辐射诱变冰糖橙早熟突变体的遗传鉴定与品种特性

1

作者 王驰 黄伟 +5 位作者 龚玲 何淙 邓钢桥 邓子牛 龙桂友 李娜 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期2117-2125,共9页

为探究辐射诱变冰糖橙果实提早着色性状的遗传变异,果实着色与糖酸内在品质表现,以及辐射诱变冰糖橙是否为早熟突变体,以突变体与对照冰糖橙为材料,对比分析春梢长度、春梢叶片、花器官、果实大小、果皮颜色转变、主要物候期等性状和特... 为探究辐射诱变冰糖橙果实提早着色性状的遗传变异,果实着色与糖酸内在品质表现,以及辐射诱变冰糖橙是否为早熟突变体,以突变体与对照冰糖橙为材料,对比分析春梢长度、春梢叶片、花器官、果实大小、果皮颜色转变、主要物候期等性状和特性的变化,应用分子标记鉴定遗传变异,比较两者果实中可溶性固形物、可滴定酸、固酸比的变化以及蔗糖和柠檬酸代谢相关基因的表达。结果表明,与对照冰糖橙相比,突变体春梢显著变短,成熟时果实较大,果皮和果肉提前15 d转色成橙黄色和橙色,主要物候期提早2~5 d,插入或缺失(InDel)标记和简单序列重复(SSR)标记引物扩增都存在差异条带,突变体发生了遗传改变。早熟突变体果实外观颜色与内在品质在花后190 d同步达到正常成熟度,可溶性固形物、可滴定酸及固酸比分别为14.53°Brix、0.46%和31.59,表现为低酸、降酸早、固酸比值高,比对照提早15 d成熟。蔗糖和柠檬酸的合成、降解、转运相关基因的表达分析结果表明,早熟突变体蔗糖合成多、转运早,柠檬酸合成少、降解快、贮运少,与果实品质表现低酸、降酸早、固酸比高基本吻合。综上,辐射诱变突变体发生了植物性状、生物特性、DNA的遗传改变,果实降酸早、含酸低、固酸比高,11月上旬着色成熟。研究结果为该突变体的进一步选育和登记早熟冰糖橙新品种奠定了基础。 展开更多

关键词 冰糖橙 早熟 分子标记 果实品质 基因表达

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巨峰葡萄实生苗阶段发育过程中几种同工酶酶谱的变化 被引量：10

2

作者 龙桂友 沈德绪 林伯年 《果树科学》 CAS CSCD 北大核心 1991年第2期91-96,共6页

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳,分析了三年生巨峰实生苗阶段发育过程中不同节位木质部的过氧化物酶、多酚氧化酶和超氧物歧化酶同工酶谱带。结果表明:不同节位木质部的过氧化物酶同工酶的一条谱带,从茎基部到首次出现卷须的部位其活性增强,随... 采用聚丙烯酰胺凝胶电泳,分析了三年生巨峰实生苗阶段发育过程中不同节位木质部的过氧化物酶、多酚氧化酶和超氧物歧化酶同工酶谱带。结果表明:不同节位木质部的过氧化物酶同工酶的一条谱带,从茎基部到首次出现卷须的部位其活性增强,随后便消失。在休眠期,过氧化物酶同工酶不存在阶段发育的酶谱差异性;在生长期则随着葡萄蔓阶段发育程度的提高酶带数增多,活性增强。超氧物歧化酶同工酶,不论是休眠植株还是活跃生长的植株,其酶谱保持不变,但休眠期酶带多、活性高。过氧化物酶同工酶与多酚氧化酶同工酶酶谱类型一致。 展开更多

关键词 巨峰葡萄 实生苗 阶段发育 同工酶

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枳落叶前的抗寒能力分析 被引量：4

3

作者 龙桂友 刘杰 +3 位作者 饶力群 邓子牛 熊兴耀 赵文魁 《湖南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期700-704,共5页

