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表达猪源GM-CSF重组PRRSV疫苗对同源高致病性毒株的免疫保护效力评价
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作者 虞凌雪 姜一峰 +11 位作者 杨莘 于海 周艳君 童武 高飞 李国新 刘长龙 郑浩 单同领 李丽薇 孔宁 童光志 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2024年第2期106-112,共7页
为研究表达猪源粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)的重组猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)在动物体内的免疫调节特性及对其的保护效力评价,本研究将15头30日龄仔猪随机分成4组,空白对照组(DMEM)4头、疫苗对照组(HuN4-F112株)4头、疫苗... 为研究表达猪源粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)的重组猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)在动物体内的免疫调节特性及对其的保护效力评价,本研究将15头30日龄仔猪随机分成4组,空白对照组(DMEM)4头、疫苗对照组(HuN4-F112株)4头、疫苗组(rPRRSV-GM-CSF株)3头和攻毒对照组(DMEM^(+)HuN4株)4头。疫苗对照组肌注免疫HuN4-F112株10^(5) TCID_(50)/头、疫苗组肌注免疫rPRRSV-GM-CSF株10^(5) TCID_(50)/头,实验空白组和攻毒对照组肌注DMEM 2 mL/头,免疫后28 d,疫苗组、疫苗对照组和攻毒对照组肌注HuN4株(10_(5) TCID_(50)/头)。攻毒后的试验结果表明,免疫rPRRSV-GM-CSF重组病毒组和疫苗株HuN4-F112组获得完全保护,阴性对照组全部死亡;通过IDEXX试剂盒检测仔猪血清中PRRSV抗体水平可知,在免疫14 d后,疫苗组抗体水平显著高于疫苗对照组(P<0.05);由流式细胞术分析体内免疫细胞亚群比例可知,疫苗组同疫苗对照组相比,疫苗组的重组疫苗株能够引起免疫记忆细胞亚群CD4^(+)CD8^(+)T在免疫后28 d显著升高,以及引发攻毒后其抗原递呈细胞显著增多,进而促进CD4-CD8^(+)T的增殖以发挥抗病毒免疫应答。本研究筛选出了一株具有改善HuN4-F112弱毒疫苗株免疫效果的重组病毒rPRRSV-GM-CSF,为进一步研发广谱通用的新型疫苗奠定基础。 展开更多
关键词 rPRRSV-GM-CSF 免疫记忆细胞T淋巴细胞 杀伤性T淋巴细胞
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AIFM1分子与猪伪狂犬病病毒UL16蛋白互作抑制病毒的增殖机制研究
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作者 徐晶晶 高飞 +7 位作者 武吉强 程雪飞 刘宇婷 傅欣玲 郑浩 童武 童光志 李国新 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2024年第1期9-17,共9页
凋亡诱导因子1(AIFM1)是一个结构复杂的线粒体蛋白,能优化线粒体呼吸链的功能、参与氧化还原代谢,是第一个被发现的caspase非依赖性的凋亡蛋白。本研究发现AIFM1能与猪伪狂犬病病毒(PRV)pUL16相互作用,过表达以及RNA干扰试验结果表明,AI... 凋亡诱导因子1(AIFM1)是一个结构复杂的线粒体蛋白,能优化线粒体呼吸链的功能、参与氧化还原代谢,是第一个被发现的caspase非依赖性的凋亡蛋白。本研究发现AIFM1能与猪伪狂犬病病毒(PRV)pUL16相互作用,过表达以及RNA干扰试验结果表明,AIFM1能抑制PRV的增殖,且pUL16能减弱这种抑制作用。激光共聚焦和流式试验表明,PRV感染细胞时,AIFM1从线粒体易位至细胞核,且AIFM1增强了PRV引起的细胞凋亡。本研究通过对PRV pUL16和宿主蛋白相互作用机制研究,部分地解析了这两种蛋白在PRV复制、包装以及与宿主互作中发挥的作用,为进一步阐明PRV感染机制奠定了基础。 展开更多
关键词 伪狂犬病病毒 独特长区16蛋白 凋亡诱导因子1
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猪流行性腹泻病毒SYBR Green I实时荧光定量PCR检测方法的建立
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作者 董苏洁 孔宁 +9 位作者 秦文珍 翟焕杰 翟雪滢 杨心雨 童武 郑浩 于海 童光志 李有文 单同领 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2024年第2期174-180,共7页
为了建立高效、灵敏的猪流行性腹泻病毒(PEDV)检测方法,本研究从GenBank数据库中获取PEDV N基因序列,扩增出PEDV N基因标准质粒,并在N基因的保守区域内设计了一对特异性荧光定量引物,成功建立了SYBR Green I实时荧光定量PCR检测方法。... 为了建立高效、灵敏的猪流行性腹泻病毒(PEDV)检测方法,本研究从GenBank数据库中获取PEDV N基因序列,扩增出PEDV N基因标准质粒,并在N基因的保守区域内设计了一对特异性荧光定量引物,成功建立了SYBR Green I实时荧光定量PCR检测方法。经过一系列试验表明,该检测方法线性关系良好,R^(2)值为0.99;特异性强,敏感性高,最低可检测至2.23 copies/μL,比普通PCR灵敏约100倍;重复性好,组内变异系数为0.25%~0.43%,组间变异系数为0.67%~0.97%;对于各地区96份临床样品检测出PEDV阳性率为25%。本研究建立的实时荧光定量PCR检测方法为PEDV的临床诊断、流行病学调查以及定量研究提供了有效的检测工具。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 N基因 SYBR Green I 荧光定量PCR
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A型塞内卡病毒VP1蛋白的原核表达及多克隆抗体制备
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作者 秦文珍 李挺 +11 位作者 赵欣 董苏洁 翟焕杰 叶晨倩 叶曼青 童武 郑浩 于海 单同领 童光志 兰道亮 孔宁 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2024年第2期195-200,共6页
