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ABO疑难血型的基因型鉴定与序列分析 被引量:5
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作者 林秋燕 张进萍 +4 位作者 黄震宇 黄清华 范丽萍 付丹晖 黄豪博 《中国输血杂志》 CAS 2023年第1期8-10,共3页
目的 研究20例ABO疑难血型标本的基因型并鉴定其分子生物学特性。方法 应用标准血型血清学鉴定技术分析标本的血清学表型。应用聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)扩增标本ABO基因7个外显子,对PCR产物进行直接测序,分析ABO... 目的 研究20例ABO疑难血型标本的基因型并鉴定其分子生物学特性。方法 应用标准血型血清学鉴定技术分析标本的血清学表型。应用聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)扩增标本ABO基因7个外显子,对PCR产物进行直接测序,分析ABO疑难血型的基因分型和序列。结果 20例ABO疑难血型标本的血清学表型分别为:A抗原减弱5例、A抗原减弱合并抗-A15例、A抗原正常合并抗-A12例、B抗原减弱8例,基因型分别为:Ax02/O01 3例、Ael07/O01 2例、B313/O01 2例、A204/O02、A220/O01、Ael07/O02、Ael02/O01、Ael02/O02、Ax03/O01、Ax03/O02、B313/O02、B302/O01、B302/O02、Bw19/O02、A102/B313、A101/Bw37各1例。结论 ABO基因分型技术可精准鉴定疑难标本的血型,提供明确的血型遗传学信息,保障临床用血安全。 展开更多
关键词 ABO血型 疑难血型 基因型 序列分析
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核酸外切体成分4在初治弥漫大B细胞淋巴瘤患者中的表达及临床意义
2
作者 洪金全 黄清华 +3 位作者 黄震宇 范丽萍 林秋燕 黄豪博 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期1684-1689,共6页
目的:探讨初治弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者组织中核酸外切体成分4(EXOSC4)的表达情况及其临床意义。方法:采用免疫组织化学染色方法检测181例初治DLBCL患者组织中EXOSC4蛋白的表达情况;收集临床资料,并分析初治DLBCL患者组织中EXOSC4... 目的:探讨初治弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者组织中核酸外切体成分4(EXOSC4)的表达情况及其临床意义。方法:采用免疫组织化学染色方法检测181例初治DLBCL患者组织中EXOSC4蛋白的表达情况;收集临床资料,并分析初治DLBCL患者组织中EXOSC4蛋白表达与临床特征的相关性及其预后意义。结果:181例初治DLBCL患者组织中,EXOSC4蛋白表达阳性率为68.51%;将患者分为高表达组44例和低表达组137例,两组患者年龄、性别、B症状、血清乳酸脱氢酶(LDH)水平、美国东部肿瘤协作组(ECOG)评分、Ann Arbor分期、结外侵犯、国际预后指数(IPI)评分、国家综合癌症网络IPI(NCCN-IPI)评分、细胞起源等特征的差异均无统计学意义(P>0.05)。Cox多因素回归分析结果显示,组织EXOSC4蛋白高表达是初治DLBCL患者OS和PFS的独立不良预后因素(均P<0.05)。K-M生存分析结果显示,组织中EXOSC4蛋白高表达初治DLBCL患者总生存期和无进展生存期较低表达患者显著缩短(均P<0.05)。结论:初治DLBCL患者组织EXOSC4蛋白高表达是影响生存的独立不良预后因素。 展开更多
关键词 核酸外切体成分4 弥漫大B细胞淋巴瘤 预后 临床意义
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初治弥漫性大B细胞淋巴瘤患者血浆C反应蛋白水平与预后的相关性研究
3
作者 王颖 付丹晖 +3 位作者 张进萍 范丽萍 林秋燕 黄豪博 《福建医药杂志》 CAS 2023年第3期38-42,共5页