以即将落叶的2年生枳(Poncirustrifoliata(L.)Raf.)营养袋苗为试材,以相同时期的2年生宫本/枳砧(Cit- rus reticulata Blanco cv.Miyamoto)营养袋苗为对照,棉絮包蔸进行-6℃不同时间的低温处理,探讨枳在落叶前的抗寒能力.结果表明,枳叶... 以即将落叶的2年生枳(Poncirustrifoliata(L.)Raf.)营养袋苗为试材,以相同时期的2年生宫本/枳砧(Cit- rus reticulata Blanco cv.Miyamoto)营养袋苗为对照,棉絮包蔸进行-6℃不同时间的低温处理,探讨枳在落叶前的抗寒能力.结果表明,枳叶片电解质渗出率随-6℃处理时间的延长呈"S"形变化,当电解质渗出率在25%以下时,叶片受冻可以恢复;当叶片电解质渗出率在50%以上时,叶片发生不可逆冻害,2～3 d干枯、死亡,与受冻形态观察结果吻合.枳落叶前-6℃处理60 min是耐受低温的临界点.枳抗寒能力强于宫本的因素之一可能是枳的过氧化氢酶和过氧化物酶活性比宫本高.枳经历了秋季日照缩短和气温降低的低温锻炼,落叶前其抗寒能力比经历同样条件的宫本略强,但尚未获得真正的越冬抗寒能力. 展开更多

关键词 枳 低温锻炼 抗寒性 电导率

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柑桔抗寒研究的现状与展望 被引量：4

4

作者 龙桂友 刘杰 +3 位作者 饶力群 邓子牛 熊兴耀 焦徕 《生物技术通报》 CAS CSCD 2006年第C00期58-62,共5页

柑桔是一种经济价值极高但又常受冻害影响的亚热带果树,本文总结了柑桔抗寒研究取得的成果,介绍了对于柑桔抗寒研究还是空白但是在其他植物抗寒研究上取得的新进展,并由此提出了柑桔抗寒可在冷诱导蛋白、冷诱导基因和抗寒基因工程等方... 柑桔是一种经济价值极高但又常受冻害影响的亚热带果树,本文总结了柑桔抗寒研究取得的成果,介绍了对于柑桔抗寒研究还是空白但是在其他植物抗寒研究上取得的新进展,并由此提出了柑桔抗寒可在冷诱导蛋白、冷诱导基因和抗寒基因工程等方面进行探讨以及作者粗浅的研究设想。 展开更多

关键词 柑桔 抗寒性 低温锻炼 抗寒基因工程

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巨峰葡萄实生苗阶段发育过程中核酸含量的变化 被引量：4

5

作者 龙桂友 沈德绪 林伯年 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 1991年第4期362-364,共3页

实生个体的阶段发育包括不同发育时期和空间的生理生化变化。Kessler和Monse-llse(1961)研究了苹果、柑桔叶龄对其叶片中RNA含量及RNase活性的影响,均是成年树叶片的RNA水平高于幼年树,且随树龄而增加,与RNase活性随树龄而降低相一致。... 实生个体的阶段发育包括不同发育时期和空间的生理生化变化。Kessler和Monse-llse(1961)研究了苹果、柑桔叶龄对其叶片中RNA含量及RNase活性的影响,均是成年树叶片的RNA水平高于幼年树,且随树龄而增加,与RNase活性随树龄而降低相一致。在豆梨、西洋梨、杜梨及英国常春藤上的有关研究亦有类似结果,成年组织与幼年组织的DNA水平差异不大,而RNA比值随实生个体的成熟而提高。这种有关代谢方面的研究在果树方面报道不多,在葡萄方面更少。本文对巨峰实生苗阶段发育过程中叶内遗传物质含量的变化进行了研究。 材 料 与 方 法 1.自根苗 巨峰葡萄于1986年春播种于温室,株行距1.5×2.0m,一般肥水管理,未进行修剪。1988年末首次开花,此时取样分析。取样方法:以卷须首次出现节位和开花的最低节位作为两个基本节位Ⅱ和Ⅳ,在Ⅱ与Ⅳ的中点取Ⅲ,Ⅱ以下10节为Ⅰ,Ⅳ以上10节和20节分别为Ⅴ和Ⅵ,在这6个部位分别取发育中庸的营养枝中部叶片,洗净,去除粗叶脉。单株重复3次。取样节位为所取叶片在营养枝上的节位加该营养枝在主蔓上的节位。 2.嫁接苗 2年生白香蕉扦插苗于1986年冬盆栽,一般管理,未修剪。1987年3月基部留17cm剪断,所发新蔓于6月中旬留4—6片叶剪断进行嫩枝嫁接。 展开更多

