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滇水金凤4CL基因的克隆及表达分析 被引量:1
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作者 陈心仪 吴成英 +3 位作者 贺海皓 黄海泉 瞿素萍 黄美娟 《福建农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期40-48,共9页
【目的】4-香豆酰-CoA连接酶(4CL)作为苯丙烷类代谢途径的关键酶之一,对花青素合成起着重要作用。探究滇水金凤4CL基因(命名为Iu4CL)对滇水金凤花色调控的分子机理,为其花色调控及花色育种提供参考依据。【方法】以滇水金凤为材料,采用R... 【目的】4-香豆酰-CoA连接酶(4CL)作为苯丙烷类代谢途径的关键酶之一,对花青素合成起着重要作用。探究滇水金凤4CL基因(命名为Iu4CL)对滇水金凤花色调控的分子机理,为其花色调控及花色育种提供参考依据。【方法】以滇水金凤为材料,采用RT-PCR技术分离克隆Iu4CL1、Iu4CL2、Iu4CL3和Iu4CL4基因,并对其生物信息学进行分析;通过qRT-PCR技术对4CL基因在4种不同花色(白色、粉色、红色和深红色)及其4个不同花发育时期(花苞期S1、始花期S2、盛花期S3和谢花期S4)中的表达情况进行分析。【结果】Iu4CL1、Iu4CL2、Iu4CL3和Iu4CL4的cDNA全长分别为1620、1653、1698、1638 bp,分别编码539、550、565、545个氨基酸;其中Iu4CL1和Iu4CL2分别含有2个和4个内含子,Iu4CL3和Iu4CL4没有内含子。生物信息学分析表明,Iu4CL1、Iu4CL2和Iu4CL4为稳定蛋白,Iu4CL3为不稳定蛋白;4个基因均为无信号肽疏水性蛋白;Iu4CL2有3个跨膜结构,其余3个基因均不存在跨膜结构;Iu4CL基因4个拷贝均属于AMP结合酶超级家族和腺苷酸形成域I类超级家族。同源性分析表明,Iu4CL基因的4个拷贝均与喜马拉雅凤仙花的同源性最高;且Iu4CL1和Iu4CL2处于同一个大的分支中,而Iu4CL3和Iu4CL4处于另一个大的分支中,推测可能为旁系同源。qRT-PCR分析表明,Iu4CL基因的4个拷贝在4种不同花色和4个不同花发育时期的滇水金凤花器官中均有表达,其中Iu4CL1和Iu4CL3基因在白色花器官S3(盛花期)阶段表达量最高;Iu4CL2基因在红色花器官S3(盛花期)阶段表达量达到顶峰;Iu4CL4基因在深红色花器官S3(盛花期)阶段表达量最高。【结论】Iu4CL基因可能在滇水金凤花青素生物合成中发挥重要作用。 展开更多
关键词 滇水金凤 4CL基因 花色 基因克隆 表达分析
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滇水金凤花蜜相关SWEET7和SWEET16的克隆及表达分析
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作者 张晓丽 谭弋 +4 位作者 李凡 赵潞秋 石万磊 黄海泉 黄美娟 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期1933-1941,共9页
植物SWEET(Sugars will eventually be exported transporter)基因家族是一类重要的糖转运蛋白,参与开花植物的花蜜合成。本研究以野生型和突变型滇水金凤(Impatiens uliginosa)为材料,基于课题组前期的花距转录组数据,通过筛选和RT-PC... 植物SWEET(Sugars will eventually be exported transporter)基因家族是一类重要的糖转运蛋白,参与开花植物的花蜜合成。本研究以野生型和突变型滇水金凤(Impatiens uliginosa)为材料,基于课题组前期的花距转录组数据,通过筛选和RT-PCR技术克隆得到花蜜相关基因SWEET7和SWEET16,分别命名为IuSWEET7和IuSWEET16,其cDNA分别为741 bp和903 bp,分别编码246和300个氨基酸。生物信息学分析表明:IuSWEET7为疏水性不稳定蛋白,IuSWEET16为疏水性稳定蛋白,二者均含有2个典型的MtN3/saliv保守结构域;IuSWEET7和IuSWEET16基因的氨基酸序列与杜鹃花(KAG5539487.1)、一串红(XP_042052415.1)等植物同源序列的相似性均在54.15%~71.48%;系统进化分析表明,IuSWEET7和IuSWEET16处于两个不同分支。qRT-PCR分析表明两个基因在野生型和突变型滇水金凤花距的3个时期中均有表达,且在不同部位中表达模式不同。其中IuSWEET7基因在野生型滇水金凤中其表达量从花苞期至盛花期逐渐上升;在突变型2距和3距中其表达量从花苞期至盛花期先上升后下降,且在始花期表达量最高;而IuSWEET16基因在野生型和突变型3距中其表达量从花苞期至盛花期均逐渐上升,但在突变型2距中其表达量从花苞期至盛花期先上升后下降,也在始花期时达到最高。 展开更多
关键词 滇水金凤 花蜜 SWEET7基因 SWEET16基因 基因克隆 表达分析
