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新型冠状病毒Omicron变异株RBD二聚体蛋白抗体的制备与鉴定
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作者 王婷 陶飞飞 +7 位作者 刘仕国 余文捡 王宇 黎美凤 李名志 刘树荣 王毅豪 孔令保 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期972-982,共11页
【目的】研究旨在构建新冠病毒Omicron变异株(B.1.1.529)RBD重组质粒pET-28a-RBD-dimer,利用E.coli BL21(DE3)原核细胞表达S-RBD二聚体蛋白并制备其多克隆抗体,用于研究Omicron变异株RBD的免疫学功能。【方法】运用Golden Gate无缝克隆... 【目的】研究旨在构建新冠病毒Omicron变异株(B.1.1.529)RBD重组质粒pET-28a-RBD-dimer,利用E.coli BL21(DE3)原核细胞表达S-RBD二聚体蛋白并制备其多克隆抗体,用于研究Omicron变异株RBD的免疫学功能。【方法】运用Golden Gate无缝克隆技术将密码子优化的RBD二聚体基因克隆到pET-28a载体中,构建pET-28a-RBD-dimer重组质粒。经表达条件优化后,以镍离子亲和层析法分离纯化RBD二聚体蛋白。将纯化的蛋白作为免疫原制备鼠源抗RBD二聚体蛋白的多克隆抗体,利用间接ELISA、IFA及Western blotting试验技术分别检测多克隆抗体的效价和特异性。【结果】ELISA试验结果显示该多克隆抗体的效价高达1:256000,IFA及Western blotting试验结果表明该多克隆抗体可特异性识别原核、真核细胞表达的RBD二聚体蛋白以及商业化RBD蛋白,具有较好的特异性、反应原性和灵敏性。【结论】研究成功使用原核细胞表达Omicron RBD二聚体蛋白,其具有较好的免疫原性,可以有效制备具有较高抗体效价、特异性及灵敏度的多克隆抗体,为进一步研究原核表达的RBD二聚体蛋白的生物学功能,Omicron变异株的鉴别诊断和亚单位疫苗的开发提供依据。 展开更多
关键词 Omicron变异株 受体结合域 原核表达 多克隆抗体
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乙型脑炎病毒NS1_(△63)蛋白发酵工艺优化研究
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作者 陶飞飞 卞佳宁 +5 位作者 余文捡 刘仕国 熊海月 钟鸣 孔令保 王婷 《生物灾害科学》 2023年第2期242-248,共7页
【目的】乙型脑炎病毒NS1蛋白能诱导机体产生保护性免疫,具有开发成亚单位疫苗的潜力。为提高重组蛋白NS1_(△63)的原核表达量,研究进行发酵条件优化以开发稳定高产的蛋白生产工艺。【方法】采用单因素与Plackett-Burman试验对培养基成... 【目的】乙型脑炎病毒NS1蛋白能诱导机体产生保护性免疫,具有开发成亚单位疫苗的潜力。为提高重组蛋白NS1_(△63)的原核表达量,研究进行发酵条件优化以开发稳定高产的蛋白生产工艺。【方法】采用单因素与Plackett-Burman试验对培养基成分进行优化,同时探究诱导条件对发酵的影响,并在5 L发酵罐中进行初步的工艺放大验证。【结果】最佳的培养基成分为乳糖10 g/L、酵母粉19 g/L、蛋白胨25 g/L、磷酸盐37.5 mmol/L、氯化钾1.25 g/L。最佳发酵条件是诱导温度36℃、诱导时间12 h、0.6 mmol/L IPTG、5%接种量。蛋白产量提高到优化前的3.25倍,5 L发酵罐蛋白产量可达3022.23 mg/L。【结论】研究显著提高了NS1△63蛋白的原核产量,为该蛋白应用于亚单位疫苗和检测试剂盒的相关研究奠定了基础。 展开更多
关键词 乙型脑炎病毒 NS1_(△63) 大肠杆菌 发酵优化 Plackett-Burman试验
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基于改进LEC法的水利工程安全风险分级评价 被引量:2
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作者 邵勇 陶飞飞 +1 位作者 皮妍玲 章猛 《江苏水利》 2023年第6期60-65,共6页
针对作业条件危险性评价法(LEC)在水利工程安全评价过程中存在的主观性较强以及危险发生的可能性影响因素考虑不充分等问题,提出一种基于LEC法改进的水利工程安全风险分级评价方法。首先基于文献分析与水利工程风险隐患,建立事故发生的... 针对作业条件危险性评价法(LEC)在水利工程安全评价过程中存在的主观性较强以及危险发生的可能性影响因素考虑不充分等问题,提出一种基于LEC法改进的水利工程安全风险分级评价方法。首先基于文献分析与水利工程风险隐患,建立事故发生的可能性评估指标体系,再通过AHP-熵值法计算得到事故发生可能性各影响因素指标的综合权重,在进行专家打分时引入专家可信度得到改进后的各项指标取值,最终计算得出各项指标值以确定危险源风险等级。通过与传统LEC评价法进行对比,改进后的方法可更为客观地确定危险源风险等级,评价结果更符合实际。 展开更多
关键词 水利工程 安全管理 风险分级 LEC法
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Feasibility study of assessing cotton fiber maturity from near infrared hyperspectral imaging technique
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作者 LIU Yongliang tao feifei +1 位作者 YAO Haibo KINCAID Russell 《Journal of Cotton Research》 CAS 2023年第4期266-276,共11页