关键词 巨峰葡萄 实生苗 发育 核酸 葡萄

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基因差异表达分析技术进展 被引量：5

6

作者 龙桂友 饶力群 《生命科学研究》 CAS CSCD 2004年第S2期48-52,共5页

比较了目前几种主要的基因差异表达分析技术并简要地归纳了各种基因差异表达分析方法的特点,重点介绍了经典的基因差异表达分析技术———差异显示技术及其改进与完善,最后根据差异显示技术在高等植物方面已取得的成就乐观地展现了该技... 比较了目前几种主要的基因差异表达分析技术并简要地归纳了各种基因差异表达分析方法的特点,重点介绍了经典的基因差异表达分析技术———差异显示技术及其改进与完善,最后根据差异显示技术在高等植物方面已取得的成就乐观地展现了该技术在园艺植物研究上的应用前景. 展开更多

关键词 基因差异表达 差异显示 DDRT-PCR MRNA 基因表达

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多效唑对幼桃树营养生长的影响 被引量：2

7

作者 龙桂友 魏文娜 +1 位作者 李润唐 谢深喜 《湖南农学院学报》 CSCD 1995年第3期249-252,共4页

土施多效唑（ＰＰ３３３）能显著抑制幼桃树（二年生）新梢与树体的生长．一年中土施２次ＰＰ３３３（即一次梢萌发及二次梢萌发时每株各施２ｇ），使一次梢长度减少４２．９％，节间长度缩短３８．１％，一次梢粗度／长度比增大４２．... 土施多效唑（ＰＰ３３３）能显著抑制幼桃树（二年生）新梢与树体的生长．一年中土施２次ＰＰ３３３（即一次梢萌发及二次梢萌发时每株各施２ｇ），使一次梢长度减少４２．９％，节间长度缩短３８．１％，一次梢粗度／长度比增大４２．０％，树高和冠径分别减少２８．５％和２２．４％；一年中土施１次ＰＰ３３３（即只在一次梢萌发时或者只在二次梢萌发时每株土施２ｇ），对桃新梢及树体的生长也有显著的抑制效应．幼桃树“呆滞期”（施药后到桃树体尤其是新梢生长受到抑制所需时间）因施药时期不同而有变化，一次梢萌发时处理的“呆滞期”为１２～１５ｄ，而二次梢萌发时处理的则为１０ｄ． 展开更多

关键词 植物生长调节剂 三唑 新梢 生长 多效唑 桃树

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植物蛋白质组研究方法 被引量：1

8

作者 龙桂友 刘杰 饶力群 《湖南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期342-346,共5页

蛋白质组研究是后基因组时代的热点领域.介绍了蛋白质组概念提出的背景,蛋白质组与基因组的联系与区别,蛋白质组研究的内容,重点综述了植物蛋白质组研究的技术.双向凝胶电泳仍为蛋白质分离的核心技术,该技术在某些方面作了改进和发展;... 蛋白质组研究是后基因组时代的热点领域.介绍了蛋白质组概念提出的背景,蛋白质组与基因组的联系与区别,蛋白质组研究的内容,重点综述了植物蛋白质组研究的技术.双向凝胶电泳仍为蛋白质分离的核心技术,该技术在某些方面作了改进和发展;生物质谱是蛋白质鉴定的关键技术,进一步发展了生物传感芯片质谱及蛋白质芯片技术;对蛋白质组研究的信息处理依赖于生物信息学的发展,介绍了国内外相关的蛋白质数据库及建立数据库主要应用的图像软件. 展开更多