目的探讨治疗前血浆C反应蛋白(CRP)水平与初治弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者预后的相关性。方法回顾性分析180例初治DLBCL患者治疗前血浆CRP水平、临床特征与实验室指标及预后的关系。将患者分为CRP升高组和正常组。比较两组患者临床... 目的探讨治疗前血浆C反应蛋白(CRP)水平与初治弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者预后的相关性。方法回顾性分析180例初治DLBCL患者治疗前血浆CRP水平、临床特征与实验室指标及预后的关系。将患者分为CRP升高组和正常组。比较两组患者临床特征与实验室指标、总生存期(OS)及疾病无进展生存期(PFS)的差异;Cox单因素和多因素回归明确影响初治DLBCL患者预后的因素。结果治疗前血浆CRP升高组DLBCL患者中,高龄(>60岁)、男性、存在B症状、乳酸脱氢酶(LDH)水平高于正常、高ECOG评分、高Ann Arbor分期、高结外侵犯、高国际预后指数评分(IPI)、高国家综合癌症网络国际预后指数(NCCN-IPI)评分的患者比例明显高于血浆CRP正常组。单因素分析显示:年龄>60岁、LDH水平高于正常、ECOG评分2~4分、Ann Arbor分期Ⅲ~Ⅳ、结外侵犯>1处、血浆CRP水平升高是影响DLBCL患者OS和PFS的危险因素。多因素分析显示:结外侵犯>1处是影响DLBCL患者OS和PFS的独立危险因素;LDH水平高于正常、年龄>60岁分别是影响DLBCL患者OS、PFS的独立危险因素。治疗前血浆CRP升高不是初治DLBCL患者OS、PFS的独立危险因素。结论治疗前血浆CRP与初治DLBCL患者不良预后相关,但并不是独立危险因子。 展开更多
关键词 弥漫大B细胞淋巴瘤 C反应蛋白 预后
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治疗前外周血单核细胞计数在弥漫大B细胞淋巴瘤中的预后意义
4
作者 张进萍 范丽萍 +2 位作者 黄震宇 黄晓玲 黄豪博 《国际医药卫生导报》 2023年第23期3360-3365,共6页
目的探讨治疗前外周血单核细胞计数在弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B cell lymphoma,DLBCL)患者预后中的价值。方法回顾性分析2016年1月至2021年12月初诊于福州市第二医院和福建医科大学附属协和医院的641例初治DLBCL患者为研究对象... 目的探讨治疗前外周血单核细胞计数在弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B cell lymphoma,DLBCL)患者预后中的价值。方法回顾性分析2016年1月至2021年12月初诊于福州市第二医院和福建医科大学附属协和医院的641例初治DLBCL患者为研究对象,其中男378例,女263例,年龄14~86岁。受试者工作特征曲线(ROC)确定治疗前外周血单核细胞计数最佳截断值;按截断值将患者分为外周血单核细胞计数高水平组(217例)和低水平组(424例)。χ^(2)检验和log-rank检验分别比较两组患者临床和实验室特征、总生存期(OS)及疾病无进展生存期(PFS)的差异;单因素和多因素回归分析各指标与预后的关系。结果与治疗前外周血单核细胞计数低水平组比较,高水平组患者年龄>60岁比例[44.70%(97/217)比36.32%(154/424)]、男性比例[70.51%(153/217)比53.07%(225/424)]、乳酸脱氢酶(LDH)水平高于正常上限(ULN)比例[68.20%(148/217)比40.80%(173/424)]、高美国东部肿瘤协作组(ECOG)评分(2~4分)比例[31.34%(68/217)比16.27%(69/424)]、Ann Arbor分期Ⅲ~Ⅳ比例[84.79%(184/217)比58.73%(249/424)]、结外病灶>1处比例[48.39%(105/217)比30.42%(129/424)]、有B症状比例[31.34%(68/217)比16.75%(71/424)]、高国际预后指数(IPI)评分(3~5分)比例[59.45%(129/217)比32.08%(136/424)]、复发/难治发生率[34.56%(75/217)比23.11%(98/424)]均更高(均P<0.05)。单因素分析显示,有B症状、LDH>ULN、高ECOG评分(2~4分)、Ann Arbor分期Ⅲ~Ⅳ、结外病灶>1处、非生发中心B细胞(non-GCB)亚型、外周血单核细胞计数高与DLBCL患者OS、PFS有关(均P<0.05)。多因素分析显示,LDH>ULN、高ECOG评分(2~4分)、non-GCB亚型是DLBCL患者OS的独立不良预后因子(均P<0.05);高ECOG评分(2~4分)、结外病灶>1处、non-GCB亚型是DLBCL患者PFS的独立不良预后因子(均P<0.05);外周血单核细胞计数高是DLBCL患者OS的独立不良预后因子(HR=1.80,95%CI 1.14~2.82,P<0.01),但不是DLBCL患者PFS的独立不良预后因子。结论治疗前外周血单核细胞计数高是DLBCL患者OS的独立不良预后因子。 展开更多
关键词 弥漫大B细胞淋巴瘤 单核细胞 预后
