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桉属植物内参基因的筛选及评估 被引量:23
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作者 黄真池 欧阳乐军 +2 位作者 张龙 沙月娥 曾富华 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2013年第10期67-72,共6页
【目的】分析桉属植物候选内参基因的表达稳定性,筛选合适的内参基因,为深入研究桉属植物愈伤组织芽分化及体细胞胚胎发生过程中基因的表达变化提供参考。【方法】以尾巨桉、粗皮桉、尾叶桉的叶片及尾叶桉的绿色、红色和白色3种愈伤组... 【目的】分析桉属植物候选内参基因的表达稳定性,筛选合适的内参基因,为深入研究桉属植物愈伤组织芽分化及体细胞胚胎发生过程中基因的表达变化提供参考。【方法】以尾巨桉、粗皮桉、尾叶桉的叶片及尾叶桉的绿色、红色和白色3种愈伤组织为材料,提取其总RNA后逆转录得cDNA;分别将桉属植物actin基因和拟南芥actin基因的GenBank序列输入Primer3Plus软件,设计Real-time quantitative PCR(qPCR)引物,同时选择RTEF和RARS为候选内参基因;以cDNA为模板进行qPCR,得4个候选内参基因的Ct值;并用RefFinder软件分析候选内参基因的表达稳定性。【结果】RefFinder软件分析结果显示,4个候选内参基因RTEF、RARS、EACT、AACT的稳定系数分别为1.189,1.861,2.828和3.224,基因表达稳定性由高到低依次为RTEF、RARS、EACT、AACT。【结论】以RTEF为内参基因分析桉属植物的基因表达变化较为理想。 展开更多
关键词 内参基因 桉属 愈伤组织 RefFinder软件
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Cu^(2+)、Cd^(2+)、Hg^(2+)对玉米幼苗生长和抗氧化酶活性的影响 被引量:9
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作者 黄真池 彭舒 +2 位作者 欧阳乐军 欧日华 曾富华 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2012年第1期37-42,共6页
【目的】研究必需元素Cu2+和非必需元素Cd2+、Hg2+对玉米幼苗生长及抗氧化酶活性的影响,探讨玉米抵抗重金属毒害的机理。【方法】用自来水(CK)及高(1mmol/L)、中(0.5mmol/L)、低(0.25mmol/L)3个浓度的重金属离子Cu2+、Cd2+、Hg2+溶液滴... 【目的】研究必需元素Cu2+和非必需元素Cd2+、Hg2+对玉米幼苗生长及抗氧化酶活性的影响,探讨玉米抵抗重金属毒害的机理。【方法】用自来水(CK)及高(1mmol/L)、中(0.5mmol/L)、低(0.25mmol/L)3个浓度的重金属离子Cu2+、Cd2+、Hg2+溶液滴灌玉米幼苗,处理3d后测定玉米幼苗根长和叶长、可溶性蛋白和叶绿素含量及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)的活性,并对根系和叶片中POD同工酶表达的变化进行电泳分析。【结果】与CK相比,3种重金属离子明显抑制玉米幼苗生长,提高根系和叶片中可溶性蛋白含量,对叶绿素含量的影响与其浓度有关。Cu2+对玉米根系中SOD活性无明显影响,Cd2+和Hg2+明显降低了根系中SOD活性。Cu2+使玉米幼苗根系中POD活性增强;低浓度Cd2+和Hg2+使玉米根系中POD活性增强,中、高浓度Cd2+和Hg2+则使玉米根系中POD活性减弱。重金属对根系中POD同工酶的影响表现为:Cu2+无明显影响,Cd2+减弱了Rb1和Rb2的表达,Hg2+则抑制了Rb1的表达,增强了Rb2的表达,且低浓度Hg2+诱导出了Rb3。重金属对叶片中POD同工酶的影响表现为:随着处理浓度的增大,Lb5表达增强,其中Cd2+的诱导效果最强;与CK及Cu2+和Cd2+相比,Hg2+完全抑制了Lb6的表达。【结论】Cu2+、Cd2+、Hg2+对玉米生长及SOD和POD活性的影响,与重金属种类和浓度有关,并存在器官特异性。重金属中必需元素和非必需元素都会影响POD同工酶的表达,但作用机理不同。 展开更多