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新几内亚凤仙CCoAOMT和SAMS基因的克隆及表达分析
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作者 李凡 张晓丽 +4 位作者 赵潞秋 石万磊 谭弋 黄美娟 黄海泉 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期462-471,共10页
通过对新几内亚凤仙(Impatiens hawkeri)指甲花醚合成相关基因CCoAOMT和SAMS的克隆及表达分析,以期为解析其合成途径提供一定的理论依据。基于新几内亚凤仙指甲花醚含量测定和转录组测序数据分析,克隆到1个CCoAOMT和2个SAMS基因,将其命... 通过对新几内亚凤仙(Impatiens hawkeri)指甲花醚合成相关基因CCoAOMT和SAMS的克隆及表达分析,以期为解析其合成途径提供一定的理论依据。基于新几内亚凤仙指甲花醚含量测定和转录组测序数据分析,克隆到1个CCoAOMT和2个SAMS基因,将其命名为IhCCoAOMT、IhSAMS1和IhSAMS2。3种处理(光培养、暗培养和前体物DHNA (1,4-dihydroxy-2-naphthoate)诱导)均能促进指甲花醚积累,且暗培养处理最佳。IhCCoAOMT的cDNA全长为729 bp,编码242 aa,其蛋白具有AdoMet_MTases超家族结构域;IhSAMS1和IhSAMS2的cDNA全长分别为1179 bp和1173 bp,分别编码393 aa和391 aa,其蛋白均具有S-AdoMet_synt超家族结构域。系统进化分析表明,IhCCoAOMT与喜马拉雅凤仙亲缘关系最近;IhSAMS1与IhSAMS2可能为旁系同源。qRT-PCR分析表明,3个基因在新几内亚凤仙的3个处理及4个时期中均有表达,其中IhCCoAOMT在暗培养及前体物DHNA诱导中表达量整体上调,且暗培养第60天时表达量最高;IhSAMS1和IhSAMS2在暗培养及DHNA诱导中表达量整体下调,但IhSAMS1在DHNA诱导中表达量较高,IhSAMS2在暗培养中表达量较高。综上所述,推测IhCCoAOMT在指甲花醚处理后期起主要作用,IhSAMS1和IhSAMS2在其早期起主要作用,且IhSAMS2作用更为显著。 展开更多
关键词 新几内亚凤仙 指甲花醚 CCOAOMT SAMS 表达分析
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滇水金凤耐铜相关基因CAX3和CCS的克隆及表达分析
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作者 谭弋 张晓丽 +5 位作者 赵潞秋 李凡 石万磊 梁光容 黄海泉 黄美娟 《山东农业科学》 北大核心 2024年第10期10-17,共8页
植物CAX(Ca2+/H+反向转运蛋白)和CCS(铜锌超氧化物歧化酶铜伴侣蛋白)分别是重要的液泡膜转运蛋白和铜伴侣蛋白,通过不同机制在缓解重金属胁迫中发挥着重要作用。本课题组前期研究发现滇水金凤(Impatiens uliginosa)对铜胁迫具有很好的... 植物CAX(Ca2+/H+反向转运蛋白)和CCS(铜锌超氧化物歧化酶铜伴侣蛋白)分别是重要的液泡膜转运蛋白和铜伴侣蛋白,通过不同机制在缓解重金属胁迫中发挥着重要作用。本课题组前期研究发现滇水金凤(Impatiens uliginosa)对铜胁迫具有很好的耐受性,并通过转录组测序筛选出耐铜相关基因。在此基础上,本研究以野生滇水金凤为材料,通过RT-PCR技术克隆获得耐铜相关基因CAX3和CCS,分别命名为IuCAX3和IuCCS,其cDNA序列长度分别为1320 bp和975 bp,分别编码439个和324个氨基酸。生物信息学分析结果表明,IuCAX3为不稳定蛋白,具有caca2超家族的保守结构域,定位在质膜、液泡上;IuCCS为稳定蛋白,具有PLN02957超家族的保守结构域,定位在叶绿体上。系统进化分析结果显示,IuCAX3和IuCCS均与喜马拉雅凤仙花的相应基因聚为一支,相似性分别为98.18%和89.81%。通过设置不同的铜处理浓度(0、5、10、15、20、25 mg·L^(-1))研究了IuCAX3和IuCCS基因在滇水金凤叶片中的表达情况,qRT-PCR分析结果表明,铜处理能诱导两个基因大幅上调表达,且铜浓度为15 mg·L^(-1)时的上调幅度最大,并均在处理12 d达到最高水平;随处理时间延长,IuCAX3的表达量先升高后降低,IuCCS的表达量在铜浓度不高于15 mg·L^(-1)时呈先升后降再升的趋势,但当铜浓度高于15 mg·L^(-1)后则呈先升后降的趋势,而且铜处理下IuCCS的表达水平明显高于IuCAX3,因此推测IuCAX3基因主要在铜胁迫前期起作用,而IuCCS基因在铜胁迫后期仍发挥重要作用。本研究结果可为深入研究滇水金凤耐铜分子机制提供一定的参考依据。 展开更多
关键词 滇水金凤 CAX3基因 CCS基因 铜胁迫 基因克隆 生物信息学分析 表达分析
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川西凤仙花属植物资源调查与评价
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作者 潘俊桥 张茜 +2 位作者 石万磊 黄海泉 黄美娟 《北方园艺》 CAS 北大核心 2024年第6期44-51,共8页
