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Erratum to:Influence law of modified glutinous rice-based materials on gravel soil reinforcement and water erosion process
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作者 ZHANG Wen-xiang PEI Xiang-jun +4 位作者 ZHANG Xiao-chao wu xue-min XIAO Wei-yang QIN Liang ZHU Jin-yu 《Journal of Mountain Science》 SCIE CSCD 2024年第2期718-718,共1页
The original online version of this article was revised.The first author is“ZHANG Weng-xiang”in the original article.The first author’s name has been corrected to“ZHANG Wen-xiang”.
关键词 revised xiang EROSION
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Influence law of modified glutinous rice-based materials on gravel soil reinforcement and water erosion process
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作者 ZHANG Weng-xiang PEI Xiang-jun +4 位作者 ZHANG Xiao-chao wu xue-min XIAO Wei-yang QIN Liang ZHU Jin-yu 《Journal of Mountain Science》 SCIE CSCD 2023年第12期3552-3567,共16页
A large number of loose piles formed by mountain hazards are highly susceptible to hydraulic erosion under rainfall conditions.The use of ecological substrate materials for erosion control and ecological restoration o... A large number of loose piles formed by mountain hazards are highly susceptible to hydraulic erosion under rainfall conditions.The use of ecological substrate materials for erosion control and ecological restoration of gravel soil slopes has become a current research hotspot and the study difficulty.The post-earthquake slump accumulation gravel soil in Jiuzhaigou was selected as the research object,and the self-developed modified glutinous rice-based material was used to reinforce the gravel soil.The variable slope flume erosion test and rainfall simulation test were carried out to study the water erosion resistance of the material reconstructed soil under the influence of runoff erosion and raindrop splash erosion.The results show that:As the material content reached 12.5%,the reconstructed soil did not disintegrate after 24 hours of immersion,the internal friction angle was increased by 42.26%,and the cohesion was increased by 235.5%,which played a significant reinforcement effect.In the process of slope erosion,the soil rill erodibility