关键词 玉米 重金属 生理生化指标 POD同工酶 抗氧化酶
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青枯菌致病机理及作物抗青枯病研究进展 被引量:9
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作者 黄真池 刘媛 +1 位作者 曾富华 卢向阳 《热带亚热带植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期491-496,共6页
青枯菌(Ralstonia solanacearum)是引起植物青枯病的病原细菌。青枯菌通过T3S(Ⅲ型分泌系统)、T2S(II型分泌系统)等分泌系统将多种毒性因子输送到胞外使寄主植物致病。转基因抗病、培育抗性品种和生物防治是防治青枯病的主要途径。
关键词 青枯菌 青枯病 生物防治 转基因
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受病原物诱导的植物启动子PPPs在转基因辣椒中的活性 被引量:5
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作者 黄真池 卢向阳 +3 位作者 曾富华 叶耀华 刘媛 贺炜华 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期270-273,共4页
按GenBank中受病原物诱导的植物启动子(PPPs)的碱基序列设计3对引物,从烟草基因组中扩增到3个启动子PPP1,PPP2和PPP3.用PPPs替换pBI121中与uidA基因(编码β-葡萄糖醛酸酶GUS)相连的35S启动子,再将重组质粒导入农杆菌GV3101,构建了PPPs和... 按GenBank中受病原物诱导的植物启动子(PPPs)的碱基序列设计3对引物,从烟草基因组中扩增到3个启动子PPP1,PPP2和PPP3.用PPPs替换pBI121中与uidA基因(编码β-葡萄糖醛酸酶GUS)相连的35S启动子,再将重组质粒导入农杆菌GV3101,构建了PPPs和uidA相连的转化单元.通过农杆菌介导法将受PPPs控制的uidA基因导入辣椒.对转基因辣椒叶片接种青枯菌无致病性菌株(AVRS1),24 h后检测GUS活性.结果表明,接种AVRS1后,PPPs启动了uidA的表达,GUS活性显著增强. 展开更多
关键词 病原物诱导的植物启动子 转基因辣椒 青枯菌无致病性菌株
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一种木本植物RNA和DNA的简捷提取方法 被引量:5
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作者 黄真池 余秋梅 +1 位作者 欧阳乐军 曾富华 《湖北农业科学》 北大核心 2010年第4期773-774,784,共3页
将尾叶桉(Eucalyptus urophylla)叶片在液氮中研磨成粉,先用含山梨醇、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、牛血清白蛋白、聚乙二醇和亚精胺的提取缓冲液使总核酸沉淀,同时去除了大部分次生代谢物质。然后用山梨醇、月桂酰肌氨酸钠进一步裂解细胞,释... 将尾叶桉(Eucalyptus urophylla)叶片在液氮中研磨成粉,先用含山梨醇、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、牛血清白蛋白、聚乙二醇和亚精胺的提取缓冲液使总核酸沉淀,同时去除了大部分次生代谢物质。然后用山梨醇、月桂酰肌氨酸钠进一步裂解细胞,释放核酸。再用CTAB与核酸结合成复合物溶于高盐溶液。用氯仿/异戊醇除蛋白质后,离心得含总核酸的上清液。运用钙盐分步沉淀法,先在上清液中加入1/10体积的10%氯化钙溶液,使DNA与Ca2+结合成DNA钙盐。向溶液中加入1/5体积的乙醇,使DNA钙盐形成沉淀析出,离心得DNA后,再增大乙醇浓度使RNA钙盐沉淀。得到的DNA和RNA用非变性琼脂糖凝胶进行质量检测,可得完整的RNA和DNA条带。此法经济、快捷,可同时得到DNA和RNA。 展开更多
