猪细小病毒4型单克隆抗体制备及抗原表位鉴定

1

作者 柴书军 杨苏珍 +5 位作者 刘运超 冯华 魏蔷 王方雨 金前跃 张改平 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2024年第8期77-84,共8页

为了制备猪细小病毒(PPV)4型Cap蛋白单克隆抗体(mAb)并鉴定其抗原表位,试验采用原核表达的Cap重组蛋白免疫BALB/c小鼠,将其脾细胞与SP2/0细胞进行融合,通过酶联免疫吸附测定(ELISA)、血凝抑制(HI)和免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)筛... 为了制备猪细小病毒(PPV)4型Cap蛋白单克隆抗体(mAb)并鉴定其抗原表位,试验采用原核表达的Cap重组蛋白免疫BALB/c小鼠,将其脾细胞与SP2/0细胞进行融合,通过酶联免疫吸附测定(ELISA)、血凝抑制(HI)和免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)筛选阳性克隆,最终获得2E7、4D6和5C9这3株特异性杂交瘤细胞株;然后用mAb对Cap蛋白多肽进行ELISA检测,鉴定分析其抗原表位。结果显示:4D6和5C9 mAb识别表位为线性表位,分别为387RRQDN^(391)和578QRKE^(581),而2E7 mAb识别的表位为构象表位;通过对Cap蛋白3D结构定位分析,387RRQDN^(391)和578QRKE^(581)抗原表位位于蛋白表面,且在PPV4亚型中高度保守,而与猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪乙型脑炎病毒(JEV)和猪博卡病毒(PBoV)基因序列同源性低。本研究为PPV4诊断试剂的开发和新型疫苗的研制提供了参考。 展开更多

关键词 猪细小病毒4型 单克隆抗体 抗原表位

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碳/玻混杂复合材料开孔板拉伸极限强度研究

2

作者 王芳钰 严仁军 +1 位作者 黎梦真 孙俊 《武汉理工大学学报（交通科学与工程版）》 2024年第5期923-928,共6页

针对正交碳/玻混杂复合材料开孔板的拉伸承载特性,设计了纯碳纤维(CCCC)、纯玻璃纤维(GGGG)和层间碳/玻混杂(CGGC和GCCG)的复合材料开孔板拉伸强度试验.基于Hashin准则、刚度退化准则对Vumat子程序进行改进,实现了异种纤维增强材料的渐... 针对正交碳/玻混杂复合材料开孔板的拉伸承载特性,设计了纯碳纤维(CCCC)、纯玻璃纤维(GGGG)和层间碳/玻混杂(CGGC和GCCG)的复合材料开孔板拉伸强度试验.基于Hashin准则、刚度退化准则对Vumat子程序进行改进,实现了异种纤维增强材料的渐进损伤分析.对这四种堆叠形式的开孔拉伸试件的载荷位移曲线、孔周应力、极限强度、以及损伤发展过程等进行了预报.结果表明:异种纤维增强材料渐进损伤仿真结果与试验结果较为接近,证实所改进方法的准确性.上述四种类型混杂复合材料开孔板均以垂直于拉伸载荷方向失效破坏.碳/玻混杂开孔层合板的极限载荷和刚度在纯碳纤维与纯玻璃纤维开孔板之间,内碳外玻(GCCG)的结构形式的抗拉强度略高于内玻外碳(CGGC).受拉载荷下混杂开孔板均为CFRP层先发生损伤,随后GFRP层在短时间内再发生萌生并快速扩展,该损伤过程与铺层顺序无关. 展开更多

