏｌａｃｔａｔｅ ｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅ， α-ＡＬＤＣ）基因的工程菌株，并使它们分别在大肠杆菌中高效表达，获得重组α－ＡＬＤＣ。在实验室，用 ２Ｌ体积的麦芽汁进行啤酒生产试验，添加 ２种重组α－ＡＬＤＣ后，使啤酒中的双乙酰含量快速下降到或始终保持在０.１ｍｇ／Ｌ以下。证明得到的重组ａ－ＡＬＤＣ能有效地降低啤酒中双乙酰含量。 展开更多

关键词 短芽孢杆菌 产气肠杆菌 双乙酰 α-ALDC 啤酒

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香雪兰外植体形态学极性决定的体细胞胚胎发生 被引量：21

9

作者 王丽 鲍晓明 +1 位作者 黄百渠 郝水 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1998年第2期138-143,共6页

在含有２ｍｇ／ＬＩＡＡ和３ｍｇ／ＬＢＡＰ的改良Ｎ６培养基上，香雪兰（ＦｒｅｓｉａｒｅｆｒａｃｔａＫｌａｔ）花序外植体经直接体细胞胚胎发生途径再生出新的植株。在这一形态发生过程中，一个引人注意的现象是，所有的体细胞胚都... 在含有２ｍｇ／ＬＩＡＡ和３ｍｇ／ＬＢＡＰ的改良Ｎ６培养基上，香雪兰（ＦｒｅｓｉａｒｅｆｒａｃｔａＫｌａｔ）花序外植体经直接体细胞胚胎发生途径再生出新的植株。在这一形态发生过程中，一个引人注意的现象是，所有的体细胞胚都出现在花序轴切段的原形态学下端（称为胚发生端，ＥＥ），而在形态学上端（称为非胚胎发生端，ＮＥＥ）无体细胞胚形成。这一形态发生的极性与地心引力的方向和外植体在培养基上的放置位置无关。在培养的早期，仅于胚发生端观察到了起始细胞的分裂。ＳＤＳ聚丙烯酰胺凝胶电泳结果表明，在培养了１ｄ的外植体的胚发生端出现了两个特殊的多肽成分，而在非胚发生端则未检测到这两种多肽。高效液相色谱分析表明，培养前外植体切段两端的内源激素（ＩＡＡ）的含量无显著差别。但经过一段时间的培养，胚发生端的ＩＡＡ含量明显高于非胚发生端的ＩＡＡ含量，表明内源激素在体细胞胚胎发生的诱导过程中起着关键的作用。在香雪兰体细胞胚胎发生诱导的过程中，由于花序轴切段两端在分子水平和生理水平上均存在差异，使这一系统有可能成为研究体细胞胚胎发生机理的有用实验材料。 展开更多

关键词 香雪兰 体细胞 胚胎发生 外植体极性

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产气肠杆菌α-乙酰乳酸脱羧酶基因的克隆和表达及影响重组酶活性的因素 被引量：6

10

作者 尹东 曾庆华 +2 位作者 卢大宁 黄百渠 李彦舫 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期501-506,共6页

用 Ｐ Ｃ Ｒ 方法从产气肠杆菌（ Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ ａｅｒｏｇｅｎｅｓ） 中克隆出０９ｋｂ 的 Ｄ Ｎ Ａ 片段，经 Ｄ Ｎ Ａ 测序证明是α乙酰乳酸脱羧酶（αａｃｅｔｏｌａｃｔａｔｅ ｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅ ，α... 用 Ｐ Ｃ Ｒ 方法从产气肠杆菌（ Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ ａｅｒｏｇｅｎｅｓ） 中克隆出０９ｋｂ 的 Ｄ Ｎ Ａ 片段，经 Ｄ Ｎ Ａ 测序证明是α乙酰乳酸脱羧酶（αａｃｅｔｏｌａｃｔａｔｅ ｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅ ，α Ａ Ｌ Ｄ Ｃ） 基因。将α Ａ Ｌ Ｄ Ｃ基因重组到质粒ｐ Ｂ Ｖ２２０ 后，转化大肠杆菌，经筛选获得高效表达的重组子菌株。重组α Ａ Ｌ Ｄ Ｃ 基因表达量占菌体总蛋白量的２７ ％ 。酶活检测表明重组子细胞表达的α Ａ Ｌ Ｄ Ｃ 活性是产气肠杆菌的１２０００ 倍。另外，粗提的重组α Ａ Ｌ Ｄ Ｃ 的最适ｐ Ｈ 为６５ ～７０ ，ｐ Ｈ 稳定范围为５５ ～８０ ，适合的温度为３５ ～４５ ℃。 Ｂａ２ ＋ 、 Ｃｄ２ ＋ 、 Ｆｅ２ ＋ 、 Ｃｏ２ ＋ 、 Ｍｎ２ ＋ 、 Ｓｎ２ ＋ 可提高重组α Ａ Ｌ Ｄ Ｃ 的活性。氨基酸修饰剂可降低其活性。 展开更多