A型塞内卡病毒(SVA)是一种新兴的猪病原体,可引起母猪水泡样病变和仔猪急性死亡。本研究将SVA的VP1基因分别克隆到原核表达载体pCold-I和pCold-TF,并将测序正确的重组质粒VP1-pCold-I、VP1-pCold-TF转化BL21(DE3)大肠杆菌中,诱导表达重... A型塞内卡病毒(SVA)是一种新兴的猪病原体,可引起母猪水泡样病变和仔猪急性死亡。本研究将SVA的VP1基因分别克隆到原核表达载体pCold-I和pCold-TF,并将测序正确的重组质粒VP1-pCold-I、VP1-pCold-TF转化BL21(DE3)大肠杆菌中,诱导表达重组蛋白。结果显示:VP1-pCold-I表达的目的蛋白在沉淀(包涵体)中,VP1-pCold-TF表达的蛋白为可溶性蛋白。分别纯化上述表达的蛋白,并免疫BALB/c小鼠,经四次免疫后得到多克隆抗体。经Western blot和间接免疫荧光(IFA)鉴定,制备的多克隆抗体具有良好的Western blot效价和IFA效价,为相关基础研究和应用研究提供了工具。 展开更多
关键词 A型塞内卡病毒 VP1 原核表达 多克隆抗体
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猪流行性腹泻病毒PEDV SD株的分离及体外3D肠道类器官感染模型建立
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作者 蔡鸿明 张敏 +9 位作者 吕丽蕾 姜一峰 高飞 虞凌雪 童武 李丽薇 李国新 周艳君 刘长龙 童光志 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2024年第1期1-8,共8页
猪流行性腹泻病毒(PEDV)是一种主要感染仔猪小肠的肠道冠状病毒。本研究旨在建立一种用于PEDV体外研究的仔猪小肠类器官模型。首先从PEDV发病猪场的临床仔猪腹泻样品中分离PEDV并进行全基因组测序,结果显示成功分离1株PEDV,命名为PEDV S... 猪流行性腹泻病毒(PEDV)是一种主要感染仔猪小肠的肠道冠状病毒。本研究旨在建立一种用于PEDV体外研究的仔猪小肠类器官模型。首先从PEDV发病猪场的临床仔猪腹泻样品中分离PEDV并进行全基因组测序,结果显示成功分离1株PEDV,命名为PEDV SD株。另外采用肠道类器官的培养技术,从10日龄健康仔猪小肠中分离小肠隐窝组织,经过体外培养7 d左右分化成具有肠道隐窝结构的猪小肠类器官,并能进行连续传代。然后将分离的PEDV SD株感染传代培养的猪小肠道类器官,通过间接免疫荧光试验显示PEDV可以很好地感染猪小肠道类器官,表明成功建立了PEDV感染肠道类器官的模型。猪小肠类器官感染模型可以在体外很好地重现PEDV感染肠道细胞的复杂结构的过程,为深入研究PEDV的致病机制提供一种新的可再生的体外研究模型。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 肠道类器官 感染模型
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非洲猪瘟病毒pE248R蛋白的原核表达及其多克隆抗体制备
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作者 杜楠楠 陈金霞 +6 位作者 曹云雷 张宽 童武 李丽薇 赵冉 童光志 高飞 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2024年第2期188-194,共7页
本研究利用PCR方法从非洲猪瘟病毒的灭活样品中扩增出747 bp的E248R基因全长序列,利用同源重组法构建原核表达质粒pCold I-pE248R,经1 mmol/L的IPTG诱导1 h后,利用SDS-PAGE对重组蛋白进行表达鉴定和反应原性分析,表达蛋白的分子量约为32... 本研究利用PCR方法从非洲猪瘟病毒的灭活样品中扩增出747 bp的E248R基因全长序列,利用同源重组法构建原核表达质粒pCold I-pE248R,经1 mmol/L的IPTG诱导1 h后,利用SDS-PAGE对重组蛋白进行表达鉴定和反应原性分析,表达蛋白的分子量约为32 kDa,利用纯化后得到pE248R重组蛋白作为免疫原经过4次免疫后制备鼠源抗pE248R多克隆抗体。利用该多克隆抗体检测实验室构建并拯救的已证明能够稳定表达ASFV pE248R蛋白的重组病毒rPRRSV-E248R,结果显示制备的抗pE248R的多克隆抗体能够与rPRRSV-E248R发生特异性结合反应,证明利用本试验中原核表达的pE248R蛋白制备的多克隆抗体具有抗pE248R蛋白的特异性,为进一步针对ASFV E248R基因建立快速,特异性的血清学检测方法奠定了基础,也为针对pE248R蛋白的功能性研究提供了研究基础。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 E248R基因 pE248R蛋白 多克隆抗体
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A novel Ag/ZnO core-shell structure for efficient sterilization synergizing antibiotics and subsequently removing residuals
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作者 Wenmei Han Wenli Wang +4 位作者 Jie Fan Runping Jia Xuchun Yang tong wu Qingsheng wu 《Green Energy & Environment》 SCIE EI CAS CSCD 2024年第2期366-377,共12页
The massive use of antibiotics has led to the aggravation of bacterial resistance and also brought environmental pollution problems.This poses a great threat to human health.If the dosage of antibiotics is reduced by ... The massive use of antibiotics has led to the aggravation of bacterial resistance and also brought environmental pollution problems.This poses a great threat to human health.If the dosage of antibiotics is reduced by increasing its bactericidal performance,the emergence of drug resistance is certainly delayed,so that there's not enough time for developing drug resistance during treatment.Therefore,we selected typical representative materials of metal Ag and semiconductor ZnO nano-bactericides to design and synthesize Ag/ZnO hollow core-shell