parameter Kr was only 3‰ of the gravel soil control group,the critical shear force τ increased by 272%,and the soil erosion resistance was significantly improved.In the process of rainfall and rainfall on the slope,the runoff intensity of the reconstructed soil was stable,and the ability to resist runoff erosion and raindrop splash erosion was enhanced.The maximum value of soil loss rate on different slope slopes is 0.02-0.10 g·m^(-2)s^(-1),which is significantly lower than that of the control group and has better erosion reduction effect. 展开更多
关键词 Modified glutinous rice substrate Gravel soil Soil reconstruction Trauma repair Water erosion
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变异猪流行性腹泻病毒M和N双基因融合真核表达及其活性鉴定 被引量:4
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作者 王隆柏 陈秋勇 +3 位作者 吴学敏 陈如敬 车勇良 周伦江 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期3083-3089,共7页
【目的】体外表达变异猪流行性腹泻病毒(PEDV)的M-N双基因融合蛋白并明确其生物活性,为开展PEDV新型疫苗及其诊断技术研究提供更多的候选蛋白。【方法】将变异PEDV的M基因克隆至pEASY-Blunt M2(pM2)真核表达载体构建pM2-M真核质粒,通过... 【目的】体外表达变异猪流行性腹泻病毒(PEDV)的M-N双基因融合蛋白并明确其生物活性,为开展PEDV新型疫苗及其诊断技术研究提供更多的候选蛋白。【方法】将变异PEDV的M基因克隆至pEASY-Blunt M2(pM2)真核表达载体构建pM2-M真核质粒,通过同源重组将N基因克隆至M2-M基因片段构建pM2-M-N双基因融合重组质粒,然后转染293T细胞表达出M-N双基因融合蛋白。通过Western blotting、ELISA及免疫BLAB/c小鼠试验鉴定表达融合蛋白的生物学活性。【结果】扩增获得的M基因、N基因片段大小分别为678和1359 bp,且与原序列的相似性均达100.0%。将M基因和N基因并连接至pM2真核表达载体成功构建获得pM2-M-N双基因融合重组质粒,M-N双基因片段大小为2004 bp,且与原序列的相似性为99.3%。以pM2-M-N双基因融合重组质粒转染239T细胞,表达出大小约75 kD且具有免疫活性的M-N双基因融合蛋白,纯化的M-N双基因融合蛋白能与PEDV阳性血清反应,与猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、伪狂犬病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪瘟病毒(CSFV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)等病毒均无交叉反应;以其免疫BLAB/c小鼠能诱导产生特异性抗体。【结论】通过pM2真核表达载体能构建获得变异PEDV毒株的pM2-M-N融合双基因重组质粒,转染293T细胞后可表达出具有良好免疫活性的M-N双基因融合蛋白,为后期开展变异PEDV基因工程疫苗及其诊断技术研究提供更多的候选蛋白。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒(PEDV) M基因 N基因 双基因 融合蛋白
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猪圆环病毒3型去核定位信号的Cap蛋白原核表达 被引量:5
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作者 陈如敬 吴学敏 +4 位作者 陈秋勇 严山 车勇良 王晨燕 周伦江 《动物医学进展》 北大核心 2020年第11期24-28,共5页