以20种川西凤仙花属植物为试材,采用实地调查和AHP层次分析法,研究了凤仙花属植物形态特征与资源评价对凤仙花属植物开发利用和分类学的影响,以期为四川凤仙花属植物研究提供参考依据。结果表明:川西南地区凤仙花属植物种类多于川西北地... 以20种川西凤仙花属植物为试材,采用实地调查和AHP层次分析法,研究了凤仙花属植物形态特征与资源评价对凤仙花属植物开发利用和分类学的影响,以期为四川凤仙花属植物研究提供参考依据。结果表明:川西南地区凤仙花属植物种类多于川西北地区,其主要分布于海拔1000~2000 m,占总数的70%;花色丰富,有黄色、红色、白色等颜色,以黄色为主,占总数的40%;叶片形状有卵形、长卵形和椭圆形等,叶长5.75~18.30 cm,叶宽1.69~5.91 cm,叶片面积3.85~38.32 cm^(2);种子长2.24~3.93 mm,宽1.18~2.46 mm,千粒质量1.02~4.41 g。此外,采用AHP层次分析法对其进行了综合评价,发现Ⅰ级(>3.5)资源有6种,可直接开发并加以应用;Ⅱ级(3.0~3.5)资源有10种,可驯化后予以开发;Ⅲ级(<3.0)资源有4种,可作为杂交亲本等予以开发。综上所述,川西地区凤仙花属植物资源丰富,并具有较高观赏价值和开发利用价值。 展开更多
关键词 川西 凤仙花属植物 形态特征 AHP层次分析法 资源评价
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基于波士顿肠道准备评分标准与肠镜检查前肉眼粪便观察法一致性研究 被引量:1
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作者 黄美娟 张勤 +6 位作者 何慧娴 李琴 张颖璠 陈春红 李红侠 陈妍芷 张宁 《现代临床护理》 2023年第10期53-57,共5页
目的探讨内镜下波士顿肠道准备评分判断与肠镜检查前肉眼粪便观察法评价肠道清洁度的一致性,以便指导临床肠道准备工作。方法2018年9月至2019年6月,采用便利抽样法,选取在广州市某三级甲等综合医院消化内科住院行结肠镜检查的患者150例... 目的探讨内镜下波士顿肠道准备评分判断与肠镜检查前肉眼粪便观察法评价肠道清洁度的一致性,以便指导临床肠道准备工作。方法2018年9月至2019年6月,采用便利抽样法,选取在广州市某三级甲等综合医院消化内科住院行结肠镜检查的患者150例作为研究对象,肠镜检查前按照统一的肠道准备方案给予复方聚乙二醇电解质散口服进行清洁肠道,检查前先由护士采用肉眼观察法观察排泄物清亮度以评价肠道清洁度,之后由内镜医师在肠镜检查时用波士顿肠道准备评价量表进行肠道清洁度评价。结果145例患者完成研究。肉眼观察法肠道准备清洁度为93.10%,内镜直视下肠道准备清洁度为88.28%,两种评价方法在判断肠道准备一致性无显著差异(P>0.05),肉眼观察法判断肠道准备的敏感性为96.10%,特异性为29.41%,阳性预测值为91.11%,阴性预测值为50.00%,Kappa值为0.310,P<0.001,表明两种评价方法具有较好的一致性。结论肉眼粪便观察评价法具有敏感性高,特异性低,阳性预测值高,阴性预测值较低的特点,认为可作为肠镜检查前肠道清洁的初步评价方法,基本能满足内镜下肠道清洁的要求。对于肠道肿瘤、炎症性肠病等未能达到肠道清洁度标准者值得进一步探讨。 展开更多
关键词 肠道准备 粪便 波士顿评分 自身前-后对照研究
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滇水金凤花距发育相关基因TCP4的克隆及表达分析
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作者 李洋 李凡 +4 位作者 孟丹晨 李林菊 魏春梅 黄美娟 黄海泉 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期341-348,共8页
为探究滇水金凤(Impatiens uliginosa)TCP4基因(IuTCP4)对花距发育的调控作用,通过反转录聚合酶链反应技术克隆其cDNA全长,对其序列进行生物信息学分析,并采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase ... 为探究滇水金凤(Impatiens uliginosa)TCP4基因(IuTCP4)对花距发育的调控作用,通过反转录聚合酶链反应技术克隆其cDNA全长,对其序列进行生物信息学分析,并采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction, qRT-PCR)技术探讨IuTCP4基因在花距的不同发育阶段及不同组织部位的时空表达模式。结果表明:滇水金凤IuTCP4基因2个拷贝(IuTCP4.1和IuTCP4.2)的cDNA全长分别为1 194、1 173 bp,各编码397个和390个氨基酸,且均不包含内含子;IuTCP4.1和IuTCP4.2所编码的蛋白均为不稳定的亲水性蛋白,且均不存在信号肽和跨膜结构域,两者与茶(Camellia sinensis)、苦瓜(Momordica charantia)等15个物种TCP4蛋白的同源性达到66.11%。在系统发育树中这2个拷贝聚为一支,推测它们为旁系同源基因。qRT-PCR结果显示:IuTCP4.1在初期、开花期的花距和檐部存在差异性表达,且在初期的檐部表达量最高;IuTCP4.2在3个发育时期的花距和檐部均存在差异性表达,且在初期的花距中表达量最高。综上所述,IuTCP4基因在花距发育过程中具有一定的调控作用,且主要在花距发育初期发挥作用。上述结果为凤仙花花距发育机制、花形改良和新品种培育提供了一定的理论依据。 展开更多