structures(AZ for short).Antibiotics are grafted on the surface of AZ through rational modification to form a composite sterilization system.The research results show that the antibacterial efficiency of the composite system is significantly increased,from the sum(34.7%+22.8%-57.5%)of the antibacterial efficiency of AZ and gentamicin to 80.2%,net synergizes 22.7%,which fully reflects the effect of 1+1>2.Therefore,the dosage of antibiotics can be drastically reduced in this way,which makes both the possibility of bacterial resistance and medical expenses remarkably decrease.Subsequently,residual antibiotics can be degraded under simple illumination using AZ-self as a photocatalyst,which cuts off the path of environmental pollution.In short,such an innovative route has guiding significance for drug resistance. 展开更多
关键词 Ag/ZnO hollow Core-shell structures ANTIBIOTICS GENTAMYCIN Synergistic sterilization PHOTODEGRADATION
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新工科背景下的“普通化学”教材建设 被引量:1
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作者 温鸣 吴彤 +3 位作者 石硕 郭新华 陈云 吴庆生 《大学化学》 CAS 2023年第6期57-61,共5页
“普通化学”是理工科大多数专业所必修的一门基础课程,而无论是课程建设,还是人才培养,都需要有高质量的教材做支撑。同济大学无机及普通化学教学科研团队几十年来对“普通化学”教材经过多版本、多形式、多维度的系统建设,使之推到《... “普通化学”是理工科大多数专业所必修的一门基础课程,而无论是课程建设,还是人才培养,都需要有高质量的教材做支撑。同济大学无机及普通化学教学科研团队几十年来对“普通化学”教材经过多版本、多形式、多维度的系统建设,使之推到《普通化学》(第二版)的新高度。这套教材的系统建设成果主要体现在如下三个方面:1)针对不同人才培养模式的工科普通化学课程,系统建设了满足不同人才培养层次的知识结构教材体系,并布局了符合新工科要求的教材知识点;2)建立了与基础扎实且视野广阔的高素质人才培养目标相适应的教材体系;3)构建了紧跟时代发展步伐的动态更新机制。基于该教材建设体系的组织思路,能将基础知识、拓展知识和化学前沿讲座有机结合交融,体现了知识的先进性、交叉性和综合性的特色。总而言之,同济大学的《普通化学》(第二版)经过教材的系统建设,既符合当今学科交叉的时代特色,又适应了新工科人才培养的要求。 展开更多
关键词 普通化学 教材建设 课程建设 新工科 人才培养
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猪源盖塔病毒抗体间接ELISA检测方法的初步建立及其优化 被引量:2
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作者 朱世强 王帅勇 +9 位作者 王娟 虞凌雪 姚云 张毅峰 周艳君 单同领 郑浩 童武 童光志 于海 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2023年第1期66-71,共6页
为了建立猪源盖塔病毒(GETV)血清学ELISA抗体检测方法,本实验首先在PK-15细胞上增殖猪源盖塔病毒(GETV-SD1),并对病毒进行灭活处理和超离纯化,将纯化的灭活GETV作为包被抗原,经过包被条件的优化,初步建立了GETV特异性抗体检测的间接ELIS... 为了建立猪源盖塔病毒(GETV)血清学ELISA抗体检测方法,本实验首先在PK-15细胞上增殖猪源盖塔病毒(GETV-SD1),并对病毒进行灭活处理和超离纯化,将纯化的灭活GETV作为包被抗原,经过包被条件的优化,初步建立了GETV特异性抗体检测的间接ELISA方法。结果显示:GETV粒子的最佳包被浓度为200 ng/孔,最佳包被条件为4℃孵育过夜,最佳封闭条件4℃封闭2 h,血清最佳孵育条件为37℃孵育2 h,血清最佳稀释比1∶200,临界值为0.181;特异性检测试验结果表明,该检测方法具有GETV特异性;所建立的方法也具有较好的重复性,批内、批间重复率变异系数均小于10%;通过稀释阳性血清表明该方法具有较好的敏感性。本研究建立的猪源盖塔病毒抗体的间接ELISA检测方法为GETV抗体的有效监测奠定了坚实的基础。 展开更多
关键词 猪源盖塔病毒 全病毒蛋白 间接ELISA
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非洲猪瘟病毒p17蛋白的哺乳动物细胞表达及鉴定 被引量:1
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作者 乔思娜 赵款 +7 位作者 刘佳晨 李国新 童武 周艳君 赵冉 童光志 高飞 李丽薇 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2023年第3期68-73,共6页
研究旨在利用哺乳动物细胞悬浮培养系统表达非洲猪瘟病毒(ASFV)p17蛋白,纯化并免疫小鼠,制备针对ASFV p17蛋白的特异性多克隆抗体。根据GenBank中公布的ASFV SY18毒株p17蛋白编码基因序列,设计特异性引物扩增p17基因片段,构建重组真核... 研究旨在利用哺乳动物细胞悬浮培养系统表达非洲猪瘟病毒(ASFV)p17蛋白,纯化并免疫小鼠,制备针对ASFV p17蛋白的特异性多克隆抗体。根据GenBank中公布的ASFV SY18毒株p17蛋白编码基因序列,设计特异性引物扩增p17基因片段,构建重组真核表达质粒pCDNA3.1-p17-strep。将其瞬时转染293i细胞,并利用下游strep标签进行蛋白纯化。纯化后的重组p17蛋白配合MnJ(β)胶体锰佐剂免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体血清。利用Western blot、间接免疫荧光试验鉴定该多克隆抗体的反应原性和特异性。结果显示:本试验成功构建pCDNA3.1-p17-strep真核表达质粒,转染293i细胞后纯化获得重组p17蛋白。免疫小鼠后制备的多克隆抗体与真核表达的p17蛋白及表达ASFV p17蛋白的猪繁殖与呼吸综合征病毒均有良好的特异性免疫反应。本试验为深入探讨ASFV p17蛋白的生物学功能奠定了基础。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 p17蛋白 293i细胞 多克隆抗体