Background Fiber maturity is a key cotton quality property,and its variability in a sample impacts fiber processing and dyeing performance.Currently,the maturity is determined by using established protocols in laborat... Background Fiber maturity is a key cotton quality property,and its variability in a sample impacts fiber processing and dyeing performance.Currently,the maturity is determined by using established protocols in laboratories under a controlled environment.There is an increasing need to measure fiber maturity using low-cost(in general less than $20000)and small portable systems.In this study,a laboratory feasibility was performed to assess the ability of the shortwave infrared hyperspectral imaging(SWIR HSI)technique for determining the conditioned fiber maturity,and as a comparison,a bench-top commercial and expensive(in general greater than $60000)near infrared(NIR)instrument was used.Results Although SWIR HSI and NIR represent different measurement technologies,consistent spectral characteristics were observed between the two instruments when they were used to measure the maturity of the locule fiber samples in seed cotton and of the well-defined fiber samples,respectively.Partial least squares(PLS)models were established using different spectral preprocessing parameters to predict fiber maturity.The high prediction precision was observed by a lower root mean square error of prediction(RMSEP)(<0.046),higher R_(p)^(2)(>0.518),and greater percentage(97.0%)of samples within the 95% agreement range in the entire NIR region(1000-2500 nm)without the moisture band at 1940 nm.Conclusion SWIR HSI has a good potential for assessing cotton fiber maturity in a laboratory environment. 展开更多
关键词 Near infrared spectroscopy Near infrared hyperspectral imaging Fiber maturity Seed cotton Partial least squares regression
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基于对抗自编码网络的水利数据补全方法 被引量:2
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作者 季琳雅 吕鑫 +1 位作者 陶飞飞 曾涛 《计算机工程》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期307-310,共4页
在大规模监测系统中,监测点失效会导致数据缺失,从而影响数据分析结果的准确性。为此,提出一种对抗自编码的水利数据补全方法。利用自编码器构造生成网络,并提取监测点的数据特征,将其与训练好的判别网络进行对抗,最终补全待修复的监测... 在大规模监测系统中,监测点失效会导致数据缺失,从而影响数据分析结果的准确性。为此,提出一种对抗自编码的水利数据补全方法。利用自编码器构造生成网络,并提取监测点的数据特征,将其与训练好的判别网络进行对抗,最终补全待修复的监测数据。实验结果表明,与基于图正则化局部子表示方法相比,该方法具有较高的补全精确度,且均方误差较小,能够有效地重构监测数据。 展开更多
关键词 水利监测数据 数据缺失与补全 对抗自编码网络 对抗正则化 重构误差
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酪蛋白磷酸肽在婴幼儿配方奶粉中的功能及其检测方法研究 被引量:4
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作者 张永利 陶妃妃 +3 位作者 杨雪 薛鑫 张小玲 罗自生 《现代食品》 2020年第1期174-175,179,共3页
酪蛋白磷酸肽(CPPs)作为酪蛋白的酶解产物,不仅能够为婴幼儿提供大量的必需氨基酸,还可以促进婴幼儿对矿质元素的吸收,具有预防龋齿、增强免疫力等作用。但自2012版GB 14880中规定酪蛋白磷酸肽可用于婴幼儿配方食品以来,关于婴幼儿配方... 酪蛋白磷酸肽(CPPs)作为酪蛋白的酶解产物,不仅能够为婴幼儿提供大量的必需氨基酸,还可以促进婴幼儿对矿质元素的吸收,具有预防龋齿、增强免疫力等作用。但自2012版GB 14880中规定酪蛋白磷酸肽可用于婴幼儿配方食品以来,关于婴幼儿配方奶粉中CPPs的检测方法一直处于空缺状态,直到2018年才发布了食品中CPPs检测的征求意见稿,但关于婴幼儿配方奶粉中CPPs的最佳检测方法也一直存在争议。本文中首先介绍了CPPs在婴幼儿配方奶粉中的作用,并针对婴幼儿配方奶粉中CPPs的检测方法进行了研究。 展开更多