为探讨猪圆环病毒3型(PCV3)去核定位信号结构蛋白(Cap)的生物学功能及其在血清学检测中的作用,应用Oligo 7.0软件设计特异性引物序列,采用PCR方法从PCV3福建株阳性核酸中扩增获得其去核定位信号的Cap基因片段。将目的片段克隆到原核表... 为探讨猪圆环病毒3型(PCV3)去核定位信号结构蛋白(Cap)的生物学功能及其在血清学检测中的作用,应用Oligo 7.0软件设计特异性引物序列,采用PCR方法从PCV3福建株阳性核酸中扩增获得其去核定位信号的Cap基因片段。将目的片段克隆到原核表达载体pET28a(+)上获得阳性重组表达质粒pET28a-Cap,进行原核表达条件优化。经SDS-PAGE分析其最优表达条件为IPTG浓度为0.4 mmol/L、37℃诱导表达4 h,目的蛋白大小约为25 ku。表达的去核定位信号Cap蛋白经Western blot和ELISA分析,具有良好的生物学活性。研究结果为开展PCV3去核定位信号基因功能研究和储备血清学诊断试剂盒奠定了基础。 展开更多
关键词 猪圆环病毒3型 去核定位信号 结构蛋白 原核表达
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多黏菌素耐药基因mcr-1重组酶介导扩增方法的建立及应用 被引量:4
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作者 车勇良 陈秋勇 +4 位作者 陈如敬 吴学敏 王隆柏 刘玉涛 周伦江 《动物医学进展》 北大核心 2022年第8期46-49,共4页
根据多黏菌素耐药基因mcr-1的保守序列,设计合成一对重组酶介导扩增方法(RAA)特异性引物和一条FAM标记的荧光探针,优化扩增条件,建立了检测多黏菌素耐药基因mcr-1的RAA方法,验证其特异性和敏感性,并应用于临床检测。结果显示,建立的RAA... 根据多黏菌素耐药基因mcr-1的保守序列,设计合成一对重组酶介导扩增方法(RAA)特异性引物和一条FAM标记的荧光探针,优化扩增条件,建立了检测多黏菌素耐药基因mcr-1的RAA方法,验证其特异性和敏感性,并应用于临床检测。结果显示,建立的RAA方法只需21 min就能出结果,能特异性地检测多黏菌素耐药基因mcr-1,最低能检测出10~2的mcr-1阳性质粒拷贝数,也可很好地检测出临床样品中的mcr-1基因。4株临床分离大肠埃希氏菌株样品,有2株mcr-1基因阳性,2株为mcr-1基因阴性。 展开更多
关键词 多黏菌素 耐药基因 mcr-1 重组酶介导扩增方法
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变异猪流行性腹泻病毒M和N融合双基因的原核表达及表达产物免疫原性分析 被引量:2
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作者 王隆柏 王晨燕 +4 位作者 吴学敏 陈秋勇 车勇良 陈如敬 周伦江 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期1249-1255,共7页
旨在构建变异猪流行性腹泻病毒(PEDV)的M和N双基因融合质粒,并分析表达蛋白免疫原性。通过扩增变异PEDV FJFQ2014毒株(GenBank登陆号KJ646580)的M基因和N基因,将M基因克隆至pEASY-Blunt E2(pE2)表达载体,构建出pE2-M质粒。利用同源重组... 旨在构建变异猪流行性腹泻病毒(PEDV)的M和N双基因融合质粒,并分析表达蛋白免疫原性。通过扩增变异PEDV FJFQ2014毒株(GenBank登陆号KJ646580)的M基因和N基因,将M基因克隆至pEASY-Blunt E2(pE2)表达载体,构建出pE2-M质粒。利用同源重组原理,采用无缝拼接试剂盒将N基因克隆至E2-M片段,转化到Trans 1-T1感受态细胞中,构建出pE2-M-N融合双基因质粒并转化Transetta(DE3),表达出相应的融合蛋白,采用SDS-PAGE和Western blot验证蛋白的表达情况。将纯化的M-N融合蛋白皮下接种BLAB/c小鼠,通过ELISA方法检测融合蛋白的免疫原性。结果表明:扩增出M和N基因,成功构建了pE2-M质粒,并将E2-M基因与N基因进行有效连接,构建出pE2-M-N融合双基因质粒,表达出了具有免疫原性的M-N融合蛋白,该蛋白能够诱导小鼠产生相应的特异性抗体。变异PEDV的pE2-M-N双基因融合质粒的构建,为进一步开展变异PEDV的诊断技术和免疫学等研究,奠定良好基础。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 PEDV M基因 N基因 双基因表达
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气候环境实验室降雪环境模拟技术研究 被引量:5
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作者 任战鹏 吴敬涛 +1 位作者 吴学敏 成竹 《装备环境工程》 CAS 2020年第1期119-123,共5页
目的建立实验室降雪环境模拟技术,为飞机等武器装备降雪环境适应性试验验证提供技术支持。方法基于对自然降雪和实验室模拟降雪机理的对比与分析,提出影响实验室内模拟降雪的关键因素,并结合理论分析和试验研究,得出实验室内模拟降雪环... 目的建立实验室降雪环境模拟技术,为飞机等武器装备降雪环境适应性试验验证提供技术支持。方法基于对自然降雪和实验室模拟降雪机理的对比与分析,提出影响实验室内模拟降雪的关键因素,并结合理论分析和试验研究,得出实验室内模拟降雪环境的冷负荷计算方法和最优成雪的水粒直径。结果建立了实验室降雪环境模拟技术,采用该降雪环境模拟技术,降雪强度及降雪品质均满足飞机等武器装备降雪环境适应性试验验证需求。结论建立的降雪环境模拟技术切实有效,可用于实验室飞机等武器装备降雪环境适应性试验研究。 展开更多