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中国福建地区类孟买血型个体Fut1基因突变研究 被引量:4
5
作者 黄豪博 范丽萍 +3 位作者 魏世金 曾丰 林海艳 战榕 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2010年第5期1338-1340,共3页
本研究旨在探讨中国福建地区类孟买血型的分子机制。采用血清学方法鉴定研究对象为类孟买血型,采用PCR扩增研究对象的α1,2岩藻糖基转移酶(FUT1)基因编码区序列,并将PCR产物经TA后进行测序,分析fut1基因编码区序列,以证实类孟买血型的... 本研究旨在探讨中国福建地区类孟买血型的分子机制。采用血清学方法鉴定研究对象为类孟买血型,采用PCR扩增研究对象的α1,2岩藻糖基转移酶(FUT1)基因编码区序列,并将PCR产物经TA后进行测序,分析fut1基因编码区序列,以证实类孟买血型的发生机制。结果表明,PCR扩增产物电泳分析证实成功扩增fut1基因编码区序列;克隆后测序分析发现本例先证者2条染色体上fut1基因均为第547-552位AG两碱基缺失(CAGAGAG→CAGAG),导致阅读框架发生移码,提前形成终止密码。结论:本例类孟买血型个体fut1基因为h1h1型纯合突变。 展开更多
关键词 类孟买血型 α1 2岩藻糖基转移酶 FUT1基因
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VEGF反义RNA促骨髓瘤细胞凋亡及抑制内皮细胞形成血管作用的体外研究 被引量:4
6
作者 黄豪博 战榕 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2008年第2期312-316,共5页
本研究探讨血管内皮细胞生长因子(VEGF)反义RNA对人多发性骨髓瘤细胞系U266增殖、凋亡及内皮细胞ECV304体外血管形成的影响和以VEGF反义RNA进行多发性骨髓瘤(MM)基因治疗的可行性。将VEGF121反向克隆入真核表达质粒pIRES2-EGFP构建重组... 本研究探讨血管内皮细胞生长因子(VEGF)反义RNA对人多发性骨髓瘤细胞系U266增殖、凋亡及内皮细胞ECV304体外血管形成的影响和以VEGF反义RNA进行多发性骨髓瘤(MM)基因治疗的可行性。将VEGF121反向克隆入真核表达质粒pIRES2-EGFP构建重组质粒AS-VEGF,酶切、测序鉴定。用此真核表达重组质粒转染人骨髓瘤细胞系U266,G418筛选获得阳性克隆。RT-PCR、Western blot法分别检测阳性克隆中VEGF mRNA和蛋白的表达;利用MTT法、流式细胞术检测转染细胞增殖、凋亡的变化;利用基质胶中内皮细胞ECV304的网络形成检测血管形成。结果表明:获得了携带反义VEGF基因的真核表达重组质粒AS-VEGF;VEGF121反义RNA部分阻断了U266细胞中VEGF的表达,转染重组质粒的U266细胞VEGF mRNA和蛋白表达都较对照组细胞有明显减少,细胞的增殖受到抑制,凋亡增加。转染重组质粒的细胞培养上清在基质胶中作用ECV304细胞后的血管形成较对照组亦有明显减少。结论:VEGF反义RNA可以下调VEGF表达,从而抑制骨髓瘤细胞系U266增殖,增加其凋亡并抑制血管形成。 展开更多
关键词 VEGF 反义RNA 骨髓瘤细胞 U266细胞 内皮细胞 细胞凋亡 ECV304细胞 血管形成
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不同贮存时间的单采少白细胞血小板中精氨酸酶水平的研究 被引量:1
7
作者 黄豪博 范丽萍 +3 位作者 魏世金 傅丹晖 曾丰 黄清华 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期1879-1882,共4页
目的:探讨不同贮存时间对单采少白细胞血小板(apheresis leukocyte-reduced platelet,ALR-Plt)中精氨酸酶水平的影响及精氨酸酶的可能来源。方法:应用ELISA法检测不同贮存时间ALR-Plt和对照血浆中精氨酸酶水平及髓过氧化物酶(myeloperox... 目的:探讨不同贮存时间对单采少白细胞血小板(apheresis leukocyte-reduced platelet,ALR-Plt)中精氨酸酶水平的影响及精氨酸酶的可能来源。方法:应用ELISA法检测不同贮存时间ALR-Plt和对照血浆中精氨酸酶水平及髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)水平;应用相关性分析分析不同贮存时间的ALR-Plt中精氨酸酶水平与MPO水平的相关性。结果:贮存3 d内的ALR-Plt与对照血浆中精氨酸酶水平差异无统计学意义,但是贮存超过3d的ALR-Plt中精氨酸酶水平显著高于贮存3 d内的ALR-Plt和对照血浆中的水平(P<0.05)。不同贮存时间的ALR-Plt之间MPO水平差异无统计学意义,但均显著低于对照血浆中的水平(P<0.05)。相关性分析显示:ALRPlt中精氨酸酶水平与MPO水平呈正相关(r=0.58)。结论:贮存时间超过3 d的ALR-Plt中精氨酸酶水平显著升高,其可能来源于残留的少量白细胞,特别是中性粒细胞。 展开更多