关键词 植物蛋白质纽 双向凝胶电泳 生物质谱 蛋自质数据库 蛋白质芯片

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实生葡萄阶段转变过程中核酸、半乳糖醛酸和可溶性糖含量的变化(英文) 被引量：1

9

作者 龙桂友 林伯年 《生命科学研究》 CAS CSCD 2005年第4期371-376,共6页

试验以刚开花的3年生巨峰葡萄实生苗为材料,分析其童区、转变区及成年区叶片中核酸、半乳糖醛酸和可溶性糖含量的变化.结果表明:每克鲜重叶片中RNA含量由童区至转变区急剧上升达最大值,在转变区保持在较高水平上,开花以上节位其含量降低... 试验以刚开花的3年生巨峰葡萄实生苗为材料,分析其童区、转变区及成年区叶片中核酸、半乳糖醛酸和可溶性糖含量的变化.结果表明:每克鲜重叶片中RNA含量由童区至转变区急剧上升达最大值,在转变区保持在较高水平上,开花以上节位其含量降低,总核酸含量的变化也是如此;RNA/DNA比值在刚进入转变区达峰值,然后逐渐降低;半乳糖醛酸含量在童区和成年区均较低,在转变区出现最大值;非还原糖含量随阶段发育的提高而增加,在成年区大量开花部位降低,近植株顶端无花序部位复又增加;还原糖含量在进入转变区时达最大值,然后迅速降低,在转变区及成年区处于较低水平. 展开更多

关键词 葡萄 巨峰实生苗 童期 阶段发育 核酸 半乳糖醛酸 可溶性糖

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巨峰葡萄实生苗阶段发育过程中半乳糖醛酸及可溶性糖含量的变化

10

作者 龙桂友 沈德绪 林伯年 《浙江农业学报》 CSCD 1990年第4期169-173,共5页

试验以3年生巨峰实生苗——始花自根苗和未花嫁接苗为材料,分析其阶段发育过程中叶片的还原糖、非还原糖,可溶性总糖和中乳糖醛酸等含量的变化,还研究了延长光照(40w/m^2 18:30—06:30)对上述成分含量的影响。结果表明:始花自根苗的叶片... 试验以3年生巨峰实生苗——始花自根苗和未花嫁接苗为材料,分析其阶段发育过程中叶片的还原糖、非还原糖,可溶性总糖和中乳糖醛酸等含量的变化,还研究了延长光照(40w/m^2 18:30—06:30)对上述成分含量的影响。结果表明:始花自根苗的叶片,非还原糖含量从茎基部到开花节位逐渐增加,在开花节位降低,近植株顶端又增加;还原糖和可溶性总糖含量在首次出现卷须部位达最大值;半乳糖醛酸含量在卷须和花序首次出现部位之间即转变区达最大值,然后随节位升高而降低并稳定在较低水平上;光照处理对半乳糖醛酸和可溶性糖含量无显著影响;始花自根苗最低开花节位以下部位叶片的还原糖、可溶性总糖及半乳糖醛酸的含量与末花嫁接苗相应的发育部位有相似的变化趋势。 展开更多

关键词 巨峰葡萄 实生苗 发育 半乳糖醛酸

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柑橘品种鉴定的SSR标记开发和指纹图谱库构建 被引量：61

11

作者 李益 马先锋 +7 位作者 唐浩 李娜 江东 龙桂友 李大志 牛英 韩瑞玺 邓子牛 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第15期2969-2979,共11页