关键词 滇水金凤 花距 TCP4基因 基因克隆 表达分析
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神经递质多巴胺工作原理的教育意蕴
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作者 黄美娟 姜宝腾 《教育家》 2024年第8期63-65,共3页
多巴胺是一种神经递质,这个网络热词在传播过程中被等同于快乐因子,而获得了广泛关注,“多巴胺穿搭”“多巴胺景区”“多巴胺饮食”“多巴胺休闲”等成为人们的日常用语。“多巴胺”的“胺”字经常被误读为ān,其实正确读音是àn。... 多巴胺是一种神经递质,这个网络热词在传播过程中被等同于快乐因子,而获得了广泛关注,“多巴胺穿搭”“多巴胺景区”“多巴胺饮食”“多巴胺休闲”等成为人们的日常用语。“多巴胺”的“胺”字经常被误读为ān,其实正确读音是àn。多巴胺在网络上很热,但在教育中较冷。网络上有大量介绍多巴胺与人学习、情绪和认知的关系。 展开更多
关键词 多巴胺 网络热词 神经递质 日常用语 教育意蕴 快乐因子 正确读音
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中医推拿联合脉冲磁治疗仪治疗小儿腹痛(脾胃虚寒证)的临床护理研究
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作者 黄美娟 韦凤玲 韦婧 《中国科技期刊数据库 医药》 2024年第1期0075-0078,共4页
对中医推拿联合脉冲磁治疗仪治疗小儿腹痛(脾胃虚寒证)的临床护理进行研究分析。方法 研究对象2022年1月至2023年9月我院收治的112例腹痛脾胃虚寒证患儿。其中2022年1月至2022年12月收治的42例患儿纳入对照组;2023年1月至2023年9月收治... 对中医推拿联合脉冲磁治疗仪治疗小儿腹痛(脾胃虚寒证)的临床护理进行研究分析。方法 研究对象2022年1月至2023年9月我院收治的112例腹痛脾胃虚寒证患儿。其中2022年1月至2022年12月收治的42例患儿纳入对照组;2023年1月至2023年9月收治的70例患儿纳入研究组。对照组实施单纯中医推拿治疗与常规护理,观察组在对照组基础上加用脉冲磁治疗仪与优质护理,对比两组患儿的临床疗效以及治疗前后中医证候积分变化情况。结果 研究组临床治疗总有效率明显高于对照组(P<0.05);治疗后,研究组患儿的腹痛绵绵、喜温喜按、大便溏薄、得食减痛评分均低于对照组(P<0.05),差异有统计学意义。结论 在腹痛脾胃虚寒证患儿采用中医推拿联合脉冲磁治疗仪治疗的过程中,给予患儿优质的临床护理,能够有效提升临床治疗效果,改善中医证候积分,值得在临床上进行推广应用。 展开更多
关键词 腹痛 脾胃虚寒证 中医推拿 脉冲磁治疗仪 临床护理
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穴位贴敷应用于乳腺癌化疗护理中对患者恶心呕吐反应的影响分析
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作者 黄美娟 《中文科技期刊数据库(文摘版)医药卫生》 2024年第2期0068-0071,共4页
研究穴位贴敷在乳腺癌化疗护理中对患者恶心呕吐反应的影响。方法 运用随机数字表法,将2020.1-2022.12我院收治的乳腺癌化疗患者(n=40)分为对照组(n=20,采取常规乳腺癌化疗护理)和研究组(n=20,在对照组基础上采取穴位贴敷护理)。共观察... 研究穴位贴敷在乳腺癌化疗护理中对患者恶心呕吐反应的影响。方法 运用随机数字表法,将2020.1-2022.12我院收治的乳腺癌化疗患者(n=40)分为对照组(n=20,采取常规乳腺癌化疗护理)和研究组(n=20,在对照组基础上采取穴位贴敷护理)。共观察化疗4个周期,每组各80次化疗。比较各组恶心、呕吐及生活质量情况。结果 护理前,两组恶心、呕吐症状等级对比无差异(P>0.05);护理后,研究组恶心、呕吐症状等级均低于对照组(P<0.05。护理前两组生活质量量表(SF-36)得分对比均无差异(P>0.05);护理后,研究组一般健康状况、精力得分均高于对照组(P<0.05)。结论 穴位贴敷在乳腺癌化疗护理中能够显著改善患者恶心呕吐反应,并提高其生活质量。 展开更多
关键词 穴位贴敷 乳腺癌化疗护理 恶心呕吐 生活质量
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濒危植物峨眉凤仙花叶绿体基因组分析 被引量:4
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作者 赵秋燕 曹孟会 +6 位作者 李新艺 周敏 魏春梅 张茜 瞿素萍 黄海泉 黄美娟 《福建农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期174-182,共9页