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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒弱毒疫苗株作为外源基因表达活病毒载体的研究
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作者 陈金霞 张宽 +9 位作者 张玉娇 杜楠楠 郑海红 李丽薇 周艳君 虞凌雪 童武 郑浩 童光志 高飞 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2023年第3期12-19,共8页
利用反向遗传操作技术,猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)也可以被用作外源基因表达的活载体。前期研究将猪瘟病毒E2蛋白的编码基因插入了高致病性PRRSV弱毒疫苗株HuN4-F112的非结构蛋白和结构蛋白编码间区,所拯救的重组病毒rPRRSV-E2能够... 利用反向遗传操作技术,猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)也可以被用作外源基因表达的活载体。前期研究将猪瘟病毒E2蛋白的编码基因插入了高致病性PRRSV弱毒疫苗株HuN4-F112的非结构蛋白和结构蛋白编码间区,所拯救的重组病毒rPRRSV-E2能够在体外和体内高效表达E2蛋白。能够为猪瘟和HP-PRRS的感染提供100%的免疫保护。本研究利用rPRRSV-E2的全长感染性克隆平台,在PRRSV基因组ORF7和3'非翻译区之间插入了转录调控序列6(TRS6)和绿色荧光蛋白的编码基因,构建并拯救了重组病毒rPRRSV-E2-EGFP,该病毒感染MARC-145细胞后,可以同时表达猪瘟E2蛋白和EGFP。外源序列在载体中能够保持遗传稳定。本研究为开发PRRSV作为病毒活载体疫苗提供了一个新的外源基因插入位点和构建策略,对今后多价疫苗的研发有重要意义。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 3'非翻译区 转录调控序列 外源基因表达
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伪狂犬病病毒UL9基因突变株构建及其生物学特性分析
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作者 阮可悦 桑国菊 +7 位作者 童武 许朝阳 于海 单同领 李丽薇 高飞 童光志 郑浩 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2023年第4期1-8,共8页
伪狂犬病病毒(PRV)是一种大的DNA病毒,编码蛋白众多,其中一些具有酶功能,涉及病毒复制、蛋白调控和核苷酸代谢等。本研究在实验室已有的PRV感染性克隆pBAC-PRV基础上,利用体外转座的方法将Tn5转座子随机插入伪狂犬病病毒基因组中,获得... 伪狂犬病病毒(PRV)是一种大的DNA病毒,编码蛋白众多,其中一些具有酶功能,涉及病毒复制、蛋白调控和核苷酸代谢等。本研究在实验室已有的PRV感染性克隆pBAC-PRV基础上,利用体外转座的方法将Tn5转座子随机插入伪狂犬病病毒基因组中,获得病毒复制相关功能基因UL9的突变体。将UL9基因突变体转染Vero细胞,获得重组病毒vPRV-Tn5-UL9。通过病毒空斑实验和多步生长曲线测定等方法对vPRV-Tn5-UL9的生物学特性进行研究分析,结果显示突变病毒可在体外传代,但病毒的增殖速度显著降低,这表明UL9基因为PRV复制非必需基因,但对病毒复制增殖存在重要影响。此外,动物试验显示,vPRV-Tn5-UL9失去对小鼠的致死能力。本研究成功利用体外转座技术获得了PRV的UL9突变病毒,为构建重组病毒的方法提供了新思路,同时也为研究PRV复制机制打下一定基础。 展开更多
关键词 伪狂犬病病毒 UL9基因 Tn5转座子 BAC
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猪繁殖与呼吸综合征病毒转录调控序列顺式作用元件的鉴定及其在基因转录表达中的机制解析
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作者 张宽 陈金霞 +9 位作者 张玉娇 杜楠楠 郑浩 姜一峰 李丽薇 虞凌雪 周艳君 童武 童光志 高飞 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2023年第2期13-21,共9页
猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)的转录调控序列(TRS)在sg mRNA的合成中起着至关重要的作用。为了深入了解TRS在病毒亚基因组转录和翻译过程中的作用,本研究通过对高致病性PRRSV细胞传代致弱株HuN4-F112的转录调控序列进行鉴定,并构... 猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)的转录调控序列(TRS)在sg mRNA的合成中起着至关重要的作用。为了深入了解TRS在病毒亚基因组转录和翻译过程中的作用,本研究通过对高致病性PRRSV细胞传代致弱株HuN4-F112的转录调控序列进行鉴定,并构建了一系列针对TRS6突变以及将TRS6替换为其他Body TRS的全长感染性克隆。结果表明,同时突变TRS6核心寡核苷酸3'端两个碱基或同时缺失5'端和3'端侧翼序列的全长突变体克隆均不能拯救出病毒,而单独缺失TRS65'端或3'端侧翼序列的全长突变体克隆可以拯救出病毒,但侧翼序列缺失后拯救出的病毒相较于原始亲本病毒的滴度有所下降;将HuN4-F112-EGFP的TRS6替换为TRS2、3、7均可以拯救出病毒,并有相似的生长特性,但含有TRS2的重组病毒滴度相对较低,而将TRS6替换为TRS4或TRS5后,无法拯救出病毒。本研究鉴定了HuN4-F112的一系列Body TRS在基因组中的相对位置,同时也证明了ORF1b和ORF2a基因区中4种不同的Body TRS都可以引导基因稳定高效的表达,该研究为今后以PRRSV疫苗株为活病毒载体进行多价重组疫苗的研发奠定了基础。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 转录调控序列 非连续性转录
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猪源盖塔病毒TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立