关键词 木本植物 RNA DNA 非变性琼脂糖电泳
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不破坏种子活力测定方法研究 Ⅱ种子活力与呼吸速率的关系 被引量:10
6
作者 黄真池 黄上志 《种子》 CSCD 北大核心 1998年第5期3-5,共3页
对不同活力的白菜种子进行连续5次吸水回干处理,发现吸水回干处理使种子的抗劣变能力显著提高。测定种子吸胀初期的呼吸速率发现:高活力种子(发芽率82%)和中等活力种子(发芽率68%)的呼吸速率显著高于低活力种子(发芽率44%)... 对不同活力的白菜种子进行连续5次吸水回干处理,发现吸水回干处理使种子的抗劣变能力显著提高。测定种子吸胀初期的呼吸速率发现:高活力种子(发芽率82%)和中等活力种子(发芽率68%)的呼吸速率显著高于低活力种子(发芽率44%)的呼吸速率,但高活力种子与中等活力种子的呼吸速率差别不明显。种子经吸水回干处理(1~5次)再自然老化后,种子吸胀初期的呼吸速率则与种子活力呈明显的正相关。 展开更多
关键词 白菜种子 吸水回干处理 呼吸速率 检验
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生物课堂双语教学之浅见 被引量:5
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作者 黄真池 曾富华 《生物学杂志》 CAS CSCD 2007年第4期77-78,65,共3页
根据生物课堂双语教学的实践经验,提出当前实施双语教学要经历"引、记、读、译、说"五个阶段;指出了实施双语教学应注意的几个问题。
关键词 生物课堂 双语教学 实践经验
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不破坏种子活力测定方法研究──Ⅰ不同活力种子挥发性组分和释放量分析 被引量:3
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作者 黄真池 黄上志 《种子》 CSCD 北大核心 1998年第4期1-3,7,共4页
用气相色谱分析了白菜、水稻、绿豆种子在密闭贮藏期间挥发性组分的种类与释放量。不同温度下含水量不同的各种种子都有挥发性组分产生。种于贮藏在0℃比的在25℃产生的挥发性组分多:经32%相对湿度(RH)平衡水分的种子比经9%或64%R... 用气相色谱分析了白菜、水稻、绿豆种子在密闭贮藏期间挥发性组分的种类与释放量。不同温度下含水量不同的各种种子都有挥发性组分产生。种于贮藏在0℃比的在25℃产生的挥发性组分多:经32%相对湿度(RH)平衡水分的种子比经9%或64%RH平衡水分的种子产生的挥发性组分释放量多。分析种子产生的挥发性组分与种子活力关系,发现乙醛释放量与种子活力成显著正相关,乙醛/乙醇与种子活力也成明显正相关。 展开更多
关键词 挥发性组分 种子活力 非破坏性方法 测定
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辣椒子叶高效再生体系的建立 被引量:14
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作者 黄真池 李飞凤 +3 位作者 曾骥 胡志娟 刘媛 曾富华 《仲恺农业技术学院学报》 2007年第1期13-18,共6页
以保加利亚尖椒(Capsicum annuum L.Bulgaria pointed pepper)为试验材料,探讨了有机成分、激素组合、辣椒幼苗提取物、AgNO3、脱落酸和亚精胺等因素对子叶离体培养的影响.结果表明,辣椒幼苗汁液对不定芽的诱导分化及伸长有明显的促进作... 以保加利亚尖椒(Capsicum annuum L.Bulgaria pointed pepper)为试验材料,探讨了有机成分、激素组合、辣椒幼苗提取物、AgNO3、脱落酸和亚精胺等因素对子叶离体培养的影响.结果表明,辣椒幼苗汁液对不定芽的诱导分化及伸长有明显的促进作用,添加脱落酸和亚精胺可促进不定芽的伸长;采用优化的培养基培养,不定芽诱导率达到100%,不定芽伸长率达83%,生根率达到100%.在此基础上建立了保加利亚尖椒的子叶离体高效再生体系. 展开更多