[目的]对峨眉凤仙花(Impatiens omeiana Hook.f.)叶绿体基因组的结构特征及系统发育进行研究,为其资源保护及开发利用提供理论依据。[方法]基于峨眉凤仙花叶绿体基因组序列,利用生物信息学软件,对叶绿体基因组进行组装、注释、基因特征... [目的]对峨眉凤仙花(Impatiens omeiana Hook.f.)叶绿体基因组的结构特征及系统发育进行研究,为其资源保护及开发利用提供理论依据。[方法]基于峨眉凤仙花叶绿体基因组序列,利用生物信息学软件,对叶绿体基因组进行组装、注释、基因特征、序列重复和系统发育分析。[结果]峨眉凤仙花完整的叶绿体基因组长度为152 527bp,共有130个基因,包括86个蛋白质编码基因、8个rRNA基因和36个tRNA基因,GC含量为37%,且具有保守的四分体结构,包括大单拷贝区、小单拷贝区各1个和2个相同的反向重复区域,其长度分别为83 150、17 903、25 737 bp,其中13个基因有1个内含子,2个基因有2个内含子。特征分析表明:峨眉凤仙花叶绿体全基因组中共检测到76个SSR序列,且多以A/T单核苷酸序列为主,其长度为10-91 bp;检测到50 842个密码子,其中以亮氨酸(Leu)最多,色氨酸(Tyr)最少;密码子偏好性分析显示33个RSCU≥1的密码子多数以A/U结尾。通过邻接法(NJ)构建系统发育树发现,峨眉凤仙花与贵州凤仙花亲缘关系最近,均属于棒凤仙花亚属植物。[结论]峨眉凤仙花叶绿体基因组呈典型的四分体结构,SSR序列以A/T单碱基为主;系统发育分析结果将其归为棒凤仙花亚属,上述结果为峨眉凤仙花系统发育学地位及物种鉴定工作提供了重要的分子信息。 展开更多
关键词 峨眉凤仙花 叶绿体基因组 序列结构与特征分析 系统发育
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川西南凤仙花属植物资源调查与评价 被引量:2
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作者 赵秋燕 张茜 +5 位作者 曹孟会 陶宇蝶 周敏 黄海泉 瞿素萍 黄美娟 《种子》 北大核心 2023年第2期64-71,82,F0003,共10页
本研究通过对川西南5个地区(峨眉山市、洪雅县、宝兴县、盐源县和盐边县)凤仙花属植物进行实地调查,在对其地理分布、形态特征进行分析的基础上,采用层次分析法(AHP)对其进行评价与分析。结果表明,该区域共收集凤仙花属植物22种,分布在... 本研究通过对川西南5个地区(峨眉山市、洪雅县、宝兴县、盐源县和盐边县)凤仙花属植物进行实地调查,在对其地理分布、形态特征进行分析的基础上,采用层次分析法(AHP)对其进行评价与分析。结果表明,该区域共收集凤仙花属植物22种,分布在海拔700~2 600 m地区,其中大多数分布于海拔1 400~2 600 m地区,占本次调查总数的68.0%;且多生长在山间路旁、草丛、林下湿地等湿度相对较大的地方;株高20~140 cm;花色有白色、紫色、黄色、粉色等,以黄色为主,占本次调查总数的54.0%;叶长1.85~14.95 cm,叶宽1.32~4.64 cm,叶面积2.55~33.79 cm~2;种子直径1.87~5.00 mm,千粒重0.840~8.578 g;综合分析,可将22种凤仙花分为3个等级:Ⅰ级(>3.5分)有9种,可优先大面积开发应用,Ⅱ级(3.0~3.5分)有3种,可适度推广应用,Ⅲ级(<3.0分)有10种,可小范围或暂不开发应用。综上所述,川西南地区凤仙花属植物资源丰富多样,具有花形奇特、花色丰富艳丽、观赏价值高等特点。 展开更多
关键词 川西南 凤仙花属植物 地理分布 形态特征 层次分析法
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不同类型及不同品种百合的杂交亲和性与胚挽救 被引量:4
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作者 周敏 赵秋燕 +4 位作者 张迪 魏春梅 陶宇蝶 黄美娟 黄海泉 《江苏农业科学》 北大核心 2023年第7期132-138,共7页
以不同杂种系的22个百合品种为材料进行杂交试验,探讨常规授粉对系内、系间子房膨大率、有胚率的影响,并用子房切片、幼胚培养方法对不同杂交组合进行胚挽救研究。结果表明,系内杂交除LA杂种系不亲和外,其他杂种系均表现为不同程度的亲... 以不同杂种系的22个百合品种为材料进行杂交试验,探讨常规授粉对系内、系间子房膨大率、有胚率的影响,并用子房切片、幼胚培养方法对不同杂交组合进行胚挽救研究。结果表明,系内杂交除LA杂种系不亲和外,其他杂种系均表现为不同程度的亲和,其中OO杂种系子房的膨大率最高,为30.00%~81.82%,并获得了3个杂交后代。在不同杂种系间杂交时,以东方杂种系为母本与亚洲、OT百合进行杂交育种的亲和性较高,分别为33.33%、50.00%,获得了3个杂交后代;而与麝香百合杂交表现为不亲和,子房不膨大且无杂交后代;以OT杂种系为母本与LA、亚洲、东方、麝香杂种系7个品种进行杂交,其中紫色大理石×穿梭、紫色大理石×爱马仕、激情月球×卡里、罗宾娜×索邦和紫色大理石×小火箭5个杂交组合出现子房膨大并获得了有胚种子,子房膨大率最高达100.00%,有胚率为1.21%~13.03%。胚挽救试验结果显示,30 d胚龄的幼胚最适合子房切片培养,其中帕拉左×小月亮杂交组合光培养后的萌发率最高,达100.00%;而60~75 d胚龄的幼胚进行胚培养获得的杂交后代最多。研究探讨了不同类型百合及不同百合品种间的杂交亲和性规律,对培育花大色艳、抗性强的百合新品种具有一定的理论意义和实际应用价值。 展开更多