关键词 酪蛋白磷酸肽 婴幼儿配方奶粉 检测方法
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新冠病毒RT-LAMP可视化检测方法的建立
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作者 刘树荣 陶飞飞 +3 位作者 熊园翔 温林 郭韫丽 孔令保 《生物灾害科学》 2022年第4期415-422,共8页
【目的】为了实现对新冠病毒一步法检测。【方法】采用RT-LAMP技术,利用具有反转录酶活性的Bst3.0 DNA聚合酶,以新冠病毒N蛋白基因为模板设计LAMP引物,成功建立了以新冠N蛋白基因为靶基因的RT-LAMP检测方法。同时对反应条件中的温度、... 【目的】为了实现对新冠病毒一步法检测。【方法】采用RT-LAMP技术,利用具有反转录酶活性的Bst3.0 DNA聚合酶,以新冠病毒N蛋白基因为模板设计LAMP引物,成功建立了以新冠N蛋白基因为靶基因的RT-LAMP检测方法。同时对反应条件中的温度、镁离子浓度、NTP浓度、甜菜碱浓度以及酶浓度进行优化。通过加入钙黄绿素和氯化锰显色剂对反应结果进行判定,用ASFV p54质粒和JEV NS1质粒与稀释后模板做对照。【结果】温度为66℃,镁离子浓度为6mmol/L,甜菜碱浓度为1 mol/L,NTP为1.4 mmol/L,酶浓度为160 U/L为最优反应条件。【结论】证明了Bst3.0 DNA聚合酶对新冠N蛋白基因检测是成功的,该方法具有良好的特异性以及灵敏度。 展开更多
关键词 新型冠状病毒 环介导等温扩增技术 可视化
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萆薢总皂苷通过抑制软骨基质降解改善豚鼠骨关节炎的作用研究
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作者 李强 庞仲辉 +1 位作者 陶飞飞 徐文龙 《现代中医药》 CAS 2022年第6期37-41,共5页
目的探讨萆薢总皂苷(TRI)对骨关节炎(Osteoarthritis,OA)模型豚鼠的治疗效果及其可能的作用机制。方法40只豚鼠分组,对照组(Con)、骨关节造模组(OA),萆薢总皂苷给药组(TRI)、阳性药物牛膝总皂苷组(TSA)给药组。HE染色观察各组豚鼠软骨形... 目的探讨萆薢总皂苷(TRI)对骨关节炎(Osteoarthritis,OA)模型豚鼠的治疗效果及其可能的作用机制。方法40只豚鼠分组,对照组(Con)、骨关节造模组(OA),萆薢总皂苷给药组(TRI)、阳性药物牛膝总皂苷组(TSA)给药组。HE染色观察各组豚鼠软骨形态;番红O-固绿染色观察各组豚鼠软骨基质的情况;免疫荧光检测各组豚鼠Ⅱ型胶原蛋白表达;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测各组豚鼠骨关节液白细胞介素1(IL-1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和基质金属蛋白酶13(MMP-13);免疫组化观察各组豚鼠骨关节尼尔样1型生长因子(Nel-like molecule 1,Nell-1)表达。结果TRI和TSA均显著缓解OA组豚鼠骨关节炎损伤和软骨基质的退化,同时显著促进Ⅱ型胶原蛋白和Nell-1表达,降低炎性因子IL-1、TNF-α和MMP-13的表达,且TRI组治疗效果优于TSA组。结论萆薢总皂苷可能通过促进Nell-1表达对骨关节炎发挥治疗作用。 展开更多
关键词 萆薢总皂苷 骨关节 软骨基质 NELL-1
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婴幼儿配方奶粉中脂肪过氧化值的检测及其意义
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作者 陶妃妃 张永利 《现代食品》 2018年第24期131-132,135,共3页
本文建立了适用于婴幼儿配方奶粉脂肪提取及过氧化值的检测方法,该法前处理较为简便,对市售3种婴幼儿配方奶粉过氧化值进行检测,结果显示脂肪提取率的RSD均在5%以内,脂肪回收率均在90%以上,表明该方法具有较高的精密度和回收率,能够满... 本文建立了适用于婴幼儿配方奶粉脂肪提取及过氧化值的检测方法,该法前处理较为简便,对市售3种婴幼儿配方奶粉过氧化值进行检测,结果显示脂肪提取率的RSD均在5%以内,脂肪回收率均在90%以上,表明该方法具有较高的精密度和回收率,能够满足分析需求,可用于婴幼儿配方奶粉过氧化值的检测。 展开更多
关键词 婴幼儿配方奶粉 脂肪 过氧化值
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“实验”所指——南京艺术学院平面设计专业毕业作品解读 被引量:1
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作者 陶霏霏 《装饰》 CSSCI 北大核心 2020年第6期48-49,共2页
2014年,南京艺术学院设计学院首次为毕业展定名"实验"。此后,几乎所有的教学、艺术创作均围绕"实验"展开,至今已经7年。其中,视觉传达设计专业的平面设计方向形成了较为清晰的设计语言与路径。本文结合近年平面设... 2014年,南京艺术学院设计学院首次为毕业展定名"实验"。此后,几乎所有的教学、艺术创作均围绕"实验"展开,至今已经7年。其中,视觉传达设计专业的平面设计方向形成了较为清晰的设计语言与路径。本文结合近年平面设计方向的毕业作品,对作品提示的"社会""科学""媒介"议题展开分析,记录视觉符号表象之下的"实验"所指。 展开更多
关键词 平面设计 毕业设计 南京艺术学院 视觉传达设计
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Feature extraction method of hyperspectral scattering images for prediction of total viable count in pork meat 被引量:5