关键词 产气肠杆菌 乙酰乳酸脱羧酶 基因克隆表达 酶活

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细叶黄芪叶肉原生质体发育早期几种细胞器的变化 被引量：11

11

作者 李喜文 安利佳 +1 位作者 黄百渠 郝水 《实验生物学报》 CSCD 1994年第1期11-23,共13页

在细叶黄芪叶肉原生质体发育早期,细胞器的变化较大。离体培养4h后,线粒体的嵴和基质物质开始增加。培养3—5天后,线粒体的数量增加5倍以上,此时可见大部分线粒体围绕细胞核分布。在培养24h后,高尔基体开始发育,它们主要分布在细胞质周... 在细叶黄芪叶肉原生质体发育早期,细胞器的变化较大。离体培养4h后,线粒体的嵴和基质物质开始增加。培养3—5天后,线粒体的数量增加5倍以上,此时可见大部分线粒体围绕细胞核分布。在培养24h后,高尔基体开始发育,它们主要分布在细胞质周边区域。多糖细胞化学染色表明,高尔基体内沉积着大量嗜银物质。培养1天后,粗面内质网开始发育。培养3天时,部分叶绿体边缘出现一些空隙结构。随着叶绿体内膜结构的消失,淀粉粒增大,叶绿体逐渐转变为造粉质体。 展开更多

关键词 叶肉 原生质体 细胞器 黄芪 发育

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人Elongator复合物Elp4亚基基因可部分补偿酵母ELP4缺失菌株的生长缺陷 被引量：3

12

作者 李芬 韩秋菊 +2 位作者 罗巅辉 陆军 黄百渠 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第7期668-674,共7页

为研究人Elongator复合物Elp4亚基的功能 ,将人ELP4基因转入酵母ELP4基因缺失的突变菌株 (elp4△菌株 )中 ,并对转化菌株进行功能互补实验和SSA3和PHO5基因表达分析 ,结果表明人的ELP4基因不能恢复突变菌株对高盐的敏感性 ,但可以在一... 为研究人Elongator复合物Elp4亚基的功能 ,将人ELP4基因转入酵母ELP4基因缺失的突变菌株 (elp4△菌株 )中 ,并对转化菌株进行功能互补实验和SSA3和PHO5基因表达分析 ,结果表明人的ELP4基因不能恢复突变菌株对高盐的敏感性 ,但可以在一定程度上缓解突变菌株对高温、咖啡因 (Caffeine)和 6 氮尿嘧啶 (6 AU)的敏感性 ,部分恢复低磷条件下PHO5基因表达延迟的缺陷 ,并可在热激条件下提高SSA3基因的表达 ,因此人的ELP4基因可以部分补偿酵母ELP4基因缺失所引起的生长缺陷 ,提示人的Elp4亚基可能与酵母的该亚基功能相似。 展开更多

