期刊文献+
共找到9篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
高标准农田建设适宜性评价和优先级分区——以陕西省大荔县为例
1
作者 徐通 张永锋 +2 位作者 赵志江 董秀梅 杜宜春 《地球科学与环境学报》 CAS 北大核心 2024年第5期595-605,共11页
为了提高陕西省高标准农田建设的效益和效率,加强农田生态保护,以陕西省大荔县为研究对象,基于生态位理论构建适合关中平原的高标准农田建设适宜性评价和优先级分区方法。该方法选取了土壤条件、基础设施、景观格局和生态约束等4个维度... 为了提高陕西省高标准农田建设的效益和效率,加强农田生态保护,以陕西省大荔县为研究对象,基于生态位理论构建适合关中平原的高标准农田建设适宜性评价和优先级分区方法。该方法选取了土壤条件、基础设施、景观格局和生态约束等4个维度的15个评价因子,通过比较评价因子的现实生态位和理想生态位,计算各评价单元的建设适宜度和障碍度。根据建设适宜度、障碍度和障碍因子改造难度的综合分级,进行高标准农田工程建设优先级分区。对大荔县72379个农田图斑的定量评价结果显示,大荔县高标准农田建设适宜性总体较好,优先建设区和次优先建设区耕地占55.66%,适宜工程选址和建设,只要稍加改造即可达到高标准农田建设要求。土壤条件和基础设施的障碍因素主要是有效土层厚度和有机质含量,而景观格局和生态约束维度的主要障碍因素是田块规模和灌溉水源。同时,提出了提升土壤有机质含量、增加有效土层厚度、降低耕地碎片化程度等方面的建议。综合来看,生态位理论对大荔县高标准农田建设适宜性评价和优先级分区具有较好的适用性。 展开更多
关键词 生态位 适宜性评价 优先级分区 障碍度 高标准农田 关中平原
下载PDF
狼源产气荚膜梭菌的分离鉴定及分子分型 被引量:4
2
作者 董秀梅 李秀云 +7 位作者 刘念 杨巍 邓爱怀 吕文鹏 关春宇 张萍 邹希明 师东方 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期831-836,共6页
为探究黑龙江省某动物园狼急性死亡病例的病原菌及其生物学特性,本研究采集病死狼心血、肝、脾及颌下淋巴结样品,经细菌分离纯化,结果显示,上述样品接种鲜血琼脂培养基厌氧培养24 h后可见灰白色、双层溶血环的菌落,在强化梭菌培养基上... 为探究黑龙江省某动物园狼急性死亡病例的病原菌及其生物学特性,本研究采集病死狼心血、肝、脾及颌下淋巴结样品,经细菌分离纯化,结果显示,上述样品接种鲜血琼脂培养基厌氧培养24 h后可见灰白色、双层溶血环的菌落,在强化梭菌培养基上形成黑色圆形菌落;革兰染色镜检可见单个或呈短链状排列的革兰阳性粗大杆菌。通过生化试验和16S rRNA基因的PCR扩增及序列分析对分离菌进行鉴定,并进一步经PCR扩增确定分离菌的毒素型。生化试验结果显示,分离菌能发酵葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖,且还原性硝酸盐试验、明胶液化和牛奶爆裂发酵均呈阳性,且无运动性;16S rRNA基因、毒素基因的PCR扩增和遗传进化分析结果表明分离菌为A型产气荚膜梭菌,命名为HLJ15-2。经多序列位点分型分析(MLST)确定分离菌的ST型,结果显示分离菌为ST 221型,属于鸡源菌。采用K-B纸片扩散法对分离菌进行药敏试验,结果显示该菌对氟苯尼考、头孢呋辛钠、头孢噻肟等磺胺类和喹诺酮类抗菌药敏感。小鼠分别经腹腔接种10倍倍比稀释(5.21×10^(5) cfu/mL~1.52×10^(9) cfu/mL)的HLJ15-2菌液,计算该菌对小鼠的半数致死量(LD_(50)),采集病死小鼠肝、脾、肠进行组织病理学观察分析分离菌对小鼠的致病性,结果显示分离菌LD_(50)为2.26×10^(7) cfu/mL,剖检小鼠可见肝脏、脾脏均有出血,肠道膨隆,肠黏膜充血,组织病理切片观察可见肝内各级血管淤血,肝细胞条锁状排列消失,胞浆内出现大小不等的空泡;脾脏红髓比例增加,白髓部分细胞坏死;肠绒毛断裂,黏膜固有层上皮细胞增生、黏膜下层红细胞增多、充血、炎性细胞浸润。本研究首次报道了致病性A型产气荚膜梭菌可感染狼,并导致其急性死亡,为野生动物梭菌性传染病的诊断与防控提供参考。 展开更多