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作者 王娟 王帅勇 +9 位作者 虞凌雪 张毅峰 严杰聪 王曼茱 周艳君 单同领 童武 郑浩 童光志 于海 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2023年第3期120-126,共7页
猪盖塔病毒感染是由盖塔病毒(GETV)引起母猪妊娠初期胎儿死亡、初生仔猪发病的一种繁殖障碍性疾病。猪是自然界中GETV的主要扩增宿主,可以产生足够高的病毒血症滴度来感染叮咬的蚊子并维持GETV的传播周期,所以定期对猪群进行GETV监测对... 猪盖塔病毒感染是由盖塔病毒(GETV)引起母猪妊娠初期胎儿死亡、初生仔猪发病的一种繁殖障碍性疾病。猪是自然界中GETV的主要扩增宿主,可以产生足够高的病毒血症滴度来感染叮咬的蚊子并维持GETV的传播周期,所以定期对猪群进行GETV监测对于预防潜在的GETV暴发具有重要意义。本研究通过分析GETV E2蛋白基因特征,设计特异性引物和探针,条件优化后建立检测GETV感染的TaqMan实时荧光定量PCR方法。结果表明:以阳性质粒为标准品建立的标准曲线在1×10^(2)~1×10^(7)copies/μL内呈现良好的线性关系,扩增效率为1.61;该检测方法的最低检出限低至3.16 TCID50/mL,远远低于普通PCR的检测限3.16×10^(3)TCID50/mL;组内、组间重复性试验的变异系数均小于2%,具有良好的重复性和稳定性。本研究建立的方法能够快速有效的检测和定量GETV,为猪群中GETV监测提供可靠的检测方法。 展开更多
关键词 猪源盖塔病毒 TaqMan实时荧光定量PCR方法 检测
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永存原始玻璃体增生症与先天性纤维血管瞳孔膜临床特征的比较 被引量:1
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作者 赵超 张泸宁 +3 位作者 郝壮 蒋孟琪 吴桐 周健 《国际眼科杂志》 CAS 北大核心 2023年第4期634-639,共6页
目的:分析永存原始玻璃体增生症(PHPV)和先天性纤维血管瞳孔膜(CFPM)的临床特征异同。方法:回顾性分析2006-03/2021-12在空军军医大学西京医院眼科接受手术治疗的PHPV(PHPV组)和CFPM患儿(CFPM组)的眼部生物测量参数、临床表现、病变的... 目的:分析永存原始玻璃体增生症(PHPV)和先天性纤维血管瞳孔膜(CFPM)的临床特征异同。方法:回顾性分析2006-03/2021-12在空军军医大学西京医院眼科接受手术治疗的PHPV(PHPV组)和CFPM患儿(CFPM组)的眼部生物测量参数、临床表现、病变的形态学特点。结果:纳入PHPV患儿56例61眼,CFPM患儿24例25眼;PHPV和CFPM的发病年龄相似、无性别差异,均以单眼患病为主,其占比分别为91%和96%。PHPV合并白内障患眼可有多种并发症和眼发育异常,CFPM主要为不同程度的瞳孔区堵塞及形态异常。PHPV组和CFPM组单眼患病患儿患眼前房深度(ACD)均小于对侧眼,手术年龄≤24月龄患儿患眼眼轴长度(AL)均小于对侧眼(P<0.05);PHPV组单眼患病患儿患眼角膜直径(CD)小于对侧眼、眼压高于对侧眼(均P<0.05);CFPM组单眼患病患儿患眼与对侧眼CD、IOP比较均无显著差异(P>0.05)。PHPV组患儿患眼ACD小于CFPM组患眼(P<0.05)。术中发现PHPV纤维血管膜组织位于晶状体后、玻璃体腔内,而CFPM纤维血管膜位于虹膜与晶状体前囊膜之间,很少累及晶状体。结论:PHPV和CFPM有非常相似的临床特点,提示PHPV和CFPM可能是永存胚胎血管(PFV)的不同表现形式,但PHPV病变范围更广、病情更复杂。 展开更多
关键词 永存原始玻璃体增生症 先天性纤维血管瞳孔膜 永存胚胎血管 临床特征 手术治疗
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Identification of the HAK gene family reveals their critical response to potassium regulation during adventitious root formation in apple rootstock 被引量:1
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作者 Muhammad Mobeen Tahir Lu tong +8 位作者 Lingling Xie tong wu Muhammad Imran Ghani Xiaoyun Zhang Shaohuan Li Xiuhua Gao Leeza Tariq Dong Zhang Yun Shao 《Horticultural Plant Journal》 SCIE CAS CSCD 2023年第1期45-59,共15页
Adventitious root formation is a bottleneck during vegetative proliferation.Potassium(K^(+))is an essential macronutrient for plants.K^(+)accumulation from the soil and its distribution to the different plant organs i... Adventitious root formation is a bottleneck during vegetative proliferation.Potassium(K^(+))is an essential macronutrient for plants.K^(+)accumulation from the soil and its distribution to the different plant organs is mediated by K^(+)transporters named K^(+)transporter(KT),K^(+)uptake(KUP),or high-affinity K^(+)(HAK).This study aimed to identify members of the HAK gene family in apples and to characterize the effects of K^(+)supply on adventitious root formation and on the expression of HAK genes and the genes that putatively control auxin transport,signaling,and cell fate during adventitious root formation.In this study,34 HAK genes(MdHAKs)were identified in the apple(Malus×domestica‘Golden Delicious’)genome.A phylogenetic analysis divided MdHAKs into four clusters(Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,andⅣ),comprising 