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木薯MeMLO12基因克隆及其CRISPR-Cas9表达载体的构建
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作者 蔡吉苗 李博勋 +3 位作者 黄贵修 李超萍 时涛 王国芬 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2024年第8期1528-1537,共10页
MLO基因是植物中特有的一类抗病性负调控因子,该基因突变导致植物产生广谱抗病性。本研究从木薯全基因组中克隆获得木薯MLO12基因的DNA和cDNA序列,并将其命名为MeMLO12。该基因全长3743 nt、编码区(ORF)全长1728 nt,具有一个完整的开放... MLO基因是植物中特有的一类抗病性负调控因子,该基因突变导致植物产生广谱抗病性。本研究从木薯全基因组中克隆获得木薯MLO12基因的DNA和cDNA序列,并将其命名为MeMLO12。该基因全长3743 nt、编码区(ORF)全长1728 nt,具有一个完整的开放阅读框,含有15个外显子和14个内含子,编码586个氨基酸,蛋白的分子质量为67.2 kDa,等电点为8.85。该基因编码的蛋白定位在内质网膜上,无信号肽,在23~45、74~96、161~183、285~307、312~334、371~393、413~435 aa处形成7次跨膜结构域。qRT-PCR定量分析发现,受木薯黄单胞病菌侵染后,MeMLO12基因在木薯抗、感品种中的表达量存在明显的差异,参与木薯与黄单胞菌之间的互作,表现出负调控作用。选择该基因第11个外显子进行Snap Gene Viewer分析,获得了10 455条sgRNA的种子序列,从中选取3条靶序列约23 nt,碱基组成上3'末端含G结尾,将其构建到CRISPR-Cas9载体上,经验证,确认MeMLO12的3条靶序列已经成功构建到基因编辑载体上,将其命名为pSGR-Cas9-AT-MeMLO12载体。 展开更多
关键词 木薯 MeMLO12基因 克隆 表达分析 CRISPR-Cas9载体 构建
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我国斯里兰卡木薯花叶病毒的分子特征及致病性分析
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作者 王国芬 李超萍 +5 位作者 时涛 吴会杰 蔡吉苗 李博勋 陆翠梅 黄贵修 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2024年第1期187-196,共10页
为进一步探究我国斯里兰卡木薯花叶病毒(Sri Lankan cassava mosaic virus,SLCMV)的分子特征及致病性。以感染SLCMV的木薯叶片基因组DNA为模板,PCR扩增获得DNA-A和DNA-B基因组全长,通过生物信息软件分析比较其核酸及氨基酸序列特征;构... 为进一步探究我国斯里兰卡木薯花叶病毒(Sri Lankan cassava mosaic virus,SLCMV)的分子特征及致病性。以感染SLCMV的木薯叶片基因组DNA为模板,PCR扩增获得DNA-A和DNA-B基因组全长,通过生物信息软件分析比较其核酸及氨基酸序列特征;构建了强、弱致病力分离物(SLCMV-Colombo和SLCMV-DG1922)的侵染性克隆,分别将2种致病力分离物的DNA-A和DNA-B组分进行重组,接种烟草(Nicotianatabacum),比较2种分离物的致病性差异。结果显示:我国SLCMV为“旧世界”双组份菜豆花叶病毒,编码包括AV2基因在内的8个开放阅读框(ORFs);具有双生病毒典型的共同序列(CR)、重复序列、TATABox和TAATATT↓AC茎环结构,Rep蛋白羧基末端有7个氨基酸缺失;我国SLCMV的基因组、编码和非编码区与柬埔寨、泰国和越南分离物的相似性在97.0%~100.0%之间,与印度和斯里兰卡早期的分离物相似性为86.5%~98.6%,DNA-B组份与印度木薯花叶病毒株系(ICMV)编码区序列相似性为95.0%~97.6%,与其他9个非洲木薯花叶病毒株系序列之间的序列相似性均低于80.0%。侵染性克隆接种结果证实,强致病力分离物SLCMV-Col的DNA-A(Col-A)组份在烟草叶片表现典型花叶症状中起主要作用,而我国分离物的DNA-B(DG1922-B)能协同Col-A对烟草产生强致病性。本研究分析了我国SLCMV的全基因组结构,建立的侵染性克隆及其技术为进一步解析SLCMV致病性机理提供重要的研究基础。 展开更多