关键词 产气荚膜梭菌 分离鉴定 16SrRNA 分子分型
下载PDF
产不耐热肠毒素大肠杆菌减毒突变菌株的毒性和免疫应答评价 被引量:4
3
作者 冯启峥 侯美佳 +5 位作者 孙思萌 石博 刘嘉利 董秀梅 张萍 师东方 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期310-318,共9页
为探究表达不耐热肠毒素突变体(mLT)的产肠毒素大肠杆菌(ETEC)突变菌株黏膜免疫原性以及作为口服疫苗的应用前景,本研究采用细菌平板计数法、电镜观察和药物敏感试验检测了已构建的mLT突变菌株在LB液体培养基和人工胃肠环境下的生长曲... 为探究表达不耐热肠毒素突变体(mLT)的产肠毒素大肠杆菌(ETEC)突变菌株黏膜免疫原性以及作为口服疫苗的应用前景,本研究采用细菌平板计数法、电镜观察和药物敏感试验检测了已构建的mLT突变菌株在LB液体培养基和人工胃肠环境下的生长曲线、菌毛生长和对抗生素的耐药性能,结果显示E.coli mLT-S63K、E.coli mLT-A72R和E.coli mLT-R192G3突变菌株的生长曲线、菌毛生长和耐药性与亲本菌株基本一致;经PCR和细菌黏附性试验检测,3株菌的突变基因遗传稳定,并且具有和亲本菌株相当的黏附能力;采用家兔肠袢结扎试验和鼠肾上腺皮质细胞(Y1)毒性试验对突变菌株产生的mLT的毒性进行检测,结果显示,3株突变菌株所产生的mLT均具有体内肠毒性,E.coli mLT-S63K产生的mLT对Y1细胞的毒性最弱,为10^(3.476)TCID_(50)/0.1 mL,是亲本菌株E.coli C83903 LT毒性(10^(7.614)TCID_(50)/0.1 mL)的1/10000;小鼠口服突变菌后,观察小鼠临床表现,采用ELISA和中和试验检测小鼠产生的特异性抗体及其中和活性,采用MTT法测定淋巴细胞的增殖情况,结果显示,口服突变菌株对小鼠安全,能够诱导小鼠产生局部黏膜免疫应答、体液免疫应答以及细胞免疫应答,小鼠产生特异性的IgG和sIgA且对LT均具有中和活性。3株突变菌株均具有良好的免疫原性,其中E.coli mLT-S63K所产生的mLT毒性更弱,且黏膜免疫效果更好,可作为ETEC口服疫苗的候选菌株。本研究通过减毒突变构建了表达mLT的ETEC突变菌株,并筛选出毒性弱,免疫原性好,遗传稳定的ETEC口服疫苗候选菌株,为仔猪大肠杆菌性腹泻新型疫苗的研究提供了实验数据。 展开更多
关键词 产肠毒素大肠杆菌 不耐热肠毒素 突变菌 口服免疫
下载PDF
产肠毒素大肠杆菌F17菌毛黏附亚基单克隆抗体的制备及其抗原表位分析 被引量:2
4
作者 刘嘉利 侯美佳 +4 位作者 赵佳慧 董秀梅 杨巍 张萍 师东方 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期1208-1215,共8页
为获得产肠毒素大肠杆菌(ETEC)F17菌毛黏附亚基G的单克隆抗体(MAb)及其抗原表位信息,本研究通过原核表达系统表达了重组F17-G蛋白(rF17-G-His)并纯化,SDS-PAGE和western blot检测结果显示表达的rF17-G-His大小为53 ku,纯化后条带单一。... 为获得产肠毒素大肠杆菌(ETEC)F17菌毛黏附亚基G的单克隆抗体(MAb)及其抗原表位信息,本研究通过原核表达系统表达了重组F17-G蛋白(rF17-G-His)并纯化,SDS-PAGE和western blot检测结果显示表达的rF17-G-His大小为53 ku,纯化后条带单一。利用该重组蛋白免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术获得了F17-G的MAb并制备腹水,采用间接ELISA、SDS-PAGE、western blot、抗体亚类鉴定试剂盒对所获得的MAb进行鉴定。结果显示,获得了3株可稳定分泌MAb的阳性杂交瘤细胞株F2G、C3G、E5G。3株MAb亚类均为IgG1,轻链为κ链,其中MAb F2G效价最高,上清效价为1:2 048,腹水效价为1:1 000 000。3株MAb均不与其他菌毛反应,具有较强的特异性。