关键词 ELP4基因 Elongator复合物 酵母ELP4缺失突变株 功能互补 基因表达分析

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可逆的组蛋白乙酰化调控p16的表达(英文) 被引量：3

13

作者 王秀莉 冯云鹏 +4 位作者 赵静 张国平 潘虹 黄百渠 陆军 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2010年第6期600-606,共7页

p16INK4a通过抑制CDK4/6的活性而在细胞周期进行中发挥重要的作用,研究发现,组蛋白乙酰转移酶p300能促进p16INK4a启动子活性,而组蛋白去乙酰化酶HDAC3/4能够逆转由p300介导的p16INK4a启动子活性的增加,HDAC3/4能够降低p16INK4amRNA和蛋... p16INK4a通过抑制CDK4/6的活性而在细胞周期进行中发挥重要的作用,研究发现,组蛋白乙酰转移酶p300能促进p16INK4a启动子活性,而组蛋白去乙酰化酶HDAC3/4能够逆转由p300介导的p16INK4a启动子活性的增加,HDAC3/4能够降低p16INK4amRNA和蛋白质的水平.染色质免疫沉淀(ChIP)实验结果表明转染p300表达质粒能够逆转由HDAC3/4介导的p16INK4a启动子组蛋白的低乙酰化状态.此外,免疫荧光实验结果表明HDAC4的核质穿梭起着重要的作用.免疫印迹和染色质免疫沉淀实验证明HDAC的抑制剂丁酸钠盐(NaBu)能通过诱导组蛋白的高乙酰化而促进p16INK4a的表达.基于这些实验结果,推测出可逆的组蛋白乙酰化参与p16INK4a基因转录调控的模型. 展开更多

关键词 P16 P300 HDAC3 HDAC4 可逆的乙酰化

原文传递

组蛋白与转录因子在hAMFR基因启动子序列上的结合及相互作用 被引量：3

14

作者 曾庆华 尹东 +2 位作者 孙迎春 黄百渠 吕延成 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1999年第4期329-335,共7页

采用从鸡红细胞中分离纯化的组蛋白H1、核心组蛋白H2A＋H2B和H3＋H4，以及从HeLa细胞中萃取的含有RNA聚合酶Ⅱ和多种Ⅱ类基因转录因子的可溶性HeLa细胞核抽提物，通过凝胶迟滞电泳，对组蛋白和HeLa细胞核抽提物中的转录因子在人自泌移... 采用从鸡红细胞中分离纯化的组蛋白H1、核心组蛋白H2A＋H2B和H3＋H4，以及从HeLa细胞中萃取的含有RNA聚合酶Ⅱ和多种Ⅱ类基因转录因子的可溶性HeLa细胞核抽提物，通过凝胶迟滞电泳，对组蛋白和HeLa细胞核抽提物中的转录因子在人自泌移动因子受体（Humanautocrinemotilityfactor，简称为hAMFR）基因上游启动子序列的相互作用关系进行了初步研究，得到以下结论：组蛋白Hl对hAMFR基因启动子序列的结合是相对稳定的，H1在稳定染色质小体中起着重要的作用。组蛋白及其组份和转录因子可以同时结合在hAMFR基因启动子序列上形成三元复合物，提示转录因子和组蛋白在与DNA竞争结合过程中不是简单地排斥对方。 展开更多

关键词 组蛋白 核小体 转录因子 启动子序列 电泳

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小麦-冰草异附加系种子醇溶蛋白基因表达的分析 被引量：9

15

作者 鲍晓明 黄百渠 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 1993年第3期233-238,共6页

本文通过对两个系列14个小麦-冰草(Triticum aestivum-Agropyron intermedium)异附加系种子醇溶蛋白的SDS电泳分析,探讨了异源的天蓝冰草染色体在小麦基因组背景下的表达及其对小麦基因表达的影响。结果表明,附加不同的冰草染色体能以... 本文通过对两个系列14个小麦-冰草(Triticum aestivum-Agropyron intermedium)异附加系种子醇溶蛋白的SDS电泳分析,探讨了异源的天蓝冰草染色体在小麦基因组背景下的表达及其对小麦基因表达的影响。结果表明,附加不同的冰草染色体能以不同的方式影响小麦种子醇溶蛋白基因的表达。在个别异附加系中,冰草染色体上的醇溶蛋白基因能够直接表达;而在多数情况下,它们仅能干扰或改变少数几个醇溶蛋白组分的合成,包括诱发、增强和抑制小麦原有醇溶蛋白基因的表达。另外,在有的异附加系中还出现了小麦和冰草中均没有的新的带型。由此可见,异附加系中冰草染色体对小麦基因表达的影响是一种多方面的复合作用,但对其作用的机理和细节尚不清楚。 展开更多