关键词 气候环境实验室 降雪环境模拟 冷负荷 水粒直径
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新型伪狂犬病病毒gB、gC蛋白串联表达及免疫活性分析 被引量:1
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作者 吴学敏 陈如敬 +5 位作者 陈秋勇 王隆柏 车勇良 严山 刘玉涛 周伦江 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2022年第5期60-65,共6页
为研究新型PRV毒株主要抗原表位,并获得具有良好免疫原性的表位串联体,本研究通过扩增新型PRV FJ-2012株gB、gC蛋白基因片段,经密码子优化后构建串联表达序列,并链接原核表达载体pET-28a(+)克隆位点,转化至BL21(DE3)感受态细胞,利用IPT... 为研究新型PRV毒株主要抗原表位,并获得具有良好免疫原性的表位串联体,本研究通过扩增新型PRV FJ-2012株gB、gC蛋白基因片段,经密码子优化后构建串联表达序列,并链接原核表达载体pET-28a(+)克隆位点,转化至BL21(DE3)感受态细胞,利用IPTG诱导表达获得gBC串联蛋白,并用间接ELISA法测定其兔多克隆抗体血清效价,通过Western blot、间接免疫荧光试验评价其免疫活性。结果表明成功构建了PRV-gBC串联蛋白表达体系,并获得新型PRV FJ-2012株gBC串联重组蛋白;ELISA检测其克隆抗体血清效价可以达到1∶6400,Western blot试验显示gBC串联蛋白与多抗血清能产生特异性反应,免疫荧光试验说明克隆抗体血清能与FJ-2012株抗原发生免疫反应。本研究串联表达的新型PRV FJ-2012株gB、gC跨膜区域蛋白具有良好的免疫活性,为进一步研究新型PRV优势抗原表位奠定了基础。 展开更多
关键词 伪狂犬病病毒 gB蛋白 gC蛋白 串联表达 免疫活性
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一株猪链球菌的分离鉴定及其防治 被引量:1
9
作者 王隆柏 郑丽英 +4 位作者 陈秋勇 吴学敏 陈如敬 车勇良 周伦江 《福建农业科技》 CAS 2021年第7期26-29,共4页
从福建某发病规模猪场保育猪的肺脏中分离到1株细菌,根据分离细菌的形态观察、生化试验、培养特性、PCR鉴定和动物攻毒试验,结合发病猪的临床症状和病理变化,表明该分离菌为偏向厌氧型链球菌,具有在血平板上培养良好且能致小白鼠发病死... 从福建某发病规模猪场保育猪的肺脏中分离到1株细菌,根据分离细菌的形态观察、生化试验、培养特性、PCR鉴定和动物攻毒试验,结合发病猪的临床症状和病理变化,表明该分离菌为偏向厌氧型链球菌,具有在血平板上培养良好且能致小白鼠发病死亡等特性。药敏试验表明:分离链球菌对万古霉素、亚胺培南、利奈唑胺和菌必治高度敏感,对阿莫西林、氟苯尼考、头孢噻肟、呋喃妥因和替加环素中度敏感,对卡多西环素、多粘菌素、青霉素、链霉素、恩诺沙星等药物不敏感。猪场根据药敏结果,采取紧急防治措施,疫情5 d后得到有效控制。 展开更多
关键词 猪链球菌 分离鉴定 防治
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基于深层知识建构的小学综合实践课程的教学策略研究 被引量:6
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作者 张红艳 吴雪敏 张义兵 《兵团教育学院学报》 2020年第6期18-23,共6页
随着新课改的深入推进及教育信息化2.0行动计划的出台,利用新的教育理念变革教与学的过程,实现学习过程从浅层到深层的转变需求越来越迫切。知识建构是学习科学领域中的一种创新式教学理念,国内外研究实践表明它在促进学生深层知识建构... 随着新课改的深入推进及教育信息化2.0行动计划的出台,利用新的教育理念变革教与学的过程,实现学习过程从浅层到深层的转变需求越来越迫切。知识建构是学习科学领域中的一种创新式教学理念,国内外研究实践表明它在促进学生深层知识建构方面发挥着积极的作用。研究根据综合实践课程的特点和知识建构的教学原则,以“观点”为中心,将小学综合实践课程划分为观点提出阶段、观点联结阶段和观点收敛阶段,提出了对应的观点激发策略、对话形成策略和讨论推进策略、共识整合策略。通过小学六年级综合实践课程的实践表明,基于深层知识建构的小学综合实践课程的教学设计策略,能够在一定程度上促进学生主动建构社区共享知识和学生高阶思维的发展,有利于实现深层学习的发生和发展。 展开更多
关键词 深层学习 知识建构 综合实践课程 教学策略
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O_(78)血清型大肠杆菌对蛋鸡的致病性及丙/丁酸单甘油酯的保护效果