关键词 单采少白细胞血小板 贮存时间 精氨酸酶 髓过氧化物酶
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结外NK/T细胞淋巴瘤组织中MCL-1和microRNA-29a的表达 被引量:3
8
作者 黄豪博 战榕 +2 位作者 吴顺泉 徐珍珍 范丽萍 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期95-98,共4页
本研究旨在探讨结外NK/T细胞淋巴瘤(ENKTCL)组织中MCL-1和microRNA-29a(miR-29a)的表达水平及其相关性。采用免疫组织化学Maxvision法和实时荧光定量PCR法分别检测20例ENKTCL和10例增生性淋巴结炎组织中MCL-1蛋白和miR-29a表达水平并进... 本研究旨在探讨结外NK/T细胞淋巴瘤(ENKTCL)组织中MCL-1和microRNA-29a(miR-29a)的表达水平及其相关性。采用免疫组织化学Maxvision法和实时荧光定量PCR法分别检测20例ENKTCL和10例增生性淋巴结炎组织中MCL-1蛋白和miR-29a表达水平并进行分析与比较。结果表明:ENKTCL组MCL-1表达显著高于增生性淋巴结炎组,但MCL-1过表达与患者的年龄、性别、Ann Arbor分期、国际预后指数评分无关。相关性分析显示:ENKTCL组织中miR-29a表达与MCL-1表达呈显著负相关(r=-0.59,P=0.016)。结论:miR-29a可能通过靶向调控MCL-1基因表达参与了ENKTCL的发生发展。 展开更多
关键词 结外NK T细胞淋巴瘤 MCL-1 miR-29a
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溶血磷脂酸酰基转移酶β与肿瘤关系研究进展 被引量:3
9
作者 黄豪博 战榕 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2008年第4期975-978,共4页
磷脂酸(PA)是一种多功能的生物活性磷脂。研究证实:溶血磷脂酸酰基转移酶β(lysophosphatidic acidacyltransferaseβ,LPAATβ)催化溶血磷脂酸(LPA)产生的PA与肿瘤细胞内多种信号途径的活化有关,参与了肿瘤细胞的增殖、凋亡、迁移、侵... 磷脂酸(PA)是一种多功能的生物活性磷脂。研究证实:溶血磷脂酸酰基转移酶β(lysophosphatidic acidacyltransferaseβ,LPAATβ)催化溶血磷脂酸(LPA)产生的PA与肿瘤细胞内多种信号途径的活化有关,参与了肿瘤细胞的增殖、凋亡、迁移、侵袭、呼吸爆发及细胞因子表达释放。LPAATβ在肿瘤组织中的表达显著增加以及抑制LPAATβ表达在体内外抗肿瘤(实体瘤和血液肿瘤)的作用研究取得的效果,提示以LPAATβ为靶点对肿瘤进行干预将成为重要的抗肿瘤治疗策略之一。本文就溶血磷脂酸酰基转移酶β与肿瘤治疗的相关基础及临床前研究进行综述。 展开更多
关键词 溶血磷脂酸酰基转移酶β 磷脂酸 肿瘤治疗
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EB病毒潜伏感染致淋巴瘤细胞外泌体分泌和功能异常的研究进展 被引量:2
10
作者 黄豪博 沈建箴 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期325-328,共4页
EB病毒(EBV)潜伏感染与多种淋巴系统肿瘤发生发展有着密切关系。外泌体(EXO)是细胞分泌的包含蛋白质、脂质、核酸等的功能性双层膜结构小体。近几年来有研究表明,EXO在肿瘤发生发展过程中起着重要作用,故对比EBV阴性和EBV阳性淋巴瘤细胞... EB病毒(EBV)潜伏感染与多种淋巴系统肿瘤发生发展有着密切关系。外泌体(EXO)是细胞分泌的包含蛋白质、脂质、核酸等的功能性双层膜结构小体。近几年来有研究表明,EXO在肿瘤发生发展过程中起着重要作用,故对比EBV阴性和EBV阳性淋巴瘤细胞在EXO分泌数量与内容物方面的差异,了解EXO对淋巴瘤细胞和免疫细胞生物学行为的影响,对EBV潜伏感染通过外泌体途径影响淋巴瘤发生发展机制的研究具有重要意义。本综述重点阐述EBV潜伏感染对淋巴瘤细胞EXO分泌数量、内容物及其功能的影响。 展开更多
关键词 EBV病毒 淋巴瘤 外泌体 外泌体分泌 外泌体功能
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初治白血病患者april mRNA的表达研究 被引量:1