关键词 辣椒(Capsicum annuum L.) 子叶 再生体系
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低温胁迫对绿豆幼苗的影响 被引量:1
10
作者 黄真池 张保恩 黄霞 《中山大学研究生学刊(自然科学与医学版)》 1997年第4期22-25,共4页
通过研究绿豆幼苗的外观和生理生化变化,发现7℃低温条件下,绿豆幼苗的外观形态和新陈代谢被破坏。扫描电镜照片显示其根尖表皮细胞剥脱,排列不规则。一些生理生化指标,如酸性磷酸酶同工酶的种类、蛋白质和丙二醛的含量、超氧化物歧化... 通过研究绿豆幼苗的外观和生理生化变化,发现7℃低温条件下,绿豆幼苗的外观形态和新陈代谢被破坏。扫描电镜照片显示其根尖表皮细胞剥脱,排列不规则。一些生理生化指标,如酸性磷酸酶同工酶的种类、蛋白质和丙二醛的含量、超氧化物歧化酶的活性以及呼吸速率都有明显改变。 展开更多
关键词 外观形态 生理生化变化 低温胁迫
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应用人工启动子培育广谱抗病性作物的进展与设想 被引量:1
11
作者 黄真池 欧阳乐军 +1 位作者 彭舒 曾富华 《湛江师范学院学报》 2010年第3期88-94,共7页
转基因抗性作物常因目的基因的过表达而造成品质下降、减产、甚至畸形发育.因此,转基因抗病必须解决好广谱抗性、持久抗性和消除副作用等关键问题.本文综述了病原物诱导型启动子的克隆,总结了基因工程中应用病原物诱导型启动子的优点,... 转基因抗性作物常因目的基因的过表达而造成品质下降、减产、甚至畸形发育.因此,转基因抗病必须解决好广谱抗性、持久抗性和消除副作用等关键问题.本文综述了病原物诱导型启动子的克隆,总结了基因工程中应用病原物诱导型启动子的优点,分析了病原物诱导型启动子中与诱导抗病相关的保守系列,提出了构建人工启动子和选用npr1基因培育广谱抗病性作物的设想. 展开更多
关键词 病原物诱导型启动子 人工启动子 广谱抗病性
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prp1-1调控Rs-AFP2诱导表达对增强辣椒疫霉菌抗性的研究(英文)
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作者 黄真池 罗齐军 +1 位作者 欧阳乐军 曾富华 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期892-897,共6页
病原物诱导型启动子能精确控制抗病基因在侵染位点的表达,是抗病基因工程的有效工具。prp1-1是来自马铃薯谷胱甘肽巯基转移酶基因启动子的一个273bp的片段,能够快速准确地启动被侵染位点抗病基因的表达;Rs-AFP2是具有对致病性丝状真菌... 病原物诱导型启动子能精确控制抗病基因在侵染位点的表达,是抗病基因工程的有效工具。prp1-1是来自马铃薯谷胱甘肽巯基转移酶基因启动子的一个273bp的片段,能够快速准确地启动被侵染位点抗病基因的表达;Rs-AFP2是具有对致病性丝状真菌的广谱抗性。该研究构建prp1-1调控Rs-AFP2基因表达的载体,经农杆菌介导转化法导入辣椒。逆转录PCR检测发现,转基因辣椒只在受到疫霉菌孢子侵染时,才由prp1-1启动Rs-AFP2基因的转录。用疫霉菌孢子灌根接种转基因辣椒T1代植株,35株T1代辣椒中有29株表现出明显的疫霉菌抗性。另将23株T1代辣椒种于人工气候箱,发现其形态和发育特征与相同条件下的非转基因植株无明显区别。研究表明,prp1-1调控Rs-AFP2的诱导表达达到了增强辣椒疫霉菌抗性的目的,而且避免了负面效应的发生。 展开更多
关键词 辣椒 prp1-1 Rs-AFP2 疫霉菌
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中学生班级人际关系良性化论略 被引量:1