16,1,4,and 13 genes,respectively.The syntenic relationships revealed that 62.5%of the total MdHAK genes arise from genomic duplication events.Chromosome location,domain structure,motif analysis,and physico-chemical characteristics were subsequently investigated.Furthermore,the application of K^(+)indicated the emergence of adventitious roots at 8 d and produced more adventitious roots at 16 d than the K^(+)-free control(CK)treatment.In addition,various MdHAKs showed root-specific expression in B9 apple rootstock stem cuttings and enhanced expression during the initiation and emergence stages of adventitious root formation in response to K^(+)treatment.Additionally,K^(+)treatment enhanced the expression levels of MdPIN1,MdPIN2,and MdAUX1.Further data indicated that a higher expression of MdWOX11,MdLBD16,and MdLBD29 and of cell cycle-related genes contributed to the auxin-stimulated adventitious root formation in response to K^(+). 展开更多
关键词 Apple rootstock Adventitious root FORMATION Potassium(K+) HAK transporter
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Differential analysis of aqueous humor cytokine levels in patients with macular edema secondary to diabetic retinopathy or retinal vein occlusion
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作者 Ke-Ke Hu Chao-Wei Tian +6 位作者 Man-Hong Li tong wu Min Gong Xin-Li Wei Yu-Ru Du Yan-Nian Hui Hong-Jun Du 《International Journal of Ophthalmology(English edition)》 SCIE CAS 2023年第7期1041-1046,共6页
AIM:To evaluate the difference and the correlation between the concentrations of cytokines in the aqueous humor of eyes with macular edema secondary to diabetic retinopathy(DR)or retinal vein occlusion(RVO).METHODS:Th... AIM:To evaluate the difference and the correlation between the concentrations of cytokines in the aqueous humor of eyes with macular edema secondary to diabetic retinopathy(DR)or retinal vein occlusion(RVO).METHODS:This is a retrospective case control study.The aqueous humor samples were collected during intravitreal injection of anti-vascular endothelial growth factor(VEGF)for patients diagnosed with macular edema secondary to DR(DME)or RVO(RVO-ME)at Xijing Hospital from August 2021 to July 2022.Meanwhile,aqueous humor samples during vitrectomy from patients with idiopathic macular hole(IMH)were also collected and served as controls.The aqueous humor concentrations of VEGF,platelet-derived factor(PDGF),interleukin(IL)-6,IL-8,IL-18,tumor necrosis factor-α(TNF-α)and monocyte chemoattractant protein 1(MCP-1)were measured with Human Premixed Multi-Analyte Kit(Luminex).The difference of the aqueous cytokines and the correlation between the two diseases were analyzed.RESULTS:A total of 40 eyes of 38 patients were enrolled in the study,including 13 eyes of 11 DME patients(DME group),16 eyes of 16 RVO-ME patients(RVO-ME group)and 11 eyes of 11 IMH patients(control group).The VEGF,PDGF,IL-6,IL-8,and MCP-1 levels of the aqueous humor were higher in both DME and RVO-ME groups compared with the control group(all P<0.05),the levels of TNF-αwas higher in the DME group than in the control group(P<0.05).The VEGF,IL-6,MCP-1,and TNF-αlevels in the aqueous humor were significantly