关键词 百合 杂交亲和性 子房膨大率 有胚率 胚挽救
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滇水金凤转录因子TT8的克隆及表达分析 被引量:1
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作者 李新艺 李洋 +3 位作者 向南星 李泽凤 黄美娟 黄海泉 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期1813-1819,共7页
为探究滇水金凤(Impatiens uliginosa L.)TT8(TRANSPARENT TESTA 8)基因的功能和表达特性,并解析其对滇水金凤花色的影响,研究以滇水金凤花器官为材料,通过RT-PCR等技术克隆IuTT8基因,并对其进行生物信息学分析;利用qRT-PCR分析该基因... 为探究滇水金凤(Impatiens uliginosa L.)TT8(TRANSPARENT TESTA 8)基因的功能和表达特性,并解析其对滇水金凤花色的影响,研究以滇水金凤花器官为材料,通过RT-PCR等技术克隆IuTT8基因,并对其进行生物信息学分析;利用qRT-PCR分析该基因在不同花色和不同花发育阶段的表达模式。结果表明,(1)成功克隆得到滇水金凤IuTT8基因,其编码区全长为2136 bp,编码711 aa,为亲水性不稳定蛋白,gDNA全长为3938 bp,共有6个内含子;结构域分析发现该蛋白属于bHLH超家族成员,与喜马拉雅凤仙花、山茶等物种的TT8蛋白同源且Motif基序相似。(2)IuTT8与同属植物喜马拉雅凤仙花的聚在一支,相似性约86.34%;多序列比对和系统进化分析显示TT8蛋白的结构域高度保守。(3)IuTT8基因在4种不同花色滇水金凤及其4个不同发育阶段均有表达,除白色外,其表达量均随花发育的进行呈先升后降的趋势;且IuTT8基因的表达量与花色呈正相关,其中以深红色表达量最高,白色表达量最低,深红色S3的表达量约为白色S2时期的48倍。研究表明滇水金凤IuTT8基因与花色正相关,推测其在滇水金凤花色的调控中发挥重要作用。 展开更多
关键词 滇水金凤 花色 TT8基因 表达分析
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龙州凤仙花ImLHY和ImC4H基因克隆及表达分析 被引量:1
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作者 赵潞秋 张晓丽 +4 位作者 李凡 谭弋 石万磊 黄美娟 黄海泉 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期3464-3474,共11页
【目的】对龙州凤仙花晚期下胚轴蛋白基因(ImLHY)和肉桂酸-4-羟基化酶基因(ImC4H)进行克隆及表达分析,探讨龙州凤仙花旗瓣和翼瓣的彩斑区和非斑区颜色差异,克隆LHY和C4H基因,为凤仙花彩斑分子调控机制及花色改良和新品种培育提供理论依... 【目的】对龙州凤仙花晚期下胚轴蛋白基因(ImLHY)和肉桂酸-4-羟基化酶基因(ImC4H)进行克隆及表达分析,探讨龙州凤仙花旗瓣和翼瓣的彩斑区和非斑区颜色差异,克隆LHY和C4H基因,为凤仙花彩斑分子调控机制及花色改良和新品种培育提供理论依据。【方法】以龙州凤仙花为材料,测定其旗瓣和翼瓣的彩斑区和非斑区色度值以及总花色苷和总黄酮含量,对ImLHY和ImC4H基因进行克隆,利用生物信息学软件对其进行序列特征、蛋白结构和系统发育分析,利用实时荧光定量PCR检测ImLHY和ImC4H基因在不同关键发育时期(花苞期、盛花期和衰败期)旗瓣和翼瓣不同着色区的表达模式。【结果】旗瓣和翼瓣的彩斑区a*(红度值)和C*(彩度值)均高于非斑区,非斑区的L*(亮度值)大于彩斑区;旗瓣彩斑区b*(黄度值)高于旗瓣非斑区,而翼瓣彩斑区与非斑区的b*(黄度值)差异较小,且旗瓣和翼瓣的彩斑区总花色苷和总黄酮含量均高于非斑区。克隆获得ImLHY和ImC4H基因的cDNA全长分别为1698和1518 bp,分别编码565和505个氨基酸残基,GenBank登录号分别为OR096417和OR096418。ImLHY和ImC4H蛋白均为亲水性不稳定蛋白,均不具有跨膜结构域。ImLHY蛋白有1个Myb DNA-binding保守结构域,且具有MYB转录因子家族的SANT结构域,定位于细胞核中;ImC4H蛋白含有1个P450超家族结构域(PLN02394),定位于内质网上。ImLHY和ImC4H蛋白分别与喜马拉雅凤仙花LHY和C4H的氨基酸序列相似性达68%和94%,且在系统发育进化树中二者分别均与喜马拉雅凤仙花LHY和C4H蛋白聚在一支。ImLHY和ImC4H基因在3个关键发育时期(花苞期、盛花期和衰败期)旗瓣和翼瓣的彩斑区和非斑区中均有表达,且整体表现为在盛花期的相对表达量较高;在盛花期时,ImLHY和ImC4H基因在旗瓣的相对表达量均表现为彩斑区显著高于非斑区(P<0.05),在翼瓣的相对表达量均表现为非斑区高于彩斑区。【结论】ImLHY和ImC4H基因在盛花期时主要调控旗瓣彩斑形成,而在翼瓣主要调控非斑区形成,推测旗瓣和翼瓣的彩斑形成存在不同的调控机制。 展开更多