11
作者 黄豪博 吴顺泉 +1 位作者 战榕 范丽萍 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2010年第6期1414-1417,共4页
本研究旨在检测27例确诊白血病患者april mRNA的表达水平,为april分子靶向治疗在白血病中的应用提供理论基础。采用实时荧光定量PCR方法检测初治白血病患者april mRNA的相对表达水平,分析其在各型白血病中的表达变化。结果表明:急性白血... 本研究旨在检测27例确诊白血病患者april mRNA的表达水平,为april分子靶向治疗在白血病中的应用提供理论基础。采用实时荧光定量PCR方法检测初治白血病患者april mRNA的相对表达水平,分析其在各型白血病中的表达变化。结果表明:急性白血病(AL)患者april mRNA的表达高于正常对照组,差异有统计学意义(p<0.05);急性髓系白血病(AML)患者april mRNA的表达高于正常对照组,其差异有统计学意义(p<0.05),且april mRNA的表达水平与外周血白细胞计数(WBC≥20.0×109/L)呈正相关(p<0.05),与患者的髓外侵犯及CD34表达无明显相关性(p>0.05)。除外急性早幼粒细胞白血病(APL)病例,april mRNA的表达水平与AML患者的化疗敏感性呈负相关(p<0.05)。急性淋巴细胞白血病(ALL)、慢性髓系白血病(CML)患者april mRNA的表达与正常对照组相比,差异无统计学意义(p>0.05)。结论:AML患者存在着april mRNA的过表达。AML细胞产生的APRIL蛋白可能在AML细胞的异常增殖及化疗耐药中起着重要作用。 展开更多
关键词 APRIL 白血病 实时荧光定量PCR
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去白细胞悬浮红细胞来源外泌体的释放及其对血液肿瘤细胞的调控
12
作者 黄豪博 范丽萍 +2 位作者 林秋燕 黄惠炆 付丹晖 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期1188-1192,共5页
目的:探讨不同储存时间去白细胞悬浮红细胞(LDRCS)中外泌体(exosome,Exo)的释放及其对血液肿瘤细胞增殖的调控与可能机制。方法:应用超高速离心方法获得不同储存时间的LDRCS中Exo(RBC⁃Exo),采用透射电镜术、蛋白免疫印迹法分别对RBC⁃Ex... 目的:探讨不同储存时间去白细胞悬浮红细胞(LDRCS)中外泌体(exosome,Exo)的释放及其对血液肿瘤细胞增殖的调控与可能机制。方法:应用超高速离心方法获得不同储存时间的LDRCS中Exo(RBC⁃Exo),采用透射电镜术、蛋白免疫印迹法分别对RBC⁃Exo的形态、免疫标记进行检测。采用动态光散射检测不同储存时间LDRCS中RBC⁃Exo的粒径分布变化。采用CCK⁃8法检测RBC⁃Exo对血液肿瘤细胞增殖的影响。采用蛋白免疫印迹法检测与RBC⁃Exo共培养后血液肿瘤细胞内增殖相关蛋白的表达变化。结果:分离出呈类杯状、粒径分布于20-200 nm、CD63/TSG101富集、Calnexin阴性、CD235a阳性、CD41阴性的RBC⁃Exo。储存中晚期(>14 d)LDRCS中RBC⁃Exo粒径分布无显著差异,但显著大于储存早期(储存≤14 d)的RBC⁃Exo。与对照组相比,RBC⁃Exo可以明显促进血液肿瘤细胞HBL1、U2932和Jurkat的增殖。与RBC⁃Exo共培养3 d的HBL1、U2932和Jurkat细胞中周期相关蛋白P21的表达较对照组明显下调,而抗凋亡蛋白BCL⁃2并无明显变化。结论:储存中晚期的LDRCS中RBC⁃Exo形态与储存早期存在差异。RBC⁃Exo可以促进血液肿瘤细胞的增殖,其机制可能是通过调节周期相关蛋白P21的表达。 展开更多
关键词 去白细胞悬浮红细胞 外泌体 肿瘤细胞 增殖
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硼替佐米对淋巴瘤细胞系CA46的作用及机制研究
13
作者 黄豪博 战榕 吴顺泉 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2010年第4期919-922,共4页
本研究探讨硼替佐米(bortezomib,BZM)对淋巴瘤细胞系CA46的作用及相关机制。采用MTT法观察BZM对CA46细胞增殖的作用,流式细胞术分析BZM对CA46细胞凋亡的影响,Western blot法检测经BZM作用的CA46细胞procaspase-3、BCL-2蛋白表达水平。... 本研究探讨硼替佐米(bortezomib,BZM)对淋巴瘤细胞系CA46的作用及相关机制。采用MTT法观察BZM对CA46细胞增殖的作用,流式细胞术分析BZM对CA46细胞凋亡的影响,Western blot法检测经BZM作用的CA46细胞procaspase-3、BCL-2蛋白表达水平。结果表明,BZM能明显抑制CA46细胞增殖,24小时和48小时的半数抑制浓度(IC50)分别为53.19,19.68nmol/L;BZM能诱导CA46细胞凋亡,且呈现剂量和时间依赖性;20nmol/LBZM处理CA46细胞不同时间后procaspase-3、BCL-2蛋白表达呈时间依赖性降低。结论:BZM可以抑制CA46细胞增殖,诱导其凋亡,其机制可能涉及了BCL-2表达下调及caspase-3的活化。 展开更多