关键词 斯里兰卡木薯花叶病毒 分子特征 侵染性克隆 致病性
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中国热带作物产业发展现状及策略研究
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作者 李玉萍 李光辉 +3 位作者 叶露 梁伟红 李娜 黄贵修 《热带农业科学》 2024年第5期105-114,共10页
从热带作物产业在保障国家战略资源安全、满足市场多样化需求、助力乡村振兴战略实施、推动中国农业“走出去”等方面阐明其在我国农业系统中的地位;系统分析我国热带作物产业在生产、贸易、区域布局与产业结构、知识产权、品牌效应、... 从热带作物产业在保障国家战略资源安全、满足市场多样化需求、助力乡村振兴战略实施、推动中国农业“走出去”等方面阐明其在我国农业系统中的地位;系统分析我国热带作物产业在生产、贸易、区域布局与产业结构、知识产权、品牌效应、科技支撑、数字化转型升级等方面的发展现状与成效,深入研判产业发展面临的困难与挑战,提出加强基础设施建设、科技创新驱动、推进全产业链发展、实施品牌战略、完善产业经营体系、强化国际交流合作等发展策略。 展开更多
关键词 中国 热带作物 产业发展 现状 策略
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全球热带作物产业发展现状及策略研究
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作者 李光辉 李玉萍 +3 位作者 曾小红 冯韵 李娜 黄贵修 《热带农业科学》 2024年第7期115-124,共10页
热带作物是世界农业的重要组成部分,对于促进全球农业发展、保障粮食安全、增加农民收入、改善人民生活水平等具有重要意义。同时,热带作物也是全球农业贸易中不可或缺的一部分,为世界经济增长和国际合作提供了重要支撑。本文从热带作... 热带作物是世界农业的重要组成部分,对于促进全球农业发展、保障粮食安全、增加农民收入、改善人民生活水平等具有重要意义。同时,热带作物也是全球农业贸易中不可或缺的一部分,为世界经济增长和国际合作提供了重要支撑。本文从热带作物在全球农业系统中的地位、发展现状、面临的困难与挑战及应对策略4个方面进行了分析,旨在为了解热带作物在人类历史和现代社会中的作用和价值,及应对全球化和气候变化等挑战,促进全球热带作物产业可持续发展提供参考。 展开更多
关键词 全球 热带作物 产业发展 现状 策略
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大载荷植保无人机施药参数优选及不同药剂对橡胶树“两病”的飞防效果研究 被引量:3
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作者 李博勋 黄贵修 +6 位作者 刘先宝 蔡吉苗 冯艳丽 冯志军 陈奕鹏 丁莹 时涛 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2023年第12期2558-2568,共11页
本研究利用大载荷油动植保无人机(FBH300T)开展橡胶树白粉病和炭疽病(简称橡胶树“两病”)的飞防试验,分析飞行离冠层高度3、5、7 m和施药量60、90、105L/hm^(2)两个参数对橡胶树上、下层叶片雾滴沉积分布的影响。发现飞行高度和施药量... 本研究利用大载荷油动植保无人机(FBH300T)开展橡胶树白粉病和炭疽病(简称橡胶树“两病”)的飞防试验,分析飞行离冠层高度3、5、7 m和施药量60、90、105L/hm^(2)两个参数对橡胶树上、下层叶片雾滴沉积分布的影响。发现飞行高度和施药量对雾滴密度和雾滴覆盖率均表现出极显著的影响,筛选出飞行离冠层高度5 m、施药量90 L/hm^(2)、飞行速度5 m/s是该机型的最优施药参数。利用兼治橡胶树多种叶部病害的新型专用药剂19%保叶清微乳剂,以及60%硫磺粉悬浮剂、45%戊唑·咪酰胺水乳剂和50%硫磺·三唑酮悬浮剂等高效药剂与大载荷植保无人机配套施用,分析各药剂单独和两两混配施用对橡胶树“两病”的飞防效果。结果表明:4个单剂中对白粉病防效最好的是50%硫磺·三唑酮悬浮剂,其次是19%保叶清微乳剂;对炭疽病防效最好的是19%保叶清微乳剂,其次是45%戊唑·咪酰胺水乳剂。药剂两两混配施用下,19%保叶清微乳剂和60%硫磺粉悬浮剂按1∶1混配对白粉病和炭疽病的防效最好,其次是19%保叶清微乳剂和50%硫磺·三唑酮悬浮剂按1∶1混配。本研究结果可为橡胶树“两病”无人机飞防技术熟化和飞防专用药剂的选择提供参考依据。 展开更多