关键词 碳/玻混杂复合材料 开孔拉伸试验 仿真方法 渐进损伤 强度分析

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CDCA8在肿瘤发生发展及耐药中的研究进展

3

作者 顾汇权 张涵强 +3 位作者 王芳玉 姚龙宇 周小天(综述) 刘嫱(审校) 《检验医学与临床》 2024年第3期405-409,共5页

细胞分裂周期相关基因(CDCA)8是CDCA家族中的一个成员,早期在胚胎干细胞中被发现,用于调控有丝分裂期间着丝粒的定位及纺锤体的稳定性。近年越来越多的研究发现CDCA8在肺癌、肝癌、黑色素瘤和胰腺癌等多种肿瘤组织中呈高表达,并与肿瘤... 细胞分裂周期相关基因(CDCA)8是CDCA家族中的一个成员,早期在胚胎干细胞中被发现,用于调控有丝分裂期间着丝粒的定位及纺锤体的稳定性。近年越来越多的研究发现CDCA8在肺癌、肝癌、黑色素瘤和胰腺癌等多种肿瘤组织中呈高表达,并与肿瘤的分级、不良预后密切相关。干扰CDCA8的表达会显著抑制肿瘤的生长以及转移,诱导细胞周期的阻滞及细胞凋亡,同时提高肿瘤细胞对顺铂和他莫昔芬的灵敏度,而对正常细胞影响较小。故认为CDCA8是治疗恶性肿瘤的一个潜在干预靶点。本文从预后情况、作用机制以及耐药关系出发,对CDCA8在肿瘤中的功能和作用的机制通路进行讨论,旨在为临床上肿瘤生物标志物的筛选及靶向药物研发提供新思路。 展开更多

关键词 细胞分裂周期相关基因8 肿瘤 治疗靶点 耐药

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基于RhoA/ROCK通路探讨益智仁对糖尿病肾病防治作用及机制研究

4

作者 王芳玉 韩汶龙 +3 位作者 马天鹏 昌红全 刘嫱 谢毅强 《河北医药》 CAS 2024年第18期2732-2736,共5页

目的研究益智仁(Alpinia Oxyphylla Fructus,AOF)对糖尿病肾病的防治作用及机制。方法用浓度为30 mmol/L的高糖培养基诱导HK-2细胞48 h造模,实验分为正常组、模型组、卡格列净组、益智仁组,药物处理24 h,采用Western-blot和qPCR技术检测... 目的研究益智仁(Alpinia Oxyphylla Fructus,AOF)对糖尿病肾病的防治作用及机制。方法用浓度为30 mmol/L的高糖培养基诱导HK-2细胞48 h造模,实验分为正常组、模型组、卡格列净组、益智仁组,药物处理24 h,采用Western-blot和qPCR技术检测RhoA/ROCK信号通路上的相关蛋白和基因表达变化。流式细胞术检测细胞凋亡、CCK-8检测细胞增殖、活性氧(ROS)检测氧化应激。结果与正常组比较,模型组HK-2细胞的细胞活性降低,凋亡率增加,ROS含量升高,RhoA/ROCK信号通路上的基因和蛋白表达增加(P<0.05)。与模型组比较,益智仁组HK-2细胞活性升高,细胞凋亡率和ROS的含量降低,RhoA/ROCK信号通路上的基因和蛋白表达量降低(P<0.05)。结论益智仁通过抑制RhoA/ROCK信号通路促进HK-2细胞增殖及抑制细胞凋亡;降低了HK-2的炎性反应、氧化应激和改善肾小管上皮细胞纤维化对糖尿病肾病有一定的治疗作用。 展开更多

关键词 益智仁 糖尿病肾病 RhoA/ROCK

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GB/T713—2014与GB/T713—2023标准的比较和分析

5

作者 王芳钰 《化工装备技术》 CAS 2024年第5期41-45,共5页

GB/T 713—2023《承压设备用钢板和钢带》于2023年8月6日发布,于2024年3月1日实施。对GB/T 713—2023和GB/T 713—2014标准进行了对比,介绍了GB/T 713—2023标准的主要修订情况,并对新标准的新要点进行分析,可为承压设备设计单位、制造... GB/T 713—2023《承压设备用钢板和钢带》于2023年8月6日发布,于2024年3月1日实施。对GB/T 713—2023和GB/T 713—2014标准进行了对比,介绍了GB/T 713—2023标准的主要修订情况,并对新标准的新要点进行分析,可为承压设备设计单位、制造单位及设计人员在应用新标准过程中提供参考。 展开更多