关键词 硼替佐米 淋巴瘤 CA46细胞系 细胞增殖 细胞凋亡
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血细胞分离机AutoPBSC程序与MNC程序采集外周血干细胞的效果比较及影响因素分析 被引量:8
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作者 曾丰 魏世金 +5 位作者 黄豪博 黄清华 林秋燕 范丽萍 黄惠炆 付丹晖 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期1684-1690,共7页
本研究旨在分析COBE Spectra血细胞分离机自动采集程序(Auto PBSC程序)与半自动采集程序(MNC程序)在外周血干细胞采集中的效果及影响因素。109例采集按对象不同分为自体患者组(患者)和异基因供者组(供者),通过对采集物中干细胞数量与质... 本研究旨在分析COBE Spectra血细胞分离机自动采集程序(Auto PBSC程序)与半自动采集程序(MNC程序)在外周血干细胞采集中的效果及影响因素。109例采集按对象不同分为自体患者组(患者)和异基因供者组(供者),通过对采集物中干细胞数量与质量及采集程序特点的比较,对两种采集程序在两组中的采集结果及影响因素分别进行了分析。结果表明,在全血处理量基本相同的情况下,患者组和供者组两种程序采集物中MNC%与CD34+%、CD34+细胞数及血红蛋白含量差异无显著性(P>0.05);与MNC程序比较,Auto PBSC程序采集物中血小板混入少,采集物体积小,但抗凝剂用量多,采集时间长(P<0.05)。相关性分析显示,患者组两种程序采集物中MNC数(r=0.314,P=0.015)、CD34+细胞数(r=0.922,P=0.000)与采集前对应参数呈正相关,采集物中CD34+细胞数与WBC数(r=0.369,P=0.004)及MNC数(r=0.495,P=0.000)呈正相关;供者组Auto PBSC程序采集物中MNC数与采集前呈正相关(r=0.896,P=0.000),MNC程序采集物中CD34+细胞数与采集前呈正相关(r=0.666,P=0.000)。患者组Auto PBSC程序采集物中MNC数与CD34+细胞数在男性显著高于女性(P<0.05),在年龄40岁以下的患者显著高于年龄在40岁以上的患者(P<0.05),而MNC程序年龄在40岁以上患者采集的CD34+细胞数显著高于年龄40岁以下患者(P<0.05)。供者组仅MNC程序采集物中MNC数与CD34+细胞数在男性显著高于女性(P<0.05)。结论:在全血处理量相同时,自体患者和异基因供者PBSC采集中两种程序收获的MNC纯度与CD34+细胞纯度及浓度高度一致,但自体患者PBSC采集结果受年龄与性别影响较大。 展开更多
关键词 外周血造血干细胞 采集 自体 异基因 AutoPBSC程序 MNC程序
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2-甲氧基雌二醇诱导K562细胞凋亡及机制研究 被引量:8
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作者 张学亚 战榕 +1 位作者 黄豪博 杨婷 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第2期340-344,共5页
本研究探讨2-甲氧基雌二醇(2-ME2)对K562细胞的诱导凋亡作用及其机制。采用不同浓度2-ME2处理K562细胞,MTT法检测K562细胞的增殖活性,DNA琼脂糖凝胶电泳和AnnexinV/PI双染色法检测K562细胞的凋亡效应,流式细胞术检测细胞线粒体膜电位的... 本研究探讨2-甲氧基雌二醇(2-ME2)对K562细胞的诱导凋亡作用及其机制。采用不同浓度2-ME2处理K562细胞,MTT法检测K562细胞的增殖活性,DNA琼脂糖凝胶电泳和AnnexinV/PI双染色法检测K562细胞的凋亡效应,流式细胞术检测细胞线粒体膜电位的变化,RT-PCR和Westernblot方法分别检测相关基因mRNA和/或蛋白的表达变化。