关键词 橡胶树 白粉病 炭疽病 大载荷植保无人机 施药参数 化学药剂 飞防
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橡胶树杂交F_(1)代抗病种质鉴选及其抗病性分析
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作者 李博勋 黄贵修 +4 位作者 和丽岗 蔡吉苗 冯艳丽 余文才 刘忠亮 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2023年第11期2281-2291,共11页
橡胶树棒孢霉落叶病(Corynespora leaf fall disease,CLFD)是全球主要植胶国最为严重的叶部病害之一,可造成严重的产量和经济损失,而抗病种质鉴选与创制利用是该病最为有效的防治策略。本研究对云研277-5×IAN 873、RRIC103×热... 橡胶树棒孢霉落叶病(Corynespora leaf fall disease,CLFD)是全球主要植胶国最为严重的叶部病害之一,可造成严重的产量和经济损失,而抗病种质鉴选与创制利用是该病最为有效的防治策略。本研究对云研277-5×IAN 873、RRIC103×热研8-79和云研277-5×热垦525三个杂交组合的821份F_(1)代群体进行了抗棒孢霉落叶病的评价,明确了F_(1)代群体的抗病性水平,并从符合正态分布的2个杂交组合中筛选出32份候选F_(1)代单株进行芽接,再分别利用3个亚型的多主棒孢病菌和2种评价方法对候选F_(1)代无性系种苗进行抗病性复筛,最终获得5份抗病性较好的F_(1)代新种质。通过对5份抗病新种质防御酶活性的测定,以及抗病相关基因表达特性的分析,进一步证实了5份抗病新种质与多主棒孢病菌在侵染过程中的互作关系,明确了其在病原菌接种不同时间段的差异表达特征。本研究为橡胶树棒孢霉落叶病抗病性早期鉴选、抗病种质培育与创制利用提供了很好的种质材料和理论支撑。 展开更多
关键词 橡胶树 棒孢霉落叶病 杂交F_(1)代 鉴选 抗病性
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海南橡胶树炭疽病调查及喀斯特炭疽病菌的鉴定
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作者 郑肖兰 刘先宝 +4 位作者 郑行恺 李博勋 时涛 冯艳丽 黄贵修 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2023年第12期2546-2557,共12页
天然橡胶是四大工业原料中唯一的可再生资源,由炭疽病菌侵染引起的橡胶树炭疽病是当前我国橡胶生产上最为严重的两大叶部病害之一。本研究通过调查海南省主栽橡胶树品种(系)及监测炭疽病发生流行情况,调查发现PR107和RRIM600种植面积最... 天然橡胶是四大工业原料中唯一的可再生资源,由炭疽病菌侵染引起的橡胶树炭疽病是当前我国橡胶生产上最为严重的两大叶部病害之一。本研究通过调查海南省主栽橡胶树品种(系)及监测炭疽病发生流行情况,调查发现PR107和RRIM600种植面积最大,分别占51.06%(102000 hm^(2))和43.39%(86700 hm^(2));在对橡胶树炭疽病的随机踏查和固定监测中发现,该病在实生苗、嫁接苗、增殖苗、各主栽品种幼龄树和成龄胶园中全年均可发生,3—4月为盛发期;海南省橡胶树种植面积大,且品种(系)单一,因此炭疽病在适宜发病条件下易暴发流行。通过形态观察、致病性测定和多基因系统发育分析发现,分离自琼中县阳江农场苗圃橡胶树叶片上的菌株HCkHNQZ1736为喀斯特炭疽菌(Colletotrichum karstii),这是首次在海南省橡胶树上发现该类病菌。致病力评价发现其对PR107、RRIM600、热研7-33-97和大丰95四个主推品种均有强致病力。杀菌剂敏感性测定结果表明,菌株HCkHNQZ1736和分离自云南保山的同种菌株MeCkYN1705对咪鲜胺锰盐差异不显著且不具抗药性,EC_(50)分别为0.0784μg/mL和0.0775μg/mL。HCkHNQZ1736对多菌灵表现出高抗药性,EC_(50)达1107.2654μg/mL,而MeCkYN1705的EC_(50)仅为0.0554μg/mL。 展开更多
关键词 橡胶树炭疽病 病害调查 喀斯特炭疽菌 分子鉴定
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中国木薯病害研究进展与展望