关键词 承压设备 标准 修订 钢板 钢带

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体育器材用Al-Si-Mg铝合金的压铸工艺优化

6

作者 王方雨 张王京 《热加工工艺》 北大核心 2023年第13期75-78,84,共5页

分别采用不同的浇注温度、模具温度和充型速度对Al-Si-Mg铝合金体育器材试样进行生产,并对其进行了力学性能测试分析和X-ray无损检测分析。经过试验优化,最终结果为:在浇注温度从675℃升高至715℃、模具温度从100℃升高至300℃以及快充... 分别采用不同的浇注温度、模具温度和充型速度对Al-Si-Mg铝合金体育器材试样进行生产,并对其进行了力学性能测试分析和X-ray无损检测分析。经过试验优化,最终结果为:在浇注温度从675℃升高至715℃、模具温度从100℃升高至300℃以及快充型速度从1.5 m/s升高至3.5 m/s的过程中,合金的强度总体上为先上升后下降。当浇注温度为695℃、模具温度为250℃及充型速度为2.0 m/s时,合金的抗拉强度得到最大值(287.11 MPa),屈服强度同样为最大值(190.53 MPa),伸长率3.66%。经过X-ray无损探伤并未观测到压铸合金有明显的卷气和缩孔等铸造缺陷,可以得到力学性能优异、组织致密的Al-Si-Mg压铸体育器材产品。 展开更多

关键词 Al-Si-Mg铝合金 浇注温度 模具温度 充型速度

原文传递

草甘膦的水生生物水质基准及其生态风险评估 被引量：5

7

作者 刘帅 王腾 +3 位作者 王孜晔 缪丰锴 王方钰 李正炎 《生态毒理学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期335-350,共16页

草甘膦是一种高效且广谱的除草剂,具有高效、低残留、低污染等特点,在我国广泛且大量使用,主要经地表径流和土壤渗透等不同途径进入水环境。当水环境草甘膦浓度过高时,会使水生生物的生理系统紊乱,甚至会导致生物死亡。本文以草甘膦为... 草甘膦是一种高效且广谱的除草剂,具有高效、低残留、低污染等特点,在我国广泛且大量使用,主要经地表径流和土壤渗透等不同途径进入水环境。当水环境草甘膦浓度过高时,会使水生生物的生理系统紊乱,甚至会导致生物死亡。本文以草甘膦为研究对象,结合国内外淡水水生生物组成特征,筛选中英文文献中生物毒性实验数据,共获取29个急性毒性数据和13个慢性毒性数据,分别涵盖5门16科29种和3门8科13种。应用毒性百分数排序法(TPR)和物种敏感度分布法(SSD)推导草甘膦的水质基准值,以及应用商值法评价国内外各地水体中草甘膦的生态风险。结果显示,草甘膦的基准最大浓度(CMC)、基准连续浓度(CCC)、短期基准值(SWQC)和长期基准值(LWQC)分别为0.12、0.035、0.14和0.007 mg·L^(-1) 。风险表征结果显示,我国江苏省南京市太湖地表水中的草甘膦浓度最高,高达52 mg·L^(-1) ,国内外仅7.69%的水体为急性高风险水体,15.38%的水体为慢性高风险水体。上述研究结果可为草甘膦的水质标准制定和区域管理对策实施提供科学依据。 展开更多

关键词 草甘膦 水生生物 生态风险 毒性百分数排序法 物种敏感度分布法 水质基准

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内镜下改良硬化剂注射联合套扎治疗Ⅲ度内痔出血合并肝硬化的分析 被引量：2