其中MAb E5G可以有效抑制ETEC DN1502株黏附肠上皮细胞。对MAb识别的抗原表位鉴定和分析结果显示,MAb F2G识别的抗原表位区域是aa1~aa15:1AAVSFIGSTENDVGP15,MAb C3G识别的表位区域是aa211~aa225:211GTTSLKLQCDAGVTV225,二者均为线性表位。MAb E5G识别的是构象表位,且位于凝集素结构域第89位天冬氨酸。采用软件分析F17-G生物学特性,结果显示,F17-G是稳定的亲水性蛋白,aa1~aa15是较活跃的表位区域,aa1~aa15、aa211~aa225在变体F17-G1、F17-G2中较为保守,aa89在3个变体中均高度保守。综合分析后认为MAb E5G具有预防和治疗携带F17菌毛ETEC引发的疾病的潜力。本研究为相应疾病的新型药物、诊断方法和疫苗的研发提供了有效生物制剂和可靠的生物学信息。 展开更多
关键词 产肠毒素大肠杆菌 F17菌毛 G亚基 单克隆抗体 抗原表位
下载PDF
以免疫纳米微球为凝集原的犬细小病毒2型抗体凝集检测方法的建立 被引量:3
5
作者 唐毓 苏瑞红 +5 位作者 侯美佳 孙思萌 冯启峥 董秀梅 张萍 师东方 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期605-610,共6页
为建立以红色聚苯乙烯纳米微球为载体的犬细小病毒(CPV)抗体检测的间接凝集方法,本研究表达纯化了CPV-2VP2截短的重组蛋白rsVP2,并以rsVP2为致敏原与纳米微球偶联制备了免疫彩色纳米微球;通过对反应条件的优化,建立了一种快速检测CPV-2... 为建立以红色聚苯乙烯纳米微球为载体的犬细小病毒(CPV)抗体检测的间接凝集方法,本研究表达纯化了CPV-2VP2截短的重组蛋白rsVP2,并以rsVP2为致敏原与纳米微球偶联制备了免疫彩色纳米微球;通过对反应条件的优化,建立了一种快速检测CPV-2抗体的间接凝集方法。特异性试验结果显示,致敏微球仅与CPV-2阳性血清发生凝集反应,不与犬瘟热病毒、狂犬病病毒和犬腺病毒的阳性血清发生凝聚反应,特异性强;该凝集方法检测血清中和抗体的最低效价为1∶256;同一批次制备的3份致敏微球、3个不同批次制备的致敏微球以及4℃保存90d的致敏微球与CPV-2阳性血清的凝集反应特异性一致,凝集程度无明显差异,重复性稳定性均较好。该间接凝集检测方法对40份血清样品的检测结果与ImmunoComb■ Canine VacciCheck试剂盒(Dot-ELISA)检测结果的阳性符合率为97%。本研究建立的间接凝集方法为幼犬CPV-2母源抗体或免疫犬CPV-2抗体检测提供了一种快速、简便、准确、经济的方法。 展开更多
关键词 犬细小病毒 彩色聚苯乙烯纳米微球 间接凝集试验 抗体检测
下载PDF
影响大肠杆菌不耐热肠毒素2型毒性的氨基酸初步筛选
6
作者 石博 侯美佳 +5 位作者 孙思萌 刘嘉利 董秀梅 杨巍 张萍 师东方 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期477-483,共7页
为探究影响产肠毒素大肠杆菌(ETEC)不耐热肠毒素2型(LT2)毒性的关键氨基酸及其突变重组蛋白的免疫原性,本研究扩增了LT2编码基因elt2,并采用重叠延伸PCR(SOE PCR)方法分别对其A亚基进行R5K、H42A、S59K、V95K、Y102K和E110K的单突变,将e... 为探究影响产肠毒素大肠杆菌(ETEC)不耐热肠毒素2型(LT2)毒性的关键氨基酸及其突变重组蛋白的免疫原性,本研究扩增了LT2编码基因elt2,并采用重叠延伸PCR(SOE PCR)方法分别对其A亚基进行R5K、H42A、S59K、V95K、Y102K和E110K的单突变,将elt2及其6个突变基因分别双酶切后克隆于pET-30a中构建重组大肠杆菌pET-30a-elt2/BL21、pET-30a-R5K/BL21、pET-30a-H42A/BL21、pET-30a-S59K/BL21、pET-30a-V95K/BL21、pET-30a-Y102K/BL21、pET-30a-E110K/BL21,经IPTG诱导表达了重组LT2(rLT2)及其突变重组蛋白mrLT2-R5K、mrLT2-H42A、mrLT2-S59K、mrLT2-V95K、mrLT2-Y102K、mrLT2-E110K;利用细胞毒性试验和小鼠致病性试验比较了rLT2和突变重组蛋白对小鼠肾上腺皮质瘤(Y1)细胞的毒性作用及对小鼠的致病性,并将rLT2和mrLT2-V95K作为免疫原接种小鼠检测其对小鼠的免疫原性。