8
作者 时涛 李超萍 +1 位作者 王国芬 黄贵修 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2023年第12期2355-2368,共14页
木薯是全球第六大粮食作物,也是中国华南地区重要的经济作物,相关产业在当地农业经济中占有重要地位。木薯种植中,田间各种频繁发生的病害常造成严重的经济损失,是生产中必须关注的重要问题。本文简要回顾了木薯病害研究在建国后至20世... 木薯是全球第六大粮食作物,也是中国华南地区重要的经济作物,相关产业在当地农业经济中占有重要地位。木薯种植中,田间各种频繁发生的病害常造成严重的经济损失,是生产中必须关注的重要问题。本文简要回顾了木薯病害研究在建国后至20世纪80年代缓慢发展阶段,20世纪90年代至21世纪10年代快速发展阶段,以及21世纪10年代后高速发展阶段的进展情况,同时着重介绍了最新研究进展。当前,为害中国木薯的病害有4类11种,细菌性萎蔫病为害最为严重,褐斑病发生面积最大,而国际木薯第一大病害——花叶病(类)已入侵中国内地地区,中国热带农业科学院等机构已开展了木薯病害数据库建设和智能监测技术研究。在危险性病害预警方面,国内开展了5种病害风险评估,主要针对花叶病和褐条病的抗性评价、致害机理、检测方法等方面的研究。在细菌性萎蔫病方面,相关机构开展了监测技术、病原菌基因组序列测序和致病(及抗铜)机理、病原种群遗传变异、抗病种质鉴选及抗性机理等方面的研究,也进行了有效药剂筛选和高效施药、生物防治及种茎消毒等防治技术的研发和推广工作。对于花叶病,国内已明确其发生范围、病毒种类、远距离扩散关键因子,并在病毒致害机理、田间传播机制方面取得重要进展。同时,本文还介绍了褐斑病等7种常见病害监控方面的研究进展。随着国民经济的发展,中国木薯产业出现食用化、规模化等趋势,以及在参与机构数量及科研进展速度、多学科融合的助推作用,并对研发新热点等方面进行了展望。本文有助于相关从业人员更好地了解中国木薯病害发生现状及当前研究进展,也为热区其他作物病害监控技术的研发与应用提供借鉴。 展开更多
关键词 中国 木薯 病害 研究历史 监测技术 防控方法
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橡胶树叶部病害大载荷植保无人机防治技术规程
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作者 李博勋 刘先宝 +3 位作者 冯志军 蔡吉苗 陈奕鹏 黄贵修 《热带农业科学》 2023年第11期52-59,共8页
白粉病、炭疽病和棒孢霉落叶病是国内橡胶树主要叶部病害,目前生产上主要采用人工背负式喷粉的施药方式,存在防治技术落后、施药效率低、用药量大、耗费劳动力等问题。大载荷植保无人机飞防将成为热带高大经济作物病害防治更为高效的技... 白粉病、炭疽病和棒孢霉落叶病是国内橡胶树主要叶部病害,目前生产上主要采用人工背负式喷粉的施药方式,存在防治技术落后、施药效率低、用药量大、耗费劳动力等问题。大载荷植保无人机飞防将成为热带高大经济作物病害防治更为高效的技术手段。为了规范指导大载荷植保无人机在橡胶树叶部病害防治技术上的应用,确保防治效果和作业安全性,文章总结了飞防技术的适用范围、规范性文件引用、术语和定义、病情调查、无人机作业环境和条件、飞防作业要求、飞行参数、药剂准备和装载、防效调查等内容,并形成了一套橡胶树叶部病害大载荷植保无人机防治技术规程,对规范植保无人机在橡胶树上的应用、确保高质量安全作业、保证防效等方面具有重要意义,为制定橡胶树叶部病害植保无人机飞防技术标准提供参考。 展开更多
关键词 橡胶树 叶部病害 大载荷植保无人机 飞防 技术规程
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木薯细菌性萎蔫病菌2个候选抗铜基因簇的克隆和分析
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作者 徐春华 李超萍 +4 位作者 时涛 王国芬 蔡吉苗 李博勋 黄贵修 《热带生物学报》 2023年第5期499-505,共7页
为对木薯细菌性萎蔫病菌2个候选抗铜基因簇的功能进行验证和对病原菌抗铜机理进行分析,在进一步评价不同来源菌株抗铜性水平的基础上,开展2个基因簇的克隆工作。结果表明,来自国内及密克罗尼西亚、马来西亚等国家的供试菌株对铜离子同... 为对木薯细菌性萎蔫病菌2个候选抗铜基因簇的功能进行验证和对病原菌抗铜机理进行分析,在进一步评价不同来源菌株抗铜性水平的基础上,开展2个基因簇的克隆工作。结果表明,来自国内及密克罗尼西亚、马来西亚等国家的供试菌株对铜离子同样具有较高水平的抗性,不同国家的代表性菌株均编码有copTAB和XmeRSA两个抗铜基因簇。不同菌株的2个基因簇具有高度同源性,分析其除参与抗铜代谢外,可能还和致病等其他保守功能相关。 展开更多
