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橡胶树HbMC2在酵母中的表达和抗逆性分析 被引量:3
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作者 刘辉 邓治 +2 位作者 杨洪 代龙军 李德军 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期202-208,共7页
Metacaspase介导的程序性细胞死亡在植物生长发育、抵御生物和非生物胁迫过程中发挥重要作用。前期研究发现橡胶树metacaspase基因HbMC2的表达受干旱和高盐等非生物胁迫调控。为明确HbMC2的功能,采用RT-PCR从橡胶树中扩增HbMC2编码区序... Metacaspase介导的程序性细胞死亡在植物生长发育、抵御生物和非生物胁迫过程中发挥重要作用。前期研究发现橡胶树metacaspase基因HbMC2的表达受干旱和高盐等非生物胁迫调控。为明确HbMC2的功能,采用RT-PCR从橡胶树中扩增HbMC2编码区序列并将其插入到pYES2载体中,构建酵母表达载体pYES2-HbMC2。将pYES2-HbMC2质粒转化到酿酒酵母INVSc1菌株中,获得重组酵母INVSc1(pYES2-HbMC2)。PCR及RT-PCR检测结果表明,HbMC2已成功转入重组酵母并能在半乳糖诱导下表达。与对照酵母INVSc1(pYES2)相比,重组酵母INVSc1(pYES2-HbMC2)在氧化、干旱和盐胁迫下的生长受到抑制、细胞死亡率增加。结果表明酵母中表达HbMC2降低了对非生物胁迫的抗性,HbMC2是非生物胁迫抗性的负调节因子。 展开更多
关键词 橡胶树 METACASPASE 非生物胁迫 酵母表达系统 程序性细胞死亡
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巴西橡胶树HbAIH基因的克隆及表达分析 被引量:2
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作者 杨洪 岳镒繁 +3 位作者 胡燕玲 邓治 代龙军 李德军 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期120-129,共10页
鲱精胺亚胺水解酶(Agmatine iminohydrolase,AIH)是植物通过精氨酸途径合成多胺过程中的重要酶之一。本研究首次从巴西橡胶树中克隆了AIH基因HbAIH。序列分析结果表明HbAIH全长1 462 bp,开放阅读框长为1 137 bp,编码378个氨基酸。预测 H... 鲱精胺亚胺水解酶(Agmatine iminohydrolase,AIH)是植物通过精氨酸途径合成多胺过程中的重要酶之一。本研究首次从巴西橡胶树中克隆了AIH基因HbAIH。序列分析结果表明HbAIH全长1 462 bp,开放阅读框长为1 137 bp,编码378个氨基酸。预测 HbAIH 蛋白的分子量是42.28 kD,等电点为5.09,是一个亲水性蛋白。氨基酸相似性比对结果表明HbAIH与大戟科木薯MeAIH、蓖麻RcAIH和麻风树JcAIH等具有很高相似性,且含有植物AIH中高度保守的与酶活性位点形成和参与底物结合的11个氨基酸位点。qRT-PCR 分析表明,HbAIH表达无组织特异性,在雌花中表达量最高,树皮、茎尖、胶乳、叶片和雄花中表达量依次降低。HbAIH在不同发育时期叶片中的表达存在变化,稳定期表达量最低,淡绿期最高,说明HbAIH可能参与橡胶树叶片发育过程。此外,低温、干旱、高盐、过氧化氢、乙烯利、茉莉酸甲酯处理以及橡胶树死皮的发生均能引起HbAIH表达变化。这些结果说明HbAIH可能参与了橡胶树生长发育、产排胶调控及逆境应答过程。 展开更多
关键词 巴西橡胶树 鲱精胺亚胺水解酶 胁迫响应 表达分析
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橡胶树HbCPA基因的克隆、表达及生物信息学分析
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作者 杨洪 胡燕玲 +3 位作者 岳镒繁 邓治 代龙军 李德军 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期39-47,共9页
N-氨甲酰基腐胺酰胺水解酶(N-carbamoylputreseine amidohydrolase,CPA)是高等植物通过精氨酸途径合成腐胺的终反应酶。利用RACE技术从橡胶树中克隆了一个CPA基因,命名为HbCPA。HbCPA序列全长1342 bp,开放阅读框为906 bp,编码301个氨基... N-氨甲酰基腐胺酰胺水解酶(N-carbamoylputreseine amidohydrolase,CPA)是高等植物通过精氨酸途径合成腐胺的终反应酶。利用RACE技术从橡胶树中克隆了一个CPA基因,命名为HbCPA。HbCPA序列全长1342 bp,开放阅读框为906 bp,编码301个氨基酸。HbCPA理论分子量约为33.5 kD,理论等电点为6.01。进化分析表明,HbCPA与木薯MeCPA、蓖麻RcCPA和麻风树JcCPA聚为一枝。qRT-PCR结果显示,HbCPA在橡胶树各组织中均有表达,表达量从高到低依次为树皮、叶片、雌花、雄花、茎尖;HbCPA在叶片不同发育时期表达存在变化,淡绿期最高,古铜期和衰老期表达量相当且最低;同健康树树皮相比,HbCPA在死皮树树皮中表达量明显上调;HbCPA表达受乙烯利、茉莉酸甲酯、低温、干旱、高盐、过氧化氢等调控,表明HbCPA可能参与橡胶树产排胶调控及非生物逆境胁迫响应。 展开更多
关键词 橡胶树 N-氨甲酰基腐胺酰胺水解酶 非生物胁迫 生物信息学 表达分析
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橡胶树ADC1的克隆、表达及生物信息学分析 被引量:4