关键词 龙州凤仙花 旗瓣 翼瓣 彩斑 LHY基因 C4H基因 表达分析
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绿萼凤仙花MYB4的克隆及表达分析 被引量:1
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作者 李泽凤 向南星 +4 位作者 魏春梅 李新艺 孟丹晨 黄海泉 黄美娟 《山东农业科学》 北大核心 2023年第1期8-14,共7页
MYB(v-myb avian myeloblastosis viral oncogene homolog)是调控植物木质素合成的转录因子之一。为探讨绿萼凤仙花木质素合成调控的分子机制,本试验克隆了绿萼凤仙花MYB4基因,对其进行生物信息学分析,并利用qRT-PCR技术分析其表达模式... MYB(v-myb avian myeloblastosis viral oncogene homolog)是调控植物木质素合成的转录因子之一。为探讨绿萼凤仙花木质素合成调控的分子机制,本试验克隆了绿萼凤仙花MYB4基因,对其进行生物信息学分析,并利用qRT-PCR技术分析其表达模式。结果表明:(1)成功克隆到绿萼凤仙花MYB4基因的3个片段,其cDNA全长分别为666、888、771 bp,编码221、295、256 aa,命名为IcMYB4-1、IcMYB4-2和IcMYB4-3。(2)3个IcMYB4基因都含有MYB家族的DNA结合结构域(R2和R3)以及抑制型的保守基序EAR,其氨基酸序列与其他物种具有较高的相似性,同源性达62%左右。IcMYB4-1和IcMYB4-2氨基酸处于一个分支,推测其为直系同源关系;IcMYB4-3与前两者分属两个分支,推测其为旁系同源关系。(3)qRT-PCR结果表明,3个IcMYB4基因在绿萼凤仙花的不同部位均有表达,其中IcMYB4-1在绿萼凤仙花不同部位的表达均为最低,以根部表达量最高;IcMYB4-2和IcMYB4-3基因在绿萼凤仙花的根、茎和叶中的表达量依次升高,推测其对绿萼凤仙花木质素合成起负调控作用。综上所述,IcMYB4基因在绿萼凤仙花不同部位的作用机理存在一定差异,但均在绿萼凤仙花的木质素合成调控中发挥了重要作用。该结果为增加凤仙花的木质化程度以及品种改良提供了基础数据。 展开更多
关键词 绿萼凤仙花 MYB4基因 木质素 基因克隆 表达分析
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门诊护理干预运用在老年慢性病患者中的临床效果分析
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作者 黄芬娟 黄美娟 +1 位作者 郑海红 孙颖 《中文科技期刊数据库(文摘版)医药卫生》 2024年第9期0135-0138,共4页
探究在老年慢性病(CDS)患者中运用门诊护理方式进行干预的效果。方法 本文从2022.01开始试验,筛选对象均为老年CDS患者,筛选结束于2023.03内,共100例老年CDS患者参与试验,以双盲法按50例/组的分配要求予以分组。基础组老年CDS患者运用... 探究在老年慢性病(CDS)患者中运用门诊护理方式进行干预的效果。方法 本文从2022.01开始试验,筛选对象均为老年CDS患者,筛选结束于2023.03内,共100例老年CDS患者参与试验,以双盲法按50例/组的分配要求予以分组。基础组老年CDS患者运用常规护理方式进行干预,干预组老年CDS患者运用门诊护理方式进行干预。比较认知状况、生活状况、心理状况等变化。结果 与受试前比较,受试后两组老年CDS患者认知状况有所改善,其中干预组老年CDS患者认知状况更优(P<0.05)。与受试前比较,受试后两组老年CDS患者生活状况、心理状况有所改善,其中干预组老年CDS患者生活状况、心理状况等更优(P<0.05)。结论 在老年CDS患者中运用门诊护理方式进行干预后,其心理状况获得改善,认知状况及生活质量获得提升,有推广借鉴价值。 展开更多
关键词 老年 慢性病 门诊护理干预 认知状况 生活状况 心理状况
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含ACC脱氨酶的植物促生菌对香石竹生长及瓶插特性的影响
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作者 李文祥 郑舒媛 +5 位作者 张天谣 李洋 李新艺 曹孟会 黄海泉 黄美娟 《云南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期122-128,共7页