结果显示,突变重组蛋白对Y1细胞的毒性作用均弱于rLT2,其中mrLT2-V95K对Y1细胞的毒性作用最弱为1.145×10^(1)TCID_(50)/0.1 mL;rLT2及该突变重组蛋白对小鼠均无致病性,表明小鼠也不适合用于LT2的致病性检测。mrLT2-V95K免疫BALB/c小鼠的血清特异性IgG抗体效价和对rLT2的中和抗体效价分别为1:102 400和1:32,与rLT2的免疫原性无显著差异。本研究首次证实LT2 A亚基的aa95对LT2细胞毒性作用的影响较明显,其突变重组蛋白具有良好的免疫原性,为大肠杆菌减毒疫苗研究提供了重要科学信息。 展开更多
关键词 产肠毒素大肠杆菌 不耐热肠毒素2型 定点突变 重组蛋白 免疫原性
下载PDF
A rapid, simple, and sensitive immunoagglutination assay with silica nanoparticles for serotype identification of Pseudomonas aeruginosa
7
作者 dong xiu-mei TAO Jing +5 位作者 LI Ting-ting ZHANG Ping ZHU Yan TANG Yu SU Rui-hong SHI dong-fang 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2019年第8期1936-1943,共8页
An agglutination test based on colored silica nanoparticles(colored SiNps) was established to detect serotypes of Pseudomonas aeruginosa. Monodisperse colored SiNps were used as agglutination test carriers. The colore... An agglutination test based on colored silica nanoparticles(colored SiNps) was established to detect serotypes of Pseudomonas aeruginosa. Monodisperse colored SiNps were used as agglutination test carriers. The colored SiNps were prepared through reverse microemulsion with reactive dyes, sensitized with 11 kinds of mono-specific antibodies against P. aeruginosa, and denoted as IgG-colored SiNps. Eleven kinds of IgG-colored SiNps were individually mixed with P. aeruginosa on a glass slide.Different serotypes of P. aeruginosa could be identified by agglutination test with evident agglutination. The P. aeruginosa could be detected in a range from 3.6×10^5 to 3.6×10^12 cfu mL^–1. This new agglutination test was confirmed to be a specific,sensitive, fast, easy-to-perform, and cost-efficient tool for the routine diagnosis of P. aeruginosa. 展开更多