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作者 侯岚菲 杨洪 +3 位作者 邓治 代龙军 门中华 李德军 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期111-119,共9页
精氨酸脱羧酶(Arginine decarboxylase,ADC)是高等植物多胺合成的重要酶。为对橡胶树ADC基因表达模式及生物信息学进行分析,采用PCR和测序技术从橡胶树中克隆了一个ADC基因(HbADC1),获得的HbADC1序列长2 594 bp,开放阅读框为2 175 bp,编... 精氨酸脱羧酶(Arginine decarboxylase,ADC)是高等植物多胺合成的重要酶。为对橡胶树ADC基因表达模式及生物信息学进行分析,采用PCR和测序技术从橡胶树中克隆了一个ADC基因(HbADC1),获得的HbADC1序列长2 594 bp,开放阅读框为2 175 bp,编码724个氨基酸。生物信息学预测HbADC1理论分子量和等电点分别为77.7 kD和5.14。进化分析表明,HbADC1与大戟科植物木薯、麻风树的ADC聚为一支。qRT-PCR分析表明,HbADC1表达无组织特异性,在雌花中表达量最高,茎尖、雄花、叶片、树皮和胶乳次之。HbADC1在不同发育时期叶片中的表达存在变化,稳定期表达量最低,淡绿期最高,说明HbADC1可能参与橡胶树叶片发育过程。此外,HbADC1表达受伤害、低温、干旱、高盐、过氧化氢及乙烯调控,表明HbADC1可能参与橡胶树逆境胁迫和乙烯应答过程。 展开更多
关键词 橡胶树 精氨酸脱羧酶 基因克隆 生物信息学 实时荧光定量PCR
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Comparative Proteomics Analysis of the Sieve Tube from Rubber Tree(Hevea brasiliensis) Seedlings under Contrasting Ethylene Treatments 被引量:2
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作者 dai long-jun QIN Yun-xia +5 位作者 YANG Hong DENG Zhi SHI Min-jing LIU Hui TANG Chao-rong LI De-jun 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2019年第2期18-27,共10页
[Objective]To elucidate the role of ethylene(ET),a latex yield stimulant of the rubber tree,on the sieve tube(ST)transport efficiency of materials(especially sucrose)needed for natural rubber biosynthesis.[Method]Rubb... [Objective]To elucidate the role of ethylene(ET),a latex yield stimulant of the rubber tree,on the sieve tube(ST)transport efficiency of materials(especially sucrose)needed for natural rubber biosynthesis.[Method]Rubber tree seedlings were treated with ET solution or water which was used as a control on the bark,and latex samples and ST tissue samples were collected for proteomic analyses and latex sucrose content determination respectively.[Results]After ET treatment,the sucrose content of the latex was found significantly decreased.A total of 66 ethylene-responsive proteins(ERPs)were distinguished by two-dimensional gel electrophoresis(2-DE),and 54 were successfully identified by MALDI-TOF/TOF and database searching.The majority of these ERPs were involved in carbohydrate transport and metabolic processes in the ST.[Conclusion]Our findings suggest that the application of ET may increase the transport efficiency of the ST and that the application of ET promotes the consumption of energy and sucrose in the ST. 展开更多
关键词 Sieve tube Rubber tree Comparative proteomics Ethylene-responsive proteins Sucrose content
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