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作者 tao feifei Peng Yankun Li Yongyu 《International Journal of Agricultural and Biological Engineering》 SCIE EI CAS 2015年第4期95-105,共11页
This study aimed to investigate the capabilities of hyperspectral scattering imaging in tandem with Gaussian function,Exponential function and Lorentzian function for rapid and nondestructive determination of total vi... This study aimed to investigate the capabilities of hyperspectral scattering imaging in tandem with Gaussian function,Exponential function and Lorentzian function for rapid and nondestructive determination of total viable count(TVC)in pork meat.Two batches of fresh pork meat was purchased from a local market and stored at 10°C for 1-9 d.Totally 60 samples were used,and several samples were taken out randomly for hyperspectral scattering imaging and conventional microbiological tests on each day of the experiments.The functions of Gaussian,Exponential and Lorentzian were employed to model the hyperspectral scattering profiles of pork meat,and good fitting results were obtained by all three functions between 455 nm and 1000 nm.The Lorentzian function performed best for fitting the hyperspectral scattering profiles of pork meat compared with other functions.Both principal component regression(PCR)and partial least squares regression(PLSR)methods were performed to establish the prediction models.Among all the developed models,the models developed using parameters CE(scattering width parameter of Exponential function)and CL(scattering width parameter of Lorentzian function)by PLSR method gave superior results for predicting pork meat TVC,with RV and RMSEV of 0.92,0.59 log CFU/g,and 0.91,0.61 log CFU/g,respectively.In addition,based on the improved hyperspectral scattering system,parameter c which represented the scattering widths in all three functions gave more accurate prediction results,regardless of the modeling methods(PCR or PLSR).The obtained results demonstrated that hyperspectral scattering imaging combined with the presented data analysis algorithm can be a powerful tool for evaluating the microbial safety of meat in the future. 展开更多
关键词 hyperspectral scattering imaging pork meat total viable count Lorentzian function Gaussian function Exponential function
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新文脉语境下的城乡风貌特色研究--以山东昌邑为例
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作者 陶斐斐 张淑荣 +1 位作者 郭正欣 韩霖 《艺术与设计(城市空间设计)》 2022年第3期74-77,共4页
本文探讨了新文脉语境下文脉与地脉、史脉、人脉的关系,找到新文脉与城乡风貌特色的契合点,总结新文脉语境下的城乡风貌特征要素,并选取山东昌邑作为研究对象,从新文脉视角对昌邑全域风貌特色梳理,总结昌邑全域风貌突出特征与现状问题,... 本文探讨了新文脉语境下文脉与地脉、史脉、人脉的关系,找到新文脉与城乡风貌特色的契合点,总结新文脉语境下的城乡风貌特征要素,并选取山东昌邑作为研究对象,从新文脉视角对昌邑全域风貌特色梳理,总结昌邑全域风貌突出特征与现状问题,寻找国土空间背景下昌邑全域风貌的特色塑造策略。 展开更多
关键词 新文脉主义块 城乡风貌特色 策略
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