关键词 木薯细菌性萎蔫病 抗铜基因簇 copTAB XmeRSA
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利用mRNA差别显示技术分离橡胶树死皮病相关cDNA 被引量:11
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作者 黄贵修 吴坤鑫 陈守才 《热带作物学报》 CSCD 2002年第3期36-42,共7页
从中国热带农业科学院橡胶树早期预测试验地采集不同品系的橡胶树胶乳和树皮组织,分别提取纯化mRNA合成cDNA第一链。通过4个简并锚定引物和10个随机引物进行PCR扩增,经6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳后发现了至少4个差异DNA片段只在健康树中... 从中国热带农业科学院橡胶树早期预测试验地采集不同品系的橡胶树胶乳和树皮组织,分别提取纯化mRNA合成cDNA第一链。通过4个简并锚定引物和10个随机引物进行PCR扩增,经6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳后发现了至少4个差异DNA片段只在健康树中表达而在死皮树中没有出现。这4个差异DNA片段分别命名为Hb1(725bp),Hb2,Hb3,Hb4。对Hb1进行了分离、纯化,经Northern杂交证实,Hb1在健康树胶乳中表达活跃,而在死皮树胶乳中表达受到强烈抑制,表明Hb1是与死皮病相关的cDNA片段。进一步将Hb1片段进行回收和克隆,并进行DNA序列分析。序列在GenBank中进行BLAST分析未发现相关同源片段。死皮病相关cDNA片段的获得,将为分离全长死皮病相关基因,搞清该基因表达调控的机理提供条件,进而为从分子水平上阐明死皮病的致病机理打下基础。 展开更多
关键词 MRNA差别显示 技术分离 巴西 橡胶树 死皮病
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臂形草内生真菌HND5的GFP标记及其抑菌作用 被引量:5
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作者 黄贵修 时涛 +3 位作者 刘先宝 戴英葵 蔡吉苗 林春花 《中国生物防治》 CSCD 北大核心 2010年第3期320-326,共7页
臂形草Brachiaria brizantha内生真菌HND5及其产生的挥发性气体对多种植物病原真菌均有拮抗作用。本研究通过原生质体转化将绿色荧光蛋白(GFP)表达载体质粒pPKNTG转入HND5菌株中,获得了带绿色荧光且遗传稳定的转化子;PCR鉴定结果表明绿... 臂形草Brachiaria brizantha内生真菌HND5及其产生的挥发性气体对多种植物病原真菌均有拮抗作用。本研究通过原生质体转化将绿色荧光蛋白(GFP)表达载体质粒pPKNTG转入HND5菌株中,获得了带绿色荧光且遗传稳定的转化子;PCR鉴定结果表明绿色荧光与外源质粒的插入相关。随机选取7个荧光转化子进行拮抗活性评价,发现其中5个转化子及其产生的挥发性气体对多主棒孢Corynespora cassiicola的拮抗活性与野生型菌株HND5相当。该结果为深入研究HND5菌株内生性及生防作用机理奠定了基础。 展开更多
关键词 臂形草 内生真菌HND5 绿色荧光蛋白 多主棒孢菌 拮抗作用
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胶孢炭疽菌T-DNA插入突变体库的构建及其分子分析 被引量:7
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作者 黄贵修 薛迎春 卢昕 《热带作物学报》 CSCD 2008年第1期27-32,共6页
利用根癌农杆菌介导的T-DNA插入遗传转化体系转化杧果炭疽菌SC2菌株,共获得抗潮霉素B突变体4680个,平均每转化1.0×106个炭疽菌分生孢子可得到300~980个突变体,且潮霉素抗性在多次传代实验中得到稳定遗传。随机挑取38个突变体进行... 利用根癌农杆菌介导的T-DNA插入遗传转化体系转化杧果炭疽菌SC2菌株,共获得抗潮霉素B突变体4680个,平均每转化1.0×106个炭疽菌分生孢子可得到300~980个突变体,且潮霉素抗性在多次传代实验中得到稳定遗传。随机挑取38个突变体进行PCR检测,均可扩增出1条约1.2kb的目标谱带,说明突变体为T-DNA插入引起;进一步的Southern blot杂交分析结果表明,在随机挑选的20个突变体中,有1个(5%)为三拷贝T-DNA插入,4个(20%)为双拷贝插入,剩余的15个(75%)为单拷贝插入。 展开更多