8

作者 丁之昊 徐华兵 +4 位作者 宣佶 张敏芬 仇玉平 张鹏举 汪芳裕 《医学研究与战创伤救治》 CAS 北大核心 2023年第4期409-411,共3页

肝硬化合并内痔出血行内痔切除术会有进一步出血的风险,保守治疗效果较差。本文报道1例Ⅲ度内痔出血合并肝硬化的患者行改良后的内镜下硬化剂联合套扎治疗,术后内痔症状明显改善,无出血等相关并发症,现报道如下。1病例资料患者男性,74岁... 肝硬化合并内痔出血行内痔切除术会有进一步出血的风险,保守治疗效果较差。本文报道1例Ⅲ度内痔出血合并肝硬化的患者行改良后的内镜下硬化剂联合套扎治疗,术后内痔症状明显改善,无出血等相关并发症,现报道如下。1病例资料患者男性,74岁,汉族,因“大便有肿物脱出、出血5年,加重5 d”入院。2017年无明显诱因下出现大便时有肿块脱出,需用手还纳;排便带血,为黄色成形便表面覆盖鲜红色鲜血;偶有排便时肛门口疼痛感;偶有肛门瘙痒,肛周分泌物,平素大便不畅。于2019年行内镜下内痔套扎治疗后,未见明显好转。于普通外科门诊咨询,建议保守治疗。本次入院5 d前症状加重。 展开更多

关键词 内痔 肝硬化 内镜 硬化剂联合套扎

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城市公园空间使用绩效与交通可达性关系研究--以昆明市中心城区为例

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作者 陈桔 王芳宇 何保红 《西部人居环境学刊》 CSCD 2023年第4期16-22,共7页

公园是城市重要的公共开放空间。公共设施或空间的建设运营投入较高与部分空间实际使用绩效较低形成现实矛盾。为了推进城市蓝绿空间的高质量发展,充分发挥公共空间的公共性,研究者不断从更多视角关注公共设施或空间的使用绩效与可达性... 公园是城市重要的公共开放空间。公共设施或空间的建设运营投入较高与部分空间实际使用绩效较低形成现实矛盾。为了推进城市蓝绿空间的高质量发展,充分发挥公共空间的公共性,研究者不断从更多视角关注公共设施或空间的使用绩效与可达性。以昆明市中心城区31个城市公园为例,提出测度公园空间使用绩效更具有时效性和准确性的数据和方法,然后结合多种交通方式可达性建立线性回归模型,量化两者的关联性;最后根据不同聚类的关系来分析四类公园的特征、空间分布规律和相关影响因素。研究结果表明:步行可达性对公园外部空间使用绩效影响最显著;大部分公园空间使用绩效和交通可达性较为匹配,但低水平匹配居多,需要从空间平衡布局方面提出城市公共资源有效配置的规划策略;对关系不匹配的公园,需要关注公园运营管理和周边建设两方面存在的滞后要素。研究结果对城市公园公共性的充分发挥和持续性建设具有现实意义。 展开更多

关键词 空间使用绩效 交通可达性 城市公园 丘陵地区 昆明

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不同育苗方式杉木苗生长性状及相关性分析 被引量：6

10

作者 孟庆银 张运根 +7 位作者 陈清惠 林东典 许建伟 刘国昌 王芳宇 刘一德 许鲁平 陈道顺 《山东林业科技》 2023年第3期77-83,共7页

为探究不同育苗方式杉木培育的苗木差异,2022年12月开展杉木扦插裸根苗、杉木扦插容器苗、杉木实生裸根苗和杉木实生容器苗生长量、生物量测定,结果表明:杉木扦插裸根苗和杉木实生裸根苗,相对4种不同育苗方式杉木苗高、地径和总生物量... 为探究不同育苗方式杉木培育的苗木差异,2022年12月开展杉木扦插裸根苗、杉木扦插容器苗、杉木实生裸根苗和杉木实生容器苗生长量、生物量测定,结果表明:杉木扦插裸根苗和杉木实生裸根苗,相对4种不同育苗方式杉木苗高、地径和总生物量总数平均值高出45.0%、25.5%,38.3%、14.9%和56.1%、33.3%;杉木扦插容器苗和杉木实生容器苗,相对4种不同育苗方式杉木苗高、地径和总生物量总数平均值低出52.1%、53.9%,30.6%、42.4%和46.2%、119.2%;依据苗木质量指数(QI)值评价结果分析,杉木扦插裸根苗苗木质量最优,依次是杉木实生裸根苗、杉木扦插容器苗和杉木实生容器苗,通过相关性分析4种不同育苗方式杉木苗生长量和生物量均呈正相关。 展开更多