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作者 刘玉涛 凌清标 +3 位作者 黄宝钦 吴学敏 王隆柏 周伦江 《福建农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期209-213,共5页
【目的】研究O_(78)血清型大肠杆菌对蛋鸡的致病性,以及单甘油酯对蛋鸡O_(78)血清型大肠杆菌不同致病方式的保护效果,为绿色无抗养鸡提供理论支撑和实践经验。【方法】对福建省某鸡场分离的血清型O_(78)禽源致病性大肠杆菌(APEC),采用... 【目的】研究O_(78)血清型大肠杆菌对蛋鸡的致病性,以及单甘油酯对蛋鸡O_(78)血清型大肠杆菌不同致病方式的保护效果,为绿色无抗养鸡提供理论支撑和实践经验。【方法】对福建省某鸡场分离的血清型O_(78)禽源致病性大肠杆菌(APEC),采用口服、颈部皮下和气管内壁接种不同日龄的试验鸡,评价菌株的致病性,建立攻毒模型,然后评估以丙酸单甘油酯、丁酸单甘油酯为主要成分的水溶性液态添加物FraC34对鸡大肠杆菌病的保护效果。【结果】(1)12日龄海兰蛋鸡雄雏口服接种细菌3.0×10~9CFU·羽^(-1),可造成100%发病;但22日龄海兰蛋鸡雄雏分别口服接种细菌3.0×10~9CFU·羽^(-1)和6.0×10~9CFU·羽^(-1)时不发病。12日龄海兰蛋鸡雄雏颈部皮下接种细菌0.4×10~9CFU·羽^(-1),可造成70%的试验鸡发病,22日龄海兰蛋鸡雄雏气管内壁接种细菌1.5×10~9CFU·羽^(-1),可造成25%鸡只发病;(2)在饮水中添加FraC34,早期可改善鸡肠道健康,降低肠道对APEC的易感性,在饮水中添加2~3 L·m^(-3)的FraC34,能够显著降低经由口服途径感染APEC造成的发病率和死亡率,还能够降低经气管内壁接种APEC所造成的死亡率,并且显著降低发病率;当饮水添加3 L·m^(-3)时,可以维持感染鸡的日增重。【结论】鸡O_(78)血清型的APEC对幼雏具有极大的危害性,造成严重经济损失,而中大雏对该菌株具有一定的耐受性;养殖环节添加FraC34,对于鸡感染APEC具有一定的保护作用,并且可以维持鸡的生产性能,可替代部分抗生素的使用,达到较为理想的保护效果。 展开更多
关键词 禽致病性大肠杆菌 丙/丁酸单甘油酯 海兰蛋鸡 保护效果
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中日图书馆读者自我隐私保护意识比较研究 被引量:1
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作者 吴雪敏 《河北科技图苑》 2017年第4期49-54,共6页
为了全面比较中日两国图书馆读者隐私保护意识的不同,在构建读者隐私保护意识量表的基础上,设计中日读者隐私保护意识调查问卷,然后以日本岩手县盛岡市和我国陕西省西安市常住居民为对象展开调查。从宏观和微观两个层面进行比较分析,发... 为了全面比较中日两国图书馆读者隐私保护意识的不同,在构建读者隐私保护意识量表的基础上,设计中日读者隐私保护意识调查问卷,然后以日本岩手县盛岡市和我国陕西省西安市常住居民为对象展开调查。从宏观和微观两个层面进行比较分析,发现我国读者隐私保护意识的问题,并提出改进意见,以期丰富与完善图书馆读者隐私保护理论与实践。 展开更多
关键词 图书馆 隐私保护意识 中日 比较研究
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飞机实验室气候试验风险识别及分析
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作者 苏杭 吴学敏 吴敬涛 《装备环境工程》 CAS 2021年第7期38-43,共6页
目的研究飞机实验室气候试验过程中风险的识别及分析问题。方法根据飞机实验室气候试验流程,针对试验设计、试验准备、试验实施和试验确认等阶段进行风险识别和分析。结果及结论识别并分析出实验室气候试验各阶段的风险,并在国内首次某... 目的研究飞机实验室气候试验过程中风险的识别及分析问题。方法根据飞机实验室气候试验流程,针对试验设计、试验准备、试验实施和试验确认等阶段进行风险识别和分析。结果及结论识别并分析出实验室气候试验各阶段的风险,并在国内首次某民机实验室气候试验中得到应用。 展开更多
关键词 飞机 实验室气候试验 风险识别 风险分析
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资管行业基础法律关系之厘清与法律框架构建 被引量:1
14
作者 吴学敏 《海南金融》 2019年第4期36-43,81,共9页
资管界不规范,不利于投资者权益保护和资本市场健康发展。近期发布的《关于规范金融机构资产管理业务的指导意见》已呈现回归大信托格局倾向,但未明确资产管理人法定信义义务,且属于部门规章,监管仍在欠缺。建议司法层面遵守"实质... 资管界不规范,不利于投资者权益保护和资本市场健康发展。近期发布的《关于规范金融机构资产管理业务的指导意见》已呈现回归大信托格局倾向,但未明确资产管理人法定信义义务,且属于部门规章,监管仍在欠缺。建议司法层面遵守"实质重于形式"原则,确定资产管理人法定信义义务,明确资管产品"证券"本质,结合公法私法、宏观微观审慎监管全以全面实现对资管业洗牌,构建竞争有序的资产管理业秩序,实现资本市场融资功能、投资者保护两大目标。 展开更多