关键词 胶孢炭疽菌 T-DNA 插入突变 PCR SOUTHERN杂交
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橡胶树多主棒孢病菌遗传多态性分析 被引量:2
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作者 黄贵修 刘先宝 +3 位作者 高宏华 蔡吉苗 时涛 张科立 《热带作物学报》 CSCD 2008年第6期777-780,共4页
利用ISSR(简单序列重复区间扩增多态性)和RAPD(随机扩增多态DNA)技术对供试的18个多主棒孢菌株进行了遗传多态性分析,研究结果表明,2种分子标记技术均能揭示橡胶多主棒孢病菌的遗传多态性。同时利用p距离模型构建了18个多主棒孢菌株的UP... 利用ISSR(简单序列重复区间扩增多态性)和RAPD(随机扩增多态DNA)技术对供试的18个多主棒孢菌株进行了遗传多态性分析,研究结果表明,2种分子标记技术均能揭示橡胶多主棒孢病菌的遗传多态性。同时利用p距离模型构建了18个多主棒孢菌株的UPGMA聚类分析树状图,根据2种技术构建的UPGMA聚类树状图可将供试菌株分为3个主要类群。ISSR类群和RAPD类群与地理来源均不存在明显的关系。 展开更多
关键词 橡胶 多主棒孢 ISSR RAPD
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一种改良的橡胶树胶乳总RNA提取方法 被引量:13
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作者 黄贵修 吴坤鑫 陈守才 《华南热带农业大学学报》 2002年第4期1-4,共4页
橡胶树胶乳总RNA提取过程中 ,常常遇到胶乳收集需要时间长 ,需去除橡胶粒子才能提取RNA等困难 ;利用常规方法提取的胶乳总RNA通常产量较低、易降解、体外翻译困难等。本文介绍一种改进的LiCl沉淀法 ,不需预先去除橡胶粒子 ,得到的总RNA... 橡胶树胶乳总RNA提取过程中 ,常常遇到胶乳收集需要时间长 ,需去除橡胶粒子才能提取RNA等困难 ;利用常规方法提取的胶乳总RNA通常产量较低、易降解、体外翻译困难等。本文介绍一种改进的LiCl沉淀法 ,不需预先去除橡胶粒子 ,得到的总RNA样品经紫外分光光度计检测和 1.2 %甲醛变性凝胶电泳分析证明 ,具有较高的纯度和完整性 ,且产量较高 ,可满足多数分子生物学实验的需要。 展开更多
关键词 提取方法 橡胶树胶乳 LiCl沉淀法 总RNA 改良法 氯化锂沉淀法
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臂形草内生菌特异DNA片段的克隆及其分子鉴定 被引量:3
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作者 黄贵修 Yuka Takayama Segenet Kelemu 《热带作物学报》 CSCD 2002年第4期58-61,共4页
进行了臂形草内生菌特异DNA片段的克隆及分子鉴定方法的研究。从5个臂形草品种分离的5个内生菌纯培养物中,提取基因组DNA,通过140条随机引物的RAPD分析,引物OPAK10扩增出1条约500bp的共有PCR谱带。此DNA片段命名为BE1。对BE1进行分离、... 进行了臂形草内生菌特异DNA片段的克隆及分子鉴定方法的研究。从5个臂形草品种分离的5个内生菌纯培养物中,提取基因组DNA,通过140条随机引物的RAPD分析,引物OPAK10扩增出1条约500bp的共有PCR谱带。此DNA片段命名为BE1。对BE1进行分离、纯化,经点杂交证实BE1为臂形草内生菌特异DNA片段。进一步将BE1片段进行回收、克隆和DNA序列分析。BE1在基因库中进行序列分析,未发现相关同源片段。臂形草内生菌特异DNA片段的获得,为建立一种准确、快速检测臂形草内生菌及特异内生菌方法奠定了分子生物学基础。 展开更多
关键词 臂形草 内生菌 特异DNA片段 克隆
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环植所科研主体向海口转移工作与方案研究 被引量:1