【目的】筛选出一套SSR核心引物,用于构建柑橘品种的DNA指纹图谱库,为柑橘种苗认证、品种登记和植物新品种保护提供技术支撑。【方法】以柑橘属8个主要栽培种类为试材进行PCR扩增,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳检测,筛选出多态性丰富、扩增... 【目的】筛选出一套SSR核心引物,用于构建柑橘品种的DNA指纹图谱库,为柑橘种苗认证、品种登记和植物新品种保护提供技术支撑。【方法】以柑橘属8个主要栽培种类为试材进行PCR扩增,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳检测,筛选出多态性丰富、扩增条带稳定的引物对部分参试品种进行PCR扩增,扩增产物通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳进行进一步的引物筛选;筛选得到的引物进行荧光标记,并选用部分柑橘品种进行PCR扩增,扩增产物利用基因分析仪检测,分别计算各引物的PIC值、等位基因数目,选取一套多态性丰富的适合进行荧光毛细管电泳检测的SSR引物组合,进而对所有参试品种进行分析,构建柑橘品种的DNA指纹图谱库,同时利用筛选的SSR标记对参试品种进行鉴定。【结果】初期以柑橘属8个种的代表品种(太田椪柑、沙田柚、沅江酸橙、大红甜橙、邓肯葡萄柚、枸橼、费米耐劳柠檬和墨西哥来檬)为材料,用362对SSR引物进行PCR扩增,扩增产物经4%琼脂糖凝胶电泳检测,初步筛选出80对种间多态性高、扩增稳定的SSR引物;进一步从8个种类里选择不同类型的64个柑橘品种,用上述筛选出的80对SSR引物进行PCR扩增,扩增产物经6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,再筛选出60对品种类型间多态性高、扩增稳定、条带清晰的SSR引物,并分别进行荧光标记;另以168份柑橘品种为材料对上述60对SSR引物进行PCR扩增,经荧光毛细管电泳检测,依据各引物的PIC值、等位基因数目、峰图读取难易程度、扩增稳定性及染色体位置等,最终筛选出21对SSR引物作为指纹图谱库构建的核心引物。为消除不同仪器、不同试验批次等引起的误差,为21对SSR引物各主要等位变异选择相应的参照品种。根据各引物标记的荧光颜色及扩增片段大小进行合理组合,21对SSR引物可分成5组进行多重电泳,共采集500份柑橘品种的DNA指纹。利用SSR标记,有111份品种仅用1对引物即可鉴别,86份品种用2对引物组合即可鉴别,24份品种用3对引物组合即可鉴别,另外279份品种虽无法单独一一鉴别,但可分为87个小组,组内品种无法区分,组间品种易鉴别。【结论】利用筛选出的21对SSR核心引物,构建了包含500份柑橘品种的DNA指纹图谱库,筛选出部分品种的特异标记,可以鉴别221份柑橘品种和87个品种组合,构建了基于毛细管电泳平台的柑橘SSR分子标记品种鉴定体系。 展开更多

关键词 柑橘 SSR 毛细管电泳 品种鉴定 DNA指纹图谱库

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柑橘内参基因的稳定性评价 被引量：27

12

作者 肖翠 严佳文 +3 位作者 龙桂友 戴素明 李大志 邓子牛 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期978-984,共7页

【目的】为了筛选在柑橘中稳定表达的内参基因,以确保柑橘基因表达分析结果的可靠性。【方法】选取Actin、18SrRNA、rpII、GAPDH、UBQ10、UBQ1作为候选内参基因,以geNorm、Normfinder、BestKeeper以及RefFinder软件分析这6个基因在冰糖... 【目的】为了筛选在柑橘中稳定表达的内参基因,以确保柑橘基因表达分析结果的可靠性。【方法】选取Actin、18SrRNA、rpII、GAPDH、UBQ10、UBQ1作为候选内参基因,以geNorm、Normfinder、BestKeeper以及RefFinder软件分析这6个基因在冰糖橙的根、茎、叶、果实以及干旱、低温、溃疡病、衰退病胁迫下叶片中的表达稳定性。【结果】结果表明,在不同柑橘器官及不同胁迫处理下的柑橘叶片中,候选内参基因的表达稳定性确实存在差异。在不同柑橘器官之间比较用UBQ10和rpII;干旱胁迫下用GAPDH、18SrRNA和Actin;低温胁迫下用UBQ10、Actin和18Sr-RNA;溃疡病菌侵染胁迫下用Actin、UBQ10和GAPDH;感染衰退病毒时用18SrRNA和rpII。【结论】为了获得较为稳定的表达分析结果,建议根据不同的试验内容选择不同的内参基因组合。 展开更多