关键词 杉木 不同育苗方式 生长量 生物量

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考虑越限程度的断面功率灵敏度控制方法

11

作者 王方雨 王海云 +3 位作者 于希娟 张再驰 陈茜 杨莉萍 《电网技术》 EI CSCD 北大核心 2023年第9期3847-3854,共8页

针对断面潮流控制模型复杂度高、非线性强导致的求解困难问题,提出了基于节点综合灵敏度的断面功率越限控制方法。首先建立关键断面功率越限控制模型,尽可能提升调整速度的同时减小调整代价及调整量;为快速求解该模型,考虑断面越限程度... 针对断面潮流控制模型复杂度高、非线性强导致的求解困难问题,提出了基于节点综合灵敏度的断面功率越限控制方法。首先建立关键断面功率越限控制模型,尽可能提升调整速度的同时减小调整代价及调整量;为快速求解该模型,考虑断面越限程度,对传统灵敏度进行改进,提出节点综合灵敏度的概念,量化表征控制节点有功功率对断面功率的影响程度;然后基于节点综合灵敏度对控制节点进行筛选和排序,并确定控制量的大小。最后,基于IEEE 39节点系统进行仿真验证,表明所提方法可以有效控制断面越限量,并使得系统调整量最小。 展开更多

关键词 输电断面 越限控制 节点综合灵敏度 控制量分摊

原文传递

适配体在生物毒素检测中的应用进展 被引量：6

12

作者 王耀 李少珍 +4 位作者 游一 王珊 李志娟 胡骁飞 王方雨 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2018年第2期1-6,共6页

食物中毒是一类重要的食源性疾病,近年来由生物毒素引起的食物中毒事件频繁出现,引起了社会广泛关注,对于食品中生物毒素的快速、高效检测提出了更高要求。在众多快速检测技术中,基于适配体的检测方法是目前的研究热点之一。作为新型识... 食物中毒是一类重要的食源性疾病,近年来由生物毒素引起的食物中毒事件频繁出现,引起了社会广泛关注,对于食品中生物毒素的快速、高效检测提出了更高要求。在众多快速检测技术中,基于适配体的检测方法是目前的研究热点之一。作为新型识别工具,适配体具有特异性强、亲和力高、制备成本低等明显优势,已被应用于食品中危害物质的识别检测。对适配体及其在各类生物毒素检测中的应用进行综述,并对该技术存在的问题及其发展方向进行探讨,以期促进基于适配体的检测方法在生物毒素快速检测中得到进一步的推广和应用。 展开更多

关键词 适配体 生物毒素 检测

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草甘膦人工抗原的制备及兔源多抗的ELISA鉴定 被引量：3

13

作者 王晶 王耀 +6 位作者 王方雨 邓瑞广 胡骁飞 余秋颖 郝俊芳 邢云瑞 侯玉泽 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第4期65-69,共5页

采用1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide hydrochloride,EDC)法和戊二醛(glutaraldehyde,GA)法,合成了草甘膦(N-(phosphonomethyl)glycine,PMG)人工抗原,通过免疫制备高敏感性、特异性的... 采用1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide hydrochloride,EDC)法和戊二醛(glutaraldehyde,GA)法,合成了草甘膦(N-(phosphonomethyl)glycine,PMG)人工抗原,通过免疫制备高敏感性、特异性的兔PMG多克隆抗血清并进行鉴定。将PMG分别与牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)和鸡卵清白蛋白(ovalbumin,OVA)偶联,合成免疫抗原PMG-BSA和包被抗原PMG-OVA。经紫外扫描、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定后,免疫新西兰大白兔,制备多抗。利用间接酶联免疫吸附(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)方法测定多抗效价,间接竞争ELISA方法测定血清的敏感性和特异性。结果表明,免疫的3只兔血清效价均达1∶104以上,2号兔多抗效果最好,半数抑制浓度(IC50)为30.9μg/m L,且具备良好的特异性。本实验成功合成了PMG人工抗原,并制得了敏感性高、特异性好的兔多抗,为PMG的免疫学快速检测方法的提供参考。 展开更多