[目的]研究含ACC脱氨酶(1-aminocyclopropane-1-carboxylate deaminase)的不同植物生长促生菌对香石竹生长及瓶插特性的影响。[方法]以香石竹品种Tenie和Master为材料进行盆栽试验,研究接种不同菌株对香石竹生长过程中株高、茎粗、叶绿... [目的]研究含ACC脱氨酶(1-aminocyclopropane-1-carboxylate deaminase)的不同植物生长促生菌对香石竹生长及瓶插特性的影响。[方法]以香石竹品种Tenie和Master为材料进行盆栽试验,研究接种不同菌株对香石竹生长过程中株高、茎粗、叶绿素相对含量、叶片数、花径和花期以及瓶插过程中鲜质量、叶绿素降解率和叶片凋落的影响。[结果](1)栽培过程中,混合菌株对香石竹生长有一定的促进作用,可显著增加Tenie的叶片数和Master的茎粗,分别较对照高25.0%和6.2%。经SN-2菌株处理后,Master的花期较对照显著延长34.9%。(2)瓶插过程中,与对照相比,所有菌株都可显著抑制Master的叶绿素降解,且效果最好的为SN-2处理,降解率仅为对照的57.6%。经XG菌株处理后,Tenie和Master的鲜质量减少率显著降低,分别仅为对照的79.0%和43.3%。经XG、F和混合菌株处理后,Tenie的叶片凋落率显著降低;而仅有混合菌株可显著抑制Master的叶片凋落,其凋落率仅为对照的54.4%。[结论]栽培中施用混合菌株对香石竹促生效果最好,而在瓶插中XG菌株和混合菌株分别对Tenie和Master采后品质的保持效果最好。 展开更多
关键词 ACC脱氨酶 植物生长促生菌 香石竹 促生长 切花 瓶插特性
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含ACC脱氨酶的根际促生菌对切花月季生长的影响
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作者 李文祥 张天谣 +3 位作者 李洋 李新艺 黄海泉 黄美娟 《福建农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期423-430,共8页
【目的】探明含ACC脱氨酶(1-aminocyclopropane-1-carboxylate deaminase)的不同植物根际促生菌对切花月季白荔枝的促生效果。【方法】以白荔枝为试验材料,在其盆栽过程中施入含ACC脱氨酶的不同PGPR菌株,通过测定其株高、茎粗、分枝数... 【目的】探明含ACC脱氨酶(1-aminocyclopropane-1-carboxylate deaminase)的不同植物根际促生菌对切花月季白荔枝的促生效果。【方法】以白荔枝为试验材料,在其盆栽过程中施入含ACC脱氨酶的不同PGPR菌株,通过测定其株高、茎粗、分枝数等农艺性状、叶绿素a/b值、叶片保护酶活性及MDA含量、花朵乙烯释放量、光合及叶绿素荧光参数等生理指标,探讨不同菌株对白荔枝生长及生理的影响。【结果】施入含ACC脱氨酶的不同PGPR菌株对白荔枝生长及光合作用产生的影响有所差异,其中菌株F23和F195处理较对照株高增加25.9%和26.0%,且F23处理后茎粗比对照处理增加17.1%,菌株F23和F195处理叶绿素a/b也高于对照。菌株F23显著提高了根际土壤脲酶、磷酸酶和蔗糖酶活性至42.6%、 16.3%和48.8%;且菌株F23对POD以及CAT活性的提高有显著促进作用,分别达到对照的1.78和2.07倍,花朵乙烯释放量比对照减少37.8%。净光合速率经菌株F195和F23处理后显著高于对照,分别达对照的1.40倍和1.16倍。【结论】综合比较认为,菌株F23对切花月季白荔枝的促生效果最好。 展开更多
关键词 ACC脱氨酶 根际促生菌 切花月季 促生长 生理特性
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滇水金凤花斑形成相关基因IuMYB114和IuMYB36的克隆及表达分析
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作者 陶宇蝶 孟丹晨 +5 位作者 黄美娟 魏春梅 赵秋燕 周敏 瞿素萍 黄海泉 《山东农业科学》 北大核心 2023年第2期1-8,共8页
MYB基因作为植物中最庞大的一个基因家族,在花斑及色素形成、生长发育等过程中发挥着重要作用。本研究以滇水金凤花器官为材料,获得2个MYB基因,分别命名为IuMYB114和IuMYB36,其cDNA分别为315 bp和876 bp,分别编码104个和151个氨基酸。... MYB基因作为植物中最庞大的一个基因家族,在花斑及色素形成、生长发育等过程中发挥着重要作用。本研究以滇水金凤花器官为材料,获得2个MYB基因,分别命名为IuMYB114和IuMYB36,其cDNA分别为315 bp和876 bp,分别编码104个和151个氨基酸。生物信息学分析显示:二者均不具有内含子且均为亲水性不稳定蛋白,IuMYB114基因属于MYB超家族,推测IuMYB36属于新的R2R3-MYB转录因子亚组;IuMYB114和IuMYB36的氨基酸序列与其他物种的同源性均在64%和50%左右;二者均分别与各自的同源序列聚在一起,且处在两个不同分支。qRT-PCR分析发现两个基因在滇水金凤斑区和非斑区中均有表达,但在斑区表达量显著高于非斑区,IuMYB114和IuMYB36基因斑区表达量分别为非斑区的12.83倍和9.88倍,推测两个基因在滇水金凤花斑形成中发挥了重要的调控作用。本研究结果为后续探讨滇水金凤花斑形成的分子调控机理以及进行凤仙花花色改良等方面研究提供了一定的理论依据。 展开更多
关键词 滇水金凤 花斑形成 MYB基因 基因克隆 表达分析
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