结果表明:2-ME2抑制K562细胞增殖呈时间和剂量依赖性;48小时的半数抑制浓度(IC50)为2μmol/L;2μmol/L2-ME2作用于K562细胞24、48、72小时,DNA凝胶电泳分析可见典型DNA梯形条带;AnnexinV/PI双染色法检测显示,细胞凋亡率分别为13.78%、22.32%和29.43%,而对照组凋亡率仅为1.78%(p<0.05);1、2和4μmol/L2-ME2分别处理K562细胞24小时,流式细胞术检测显示细胞线粒体膜电位下降;2μmol/L2-ME2处理K562细胞24、48和72小时,K562细胞中bcr/abl、bcl-2mRNA表达下调,而baxmRNA表达上调,Bcl-2、procaspase-3、procaspase-9、PARP(116kD)和p-Akt蛋白表达下调,胞浆Cyto-C和PARP活性片段(85kD)表达上调,而对总Akt蛋白表达无影响。结论:2-ME2通过升高bax/bcl-2比值降低线粒体膜电位、促使细胞色素C(Cyto-c)释放入胞浆、触发K562细胞的线粒体凋亡途径,活化caspase-3,导致K562细胞凋亡并抑制其增殖;通过下调bcr/ablmRNA表达以阻断PI3K/Akt信号通路也参与了该过程。 展开更多
关键词 2-甲氧基雌二醇 白血病 K562细胞 细胞凋亡
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三氧化二砷对骨髓瘤细胞系U266抑制增殖及诱导凋亡的机制研究 被引量:7
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作者 俞庆宏 战榕 黄豪博 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第5期982-985,共4页
本研究探讨三氧化二砷(As2O3)在体外对骨髓瘤细胞系U266的生物学效应及其机制。用MTT法观察As2O3对U266细胞增殖的影响,用流式细胞术、DNA凝胶电泳法分析As2O3对U266细胞凋亡的影响,以RT-PCR法检测2μmol/LAs2O3不同处理时间对U266细胞... 本研究探讨三氧化二砷(As2O3)在体外对骨髓瘤细胞系U266的生物学效应及其机制。用MTT法观察As2O3对U266细胞增殖的影响,用流式细胞术、DNA凝胶电泳法分析As2O3对U266细胞凋亡的影响,以RT-PCR法检测2μmol/LAs2O3不同处理时间对U266细胞人端粒酶逆转录酶蛋白催化亚单位(hTERT)mRNA的表达变化,用Western blot法检测As2O3不同处理时间对U266细胞procaspase-3、bcl-2及hTERT蛋白水平的表达变化。结果表明:As2O3能明显抑制U266细胞增殖,半数抑制浓度(IC50)为2μmol/L;As2O3能诱导U266细胞凋亡,呈现剂量和时间依赖性;2μmol/L As2O3不同时间处理U266细胞后procaspase-3蛋白及hTERT mRNA、蛋白表达呈时间依赖性降低,而bcl-2蛋白表达未发生变化。结论:As2O3通过改变线粒体跨膜电位,触发了U266细胞的线粒体凋亡途径,导致了caspase-3的活化,最终诱导U266细胞凋亡;hTERT表达下调也是As2O3诱导U266细胞凋亡的重要作用机制。 展开更多
关键词 AS2O3 骨髓瘤 U266细胞 细胞凋亡 caspase-3 HTERT
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白血病人的gfi-1表达及慢病毒介导的gfi-1基因沉默对K562细胞增殖的影响 被引量:4
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作者 战榕 吴顺泉 +2 位作者 黄豪博 黄胜林 林君 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2010年第4期849-854,共6页
本研究旨在检测独立生长因子(Gfi-1)在白血病患者的表达水平并探讨慢病毒介导的gfi-1基因沉默对人白血病细胞株K562增殖的影响。采用荧光实时定量PCR及Westernblot方法检测初治白血病患者gfi-1的表达水平,分析其在各型白血病中的表达情... 本研究旨在检测独立生长因子(Gfi-1)在白血病患者的表达水平并探讨慢病毒介导的gfi-1基因沉默对人白血病细胞株K562增殖的影响。采用荧光实时定量PCR及Westernblot方法检测初治白血病患者gfi-1的表达水平,分析其在各型白血病中的表达情况。设计、合成一对针对gfi-1 mRNA的shRNA序列,退火后连接到pLVTHM干扰载体上,与psPAX2、PDM2G共转HEK293T细胞,包装产生慢病毒颗粒并测定病毒滴度,感染K562细胞,建立稳定株。应用实时定量PCR和Western blot方法检测K562细胞gfi-1及baxmRNA和蛋白的表达,并与对照组进行比较.结果表明:慢病毒介导的shgfi-1能明显降低gfi-1的mRNA及蛋白水平,而bax的mRNA及蛋白水平则都上调。CCK-8检测发现,与对照组相比,shgfi-1能明显抑制K562细胞的增殖。结论:gfi-1在初治白血病患者中的高表达可能参与白血病的发生发展。gfi-1特异的shRNA干扰可以有效地下调K562细胞gfi-1基因的表达,抑制K562细胞的增殖,gfi-1基因可能是白血病基因治疗的一个有效靶点。 展开更多