关键词 柑橘 内参基因 稳定性评价 RT-QPCR 基因表达分析

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柑橘新品种‘黔阳冰糖脐橙’的选育 被引量：10

13

作者 李娜 李大志 +6 位作者 何建明 龙紫薇 黄婷 龙立长 邓子牛 文跃伟 龙桂友 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期140-143,共4页

‘黔阳冰糖脐橙’是从普通冰糖橙芽变选育的冰糖橙新品种。果实圆球形,纵径75.6 mm,横径72.0 mm,果形指数1.05,单果质量192 g,果皮厚5.1 mm,果面橙色且较光滑,果脐闭合。果肉黄色,囊壁较薄,果肉质地脆嫩,化渣性好,香气清淡,可溶性固形... ‘黔阳冰糖脐橙’是从普通冰糖橙芽变选育的冰糖橙新品种。果实圆球形,纵径75.6 mm,横径72.0 mm,果形指数1.05,单果质量192 g,果皮厚5.1 mm,果面橙色且较光滑,果脐闭合。果肉黄色,囊壁较薄,果肉质地脆嫩,化渣性好,香气清淡,可溶性固形物含量(w,后同)为12.67%,可滴定酸含量为0.71%,维生素C含量为61.6 mg·100 mL^(-1),出汁率52.79%,可食率高,无种子。果实11月下旬成熟,耐贮性中等。抗病性与普通冰糖橙相似,易感溃疡病和衰退病;有一定的抗寒性和抗旱性。采用SSR标记对‘黔阳冰糖脐橙’进行遗传鉴定,表明其与普通冰糖橙在DNA水平存在差异,具有遗传特异性。该品种适合在甜橙产区推广栽培。 展开更多

关键词 柑橘 新品种 ‘黔阳冰糖脐橙’ 芽变

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柑橘溃疡病致病基因pthA核定位信号肽抗血清的制备及其抑菌研究 被引量：6

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作者 胡春华 徐磊 +3 位作者 马先锋 龙桂友 刘昆玉 邓子牛 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期811-818,共8页

用PCR法扩增位于柑橘溃疡病菌致病基因pthAC-末端的3个核定位信号序列,并将其克隆到原核表达载体PET32a(+)上,经双酶切及核酸序列测定重组质粒(pthA-NLS),其序列与GenBank中pthA的相关序列有99.9%的同一性。重组质粒转化大肠杆菌BL21(D... 用PCR法扩增位于柑橘溃疡病菌致病基因pthAC-末端的3个核定位信号序列,并将其克隆到原核表达载体PET32a(+)上,经双酶切及核酸序列测定重组质粒(pthA-NLS),其序列与GenBank中pthA的相关序列有99.9%的同一性。重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)后诱导了重组多肽的表达,并用Ni2+-NTA纯化柱得到了48kD的纯化重组多肽。把重组多肽注入免疫Balb/c小白鼠,制备了相应的抗血清,Western blotting和ELISA分析结果表明,抗血清可特异地结合重组多肽,亦可识别溃疡病菌PthA天然蛋白,获得的抗血清可以用于柑橘溃疡病的检测。利用抗血清与溃疡病菌混合接种离体冰糖橙叶片,发现抗血清能推迟溃疡病菌的致病过程,且病斑比对照小,但未能达到抗病程度。pthA基因末端核定位信号序列的克隆、原核表达及抗血清的制备为进一步研究pthA的致病机理和研发溃疡病快速分子检测技术奠定了基础。 展开更多

关键词 柑橘 溃疡病 pthA 抗血清 病害抑制

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SCoT结合克隆测序鉴别湖南甜橙变异类型 被引量：20

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作者 蒋巧巧 龙桂友 +1 位作者 李武文 邓子牛 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2011年第6期148-154,共7页