higher in the DR group than those in the RVO group(all P<0.05).Correlation analyses revealed that there were complex positive correlations between IL-6,IL-8,IL-18,MCP-1,and TNF-αlevels in the aqueous humor of eyes with two diseases.CONCLUSION:Although ischemic and inflammatory factors are similarly involved in the pathogenesis of DME and RVO-ME,the roles of these factors are more significant or more likely to be activated in DR patients,suggesting different treatment strategies should be considered for the two diseases. 展开更多
关键词 macular edema diabetic retinopathy retinal vein occlusion CYTOKINES aqueous humor
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Dispersal behaviors stimulated by habitat alterations in golden snub-nosed monkeys(Rhinopithecus roxellana)in the Qinling Mountains, China
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作者 Cheng-Liang Wang Liang Chen +13 位作者 Gang He Xiao-Dong Yan tong wu Wei Li Hai-Tao Zhao Yi Ren Wei-Wei Fu Yan Wang He Zhang Xiao-Wei Wang Wei-Feng Wang Hong-Tao Zhao Ru-Liang Pan Bao-Guo Li 《Zoological Research》 SCIE CAS CSCD 2023年第2期366-369,共4页
DEAR EDITOR,Combining location data, species distribution modeling(Max Ent), and major conservation events, we analyzed historical distribution changes in golden snub-nosed monkeys(Rhinopithecus roxellana) in the Qinl... DEAR EDITOR,Combining location data, species distribution modeling(Max Ent), and major conservation events, we analyzed historical distribution changes in golden snub-nosed monkeys(Rhinopithecus roxellana) in the Qinling Mountains of China. 展开更多
关键词 China QINLING MOUNTAINS
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Efficacy and safety of atropine at different concentrations in prevention of myopia progression in Asian children: a systematic review and Meta-analysis of randomized clinical trials
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作者 Xin-Li Wei tong wu +7 位作者 Kuan-Rong Dang Ke-Ke Hu Xin-Ting Lu Min Gong Yu-Ru Du Yan-Nian Hui Xue-Min Tian Hong-Jun Du 《International Journal of Ophthalmology(English edition)》 SCIE CAS 2023年第8期1326-1336,共11页
AIM:To assess the efficacy versus the adverse effects of various concentrations of atropine in the prevention of myopia in Asian children.METHODS:Databases(PubMed,EMBASE,the Cochrane Library and Web of science)were co... AIM:To assess the efficacy versus the adverse effects of various concentrations of atropine in the prevention of myopia in Asian children.METHODS:Databases(PubMed,EMBASE,the Cochrane Library and Web of science)were comprehensively searched from inception to April 2022.Types of studies included were randomized clinical trials(RCTs).The published languages were limited to English.Two researchers assessed the quality of included studies independently using Cochrane risk of bias tool based on the Cochrane Handbook for Systematic Reviews of Interventions.Funnel plots and Egger’s test were used for detection of publication bias.Meta-analyses were conducted using STATA(version 15.0;StataCorp).RESULTS:A total of 15 RCTs involving 2268 patients were included in the study.In the atropine group,spherical equivalent progressed at a significantly lower rate[weighted