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作者 黄真池 《长沙铁道学院学报(社会科学版)》 2005年第1期158-159,164,共3页
班级人际关系对中学生的成长是十分重要的,保持中学生班级人际关系良性化是班主任的不可忽视的工作。要做好这个工作,班主任要弄清班级人际关系状况、还要善于分析造成中学生班级不良人际关系的原因、更为重要的工作是坚持不懈地在班级... 班级人际关系对中学生的成长是十分重要的,保持中学生班级人际关系良性化是班主任的不可忽视的工作。要做好这个工作,班主任要弄清班级人际关系状况、还要善于分析造成中学生班级不良人际关系的原因、更为重要的工作是坚持不懈地在班级开展思想道德教育、人生价值观教育、班风班纪教育、向学生传输人际交往的技巧。 展开更多
关键词 中学生 班级人际关系 人际关系良性化策略
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粗皮桉的组织培养与植株再生研究 被引量:8
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作者 沙月娥 吴志华 +3 位作者 欧阳乐军 黄真池 曾富华 李再峰 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期1511-1516,共6页
【目的】研究不同植物生长调节剂组合对粗皮桉茎段愈伤组织诱导及再生的影响,为建立粗皮桉再生体系和粗皮桉商品化育苗提供参考。【方法】以粗皮桉茎段为外殖体,通过对不同植物生长调节剂组合的优化,建立粗皮桉再生体系。【结果】在MS... 【目的】研究不同植物生长调节剂组合对粗皮桉茎段愈伤组织诱导及再生的影响,为建立粗皮桉再生体系和粗皮桉商品化育苗提供参考。【方法】以粗皮桉茎段为外殖体,通过对不同植物生长调节剂组合的优化,建立粗皮桉再生体系。【结果】在MS培养基上添加2.0 mg/L PBU和0.05 mg/L IAA,21 d后,外植体愈伤组织诱导率达98.4%;将愈伤组织接种在添加0.8 mg/L 6-BA和0.1 mg/L NAA的1/2MS培养基上,诱芽率高达86.0%;用1/2MS培养基添加0.8 mg/L PBU与0.1 mg/L NAA诱导粗皮桉不定芽增殖,用1/2MS培养基附加0.5 mg/L IBA和0.5 mg/L NAA诱导生根,炼苗15 d后,组培苗移栽到黄心土与腐殖质土质量比为1∶1的基质中,成活率高达95.0%。【结论】2.0 mg/L PBU和0.05 mg/L IAA是诱导粗皮桉愈伤组织的最适植物生长调节剂组合,添加0.8 mg/L 6-BA和0.1 mg/L NAA的1/2MS培养基诱芽效果最好,添加0.1 mg/L NAA、0.8 mg/L PBU组合时,芽增殖、生长情况较好,添加0.5 mg/L NAA、0.5 mg/L IBA组合时生根效果最佳。 展开更多
关键词 粗皮桉 植物生长调节剂 组合优化 愈伤组织 再生
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3种抗生素对尾巨桉愈伤组织诱导及植株再生的影响 被引量:8
15
作者 欧阳乐军 李琼华 +2 位作者 黄真池 沙月娥 曾富华 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2012年第2期79-84,共6页
【目的】研究潮霉素、卡那霉素和头孢霉素对尾巨桉愈伤组织诱导、不定芽分化及生根的影响,确立抑制农杆菌生长的头孢霉素质量浓度。【方法】以尾巨桉无菌苗茎段为外植体,先后接种于添加不同质量浓度抗生素的愈伤组织诱导培养基、不定芽... 【目的】研究潮霉素、卡那霉素和头孢霉素对尾巨桉愈伤组织诱导、不定芽分化及生根的影响,确立抑制农杆菌生长的头孢霉素质量浓度。【方法】以尾巨桉无菌苗茎段为外植体,先后接种于添加不同质量浓度抗生素的愈伤组织诱导培养基、不定芽诱导培养基以及生根培养基上,统计愈伤组织诱导率、不定芽诱导率和不定芽生根率,观察头孢霉素对农杆菌生长的影响。