关键词 草甘膦 人工抗原 多抗 酶联免疫吸附检测

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基于图论和潮流追踪的网损分摊方法 被引量：5

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作者 刘文颖 陈鑫鑫 +2 位作者 王方雨 刘福潮 王耿 《华北电力大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2020年第5期1-9,共9页

随着电力系统各经济主体的多元化发展,传统的网损分摊方法由于计算过程复杂已不能满足多主体分摊的需求。提出了一种基于图论和潮流追踪的网损分摊方法,首先以区域为经济主体,基于图论将复杂电力网络划分成多个区域,然后采用潮流追踪法... 随着电力系统各经济主体的多元化发展,传统的网损分摊方法由于计算过程复杂已不能满足多主体分摊的需求。提出了一种基于图论和潮流追踪的网损分摊方法,首先以区域为经济主体,基于图论将复杂电力网络划分成多个区域,然后采用潮流追踪法对各区域主体进行网损分摊计算;其次在区域内以独立个体为经济主体进行网损分摊,并考虑了区域分摊损耗对独立个体网损分摊的影响,显著降低了计算的复杂性,提高了计算速度,最后以IEEE14节点数据为例进行仿真计算,验证了本文提出的分摊方法的有效性和优越性。 展开更多

关键词 网络损耗 分摊方法 图论 区域划分 潮流追踪

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反射式激光共聚焦显微镜性能变尺度评价方法 被引量：1

15

作者 王方雨 孙强 +3 位作者 戴明 刘昕辉 王成 金夕雅 《红外与激光工程》 EI CSCD 北大核心 2019年第3期195-200,共6页

为了更好地实现无创、实时、动态的皮肤层析成像,提高成像信噪比,需要对反射式激光共聚焦系统性能进行全面的评价。在此引入结构函数进行变尺度波前评价。首先对结构函数的基本数学性质进行了推导,着重分析了不同尺度的波像差在结构函... 为了更好地实现无创、实时、动态的皮肤层析成像,提高成像信噪比,需要对反射式激光共聚焦系统性能进行全面的评价。在此引入结构函数进行变尺度波前评价。首先对结构函数的基本数学性质进行了推导,着重分析了不同尺度的波像差在结构函数中的体现;之后,利用数值仿真对Zernike多项式进行了分析,验证了结构函数对低阶像差的表征能力。由于显微镜在使用时必然需要穿过皮肤组织,故在检测过程也需要考虑人体组织的影响,分析了其对系统信噪比的影响;最后,对实际显微镜系统的波前进行了分析,得到系统标校后的信噪比为95.7d B,验证了方法的正确性与可行性。通过变尺度评价方法,可以对无创成像系统进行更加全面的评价,并可以有效地指导类似设备的检测装调工作。 展开更多

关键词 波像差 功率谱密度 共聚焦显微镜 结构函数

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水合三环己基锡4-吡啶甲酸酯配合物的合成、结构及抗癌活性 被引量：1

16

作者 何丽芳 张复兴 +3 位作者 李宗泽 王芳宇 刘最 陈佩云 《合成化学》 CAS 2022年第7期521-526,共6页

三环己基氢氧化锡与4-吡啶甲酸按物质的量比1∶1在乙醇溶剂中反应,合成了水合三环己基锡4-吡啶甲酸酯配合物。采用元素分析、红外光谱、核磁共振、差热分析和X-射线单晶衍射等对配合物进行了结构表征,并对配合物进行量子化学计算和体外... 三环己基氢氧化锡与4-吡啶甲酸按物质的量比1∶1在乙醇溶剂中反应,合成了水合三环己基锡4-吡啶甲酸酯配合物。采用元素分析、红外光谱、核磁共振、差热分析和X-射线单晶衍射等对配合物进行了结构表征,并对配合物进行量子化学计算和体外抗癌活性研究。结果表明:配合物中心锡原子为五配位畸变三角双锥构型;配合物对人肝癌细胞(HUH7)、人肺腺癌细胞(A549)、人表皮癌细胞(A431)和人结肠癌细胞(HCT-116)的抑制活性高于顺铂。 展开更多