关键词 小麦 醇溶蛋白 基因表达 冰草 种子

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牛天然纤溶酶原Kringles结构域片段的获得及其抑制内皮细胞增殖作用研究 被引量：3

16

作者 杨红 许为 +4 位作者 乌垠 冯学超 李玉新 麻彤晖 黄百渠 《分子科学学报》 CAS CSCD 2001年第1期60-63,共4页

利用猪胰弹性蛋白酶和尿激酶限制性酶切牛纤溶酶原 ,获得了纤溶酶原Kringles结构域片段Kringles1 -3 (K1 -3 )和Kringles1 -4 (K1 -4 ) .研究发现 ,在没有自由巯基供体存在的条件下 ,尿激酶酶切牛纤溶酶原也能够产生K1 -4 ,从而认为存... 利用猪胰弹性蛋白酶和尿激酶限制性酶切牛纤溶酶原 ,获得了纤溶酶原Kringles结构域片段Kringles1 -3 (K1 -3 )和Kringles1 -4 (K1 -4 ) .研究发现 ,在没有自由巯基供体存在的条件下 ,尿激酶酶切牛纤溶酶原也能够产生K1 -4 ,从而认为存在由尿激酶酶切牛纤溶酶原直接产生K1 -4的途径 .所获得的K1 -3和K1 -4对恒河猴脉络膜 展开更多

关键词 纤溶酶原 Kringles结构域 内皮细胞 细胞增殖 抑制作用 血管抑素 血管

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应用FISH技术鉴定一个小冰麦易位系 被引量：6

17

作者 韩方普 何孟元 +4 位作者 卜秀玲 黄百渠 郝水 马有志 辛志勇 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1998年第6期500-502,共3页

以生物素（ｂｉｏｔｉｎ１６ｄＵＴＰ）标记的天蓝冰草（Ａｇｒｏｐｙｒｏｎｉｎｔｅｒｍｅｄｉｕｍ（Ｈｏｓｔ）Ｐ．Ｂ．＝Ｅｌｙｔｒｉｇｉａｉｎｔｅｒｍｅｄｉａ（Ｈｏｓｔ）Ｎｅｖｓｋｉ＝Ｔｈｉｎｏｐｙｒｕｍｉｎｔｅｒｍｅ... 以生物素（ｂｉｏｔｉｎ１６ｄＵＴＰ）标记的天蓝冰草（Ａｇｒｏｐｙｒｏｎｉｎｔｅｒｍｅｄｉｕｍ（Ｈｏｓｔ）Ｐ．Ｂ．＝Ｅｌｙｔｒｉｇｉａｉｎｔｅｒｍｅｄｉａ（Ｈｏｓｔ）Ｎｅｖｓｋｉ＝Ｔｈｉｎｏｐｙｒｕｍｉｎｔｅｒｍｅｄｉｕｍ（Ｈｏｓｔ）ＢａｒｋｗｏｒｔｈａｎｄＤｅｗｅｙ）染色体组ＤＮＡ为探针，普通小麦（ＴｒｉｔｉｃｕｍａｅｓｔｉｖｕｍＬ．）“中国春”ＤＮＡ为封闭，用荧光原位杂交（ＦＩＳＨ）技术对小冰麦３３号进行检测。结果表明：在一对染色体的端部显现出绿色荧光，这说明小冰麦３３号携带外源基因的冰草染色体片段位于小麦染色体端部，而且易位的染色体片段是较小的。从ＤＮＡ水平直接证明小冰麦３３是一个冰草染色体片段易位到小麦染色体端部的易位系。 展开更多

关键词 小麦 天蓝冰草 易位系 荧光原位杂交

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酵母组蛋白乙酰基转移酶GCN5和去乙酰化酶RPD3在大肠杆菌中的表达 被引量：2

18

作者 陈婷 陆军 +3 位作者 孙晖 董梅 韩松岩 黄百渠 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期567-572,共6页