关键词 gfi-1 白血病 RNA干扰 K562
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MicroRNA-193b在初治白血病患者的表达及意义 被引量:1
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作者 范丽萍 黄豪博 +2 位作者 沈建箴 傅海英 周华蓉 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期843-846,共4页
本研究旨在检测白血病患者microRNA-193b(miR-193b)的表达水平并探讨其意义。采用实时荧光定量PCR方法检测初治白血病患者miR-193b的相对表达水平,分析其在不同类型白血病中的表达差异及其与部分实验室指标和化疗反应的关系。结果表明:... 本研究旨在检测白血病患者microRNA-193b(miR-193b)的表达水平并探讨其意义。采用实时荧光定量PCR方法检测初治白血病患者miR-193b的相对表达水平,分析其在不同类型白血病中的表达差异及其与部分实验室指标和化疗反应的关系。结果表明:慢性髓系白血病(CML)和急性早幼粒细胞白血病(APL)患者与正常对照组miR-193b的表达相比,其差异均无统计学意义(P>0.05);AML(除外APL)、ALL患者miR-193b的表达均低于正常对照组,其差异有统计学意义(P<0.05)。在AML(除外APL)患者中,miR-193b表达水平与患者外周血白细胞计数及细胞CD34表达无明显相关,但是与患者的治疗反应呈负相关(P<0.05)。结论:AML(除外APL)患者中miR-193b表达水平可能与AML细胞的化疗敏感性相关。miR-193b可能是AML(除外APL)治疗的一个新靶点。 展开更多
关键词 microRNA-193b 白血病 慢性髓系白血病 急性早幼粒细胞白血病
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一个类孟买家系的分子遗传学分析 被引量:2
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作者 魏世金 黄豪博 范丽萍 《福建医科大学学报》 2013年第2期106-109,共4页
目的探讨一个类孟买家系的分子遗传学机制。方法采用血清学方法鉴定先证者及其父母的红细胞H抗原。采用高保真PCR扩增先证者及其父母的α1,2岩藻糖基转移酶(FUT1)基因编码区序列。PCR产物经TA克隆后进行测序、比对分析FUT1基因编码区序... 目的探讨一个类孟买家系的分子遗传学机制。方法采用血清学方法鉴定先证者及其父母的红细胞H抗原。采用高保真PCR扩增先证者及其父母的α1,2岩藻糖基转移酶(FUT1)基因编码区序列。PCR产物经TA克隆后进行测序、比对分析FUT1基因编码区序列。结果凝胶电泳分析证实成功扩增FUT1基因编码区序列;克隆后测序、比对分析发现先证者检出1种已知突变(h1nt547-552△AG),为h1/h1纯合子;先证者父母为H/h1杂合子。结论 FUT1基因突变以常染色体隐性遗传方式导致先证者类孟买血型的形成。 展开更多
关键词 ABO血型系统 岩藻糖基转移酶类 分子生物学 序列分析 基因 隐性 突变 系谱 克隆 分子
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微柱凝胶法检测ABO新生儿溶血病507例 被引量:3
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作者 范丽萍 黄豪博 +5 位作者 魏世金 黄清华 林海艳 曾丰 林秋燕 黄惠炆 《福建医药杂志》 CAS 2012年第2期70-72,共3页
ABO HDN是由于母婴ABO血型不合,母体IgG抗A(B)经胎盘进入胎儿循环,致敏并破坏胎儿红细胞,引起胎儿有核红细胞增多症、胎儿水肿、新生儿重症黄疸等临床表现的一种常见疾病[1-2]。既往,临床上主要通过手工抗人球蛋白方法进行患儿红细胞... ABO HDN是由于母婴ABO血型不合,母体IgG抗A(B)经胎盘进入胎儿循环,致敏并破坏胎儿红细胞,引起胎儿有核红细胞增多症、胎儿水肿、新生儿重症黄疸等临床表现的一种常见疾病[1-2]。既往,临床上主要通过手工抗人球蛋白方法进行患儿红细胞直接抗人球蛋白试验、游离抗体试验以及红细胞抗体释放试验来诊断ABO HDN。 展开更多
关键词 ABO血型 新生儿溶血病 微柱凝胶法
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