关键词 资产管理 信义义务 监管框架 投资者保护
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生、熟地黄对高脂饲料并链脲佐菌素诱导的2型糖尿病小鼠胰脏蛋白质组学与自噬差异性干预研究 被引量:5
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作者 闫京宁 刘晓琴 +12 位作者 孟祥龙 任可乐 吴学敏 张浩 王海琴 王红亮 盛淇 李斌 张钉邦 陈宏洲 张发昀 李明浩 张朔生 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期1535-1545,共11页
为探究生、熟地黄干预高脂饲料并链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导的2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)小鼠胰脏蛋白质组学与自噬的差异性,采用高脂饲料并STZ诱导(腹腔注射,100 mg·kg^(-1),每天1次,连续3 d)小鼠T2DM模... 为探究生、熟地黄干预高脂饲料并链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导的2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)小鼠胰脏蛋白质组学与自噬的差异性,采用高脂饲料并STZ诱导(腹腔注射,100 mg·kg^(-1),每天1次,连续3 d)小鼠T2DM模型,随机分为模型组(control),生地黄低、高剂量组(RRL,5 g·kg^(-1);RRH,15 g·kg^(-1)),梓醇低、高剂量组(catalpol-L,150 mg·kg^(-1);catalpol-H,300 mg·kg^(-1)),熟地黄低、高剂量组(RRPL,5 g·kg^(-1);RRPH,15 g·kg^(-1)),5-羟甲基糠醛低、高剂量组(5-HMF-L,150 mg·kg^(-1);5-HMF-H,300 mg·kg^(-1)),二甲双胍组(metformin,250 mg·kg^(-1)),同时设立正常组(normal),每组8只。给药4周后取胰脏,运用蛋白质组学探究生、熟地黄对T2DM小鼠胰脏组织中蛋白表达差异的影响;通过蛋白免疫印迹分析、免疫组织化学分析及透射电镜等技术研究T2DM小鼠胰脏组织中自噬、炎症和氧化应激相关蛋白的表达水平。结果显示,RR组与control组的差异蛋白中涉及动物自噬等7条可能与T2DM有关的KEGG通路;给药后T2DM小鼠胰脏组织中自噬相关蛋白Beclin1表达水平显著升高,磷酸化雷帕霉素靶蛋白(p-mammalian target of rapamycin,p-mTOR)/mTOR表达水平显著降低;炎症相关指标Toll样受体4(Toll-like receptor-4,TLR4)和Nod样受体蛋白3(Nod-like receptor protein 3,NLRP3)表达水平显著降低,且以生地黄降低效果更为显著;氧化应激相关指标一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、核转录因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)和血红素加氧酶-1(hine oxygenase-1,HO-1)表达水平显著降低,且以熟地黄降低效果更为显著。以上结果说明生、熟地黄均可改善T2DM小鼠胰脏组织中炎性症状、氧化应激反应及自噬水平,然诱导自噬途径存在差异。 展开更多
关键词 生地黄 熟地黄 2型糖尿病 蛋白质组学 自噬
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变异猪流行性腹泻病毒(PEDV)S和N融合双基因质粒的构建及鉴定 被引量:3
16
作者 王隆柏 王晨燕 +3 位作者 吴学敏 陈秋勇 车勇良 周伦江 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期2241-2246,共6页