以酵母基因组DNA为模板,通过PCR方法分别扩增出在5′端带有6xHis标签的gcn5和rpd3基因,将其克隆到pBV220质粒中,分别构建成表达质粒pBVgcn5和pBVrpd3,转化大肠杆菌(Escherichiacoli)并进行诱导表达。SDS PAGE显示,含重组质粒的菌株经热... 以酵母基因组DNA为模板,通过PCR方法分别扩增出在5′端带有6xHis标签的gcn5和rpd3基因,将其克隆到pBV220质粒中,分别构建成表达质粒pBVgcn5和pBVrpd3,转化大肠杆菌(Escherichiacoli)并进行诱导表达。SDS PAGE显示,含重组质粒的菌株经热诱导后分别过量表达出约50kDa的蛋白。利用6xHis亲和层析纯化了这两种重组酶。对组蛋白乙酰基转移酶GCN5进行体外活性检测,证实其具有组蛋白乙酰基转移酶活性。本工作为通过体外实验研究乙酰化和去乙酰化修饰与基因转录调控的关系奠定了基础。 展开更多

关键词 组蛋白乙酰基转移酶 组蛋白去乙酰化酶 GCN5 RPD3 基因克隆 大肠杆菌 表达

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醋酸杆菌α-乙酰乳酸脱羧酶基因克隆、表达及在啤酒发酵中的作用 被引量：3

19

作者 尹东 卢大宁 +2 位作者 曾庆华 黄百渠 李彦舫 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第1期24-26,共3页

根据α－乙酰乳酸脱羧酶（α－ａｃｅｔｏｌａｃｔａｔｅｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅ，α－ＡＬＤＣ）基因的碱基序列，用ＰＣＲ方法从醋酸杆菌（Ａｃｅｔｏｂａｃｔｅｒａｃｅｔｉ）中克隆出了０．９９ｋｂ的ＤＮＡ片段，经ＤＮＡ测序... 根据α－乙酰乳酸脱羧酶（α－ａｃｅｔｏｌａｃｔａｔｅｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅ，α－ＡＬＤＣ）基因的碱基序列，用ＰＣＲ方法从醋酸杆菌（Ａｃｅｔｏｂａｃｔｅｒａｃｅｔｉ）中克隆出了０．９９ｋｂ的ＤＮＡ片段，经ＤＮＡ测序后证明该片段是α－乙酰乳酸脱羧酶基因．将该基因重组到质粒ｐＢＶ２２０中，转化大肠杆菌，筛选获得具有α－ＡＬＤＣ活性的重组子菌株．酶活检测表明，重组子细胞表达的α－ＡＬＤＣ活性是供体菌的１１００倍．将得到的α－ＡＬＤＣ粗提后用于啤酒发酵试验。 展开更多

关键词 醋酸杆菌 α-ALDC 基因克隆 啤酒发酵

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虎眼万年青的直接体细胞胚胎发生和植株再生 被引量：12

20

作者 尹东 黄百渠 李彦舫 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1997年第1期59-63,共5页

以虎眼万年青(Ornithogalum caudatum Jacq.)子鳞茎的鳞叶为外植体,不经过愈伤组织阶段,直接诱导体细胞胚胎发生并再生植株。组织切片和扫描电镜的观察结果表明:体细胞胚来自鳞叶表皮最外层的单个细胞。这个细胞经第一次平周分裂,成为2... 以虎眼万年青(Ornithogalum caudatum Jacq.)子鳞茎的鳞叶为外植体,不经过愈伤组织阶段,直接诱导体细胞胚胎发生并再生植株。组织切片和扫描电镜的观察结果表明:体细胞胚来自鳞叶表皮最外层的单个细胞。这个细胞经第一次平周分裂,成为2-细胞原胚,然后依次经过4-细胞原胚、球形胚、香蕉形胚等阶段发育成小植株,其形态学发育过程与合子胚相似。小植株移入土中,1周后即可成活。此外,还观察到直接体细胞胚只产生于鳞叶的近轴面,而远轴面无体细胞胚产生,这两个部位在细胞结构和形态上有显著差异。 展开更多

关键词 虎眼万年青 体细胞胚胎发生 植株再生

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