关键词 PSEUDOMONAS AERUGINOSA COLORED silica nanoparticles AGGLUTINATION test SEROTYPE detection
下载PDF
新生儿行为神经测定评分联合血清胆红素总量/白蛋白比值预测新生儿高胆红素血症并发急性胆红素脑病的临床价值 被引量:8
8
作者 董秀梅 张春宇 +2 位作者 吴方红 杨飞 叶素君 《中国妇幼保健》 CAS 2023年第6期1020-1024,共5页
目的 探讨新生儿行为神经测定(NBNA)评分联合血清胆红素总量/白蛋白比值(B/A)预测新生儿高胆红素血症并发急性胆红素脑病的临床价值。方法 收集2020年5月—2021年6月杭州市妇产科医院收治的患儿62例为观察组,另选取在院进行健康体检的婴... 目的 探讨新生儿行为神经测定(NBNA)评分联合血清胆红素总量/白蛋白比值(B/A)预测新生儿高胆红素血症并发急性胆红素脑病的临床价值。方法 收集2020年5月—2021年6月杭州市妇产科医院收治的患儿62例为观察组,另选取在院进行健康体检的婴儿62例为对照组。检测两组NBNA评分、B/A水平,分析NBNA评分、B/A在高胆红素血症及其并发病情的表达水平以及对高胆红素血症以及并发症状的诊断价值。结果 观察组B/A表达水平高于对照组(8.51±2.03 vs. 5.69±1.35),NBNA评分表达水平低于对照组(26.88±4.23 vs. 35.33±5.61),差异有统计学意义(P<0.05)。logistic回归分析显示,B/A水平表达上升,NBNA评分表达水平下降是患有高胆红素血症以及并发不良病症患儿的重要影响机制。ROC曲线显示,两项联合对患有高胆红素血症及并发不良病症患儿的诊断价值高于NBNA评分、B/A单项诊断[AUC(95%CI):0.944(0.896~0.991)vs.0.823(0.749~0.897)vs.0.782(0.699~0.866)],差异有统计学意义(P<0.05)。结论 对于研究患有不良病症患儿情况变化,可检测出B/A水平表达上升,NBNA评分表达下降,能够有效地提前对患儿病情进行预测,减少不良反应的发生。 展开更多
关键词 新生儿神经行为能力测定评分 血清胆红素总量/白蛋白比值 高胆红素血症 急性胆红素脑病
原文传递
基于免疫彩色纳米微球的犬瘟热病毒抗体检测凝集试验 被引量:2
9
作者 苏瑞红 冯启峥 +6 位作者 唐毓 侯美佳 孙思萌 董秀梅 张萍 姜岩 师东方 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期947-953,共7页
为建立以红色聚苯乙烯纳米微球为载体,快速检测幼犬犬瘟热病毒(CDV)母源抗体或免疫犬抗体水平的间接凝集试验,本研究表达纯化了CDV H截短的重组蛋白rsH2,并以rsH为致敏原与纳米微球偶联制备了免疫彩色纳米微球;通过间接凝集反应条件的优... 为建立以红色聚苯乙烯纳米微球为载体,快速检测幼犬犬瘟热病毒(CDV)母源抗体或免疫犬抗体水平的间接凝集试验,本研究表达纯化了CDV H截短的重组蛋白rsH2,并以rsH为致敏原与纳米微球偶联制备了免疫彩色纳米微球;通过间接凝集反应条件的优化,特异性、敏感性、稳定性试验和临床样品的检测,建立了一种快速检测CDV抗体的间接凝集试验。特异性结果显示,致敏微球仅与CDV阳性血清发生凝集反应,不与狂犬病病毒、犬腺病毒和犬细小病毒的阳性血清发生凝集反应,特异性强;凝集试验可检测血清中和抗体的最低效价为1∶35;不同批次制备的致敏微球和4℃保存90 d的致敏微球的凝集反应特异性一致,凝集程度无明显差异,重复性稳定性好;该凝集试验对45份血清样品的检测结果与CDV抗体检测试剂盒检测结果的阳性符合率为100%。上述结果表明,本研究建立的检测CDV抗体的间接凝集试验具有良好的特异性、敏感性和稳定性,为CDV抗体检测提供了一种快速、简便、准确、经济的检测方法。 展开更多
关键词 犬瘟热病毒 彩色聚苯乙烯纳米微球 间接凝集试验 抗体检测
原文传递
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部