【结果】(1)培养基中的潮霉素、卡那霉素、头孢霉素的质量浓度分别为15,25,200mg/L时,尾巨桉外植体的愈伤组织诱导率分别为6.7%,12.1%和26.7%;(2)潮霉素、卡那霉素、头孢霉素的质量浓度分别为15,25,250mg/L时,不定芽分化受到明显抑制,不定芽诱导率分别仅有2.6%,10.2%和7.6%;(3)潮霉素、卡那霉素、头孢霉素的质量浓度分别为15,25,250mg/L时,不定芽生根困难,生根率分别为10.2%,16.2%和10.1%;当头孢霉素质量浓度≥200mg/L时,农杆菌生长被完全抑制。【结论】尾巨桉对不同抗生素的敏感性存在差异,在尾巨桉遗传转化过程中,抗性愈伤组织与不定芽诱导的潮霉素适宜质量浓度为10mg/L,卡那霉素为20mg/L;生根诱导适宜的潮霉素和卡那霉素的质量浓度分别为15和25mg/L;抑制农杆菌生长的头孢霉素较适宜的质量浓度为200mg/L。 展开更多
关键词 尾巨桉 抗生素 愈伤组织诱导 植株再生
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植物人工启动子研究进展 被引量:8
16
作者 张龙 黄真池 +3 位作者 欧阳乐军 朱苗 陈信波 曾富华 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期150-153,共4页
启动子是基因的一个重要组成部分,能控制基因表达的时间和程度,是调控基因表达的关键因子。植物遗传学技术的进步为使用人工启动子定向调控转录活性提供了平台。综述了植物基因工程中非生物逆境人工启动子、病原诱导人工启动子、人工双... 启动子是基因的一个重要组成部分,能控制基因表达的时间和程度,是调控基因表达的关键因子。植物遗传学技术的进步为使用人工启动子定向调控转录活性提供了平台。综述了植物基因工程中非生物逆境人工启动子、病原诱导人工启动子、人工双向启动子方面的研究进展。 展开更多
关键词 人工启动子 非生物胁迫人工启动子 病原诱导人工启动子 人工双向启动子
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尾巨桉不同类型愈伤组织内源激素含量差异比较 被引量:10
17
作者 欧阳乐军 沙月娥 +2 位作者 黄真池 李莉梅 曾富华 《中南林业科技大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期71-77,86,共8页
本实验以尾巨桉无性系(DH32-29)无菌苗的茎段为外植体诱导得到的绿色、黄绿色、白色和褐色4种类型愈伤组织为材料。检测不同愈伤组织中内源激素的含量,结果显示,绿色和黄绿色胚性愈伤组织中的IAA、ABA、6-BA含量均比白色和褐色的非胚性... 本实验以尾巨桉无性系(DH32-29)无菌苗的茎段为外植体诱导得到的绿色、黄绿色、白色和褐色4种类型愈伤组织为材料。检测不同愈伤组织中内源激素的含量,结果显示,绿色和黄绿色胚性愈伤组织中的IAA、ABA、6-BA含量均比白色和褐色的非胚性愈伤组织高,其中ABA的差异最大,而GA3含量则在非胚性愈伤组织中含量较高。较高含量的GA3不利于胚性愈伤组织的形成,而往培养基中添加适量的ABA可提高尾巨桉胚性愈伤组织的形成率及胚状体的发生率。本研究为尾巨桉胚状体诱导及分化机理提供借鉴与参考。 展开更多
关键词 尾巨桉 愈伤组织 内源激素
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广州一号桉树高效组培再生体系的建立 被引量:9
18
作者 欧阳乐军 沙月娥 +1 位作者 黄真池 曾富华 《东北林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期14-17,44,共5页
以广州一号桉树优良无性系无菌苗茎段为外植体,通过对噻唑基脲类新型分裂素(N-phenyl-N'-[6-(2-chlorobenzothiazol)-yl]urea,PBU)等多种不同质量浓度植物生长调节剂组合的优化,进行愈伤组织诱导及再生研究。结果表明,在添加了2 mg.... 以广州一号桉树优良无性系无菌苗茎段为外植体,通过对噻唑基脲类新型分裂素(N-phenyl-N'-[6-(2-chlorobenzothiazol)-yl]urea,PBU)等多种不同质量浓度植物生长调节剂组合的优化,进行愈伤组织诱导及再生研究。结果表明,在添加了2 mg.L-1PBU和0.06 mg.L-1IAA的改良MS培养基上,茎段外植体5 d后愈伤组织诱导率达100%;将愈伤组织接种在添加1 mg.L-16-BA和0.1 mg.L-1NAA的MS培养基上,诱芽率高达90%;随后,在添加了0.2 mg.L-1PBU与0.05 mg.L-1NAA的1/2MS培养基上诱导芽伸长,用1/2MS培养基附加0.2 mg.L-1IBA诱导生根,炼苗15 d后,以质量m(黄心土)∶m(腐殖质土)=1∶1为基质进行移栽,得到完整再生植株,成活率高达95%。 展开更多