为构建变异猪流行性腹泻病毒(PEDV)的S和N融合双基因质粒并表达出相应的蛋白,通过扩增变异PEDV的S和N基因,将S基因连接到pEAS-Blunt M2(M2)真核表达载体,构建M2-S质粒,通过同源重组原理,采用无缝拼接试剂盒将N基因克隆至M2-S基因片段,... 为构建变异猪流行性腹泻病毒(PEDV)的S和N融合双基因质粒并表达出相应的蛋白,通过扩增变异PEDV的S和N基因,将S基因连接到pEAS-Blunt M2(M2)真核表达载体,构建M2-S质粒,通过同源重组原理,采用无缝拼接试剂盒将N基因克隆至M2-S基因片段,再转化到Trans1-T1感受态细胞中,构建M2-S-N融合双基因质粒。将M2-S-N融合双基因质粒转染到293T细胞,可表达出相应的S-N融合双基因蛋白。利用RT-PCR、Western blot技术和免疫BLAB/c鼠试验鉴定载体及蛋白表达的免疫活性,结果成功构建了M2-S-N融合双基因质粒,并表达出具有免疫原性的S-N融合双基因蛋白,且该蛋白能够诱导小鼠产生特异性抗体。变异PEDV的S和N基因融合双基因质粒的构建,为进一步开展变异PEDV的诊断技术及基因工程疫苗等研究奠定良好基础。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒(PEDV) S基因 N基因 M2-S-N融合双基因
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乳香及其炮制品对葡聚糖硫酸钠诱导小鼠炎症性肠病的保护作用 被引量:3
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作者 周宜 刘晓琴 +4 位作者 吴学敏 张浩 王海琴 王红亮 孟祥龙 《现代药物与临床》 CAS 2022年第7期1432-1438,共7页
目的研究乳香及其炮制品对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠炎症性肠病的保护作用。方法采用DSS水溶液代替正常饮水建立炎症性肠病小鼠模型,将实验小鼠分为对照组、模型组、柳氮磺胺吡啶(300 mg/kg)组、生乳香(0.76 g/kg)组、醋乳香(0.76 g/... 目的研究乳香及其炮制品对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠炎症性肠病的保护作用。方法采用DSS水溶液代替正常饮水建立炎症性肠病小鼠模型,将实验小鼠分为对照组、模型组、柳氮磺胺吡啶(300 mg/kg)组、生乳香(0.76 g/kg)组、醋乳香(0.76 g/kg)组、生乳香粪清液(0.2 mL)组、醋乳香粪清液(0.2 mL)组,分别进行给药治疗。观察和监测小鼠体质量、粪便性状、便血情况,进行疾病活动指数(DAI)评分;记录结肠长度;运用苏木精–伊红染色法(HE)观察炎症性肠病小鼠肠道组织的病理变化;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测炎症性肠病小鼠血清中白细胞介素(IL)-4、IL-10、IL-6、IL-1β的水平。采用蛋白质免疫印迹法(Western blotting)测定炎症性肠病小鼠肠道组织中肠黏膜机械屏障蛋白的表达情况。结果生乳香、醋乳香、生乳香粪清液组和醋乳香粪清液组均可改善DSS造成的小鼠体质量下降、粪便性状评分和便血情况,显著降低DAI评分;改善炎症性肠病小鼠肠道组织的病理状态;调节血清中的炎症因子水平;显著升高炎症性肠病小鼠肠道组织中咬合蛋白(occludin)、紧密连接蛋白1(claudin-1)、闭合小环蛋白1(ZO-1)蛋白表达水平。结论乳香及其炮制品可改善炎症性肠病小鼠炎症反应,对肠黏膜屏障具有一定的保护作用,且粪菌移植效果更佳。 展开更多
关键词 乳香及其炮制品 炎症性肠病 粪菌移植 葡聚糖硫酸钠 白细胞介素 咬合蛋白 紧密连接蛋白1 闭合小环蛋白1
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麻疹病毒IgM抗体胶体金免疫层析法的建立 被引量:1
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作者 王国艳 吴学敏 +2 位作者 马爱敏 宋鸿儒 胡孔新 《中国国境卫生检疫杂志》 CAS 2021年第1期13-16,共4页
目的建立检测麻疹病毒IgM抗体的胶体金免疫层析法。方法用胶体金偶联重组麻疹病毒核蛋白,羊抗人IgM抗体为检测线包被蛋白,通过优化反应条件,建立麻疹病毒IgM抗体胶体金免疫层析法。选取10份麻疹病毒IgM阳性血清和20份健康人血清样本,验... 目的建立检测麻疹病毒IgM抗体的胶体金免疫层析法。方法用胶体金偶联重组麻疹病毒核蛋白,羊抗人IgM抗体为检测线包被蛋白,通过优化反应条件,建立麻疹病毒IgM抗体胶体金免疫层析法。选取10份麻疹病毒IgM阳性血清和20份健康人血清样本,验证方法的符合率。结果建立的胶体金免疫层析方法检测阳性血清和健康人血清样本的符合率均为100%,将阳性血清进行104倍稀释后仍能检测到阳性;该方法能在15 min内完成检测。结论建立的麻疹病毒IgM抗体胶体金免疫层析法,具有简便、快捷、灵敏度高的特点,可用于麻疹病毒感染早期筛查。 展开更多
关键词 麻疹病毒 胶体金免疫层析 IGM抗体 核蛋白
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Polyoxovanadate-based MOFs Microsphere Constructed from 3-D Discrete Nano-sheets as Supercapacitor 被引量:2