mean difference(WMD)=0.39,95%confidence interval(CI):0.23,0.54]than in the control group.A WMD of 0.15 mm was associated with less axial elongation(95%CI-0.19,-0.10).Different doses showed statistically significant differences(P<0.05)and an improved effect could result from a higher concentration.Changes in photopic pupil size and mesopic pupil size in atropine group is 0.70 mm(95%CI:0.33,1.06)and 0.38 mm(95%CI:0.22,0.54)more than the control group.In the present Meta-analysis,no changes in accommodative amplitude(AA)were associated with atropine administration.Atropine administration increased the risk of adverse effects by 1.37 times.CONCLUSION:Concentrations of less than 1%atropine are able to effectively retard diopter and axis growth of myopia in Asian children in a dose-dependent manner.Meanwhile,it caused pupil enlargement,but induced no change in the AA within this range.Further study is required to determine the dosage needed to achieve maximum efficacy and minimal side effects. 展开更多
关键词 ATROPINE MYOPIA Asian children META-ANALYSIS
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Effects of Whole-plant Corn Silage and Whole-plant Wheat Silage on Growth Performance and Economic Benefits of Beef Cattle
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作者 Jian HU Luman HUO +7 位作者 Yuqi LIU Zhenguo ZHANG tong wu Qianqian CONG Yuping LIU Baiqin ZHENG Zhongce YUAN Xueliang PANG 《Agricultural Biotechnology》 CAS 2023年第2期51-53,共3页
[Objectives]This study was conducted to study the effects of whole-plant corn silage and whole-plant wheat silage on growth performance and economic benefits of beef cattle.[Methods]Thirty Simmental crossbred cattle w... [Objectives]This study was conducted to study the effects of whole-plant corn silage and whole-plant wheat silage on growth performance and economic benefits of beef cattle.[Methods]Thirty Simmental crossbred cattle were selected and randomly divided based on their weight into two groups,15 cows in each group,with an average weight of 398 kg.Each group was fed the same concentrated feed,and the whole-plant corn silage and wheat silage were fed as roughage feed,respectively.The experimental period was 90 d.[Results](1)There was no significant difference in the initial weight of beef cattle between test group 1 and test group 2(P>0.05).Compared with group 2,group 1 had a higher final weight,average daily gain,and dry matter intake of beef cattle,without significant differences(P>0.05).Group 1 was 0.58%,1.99%,and 1.43%higher than group 2,respectively.The feed-to-gain ratio of test group 1 decreased by 0.54%compared with test group 2(P>0.05),with no significant difference therebetween.(2)The economic benefit of group 1 was 11.45 yuan/(day·capita),while the economic benefit of group 2 was 2.41 yuan/(day·capita),and group 1 was 9.04 yuan/(day·capita)higher than group 2.[Conclusions]Whole-plant corn silage for feeding beef cattle has the advantages of good weight gain and low breeding cost,and can be popularized in beef cattle fattening. 展开更多
关键词 Whole-plant corn silage Whole-plant wheat silage Growth performance Economic performance
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