本试验对SCoT反应体系进行优化,并筛选合适的引物,然后对24份试材进行SCoT标记,获得的目的片段克隆测序,通过测序结果探讨其遗传变异;结果表明,甜橙SCoT标记的20μL优化反应体系为:DNA模板80ng,Mg2+浓度1.6mmol/L,dNTPs浓度0.3mmol/L,... 本试验对SCoT反应体系进行优化,并筛选合适的引物,然后对24份试材进行SCoT标记,获得的目的片段克隆测序,通过测序结果探讨其遗传变异;结果表明,甜橙SCoT标记的20μL优化反应体系为:DNA模板80ng,Mg2+浓度1.6mmol/L,dNTPs浓度0.3mmol/L,引物浓度0.2μmol/L,Taq DNA聚合酶用量1.6U,扩增产物在100～2000bp之间,扩增条带明亮清晰,反应体系具有良好的稳定性和可重复性。24份试材的测序片段的大小为1090～1091bp,一致性达到99.84%,存在单碱基的缺失与替换,BLAST结果显示,该序列的编码蛋白质与核糖体蛋白S3的N端同源性高;利用单碱基变异可以区分其中的12个甜橙变异株系和'安江香柚',其他变异株系还需要结合其他的分子标记技术来进行鉴别,有待进一步研究。 展开更多

关键词 甜橙 SCoT 均匀设计 序列比对

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杨梅

16

作者 龙桂友 《湖南农业》 2002年第5期12-12,共1页

杨梅为我国原产特有果树。初夏成熟,正值水果淡季,对水果市场具有很好的调剂作用。其果实色泽艳丽,甜酸适口,富含维生素,具有生津止咳、助消化、治霍乱等功效。除鲜食外,可制糖水罐头、果酱、果汁、

关键词 杨梅 栽培技术 施肥 修剪 病虫害防治

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叶下珠胶囊的HPLC法指纹图谱研究 被引量：5

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作者 范适 左家哺 +4 位作者 易诚 杨华 龙桂友 张志飞 饶力群 《湖南中医药大学学报》 CAS 2008年第1期35-37,40,共4页

目的建立叶下珠胶囊的HPLC指纹图谱质量控制方法。方法采用高效液相色谱法,选用HypersilODSⅡ色谱柱,流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液(梯度洗脱),分析时间65 min,流速0.8 ml/min,检测波长为280nm。结果建立了叶下珠胶囊的HPLC对照指纹图谱... 目的建立叶下珠胶囊的HPLC指纹图谱质量控制方法。方法采用高效液相色谱法,选用HypersilODSⅡ色谱柱,流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液(梯度洗脱),分析时间65 min,流速0.8 ml/min,检测波长为280nm。结果建立了叶下珠胶囊的HPLC对照指纹图谱,标示了17个共有峰,并初步确定叶下珠胶囊的相似度阈值为0.91。结论本方法可靠、简单,能用于叶下珠胶囊的质量控制。 展开更多

关键词 叶下珠 HPLC 指纹图谱 胶囊 质量控制

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抗PthA-NLS多肽单克隆抗体的制备及单链抗体基因的构建 被引量：3

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作者 胡春华 龙桂友 +4 位作者 戴素明 马先锋 谢玉明 李娜 邓子牛 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期884-890,共7页