关键词 水合三环己基锡4-吡啶甲酸酯配合物 晶体结构 量子化学 体外抗肿瘤活性 合成 构型

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氟苯尼考琥珀酸钠抗原的制备与鉴定 被引量：1

17

作者 张春辉 邢广旭 +3 位作者 胡骁飞 王方雨 邓瑞广 张改平 《中兽医医药杂志》 2017年第6期17-20,共4页

为获得效价高、特异性好的氟苯尼考的小鼠多抗血清,建立氟苯尼考的免疫学检测方法。选用氟苯尼考琥珀酸钠为靶标,用活化酯法将其分别与牛血清蛋白(albumin from bovine serum,BSA)和卵清蛋白(ovalbumin,OVA)进行偶联,制备F-S-Na-BSA人... 为获得效价高、特异性好的氟苯尼考的小鼠多抗血清,建立氟苯尼考的免疫学检测方法。选用氟苯尼考琥珀酸钠为靶标,用活化酯法将其分别与牛血清蛋白(albumin from bovine serum,BSA)和卵清蛋白(ovalbumin,OVA)进行偶联,制备F-S-Na-BSA人工免疫原和F-S-Na-OVA包被原,并用紫外扫描(UV)和SDS-PAGE法鉴定。用50μg/只剂量免疫8周龄的BALB/c小白鼠,制备小鼠多抗血清(pAb),用间接ELISA测定多抗血清(pAb)的效价和特异性。结果:220~350 nm内,F-S-Na-BSA和F-S-Na及BSA的最大吸收峰发生了位移;在SDS-PAGE凝胶电泳中,F-S-Na-BSA的迁移量比BSA略小,与预期的结果相符合。免疫的63只小鼠效价均达到1∶6 400以上;效价最高的1号小鼠IC_(50)≈10μg/m L。结论:F-S-Na-BSA偶联成功,注射小鼠获得了良好的免疫效果,但该多抗血清特异性较差。 展开更多

关键词 氟苯尼考 血清浓度 鸡 人工抗原

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猪流行性腹泻病毒E蛋白诱发细胞未折叠反应的分子机制

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作者 邢广旭 焦文强 +1 位作者 王方雨 张改平 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2022年第9期60-65,共6页

为阐明猪流行性腹泻病毒(PEDV) E蛋白诱导Vero-E6细胞内质网应激分子机制,采用RT-PCR方法扩增得到E蛋白基因,经XhoⅠ和BamHⅠ酶切后与同样酶切的p-EGFP-N1载体使用T4 DNA连接酶进行连接,成功构建了表达载体,与pCDNA 3.1-GRP78共转染Vero... 为阐明猪流行性腹泻病毒(PEDV) E蛋白诱导Vero-E6细胞内质网应激分子机制,采用RT-PCR方法扩增得到E蛋白基因,经XhoⅠ和BamHⅠ酶切后与同样酶切的p-EGFP-N1载体使用T4 DNA连接酶进行连接,成功构建了表达载体,与pCDNA 3.1-GRP78共转染Vero-E6细胞,通过激光共聚焦试验和Western blot验证E蛋白的细胞定位,并揭示其激活细胞内质网应激的分子机制。结果表明,通过共聚焦荧光显微镜证实E蛋白定位在细胞中,Western blot方法验证E蛋白可以上调Vero-E6细胞GRP78蛋白表达水平,诱导Vero细胞内质网应激。进一步采用Western blot验证E蛋白通过PERK-eIF2α信号通路激活未折叠蛋白反应。本研究为探究PEDV致病机制提供了新的思路。 展开更多