关键词 广州一号桉树 愈伤组织诱导 再生
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尾巨桉胚状体诱导及愈伤组织差异研究 被引量:6
19
作者 欧阳乐军 沙月娥 +1 位作者 黄真池 曾富华 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期1345-1351,共7页
以尾巨桉优良无性系无菌苗茎段为外植体,通过对多种不同浓度生长调节剂组合的优化,进行胚状体诱导研究;并对胚性与非胚性愈伤组织进行形态解剖学观察、相关生理指标检测以及相关基因荧光定量PCR分析,以揭示尾巨桉胚性愈伤组织非胚性化... 以尾巨桉优良无性系无菌苗茎段为外植体,通过对多种不同浓度生长调节剂组合的优化,进行胚状体诱导研究;并对胚性与非胚性愈伤组织进行形态解剖学观察、相关生理指标检测以及相关基因荧光定量PCR分析,以揭示尾巨桉胚性愈伤组织非胚性化发生的机理,为建立尾巨桉体细胞胚胎再生体系提供参考。结果表明:(1)胚性愈伤组织在MS+0.1mg/L NAA+0.01mg/L TDZ培养基中诱导得到胚状体,外植体经过0.5mol/L蔗糖处理12h有助于胚性愈伤组织产生胚状体,胚状体最高发生率为16.7%。(2)尾巨桉胚性与非胚性愈伤组织石蜡切片观察发现,两者的细胞形态特征存在明显的差异,胚性愈伤组织细胞体积小,排列紧密,表现出典型的胚性细胞特征,而非胚性细胞比较大,排列疏松,细胞呈不规则形状。(3)生理生化指标检测结果表明,非胚性愈伤组织中蛋白质含量、SOD、PPO及CAT活性均显著低于胚性愈伤组织,非胚性愈伤组织中木质素、可溶性糖含量以及PAL和POD活性要高于胚性愈伤组织,二者的反肉桂酸4-单加氧酶基因、淀粉磷酸化酶基因、谷胱甘肽硫转移酶基因、葡萄糖-1-磷酸腺苷酸转移酶基因、葡萄糖六磷酸异构酶基因、分支酸合酶基因以及苯丙氨酸解氨酶基因表达差异也达到显著水平。 展开更多
关键词 尾巨桉 胚状体诱导 分化机理
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植物病原菌群体猝灭基因克隆及诱导表达载体构建 被引量:2
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作者 欧阳乐军 黄真池 +3 位作者 沙月娥 陈良 谢先荣 曾富华 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2012年第1期18-23,共6页
N-酰基高丝氨酸内酯是革兰氏阴性细菌致病过程中的关键信号分子,芽孢杆菌中广泛存在的aiiA基因编码AHL-Lactonase能够水解信号分子AHLs。研究利用PCR方法从枯草芽孢杆菌中克隆了aiiA基因,序列分析表明,该基因由753个碱基组成,编码含有25... N-酰基高丝氨酸内酯是革兰氏阴性细菌致病过程中的关键信号分子,芽孢杆菌中广泛存在的aiiA基因编码AHL-Lactonase能够水解信号分子AHLs。研究利用PCR方法从枯草芽孢杆菌中克隆了aiiA基因,序列分析表明,该基因由753个碱基组成,编码含有250个氨基酸残基的蛋白质,核苷酸序列与已报道aiiA的同源性为87%~96%。将该基因置于诱导型启动子PPP3调控下,连接到植物表达载体pCAMBIA1301中,成功构建了aiiA基因的植物诱导表达载体pCAM-PPP3-aiiA,为进一步通过转基因技术研究该基因的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 AIIA AHLs 群体感应 克隆
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