【目的】制备抗PthA-NLS多肽单克隆抗体并构建其单链抗体(single chain variable fragment,ScFv)基因,为从PthA角度进一步研究柑橘溃疡病致病机理创造条件,并为构建单链抗体基因植物表达载体,尝试利用转基因和植物抗体技术创制抗溃疡病... 【目的】制备抗PthA-NLS多肽单克隆抗体并构建其单链抗体(single chain variable fragment,ScFv)基因,为从PthA角度进一步研究柑橘溃疡病致病机理创造条件,并为构建单链抗体基因植物表达载体,尝试利用转基因和植物抗体技术创制抗溃疡病柑橘新种质奠定基础。【方法】利用PthA-NLS重组多肽免疫Balb/c小鼠,制备抗PthA-NLS多肽单克隆抗体,从分泌抗PthA-NLS多肽单克隆抗体的杂交瘤细胞中提取总RNA,采用RT-PCR和重叠延伸PCR(splicing by overlap extension PCR,SOE-PCR)法构建其单链抗体基因,并克隆到pGEM-T载体和原核表达载体pET32a(+)中,重组原核表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)后诱导重组蛋白的表达。【结果】获得了3株能稳定分泌抗PthA-NLS多肽的单克隆抗体杂交瘤细胞株1C8H1、2D12B6、3D8A10。成功构建了单链抗体基因ScFv,获得的ScFv基因大小约750bp,其中重链可变区(VH)基因有360bp,轻链可变区(VL)基因有342bp,中间连接肽基因45bp,经过IPTG诱导ScFv原核表达,获得了大小为44.5kD的ScFv重组蛋白。【结论】试验获得了3株能稳定分泌抗PthA-NLS多肽的单克隆抗体杂交瘤细胞株,成功构建了ScFv基因,并实现了原核表达,为进一步探索PthA的致病机理和下一步利用抗体技术获得抗溃疡病柑橘种质[0]的研究打下了基础。 展开更多

关键词 柑橘溃疡病 单克隆抗体 单链抗体 pthA基因

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Ptcor8表达与枳生理落叶及温度的关系 被引量：2

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作者 罗坤 龙桂友 +3 位作者 袁飞荣 焦徕 邓子牛 饶力群 《湖南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期418-421,共4页

将干径粗度相近的2年生枳实生容器苗60株从田间移入温室(20～25℃),以田间10株为对照.从2008年11月14日至2009年1月3日,每10d从温室随机搬出3株置于田间,研究枳叶片中Ptcor8的表达与枳生理落叶及环境温度的关系.结果表明,温室里的枳冬... 将干径粗度相近的2年生枳实生容器苗60株从田间移入温室(20～25℃),以田间10株为对照.从2008年11月14日至2009年1月3日,每10d从温室随机搬出3株置于田间,研究枳叶片中Ptcor8的表达与枳生理落叶及环境温度的关系.结果表明,温室里的枳冬季不落叶;从温室搬至田间的枳,随着搬出温室时间的延后,其落叶期推迟;12月中旬后搬出温室的枳,即使经历冬季低温也不落叶.在落叶和未落叶的枳叶片中,均能检测到Ptcor8的表达,qPCR结果表明,Ptcor8的表达与枳的生理落叶无关,其表达量的明显增加与骤然降温和持续低温有关,与低温关系密切. 展开更多

关键词 枳 Ptcor8 温度 生理落叶 半定量聚合酶链式反应 定量聚合酶链式反应

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抗寒性不同的枳和宫本柑桔苗生长期致死低温的探讨 被引量：2

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作者 刘杰 龙桂友 +5 位作者 饶力群 范适 杨华 彭国平 姜放军 李兰岚 《生命科学研究》 CAS CSCD 2006年第1期82-86,共5页

用本试验设计改装的控温冰箱对2年生的枳(PoncirustrifoliataRaf.)和宫本/枳砧(CitrusreticulataBlancocv.miyamoto)营养袋盆栽苗进行低温处理,探讨枳和宫本生长期的致死低温.结果表明,棉絮包蔸保持土温的效果与低温处理时间呈极显著正... 用本试验设计改装的控温冰箱对2年生的枳(PoncirustrifoliataRaf.)和宫本/枳砧(CitrusreticulataBlancocv.miyamoto)营养袋盆栽苗进行低温处理,探讨枳和宫本生长期的致死低温.结果表明,棉絮包蔸保持土温的效果与低温处理时间呈极显著正相关,相关系数为r=0.9624.枳和宫本致死低温处理分别为-6℃60min和-6℃40min左右,即该处理导致枳和宫本春叶冻死,电解质渗出率陡然成倍增加,丙二醛含量出现最大值,枳叶片中丙二醛含量比对照增加了14.81%,宫本叶片中丙二醛含量较对照增加17.58%.枳叶片中丙二醛含量从对照到各处理平均是宫本的2.1倍. 展开更多

关键词 柑桔 低温胁迫 致死温度 电导率 丙二醛

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