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作者 黄贵修 陈刚 +2 位作者 师雪茹 林培群 吴琳 《热带农业工程》 2011年第3期56-58,共3页
中国热带农业科学院环境与植物保护研究所是从事热带农业环境与植物保护领域研究的国家级公益类非营利性研究所。海口环境与植物保护研究实验室项目工程即将竣工,该所科研主体由儋州向海口转移工作已列入所2011年计划的第一项重点工作... 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所是从事热带农业环境与植物保护领域研究的国家级公益类非营利性研究所。海口环境与植物保护研究实验室项目工程即将竣工,该所科研主体由儋州向海口转移工作已列入所2011年计划的第一项重点工作。从工作方案入手,重点从领导管理、群众参与、宣传引导、督导落实等方面提出建议确保转移工作平稳有序。 展开更多
关键词 环植所 科研主体 海口 转移
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差异表达基因克隆技术的新进展 被引量:2
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作者 黄贵修 《热带生物学报》 1999年第1期34-39,共6页
综述差异表达基因克隆技术的新进展,简要介绍抑制性消减杂交法、消减杂交法、mRNA差异显示法、代表性差式分析法。
关键词 抑制性消减杂交 消减杂交 MRNA差异显示 代表性差式分析
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木薯害虫普查及其安全性评估 被引量:54
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作者 陈青 卢芙萍 +3 位作者 黄贵修 李开绵 叶剑秋 张振文 《热带作物学报》 CSCD 2010年第5期819-827,共9页
为适应中国木薯产业的可持续发展需要,于2008~2009年间对木薯害虫、害螨在中国华南地区的分布、危害进行普查,并对2种国家检疫性毁灭性害虫、害螨进行了风险评估和5种主要害虫、害螨对木薯产业及本地生态经济的影响进行了分析。结果表... 为适应中国木薯产业的可持续发展需要,于2008~2009年间对木薯害虫、害螨在中国华南地区的分布、危害进行普查,并对2种国家检疫性毁灭性害虫、害螨进行了风险评估和5种主要害虫、害螨对木薯产业及本地生态经济的影响进行了分析。结果表明,海南、广西、广东共查获木薯害虫、害螨36种,其中害虫33种,害螨3种,并在国内首次发现木薯单爪螨和螺旋粉虱危害木薯,朱砂叶螨、蔗根锯天牛、白蛴螬在国内木薯种植区大面积严重发生与危害;木薯单爪螨、螺旋粉虱对木薯均属于高度危险有害生物;目前,木薯害虫、害螨已成为中国热区木薯产业能否可持续发展的重要限制因子之一,对木薯产业及本地生态经济的潜在影响与威胁十分严重。 展开更多
关键词 木薯 害虫 普查 风险评估 生态经济
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甜瓜棒孢叶斑病病原菌鉴定及其生物学特性研究 被引量:24
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作者 王爽 黄贵修 +1 位作者 李博勋 孔祥义 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2013年第12期2446-2452,共7页
对海南三亚发生的甜瓜棒孢叶斑病的危害症状进行了系统的描述,采用致病性试验、形态学观察及分子生物学的方法对引起该病的病原菌进行了鉴定,同时采用菌落生长法和玻片法测定了病原菌的生物学特性.结果表明:甜瓜棒孢叶斑病的病原菌为... 对海南三亚发生的甜瓜棒孢叶斑病的危害症状进行了系统的描述,采用致病性试验、形态学观察及分子生物学的方法对引起该病的病原菌进行了鉴定,同时采用菌落生长法和玻片法测定了病原菌的生物学特性.结果表明:甜瓜棒孢叶斑病的病原菌为多主棒孢霉[Corynespora cassiicola(Berk.&Curst.)Wei];病原菌菌丝生长的最适宜培养基为大豆培养基,最适温度为24~28℃,致死温度和时间为55℃、15 min,最适pH为8~10,光照有利于菌丝生长,最适碳源为乳糖,最适氮源为NaN03;分生孢子萌发的最适温度为24℃,致死温度和时间为50℃、20 min. 展开更多
关键词 甜瓜 棒孢叶斑病 多主棒孢霉 生物学特性
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