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作者 巫学敏 刘敏敏 +2 位作者 郭鸿旭 应少明 陈彰旭 《Chinese Journal of Structural Chemistry》 SCIE CAS CSCD 2021年第8期994-998,967,共6页
A novel polyoxovanadate-based MOFs microsphere,[Ni(phen)V2O7]·H2O(phen=1,10-phenanthroline),constructed from 3-D discrete nano-sheets has been prepared and characterized by XRD,FT-IR,SEM and TEM.Electrochemical p... A novel polyoxovanadate-based MOFs microsphere,[Ni(phen)V2O7]·H2O(phen=1,10-phenanthroline),constructed from 3-D discrete nano-sheets has been prepared and characterized by XRD,FT-IR,SEM and TEM.Electrochemical properties as supercapacitor of the as-prepared sample,such as CV,EIS,GCD and the cycle life test have also been studied.The as-prepared MOF(V,Ni)showed a high specific capacitance of 178.09 F×g^(-1) at 1 A×g^(-1) as well as good cycling stability and coulombic efficiency.This work proved that the novel MOFs based on polyoxovanadate hybrid material may serve as a promising electrode material for high-performance supercapacitor. 展开更多
关键词 MOFs microsphere POLYOXOVANADATE discrete nano-sheets SUPERCAPACITOR
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Ultrasound Assisted Synthesis of Nanoscale NH2-MIL-53(Fe) for the Adsorption of Dye
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作者 巫学敏 刘龙雪 +3 位作者 刘玲 尤梓涵 郭鸿旭 陈彰旭 《Chinese Journal of Structural Chemistry》 SCIE CAS CSCD 2021年第1期42-46,2,共6页
Nanometer blocks of amide-functionalized Fe(Ⅲ)-based metal-organic frameworks,NH2-MIL-53(Fe),were prepared via ultrasonic method without any surfactants at room temperature and atmospheric pressure.The characterizati... Nanometer blocks of amide-functionalized Fe(Ⅲ)-based metal-organic frameworks,NH2-MIL-53(Fe),were prepared via ultrasonic method without any surfactants at room temperature and atmospheric pressure.The characterization for the as-prepared nano-structured MOFs was established by XRD,SEM,TEM,XPS and N2 adsorption-desorption.The as-prepared sample with high specific surface area(179.9 m^(2)·g^(-1))showed excellent adsorption for methylene blue in the liquid phase.The as-prepared NH_(2)-MIL-53(Fe)adsorbent seems to be a promising material in practice for organic dye removal from aqueous solution. 展开更多
关键词 NH2-MIL-53(Fe) ultrasonic method removal methylene blue
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