关键词 猪流行性腹泻病毒 E蛋白 信号通路

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KLK7小分子抑制剂对卵巢癌SKOV3细胞增殖、侵袭与转移的影响

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作者 何丽芳 王芳宇 +1 位作者 李宗泽 刘最 《衡阳师范学院学报》 2022年第6期59-64,共6页

为了探讨KLK7小分子抑制剂G284-1264对卵巢癌SKOV3细胞增殖、侵袭和转移的影响,采用MTT法检测G284-1264处理后细胞的存活率;钙黄绿素-AM/PI活细胞/死细胞双染和流式细胞术检测细胞凋亡、细胞周期分布,同时用细胞划痕实验检测G284-1264对... 为了探讨KLK7小分子抑制剂G284-1264对卵巢癌SKOV3细胞增殖、侵袭和转移的影响,采用MTT法检测G284-1264处理后细胞的存活率;钙黄绿素-AM/PI活细胞/死细胞双染和流式细胞术检测细胞凋亡、细胞周期分布,同时用细胞划痕实验检测G284-1264对SKOV3细胞侵袭与转移的影响。结果显示:相同时间作用下,随着G284-1264浓度增大,SKOV3细胞存活率逐渐降低,24 h、48 h和72 h的IC50分别为110.0、48.62和39.64μmol/L,相比5-FU,G284-1264对SKOV3细胞表现出更强的抗增殖能力;钙黄绿素-AM/PI对细胞进行双染后,G284-1264作用组细胞活力明显降低;流式细胞术分析发现,G284-1264作用组G1期的细胞数目增加,G2期明显降低,且凋亡率高于空白组和阳性对照组;划痕实验表明G284-1264处理细胞36 h后,细胞迁移率降低16.49%。以上结果表明KLK7小分子抑制剂G284-1264能明显抑制人卵巢癌SKOV3细胞的增殖、侵袭与转移。 展开更多

关键词 KLK7小分子抑制剂 卵巢癌SKOV3细胞 增殖 侵袭与转移

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内镜套扎器辅助黏膜下挖除术治疗消化道黏膜下肿瘤的应用研究 被引量：7

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作者 王震凯 刘丹 +7 位作者 刘翔 沈蒙蒙 董国华 刘灿辉 吴行 马云 汪芳裕 樊志敏 《胃肠病学》 2020年第6期358-362,共5页

背景:目前治疗消化道黏膜下肿瘤(SMT)的内镜技术多样,但多因操作难度大、对操作者要求高、培训周期长等原因而无法在基层医院推广应用。目的:评价内镜套扎器辅助黏膜下挖除术(ESE-LD)治疗消化道小SMT的可行性和安全性。方法:收集南京中... 背景:目前治疗消化道黏膜下肿瘤(SMT)的内镜技术多样,但多因操作难度大、对操作者要求高、培训周期长等原因而无法在基层医院推广应用。目的:评价内镜套扎器辅助黏膜下挖除术(ESE-LD)治疗消化道小SMT的可行性和安全性。方法:收集南京中医药大学附属南京中医院和东部战区总医院2014年1月—2019年7月因消化道小SMT(直径<2 cm)接受ESE-LD治疗的患者75例,对其临床资料进行回顾性分析。结果:75例消化道小SMT中,病变起源于黏膜下层42例,起源于固有肌层33例。病变位于食管18例,胃30例,十二指肠6例,结直肠21例。病变直径0.5~2 cm,平均(13±3)mm。所有病灶均一次性整块切除,平均手术时间(16.7±3.2)min,平均住院时间(5.08±1.21)d。无病例术后发生迟发性出血、穿孔并发症,无病例需外科手术干预。术后平均随访(33.8±5.2)个月,无复发病例。结论:ESE-LD治疗直径小于2 cm的消化道SMT安全、有效,操作简单,操作时间短,有利于在基层医院推广应用。 展开更多

关键词 内镜套扎器辅助黏膜下挖除术 胃肠肿瘤 黏膜下肿瘤 治疗结果 安全

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